布魯氏菌病監(jiān)測和疫情處置工作方案

1、 XX市布魯氏菌病監(jiān)測和疫情處置工作方案（2018年版）一、背景布魯氏菌?。ㄒ韵潞喎Q布?。┦怯刹剪斒暇鸬膰?yán)重危害人民健康和畜牧業(yè)發(fā)展的人獸共患傳染病，是中華人民共和國傳染病防治法規(guī)定的乙類傳染病。近年來，XX市布病發(fā)病人數(shù)呈現(xiàn)上升趨勢。為科學(xué)、規(guī)范、有序地開展、全國布病監(jiān)測方案（2018年版）等國家工作要求及我市實(shí)際情況，特制定本工作方案。二、監(jiān)測目的（一）及時(shí)發(fā)現(xiàn)和報(bào)告人間布病病例，保證病例的規(guī)范化管理和治療；（二）掌握我市人間布病病例的感染來源和暴露危險(xiǎn)因素；（三）掌握我市人間布病病例流行病學(xué)特征及其流行規(guī)律；（四）了解重點(diǎn)行業(yè)人員布病感染狀況，為制訂有效的防控措施，評(píng)價(jià)防控措施效果提

2、供依據(jù)。三、病例定義（一）診斷原則根據(jù)流行病學(xué)史、臨床表現(xiàn)和實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果進(jìn)行綜合判斷。（二）診斷依據(jù)1.流行病學(xué)史發(fā)病前病人與疑似布魯氏菌感染的家畜或畜產(chǎn)品有密切接觸史，或生食過牛、羊乳制品，或生活在布病疫區(qū)內(nèi)；或從事布魯氏菌培養(yǎng)、檢測或布魯氏菌疫苗生產(chǎn)、使用等工作。2.臨床表現(xiàn)（1）發(fā)熱：典型表現(xiàn)為波狀熱，常伴有寒戰(zhàn)、頭痛等癥狀，可見于各期患者；部分病例可表現(xiàn)為低熱和不規(guī)則熱型，且多發(fā)生在午后或夜間。（2）多汗：急性期病例出汗尤重，可濕透衣褲、被褥等。（3）肌肉和關(guān)節(jié)疼痛：為全身肌肉和多發(fā)性、游走性XX節(jié)疼痛。部分慢性期病例骨關(guān)節(jié)系統(tǒng)損害，表現(xiàn)為疼痛、功能障礙和畸形等。（4）乏力：幾乎全部

3、病例都有此表現(xiàn)。（5）肝、脾及淋巴結(jié)腫大：多見于急性期病例。（6）其他：男性病例可伴有睪丸炎，女性病例可見卵巢炎。少數(shù)病例可有心、腎及神經(jīng)系統(tǒng)受累表現(xiàn)。3.實(shí)驗(yàn)室檢查（1）初篩試驗(yàn)1）虎紅平板凝集試驗(yàn)（RBT）結(jié)果為陽性。2）膠體金免疫層析試驗(yàn)（GICA）結(jié)果為陽性。3）酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）結(jié)果為陽性。4）布魯氏菌培養(yǎng)物涂片革蘭染色檢出疑似布魯氏菌。（2）確證實(shí)驗(yàn)1）標(biāo)準(zhǔn)試管凝集試驗(yàn)（SAT）滴度為1:100（+）及以上；病程一年以上，滴度1:50（+）及以上。2）抗人免疫球蛋白試驗(yàn)（Coombs）滴度1:400（+）及以上。3）補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)（CFT）：滴度1:10（+）及以上。4）

4、從病人血液、骨髓、關(guān)節(jié)液、尿液、淋巴組織等標(biāo)本分離培養(yǎng)到布魯氏菌。（三）病例分類1.疑似病例：同時(shí)具備流行病學(xué)史和臨床表現(xiàn)者。2.臨床診斷病例：疑似病例，同時(shí)具備任一初篩檢查結(jié)果陽性者。3.確診病例：疑似病例或臨床診斷病例，同時(shí)具備任一項(xiàng)確證實(shí)驗(yàn)證據(jù)者。4.隱性感染：具備流行病學(xué)史，同時(shí)具備任一項(xiàng)確證實(shí)驗(yàn)證據(jù)，但無臨床表現(xiàn)者。（四）病程分期1.急性期：發(fā)病3個(gè)月以內(nèi)，凡有高熱和有明顯其他癥狀、體征（包括慢性期患者急性發(fā)作），并出現(xiàn)較高滴度的血清學(xué)反應(yīng)者。2.亞急性期：發(fā)病在3-6個(gè)月，凡有低熱和其他癥狀、體征（即有慢性炎癥），并出現(xiàn)血清學(xué)陽性反應(yīng)者。3.慢性期：發(fā)病6個(gè)月以上，體溫正常，有布病

5、癥狀、體征，并出現(xiàn)血清學(xué)陽性反應(yīng)者。四、監(jiān)測方式和內(nèi)容（一）病例報(bào)告1.責(zé)任報(bào)告單位及責(zé)任報(bào)告人各級(jí)各類醫(yī)療結(jié)構(gòu)、各區(qū)疾病預(yù)防控制中心、采供血機(jī)構(gòu)為責(zé)任報(bào)告單位，其執(zhí)行職務(wù)的人員和鄉(xiāng)村醫(yī)生、個(gè)體開業(yè)醫(yī)生為責(zé)任報(bào)告人，必須按照中華人民共和國傳染病防治法的規(guī)定進(jìn)行病例報(bào)告，履行法律規(guī)定的義務(wù)。2.報(bào)告方式、時(shí)限和程序發(fā)現(xiàn)病例后，具備網(wǎng)絡(luò)直報(bào)條件的責(zé)任報(bào)告單位應(yīng)當(dāng)于24小時(shí)內(nèi)，填寫傳染病報(bào)告卡并通過中國疾病預(yù)防控制信息系統(tǒng)中的傳染病報(bào)告信息管理系統(tǒng)進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)報(bào)告；不具備網(wǎng)絡(luò)直報(bào)條件的責(zé)任報(bào)告單位及時(shí)向?qū)俚剜l(xiāng)鎮(zhèn)衛(wèi)生院、社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心或區(qū)級(jí)疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)報(bào)告，并于24小時(shí)內(nèi)寄送出傳染病報(bào)告卡至代報(bào)單位

6、。3.個(gè)案流行病學(xué)調(diào)查。報(bào)告單位所屬轄區(qū)的區(qū)級(jí)疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)，在接到病例報(bào)告后，要在24小時(shí)內(nèi)完成報(bào)告卡審核，對(duì)臨床診斷病例和確診病例于3天內(nèi)進(jìn)行個(gè)案流行病學(xué)調(diào)查，填寫布病病例個(gè)案調(diào)查表（附件1）。確診病例需撰寫調(diào)查報(bào)告。（二）可能構(gòu)成突發(fā)公共衛(wèi)生事件的相關(guān)信息報(bào)告1.報(bào)告范圍。可能構(gòu)成突發(fā)公共衛(wèi)生事件相關(guān)信息的報(bào)告范圍，包含如下三類情況：（1）暴發(fā)。在布病持續(xù)流行的區(qū)，3周內(nèi)，同一自然村屯、社區(qū)、飼養(yǎng)場、牲畜集散地、屠宰加工廠等場所發(fā)生3例及以上急性期布病病例。（2）新發(fā)。既往5年內(nèi)無本地布病病例報(bào)告的區(qū)，出現(xiàn)1例及以上本地急性期布病病例。（3）當(dāng)?shù)匦l(wèi)生健康行政部門認(rèn)為其他可能造成公共衛(wèi)生

7、威脅，或按照國家突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急預(yù)案的判定標(biāo)準(zhǔn)、達(dá)到一般及以上級(jí)別的布病疫情相關(guān)事件。2.報(bào)告方式、時(shí)限和程序。收到突發(fā)公共衛(wèi)生事件相關(guān)信息報(bào)告的責(zé)任報(bào)告單位和責(zé)任報(bào)告人，應(yīng)當(dāng)在收到報(bào)告后2小時(shí)以內(nèi)以電話或傳真電話的方式向?qū)俚匦l(wèi)生健康行政部門指定的專業(yè)機(jī)構(gòu)報(bào)告，具備網(wǎng)絡(luò)直報(bào)條件的責(zé)任報(bào)告單位應(yīng)當(dāng)同時(shí)通過中國疾病預(yù)防控制信息系統(tǒng)中的突發(fā)公共衛(wèi)生事件管理信息系統(tǒng)進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)直報(bào)；不具備網(wǎng)絡(luò)直報(bào)條件的責(zé)任報(bào)告單位，應(yīng)當(dāng)采用最快的通訊方式將突發(fā)公共衛(wèi)生事件相關(guān)信息報(bào)告卡報(bào)送屬地衛(wèi)生健康行政部門指定的專業(yè)機(jī)構(gòu)，接到突發(fā)公共衛(wèi)生事件相關(guān)信息報(bào)告卡的專業(yè)機(jī)構(gòu)，應(yīng)當(dāng)對(duì)信息進(jìn)行審核，確定真實(shí)性，2小時(shí)內(nèi)進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)

8、直報(bào)，同時(shí)以電話或傳真電話等方式報(bào)告同級(jí)衛(wèi)生健康行政部門。接到突發(fā)公共衛(wèi)生事件相關(guān)信息報(bào)告的衛(wèi)生健康行政部門應(yīng)當(dāng)盡快組織有關(guān)專家進(jìn)行現(xiàn)場調(diào)查，如確認(rèn)實(shí)際發(fā)生突發(fā)公共衛(wèi)生事件，應(yīng)當(dāng)根據(jù)不同級(jí)別，及時(shí)組織采取相應(yīng)措施，并在2小時(shí)內(nèi)向本級(jí)人民政府報(bào)告，同時(shí)向上級(jí)衛(wèi)生健康行政部門報(bào)告。如尚未達(dá)到突發(fā)公共衛(wèi)生事件標(biāo)準(zhǔn)的，由專業(yè)防治機(jī)構(gòu)密切跟蹤事態(tài)發(fā)展，隨時(shí)報(bào)告事態(tài)變化情況。（三）監(jiān)測點(diǎn)工作1.監(jiān)測點(diǎn)劃分。在除XX區(qū)、XX區(qū)、XX區(qū)以外的13個(gè)轄區(qū)開展監(jiān)測。國家級(jí)監(jiān)測點(diǎn)包括：XX區(qū)、XX區(qū)、XX區(qū)、XX區(qū)。XX市級(jí)監(jiān)測點(diǎn)包括：XX區(qū)、XX區(qū)、XX區(qū)、XX區(qū)、XX區(qū)、XX區(qū)、XX區(qū)、XX區(qū)、XX區(qū)。2.監(jiān)測

9、內(nèi)容和方法。各監(jiān)測點(diǎn)除按上述工作要求開展疫情監(jiān)測工作外，應(yīng)當(dāng)每年開展針對(duì)重點(diǎn)職業(yè)人群的血清學(xué)監(jiān)測和布病篩查，同時(shí)收集畜間疫情資料，開展病原學(xué)監(jiān)測。（1）重點(diǎn)職業(yè)人群監(jiān)測。1）監(jiān)測對(duì)象。重點(diǎn)監(jiān)測對(duì)象為與牲畜及畜產(chǎn)品有接觸的職業(yè)人群，年齡范圍為1570歲。監(jiān)測數(shù)量要求國家級(jí)監(jiān)測點(diǎn)每個(gè)監(jiān)測點(diǎn)每年不少于400人，市級(jí)監(jiān)測點(diǎn)XX區(qū)、XX區(qū)、XX區(qū)、XX區(qū)、XX區(qū)、XX區(qū)每個(gè)監(jiān)測點(diǎn)每年不少于50人，XX區(qū)、XX區(qū)、XX區(qū)每個(gè)監(jiān)測點(diǎn)每年不少于30人。2）監(jiān)測場所。監(jiān)測點(diǎn)根據(jù)當(dāng)?shù)貙?shí)際情況，選擇職業(yè)人群集中的鄉(xiāng)（鎮(zhèn)）及屠宰場、牲畜交易市場和畜產(chǎn)品加工廠等工作場所，作為固定監(jiān)測鄉(xiāng)（鎮(zhèn)）和固定監(jiān)測場所，開展連續(xù)監(jiān)測

10、。選擇固定監(jiān)測鄉(xiāng)（鎮(zhèn)）養(yǎng)殖戶集中的若干個(gè)村和若干個(gè)固定監(jiān)測場所，對(duì)所有符合條件的獸醫(yī)、飼養(yǎng)員、放牧員、接羔員、育羔員和牲畜交易、屠宰、皮毛、乳肉加工人員等職業(yè)人群開展監(jiān)測。固定監(jiān)測鄉(xiāng)（鎮(zhèn)）或者固定監(jiān)測場所的數(shù)量根據(jù)調(diào)查樣本量確定。3）監(jiān)測時(shí)間。全年開展監(jiān)測工作，重點(diǎn)在流行季節(jié)（3-8月）。4）監(jiān)測內(nèi)容。對(duì)所有監(jiān)測對(duì)象開展布魯氏菌血清學(xué)檢查。血檢樣品做虎紅平板凝集試驗(yàn)和試管凝集試驗(yàn)。血清學(xué)檢查結(jié)果陽性者應(yīng)當(dāng)由臨床醫(yī)生進(jìn)一步明確診斷，及時(shí)治療。對(duì)所有開展血清學(xué)檢查的人員登記于重點(diǎn)職業(yè)人群調(diào)查一覽表（附件2），并記錄血清學(xué)檢查和布病診斷情況。各監(jiān)測點(diǎn)將實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果填寫于布病血清學(xué)檢測登記表（附件3

11、）。在每年監(jiān)測工作結(jié)束后，每個(gè)監(jiān)測點(diǎn)應(yīng)當(dāng)填寫重點(diǎn)職業(yè)人群監(jiān)測結(jié)果統(tǒng)計(jì)表（附件4）。（2）畜間疫情收集。監(jiān)測點(diǎn)疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)要主動(dòng)與畜牧部門聯(lián)系，了解畜間布病疫情動(dòng)態(tài)和防制情況，如牛、羊存欄數(shù)和出欄數(shù)，牛、羊布病血檢個(gè)體陽性率和群陽性率，以及畜間檢疫和免疫情況等。（四）病原學(xué)監(jiān)測1.監(jiān)測點(diǎn)病原學(xué)監(jiān)測。疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)對(duì)急性期病人采全血做細(xì)菌分離培養(yǎng)；醫(yī)療機(jī)構(gòu)對(duì)急性期病人采全血或其它體液標(biāo)本做細(xì)菌分離培養(yǎng)。標(biāo)本采集、保存及運(yùn)送按照中國疾控中心指定的布病實(shí)驗(yàn)室檢測工作方案執(zhí)行，并填寫布病病例病原檢測標(biāo)本送檢表（附件5）。根據(jù)我市情況，XX地壇醫(yī)院、XXXX醫(yī)院、XX大學(xué)人民醫(yī)院、XXXX醫(yī)院、XX

12、佑安醫(yī)院、XX大學(xué)第三醫(yī)院、XX區(qū)潞河醫(yī)院、XX區(qū)醫(yī)院、XX區(qū)醫(yī)院、XX區(qū)第一醫(yī)院、XX區(qū)仁和醫(yī)院應(yīng)對(duì)現(xiàn)住址為本市的每例布病病例標(biāo)本進(jìn)行布氏菌培養(yǎng)。將培養(yǎng)結(jié)果于2天內(nèi)記錄于布病病例實(shí)驗(yàn)室檢查登記表。醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)在獲得培養(yǎng)結(jié)果后留存培養(yǎng)瓶，由轄區(qū)疾病預(yù)防控制中心在一周之內(nèi)取樣，上送市疾病預(yù)防控制中心。2.突發(fā)公共衛(wèi)生事件病原學(xué)監(jiān)測。對(duì)暴發(fā)疫情、新發(fā)疫情及其他突發(fā)公共衛(wèi)生事件涉及的病例及對(duì)可疑的傳播因子均開展病原學(xué)檢測。區(qū)疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)在現(xiàn)場調(diào)查時(shí)，采集急性期病例全血開展細(xì)菌分離培養(yǎng)，并填寫布病病例病原檢測標(biāo)本送檢表。在市疾控中心完成細(xì)菌分離及鑒定后，將分離菌株送至中國疾控中心傳染病預(yù)防控制所進(jìn)

13、行復(fù)核，并填寫布魯氏菌菌株登記表。3.標(biāo)本（菌株）運(yùn)送。收集單位向上級(jí)單位運(yùn)送標(biāo)本（菌株），應(yīng)當(dāng)按照中華人民共和國傳染病防治法、病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理辦法、可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運(yùn)輸管理規(guī)定和人間傳染的病原微生物菌（毒）種保藏機(jī)構(gòu)管理辦法相關(guān)要求進(jìn)行。五、數(shù)據(jù)收集、分析與反饋（一）數(shù)據(jù)收集布病病例報(bào)告信息，通過中國疾病預(yù)防控制信息系統(tǒng)中的傳染病報(bào)告信息管理系統(tǒng)進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)直報(bào)。次年1月10日前，各監(jiān)測點(diǎn)完成上年度布病監(jiān)測總結(jié)，并填寫重點(diǎn)職業(yè)人群調(diào)查一覽表、重點(diǎn)職業(yè)人群監(jiān)測結(jié)果統(tǒng)計(jì)表（數(shù)據(jù)采集截止日期為當(dāng)年12月31日），上報(bào)市疾病預(yù)防控制中心。市疾病預(yù)防控制中心收集全

14、市監(jiān)測點(diǎn)上述報(bào)表相關(guān)監(jiān)測數(shù)據(jù)，以及本年度完成的布病病例個(gè)案調(diào)查表和布魯氏菌菌株登記表，并撰寫XX布病監(jiān)測總結(jié)，于次年1月底前上報(bào)中國疾控中心。（二）數(shù)據(jù)分析各區(qū)疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)可以周、月或年為周期定期對(duì)轄區(qū)布病監(jiān)測數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，統(tǒng)計(jì)分析內(nèi)容包括發(fā)病情況，病例分布情況、重點(diǎn)人群感染狀況和病原學(xué)監(jiān)測結(jié)果?？山Y(jié)合畜間監(jiān)測結(jié)果及流行因素作出風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，提出對(duì)策建議。（三）疫情反饋與通報(bào)1.各級(jí)疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)應(yīng)當(dāng)將定期分析結(jié)果報(bào)告當(dāng)?shù)匦l(wèi)生健康行政部門，并反饋給各級(jí)各類醫(yī)療機(jī)構(gòu)，通報(bào)同級(jí)動(dòng)物疫病控制中心。衛(wèi)生健康行政部門向同級(jí)畜牧獸醫(yī)、食品藥品監(jiān)管等相關(guān)部門通報(bào)。2.區(qū)級(jí)疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)完成病例個(gè)案調(diào)查后

15、，發(fā)現(xiàn)輸入、擴(kuò)散、暴發(fā)等情況，需要協(xié)調(diào)有關(guān)部門共同調(diào)查處理時(shí)，應(yīng)當(dāng)及時(shí)將調(diào)查結(jié)果通過衛(wèi)生健康行政部門向畜牧獸醫(yī)、食品藥品監(jiān)管、工商等相關(guān)部門通報(bào)，協(xié)調(diào)相關(guān)部門按照工作職責(zé)開展動(dòng)物疫情或可能受污染的動(dòng)物產(chǎn)品的調(diào)查處置。六、質(zhì)量控制（一）培訓(xùn)各級(jí)衛(wèi)生健康行政部門組織對(duì)轄區(qū)內(nèi)醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)的專業(yè)技術(shù)人員開展布病監(jiān)測工作培訓(xùn)。（二）實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制按照中國疾控中心要求，XX市疾控中心實(shí)驗(yàn)室每年負(fù)責(zé)對(duì)區(qū)級(jí)實(shí)驗(yàn)室開展血清學(xué)檢測質(zhì)量考核，并定期通報(bào)質(zhì)量控制結(jié)果。（三）督導(dǎo)按照中國疾控中心要求，XX市疾控中心組織對(duì)轄區(qū)內(nèi)的布病監(jiān)測工作開展督導(dǎo)檢查，及時(shí)發(fā)現(xiàn)問題，提出解決方案，并將督導(dǎo)情況報(bào)告XX市衛(wèi)生健康委及中國

16、疾控中心。（四）考核評(píng)價(jià)按照中國疾控中心要求，XX市疾病預(yù)防控制中心參照國家考評(píng)方案，每年組織對(duì)所轄監(jiān)測點(diǎn)監(jiān)測工作進(jìn)行質(zhì)量評(píng)估，并將評(píng)估結(jié)果通報(bào)給區(qū)級(jí)衛(wèi)生健康行政部門。七、職責(zé)與分工（一）各級(jí)衛(wèi)生健康行政部門市、區(qū)衛(wèi)生健康行政部門分別負(fù)責(zé)組織領(lǐng)導(dǎo)全市和本轄區(qū)的布病監(jiān)測工作，保障監(jiān)測工作所需人員和經(jīng)費(fèi)。（二）XX市疾控中心1.負(fù)責(zé)本市布病監(jiān)測工作的具體組織實(shí)施和管理。2.負(fù)責(zé)本市監(jiān)測的技術(shù)培訓(xùn)和指導(dǎo)，開展布病監(jiān)測督導(dǎo)、考核、評(píng)估。3.負(fù)責(zé)本市監(jiān)測數(shù)據(jù)的收集、整理，定期對(duì)監(jiān)測數(shù)據(jù)進(jìn)行分析、反饋和上報(bào)。4.負(fù)責(zé)本市實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量控制工作。5.負(fù)責(zé)將本市布病菌株送中國疾控中心進(jìn)行復(fù)核。（三）區(qū)級(jí)疾控中心

17、1.負(fù)責(zé)本轄區(qū)內(nèi)布病監(jiān)測工作的具體組織實(shí)施和管理。2.負(fù)責(zé)本轄區(qū)監(jiān)測工作的技術(shù)培訓(xùn)和指導(dǎo)，開展布病監(jiān)測督導(dǎo)、考核、評(píng)估。3.負(fù)責(zé)本轄區(qū)布病臨床診斷病例和確診病例的個(gè)案調(diào)查。4.完成高危人群血清學(xué)檢測。收集病人病原學(xué)標(biāo)本和轄區(qū)醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)分離的布病菌株，送市級(jí)疾控中心保存、復(fù)核和分型。5.負(fù)責(zé)本轄區(qū)監(jiān)測數(shù)據(jù)的收集、整理，定期對(duì)監(jiān)測數(shù)據(jù)進(jìn)行分析、反饋和上報(bào)。6.掌握當(dāng)?shù)氐男箝g布病疫情，了解當(dāng)?shù)氐募倚蟮臋z疫、免疫和陽性畜情況。7.負(fù)責(zé)收集本轄區(qū)的布病菌株，送市疾控中心保存、復(fù)核。（四）醫(yī)療機(jī)構(gòu)1.按照監(jiān)測方案要求及時(shí)發(fā)現(xiàn)、診斷和報(bào)告病例。2.協(xié)助疾控中心做好布病病例流行病學(xué)調(diào)查工作和標(biāo)本采集。3.培

18、養(yǎng)出布魯氏菌要及時(shí)通知本轄區(qū)疾控中心。附件：1.布病病例個(gè)案調(diào)查表2.重點(diǎn)職業(yè)人群調(diào)查一覽表3.布病血清學(xué)檢測登記表4.重點(diǎn)職業(yè)人群監(jiān)測結(jié)果統(tǒng)計(jì)表5.布病病例病原檢測標(biāo)本送檢表6.布魯氏菌菌株登記表7.布病病例實(shí)驗(yàn)室檢查登記表8.布魯氏菌病病例樣本采集及檢測方案附件1布病病例個(gè)案調(diào)查表國標(biāo)碼病例編碼第一部分患者基本信息（1-9項(xiàng)可從大疫情個(gè)案報(bào)告卡獲?。?患者姓名：（患兒家長姓名：）2性別：男女3出生日期：年月日（如出生日期不詳，實(shí)足年齡：年齡單位：歲月天）4職業(yè)：幼托兒童散居兒童學(xué)生教師保育保姆飲食從業(yè)人員商業(yè)服務(wù)醫(yī)務(wù)人員工人民工農(nóng)民牧民漁（船）民干部職員離退人員家務(wù)待業(yè)其他，請(qǐng)注明：不詳5

19、.從事感染布病的高風(fēng)險(xiǎn)職業(yè)：飼養(yǎng)放牧屠宰工皮毛加工工人乳肉加工銷售人員畜產(chǎn)品收購、販運(yùn)人員獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室人員其他，請(qǐng)注明：（10）不從事6現(xiàn)地址：省（自治區(qū)、直轄市）市（地區(qū)）縣（市、區(qū)）鎮(zhèn)（鄉(xiāng)）村（街道）（門牌號(hào)）7發(fā)病日期：年月日8診斷日期：年月日9.報(bào)告日期：年月日10.病程分期：（1）急性期（2）亞急性期（3）慢性期11.本次患布病是否住院治療：是，住院時(shí)間為天；否第二部分暴露史調(diào)查1.你是否有牲畜及其制品接觸史：是否不清楚（如選“否”或“不清楚”跳至題目2）（1）接觸牲畜種類（可多選）：牛羊豬狗鹿其他，請(qǐng)注明：主要接觸方式（2）有（可多選）：飼養(yǎng)放牧屠宰產(chǎn)品（肉、奶、皮毛等）加工販運(yùn)交易

20、獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室接種疫苗，型號(hào)為：其他，請(qǐng)概要描述：（3）可能感染地點(diǎn)：在家里工作場所（如屠宰廠、養(yǎng)殖廠、皮毛加工廠等），請(qǐng)注明工作場所具體名稱和地址：其他，請(qǐng)注明：（4）可能傳染源去向：（5）是否有共同接觸人員：是否不清楚（如選“否”或“不清楚”跳至題目2）（6）共同接觸人員姓名住址2.您是否食用過未煮熟的牛羊肉、奶，或食用過生奶及奶制品？是，深入追問食物來源：（1）具體食用了什么：（2）牌子、生產(chǎn)廠家、生產(chǎn)批次等：否不清楚（3）食用時(shí)間及購買時(shí)間等：（4）剩余食物去向：（5）是否有同食人員：是否不清楚（如選“否”或“不清楚”跳至題目3）（6）同食人員姓名住址3你是否到過布病流行區(qū)？是否不清楚第三

21、部分臨床表現(xiàn)1癥狀體征11發(fā)熱有無12發(fā)熱持續(xù)（天）13多汗有無14肌肉、關(guān)節(jié)酸痛有無15乏力有無16肝腫大有無17脾腫大有無18淋巴結(jié)腫有無19睪丸腫大有無1.10并發(fā)癥：有，請(qǐng)注明：_無2.實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果2.1初篩試驗(yàn)：虎紅平板凝集試驗(yàn)：陽性陰性未做膠體金免疫層析試驗(yàn)：陽性陰性未做酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)：陽性陰性未做布魯氏菌培養(yǎng)物涂片革蘭染色檢出疑似布魯氏菌：是否未做2.2確診試驗(yàn)：試管凝集試驗(yàn)：陽性，滴度1:+陰性未做Coombs試驗(yàn)：陽性，滴度1:+陰性未做補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)：陽性，滴度1:+陰性未做分離出布魯氏菌：是否未做附件2重點(diǎn)職業(yè)人群調(diào)查一覽表區(qū)鎮(zhèn)（鄉(xiāng)）填表時(shí)間：年月日姓名性別現(xiàn)住址電話職

22、業(yè)/年限布病既往史臨床癥狀虎紅平板試管凝集細(xì)菌培養(yǎng)診斷有無如有，是否治愈有無如有，發(fā)病日期陽性陰性陽性陰性陽性陰性新患老患隱性備注*臨床癥狀：如具備布病主要臨床表現(xiàn)（如發(fā)熱、乏力、多汗、肌肉關(guān)節(jié)痛等癥狀）任何一項(xiàng)則填寫“有”，否則填寫“無”。*新發(fā)患者：指本次職業(yè)人群布病篩查發(fā)現(xiàn)的新病例，包括既往感染已經(jīng)痊愈但是重復(fù)感染發(fā)病者。*老患者：指本次篩查中發(fā)現(xiàn)的既往診斷為布病但尚未治愈、長期遷延不愈的患者。單位負(fù)責(zé)人：填表人： 填表時(shí)間：年月日附件3布病血清學(xué)檢測登記表區(qū)鎮(zhèn)（鄉(xiāng)）填表時(shí)間：年月日樣品編號(hào)姓名性別年齡聯(lián)系電話接觸史發(fā)病日期確診日期采樣單位血清學(xué)檢查結(jié)果備注虎紅平板膠體金ELISA試管凝

23、集IgMIgG備注：接觸史一欄直接填寫序號(hào)：1家畜2畜產(chǎn)品3布氏菌培養(yǎng)物4生活在疫區(qū)6布氏菌疫苗。單位負(fù)責(zé)人：填表人：填表時(shí)間：年月日附件4重點(diǎn)職業(yè)人群監(jiān)測結(jié)果統(tǒng)計(jì)表（區(qū)）鄉(xiāng)（鎮(zhèn)、場）血檢人數(shù)性別職業(yè)試管凝集檢查細(xì)菌分離培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)病例數(shù)備注男女放牧飼養(yǎng)獸醫(yī)皮毛乳肉加工屠宰交易其他陽性陽性率%陽性陽性率%新患老患隱性備注：*新發(fā)患者：指本次職業(yè)人群布病篩查發(fā)現(xiàn)的新病例，包括既往感染已經(jīng)痊愈但是重復(fù)感染發(fā)病者。*老患者：指本次篩查中發(fā)現(xiàn)的既往診斷為布病但尚未治愈、長期遷延不愈的患者。單位負(fù)責(zé)人：填表人：填表時(shí)間：年月日附件5XX市疾控系統(tǒng)布魯氏菌病標(biāo)本送檢單送檢單位：送檢日期：年月日標(biāo)本來源：疫情/

24、監(jiān)測/鑒定/其他（請(qǐng)注明）樣本編號(hào)姓名性別年齡聯(lián)系電話接觸史發(fā)病日期采集日期送檢日期樣本名稱（血、關(guān)節(jié)液、腦脊液等）采樣單位備注備注：接觸史一欄直接填寫序號(hào)：1家畜2畜產(chǎn)品3布氏菌培養(yǎng)物4生活在疫區(qū)6布氏菌疫苗。單位負(fù)責(zé)人：填表人：填表時(shí)間：年月日附件6布魯氏菌菌株登記表（區(qū)）疾控中心序號(hào)菌株種型姓名性別年齡家庭地址發(fā)病日期采樣日期分離日期備注單位負(fù)責(zé)人：填表人：填表時(shí)間：年月日附件7布病病例實(shí)驗(yàn)室檢查登記表區(qū)檢驗(yàn)編號(hào)送檢編號(hào)姓名性別年齡職業(yè)虎紅平板凝集實(shí)驗(yàn)試管凝集試驗(yàn)分離病原材料及結(jié)果結(jié)論檢驗(yàn)時(shí)間1:251:501:1001:2001:400填表時(shí)間：年月日單位（蓋章）：；填表人：附件8布魯

25、氏菌病病例樣本采集及檢測方案為及時(shí)、科學(xué)地采集、保存、運(yùn)送和檢測布魯氏菌病（以下簡稱“布病”）病原和血清標(biāo)本，規(guī)范實(shí)驗(yàn)室檢測程序和方法，提高檢測質(zhì)量，明確診斷或開展相關(guān)科學(xué)研究，特制定本方案。一、樣本的采集（一）采集種類1.血清學(xué)檢測：靜脈血。2.病原分離培養(yǎng)：全血、關(guān)節(jié)液/滑囊液、腦脊液等。（二）采集方法1.血清學(xué)檢測用真空負(fù)壓采血管采集血液標(biāo)本2-3ml，室溫靜置30分鐘以上，15002000rpm離心10分鐘，無菌收集血清于2ml螺口塑料管中。2.病原分離培養(yǎng)病原分離培養(yǎng)最佳時(shí)機(jī)是在患者使用抗生素治療前。急性期發(fā)熱病例培養(yǎng)出菌率相對(duì)較高。（1）血液標(biāo)本：成人推薦每個(gè)血培養(yǎng)瓶應(yīng)加的血量為5

26、10ml，血液和肉湯比為1：510；兒童一般靜脈采血15ml用于血培養(yǎng)。（2）關(guān)節(jié)液/滑囊液：用針穿刺法或外科手術(shù)引流法采集樣本，無菌條件下注入布魯氏菌培養(yǎng)瓶中，盡可能采取更多的液體（至少1ml）。（3）腦脊液：用腰椎穿刺的方法采集腦脊液，無菌條件二、樣本的保存與運(yùn)送（一）樣本的保存1.血清學(xué)檢測：采集血清樣本后要即刻進(jìn)行檢測，如果條件不允許，可在4-8存放3天、-20以下長期保存。標(biāo)2.病原分離培養(yǎng)：含樣本的培養(yǎng)瓶應(yīng)立即送往實(shí)驗(yàn)室，放置37溫箱進(jìn)行培養(yǎng)，如不能及時(shí)送檢，在48環(huán)境下可保存24小時(shí)。（二）樣本的運(yùn)送收集單位向上級(jí)單位運(yùn)送樣本進(jìn)行檢測需使用生物安全運(yùn)輸箱，并根據(jù)中華人民共和國傳染

27、病防治法、病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理辦法和可感染人類的高致病三、樣本的檢測（一）篩查試驗(yàn)篩查試驗(yàn)一般采用虎紅平板凝集試驗(yàn)。1.虎紅平板的凝集方法（1）操作方法：在玻片上加0.03ml被檢血清，然后加入虎紅平板抗原0.03ml，充分混勻，在5分鐘內(nèi)觀察結(jié)果。（2）結(jié)果判定：出現(xiàn)可見的凝集反應(yīng)就判為陽性。（3）評(píng)價(jià)：此法簡便、快速、容易操作，適于基層大面積檢疫；該法主要是檢查IgG類凝集抗體，所以特異性較好，與試管凝集試驗(yàn)（SAT）、補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)、2-ME反應(yīng)和抗-人球蛋白試驗(yàn)（Coombs試驗(yàn)）反應(yīng)有較高的吻合率。（二）確診試驗(yàn)確診試驗(yàn)包括試管凝集試驗(yàn)、抗-人球蛋白試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)和病原分離

28、。1.試管凝集試驗(yàn)方法（1）操作步驟每份血清取9支小試管，放于試管架上。血清稀釋：第一只管加生理鹽水2.3ml，第二只不加，第三只到第九只管各加0.5ml生理鹽水。然后用1ml吸管取被檢血清0.2ml加入第一管中，混勻后吸1ml加入第二、三管各0.5ml，第三管混勻后再吸0.5ml加入第四管，以此類推到第八管吸0.5ml棄掉。此時(shí)血清的稀釋倍數(shù)從第二管開始到第八管分別為1：12.5、1：25、1：501:800。加入抗原：將試管凝集抗原做10倍稀釋充分混勻后，然后從第二管開始每管加入0.5ml，加入抗原之后，血清的最終稀釋倍數(shù)為從第二管開始1：25、1：501:1600，第一管為血清對(duì)照，最后

29、一管為抗原對(duì)照。然后充分混勻，放于37溫箱中20小時(shí)22小時(shí)后取出，在室溫下放置1小時(shí)后觀察結(jié)果。（2）結(jié)果判定：血清對(duì)照為清亮透明無沉淀，抗原對(duì)照為均勻混濁?！?”液體完全透明，菌體呈傘狀沉淀或塊狀顆粒狀沉淀，呈100%凝集；“+”液體近于完全透明，菌體呈傘狀沉淀，呈75%凝集；“+”液體略微透明，菌體呈較薄傘狀沉淀，呈50%凝集；“+”液體不透明，管底有不很明顯的傘狀沉淀，呈25%凝集；“-”液體不透明，無傘狀沉淀。（3）診斷標(biāo)準(zhǔn)：人血清為1：100（+）及以上者為陽性，1：50（+）為可疑。（4）評(píng)價(jià)：該方法特異性好，敏感性也高，適用于檢疫和臨床診斷。該試驗(yàn)有時(shí)出現(xiàn)前帶現(xiàn)象和封閉現(xiàn)象，出

30、現(xiàn)假陰性結(jié)果。2.抗-人球蛋白試驗(yàn)（Coombs試驗(yàn)）方法（1）操作步驟試管凝集反應(yīng)階段：按常規(guī)進(jìn)行試管凝集試驗(yàn)，在37溫箱中放20小時(shí)22小時(shí)，取出放室溫2小時(shí)后判XX果?？骨虻鞍追磻?yīng)階段：選取上項(xiàng)試驗(yàn)的可疑管和全部陰性管，4000轉(zhuǎn)/分離心15分鐘，反復(fù)洗滌3次。向各管中加入生理鹽水0.5ml，混勻，然后再向各管中加0.5ml一定稀釋度的（一般是1:20-1:50稀釋）抗球蛋白血清。將反應(yīng)管置（2）判定標(biāo)準(zhǔn)：同試管凝集反應(yīng)。此反應(yīng)包括以下對(duì)照：被檢血清對(duì)照（被檢血清+鹽水）試管凝集抗原對(duì)照（試管抗原+鹽水）抗球蛋白血清加生理鹽水對(duì)照（抗球蛋白血清+鹽水）抗球蛋白血清加試管凝集抗原對(duì)照（抗球

31、蛋白血清+試管抗原）抗球蛋白血清加被檢血清對(duì)照（抗球蛋白血清+被檢血清）（3）診斷標(biāo)準(zhǔn)：上述對(duì)照全部為陰性時(shí)，試驗(yàn)才有意義。用于診斷人布病標(biāo)準(zhǔn)1：400（+）及以上滴度。3.補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)（1）操作步驟先取6支凝集管放于試管架上，將滅活的待檢血清從1：5開始作對(duì)倍稀釋直至1：160倍；另取10支凝集管放于試管架上，其中6支作為反應(yīng)管，4支作為對(duì)照管。取已稀釋好的各稀釋倍數(shù)血清0.2ml分加于反應(yīng)管中；每個(gè)反應(yīng)管加2個(gè)單位抗原0.2ml，2個(gè)單位補(bǔ)體0.2ml；血清對(duì)照：血清（1：5）0.2ml+2個(gè)單位補(bǔ)體0.2ml+鹽水0.2ml補(bǔ)體及抗原對(duì)照：a.2個(gè)單位抗原0.2ml+2個(gè)單位補(bǔ)體0.05

32、ml+鹽水0.35mlb.2個(gè)單位抗原0.2ml+2個(gè)單位補(bǔ)體0.1ml+鹽水0.30mlc.2個(gè)單位抗原0.2ml+2個(gè)單位補(bǔ)體0.2ml+鹽水0.2ml混勻，置37水浴30分鐘；取出各管加入0.4ml溶血系，再放37水浴30分鐘，判XX果。補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)程序（單位：ml）成份血清稀釋度血清對(duì)照補(bǔ)體及抗原對(duì)照1:51:101:201:401:801:1601:50.5單位1.0單位2單位被檢血清0.20.20.20.20.20.20.22個(gè)單位抗原0.20.20.20.20.20.20.20.20.22個(gè)單位補(bǔ)體0.20.20.20.20.20.20.20.050.10.2生理鹽水0.20.3

33、50.30.237水浴30分鐘溶血系（溶血素+2%SRBC）0.40.40.40.40.40.40.40.40.40.437水浴30分鐘結(jié)果舉例（+）（+）（+）（+）（+）（-）（-）（+）（+）（-）（2）判XX果（+）無溶血，紅細(xì)胞沉于管底或?yàn)閼乙海唬?）25%溶血（+）50%溶血上清隨不同程度溶血，呈不同顏色，透明度亦不同（+）75%溶血（-）100%溶血，上清透明，呈深紅色。本試驗(yàn)中對(duì)照反應(yīng)合乎要求，被檢血清在1：40滴度處出現(xiàn)50%溶血，則其滴度為1：40。人及所有動(dòng)物血清溫?zé)嵫a(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)以1：10出現(xiàn)抑制溶血為（+）、（+）、（+）者為陽性；（3）評(píng)價(jià)該方法是人獸醫(yī)廣泛應(yīng)用的診斷

34、布病的手段。它的明顯特點(diǎn)是特異性較強(qiáng)。該反應(yīng)的結(jié)果不僅與布病臨床表現(xiàn)及病期有較好的一致性，而且與牲畜的排菌、帶菌均有較高的一致性。4.布魯氏菌培養(yǎng)一般的布魯氏菌（以下簡稱“布氏菌”）培養(yǎng)需要采集患者血液5毫升血液，立即注入血培養(yǎng)瓶，混勻后放入37培養(yǎng)箱或血培養(yǎng)儀器。培養(yǎng)2天以上觀察是否有細(xì)菌生長，對(duì)長出的細(xì)菌需要轉(zhuǎn)種到布氏瓊脂或適宜的培養(yǎng)基上，進(jìn)一步進(jìn)行涂片染色觀察、血清凝集、噬菌體裂解、生化鑒定和提取核酸，進(jìn)行PCR鑒定等試驗(yàn)。布氏菌涂片觀察：布氏菌常用革蘭染色方法染色，為革蘭染色陰性，涂片后需要玻片過火，以殺滅玻片上的活菌。布氏菌屬的種、型鑒定：目前采用的布氏菌種型鑒定方法包括：陽性血清和特異性單相血清A、M凝集試驗(yàn)，粗糙型（R）血清凝集試驗(yàn)，噬菌體裂解試驗(yàn)，硫化氫產(chǎn)生量的測定，初代分離培養(yǎng)時(shí)