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1、關(guān)于免疫學(xué)檢測(cè)免疫學(xué)預(yù)防第1頁(yè),共25頁(yè),2022年,5月20日,9點(diǎn)46分,星期四主要內(nèi)容第一節(jié) 免疫細(xì)胞及其亞群的檢測(cè)(自學(xué))第二節(jié) 免疫分子的檢測(cè)(重點(diǎn))一、抗原、抗體的檢測(cè)(一)抗原 - 抗體反應(yīng)的特點(diǎn)(自學(xué))(二)抗原 - 抗體反應(yīng)的影響因素(自學(xué))(三)抗原 - 抗體反應(yīng)的類型和檢測(cè)方法(重點(diǎn))1.沉淀反應(yīng)(自學(xué))2.凝集反應(yīng)(自學(xué))3.補(bǔ)體參與的抗原抗體反應(yīng)(自學(xué))4.免疫標(biāo)記技術(shù)(重點(diǎn))5.蛋白芯片技術(shù)(自學(xué))二、細(xì)胞因子的檢測(cè)(自學(xué))第三節(jié) 免疫學(xué)檢測(cè)的臨床應(yīng)用第2頁(yè),共25頁(yè),2022年,5月20日,9點(diǎn)46分,星期四第二節(jié) 免疫分子的檢測(cè)(三)抗原抗體反應(yīng)的類型和檢測(cè)方法
2、4.免疫標(biāo)記技術(shù)(1)免疫熒光技術(shù)(3)放射免疫測(cè)定法(2)酶免疫測(cè)定法.第3頁(yè),共25頁(yè),2022年,5月20日,9點(diǎn)46分,星期四 Ag-Ab + 標(biāo)記技術(shù)。用以檢測(cè)Ag或Ab的一種試驗(yàn)方法。標(biāo)記:熒光素、酶、放射性同位素等。標(biāo)記后的Ag或Ab仍 有原有的生物學(xué)活性。特點(diǎn):敏感性高、特異性強(qiáng)、應(yīng)用范圍廣,可定性、定量、定位。4、免疫標(biāo)記技術(shù)免疫熒光技術(shù)免疫酶測(cè)定法 放射免疫測(cè)定法發(fā)光免疫分析免疫膠體金技術(shù)免疫印跡技術(shù)第4頁(yè),共25頁(yè),2022年,5月20日,9點(diǎn)46分,星期四Ag熒光素Ag放射性同位素酶熒光顯微鏡酶標(biāo)檢測(cè)儀射線測(cè)量?jī)x化學(xué)發(fā)光物、金屬顆粒等用熒光素、放射性同位素、酶、金屬顆粒
3、及化學(xué)(或生物)發(fā)光劑等作為追蹤物,標(biāo)記抗體或抗原進(jìn)行的抗原抗體反應(yīng)免疫標(biāo)記技術(shù)第5頁(yè),共25頁(yè),2022年,5月20日,9點(diǎn)46分,星期四Ag硝酸纖維素膜和醋酸纖維素膜利用吸附載體作為固相進(jìn)行抗原抗體反應(yīng)吸附載體聚苯乙烯微量反應(yīng)板(酶標(biāo)板)第6頁(yè),共25頁(yè),2022年,5月20日,9點(diǎn)46分,星期四Ag聚苯乙烯微量反應(yīng)板(酶標(biāo)板)封阻/封閉(block)包被(coat)AgAg第7頁(yè),共25頁(yè),2022年,5月20日,9點(diǎn)46分,星期四熒光素:異硫氰酸熒光素(FITC)-黃綠色熒光 四乙基羅丹明(RB200)-橙色熒光四甲基異硫氰酸羅丹明(TMRITC)-橙紅色第8頁(yè),共25頁(yè),2022年,
4、5月20日,9點(diǎn)46分,星期四待檢標(biāo)本(固定在玻片上)+已知熒光抗體洗去游離的熒光Ab 干燥后,熒光顯微鏡下觀察。用途:病毒感染的細(xì)胞、攜帶某種特異性Ag的細(xì)胞的檢測(cè)。a、直接熒光法問(wèn)題思考:直接法會(huì)給我們的檢測(cè)工作帶來(lái)什么不方面?檢測(cè)多種Ag需制備多種相應(yīng)的熒光抗體標(biāo)記。 第9頁(yè),共25頁(yè),2022年,5月20日,9點(diǎn)46分,星期四用來(lái)檢測(cè)標(biāo)本中未知的Ag。檢測(cè)Ag。未標(biāo)記Ab+待檢Ag(未知)(沖洗)+熒光標(biāo) 記抗Ab沖洗、干燥、熒光顯微鏡下觀察。b、間接熒光法優(yōu)點(diǎn):敏感性高,制備一種熒光標(biāo)記抗Ab即可對(duì)多種Ab-Ab系統(tǒng)進(jìn)行檢測(cè)。缺點(diǎn):易出現(xiàn)非特異性熒光。第10頁(yè),共25頁(yè),2022年,
5、5月20日,9點(diǎn)46分,星期四直接酶標(biāo)法間接酶標(biāo)法辣根過(guò)氧化物酶(HRP) 堿性磷酸酶抗抗體、二抗酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)第11頁(yè),共25頁(yè),2022年,5月20日,9點(diǎn)46分,星期四雙抗體夾心法用已知抗體檢測(cè)未知抗原 第12頁(yè),共25頁(yè),2022年,5月20日,9點(diǎn)46分,星期四間接法用已知抗原檢測(cè)未知抗體 第13頁(yè),共25頁(yè),2022年,5月20日,9點(diǎn)46分,星期四“免疫標(biāo)記技術(shù)”小結(jié)熒光標(biāo)記法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)直 接熒光法間 接熒光法夾心法間接法已知抗體包被于固相載體,加待測(cè)抗原,再加酶標(biāo)抗體,顯色;反之亦然(先加已知抗原)標(biāo)記抗原或者一抗抗原包被于固相載體,加酶標(biāo)一抗,再加酶標(biāo)二
6、抗,顯色標(biāo)記二抗第14頁(yè),共25頁(yè),2022年,5月20日,9點(diǎn)46分,星期四課堂測(cè)試1、下列哪項(xiàng)不是免疫標(biāo)記技術(shù)的特點(diǎn)_A、提高了反應(yīng)的靈敏度 B、反應(yīng)的特異性更強(qiáng)C、能進(jìn)行定量檢測(cè) D、能進(jìn)行定性檢測(cè)E、具有快速的優(yōu)點(diǎn)2、下列免疫學(xué)測(cè)定方法靈敏度最高的是_A、沉淀反應(yīng) B、凝集反應(yīng) C、ELISAD、放射免疫測(cè)定 E、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)3、免疫熒光抗體技術(shù)間接法是將熒光素標(biāo)記在_A、被檢抗原上 B、已知抗體上C、抗Ig抗體上 D、AgAb復(fù)合物上E、已知抗原上第15頁(yè),共25頁(yè),2022年,5月20日,9點(diǎn)46分,星期四4、ELISA的雙抗體夾心法,固相載體的標(biāo)記物是_A、待檢抗原 B、已知抗原
7、 C、已知抗體D、酶標(biāo)抗體 E、酶標(biāo)抗原5、檢測(cè)可溶性抗原可以用_A、直接凝集反應(yīng) B、酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)C、放射性免疫分析法 D、直接熒光標(biāo)記6、間接標(biāo)記技術(shù)一般主要用于檢測(cè)_A、未知抗原 B、未知抗體C、兩者都可以第16頁(yè),共25頁(yè),2022年,5月20日,9點(diǎn)46分,星期四第二十四章 免疫學(xué)防治第一節(jié) 免疫預(yù)防(重點(diǎn))一、疫苗(重點(diǎn))二、疫苗的基本要求(自學(xué))三、計(jì)劃免疫和預(yù)防接種注意事項(xiàng)(了解)第二節(jié) 免疫治療(自學(xué))第17頁(yè),共25頁(yè),2022年,5月20日,9點(diǎn)46分,星期四老問(wèn)題思考第一次患嚴(yán)重疾病而病愈,第二次遭受同一嚴(yán)重疾病,患病結(jié)果會(huì)怎樣?怎么解釋?第18頁(yè),共25頁(yè),202
8、2年,5月20日,9點(diǎn)46分,星期四人工主動(dòng)免疫第19頁(yè),共25頁(yè),2022年,5月20日,9點(diǎn)46分,星期四初次抗原刺激再次抗原刺激時(shí)間(天)人工被動(dòng)免疫第20頁(yè),共25頁(yè),2022年,5月20日,9點(diǎn)46分,星期四人工主動(dòng)免疫和人工被動(dòng)免疫的特點(diǎn)人工主動(dòng)免疫 人工被動(dòng)免疫輸入物質(zhì)抗原抗體等免疫力出現(xiàn)時(shí)間慢(2-3周)快(輸注即生效)免疫力維持時(shí)間數(shù)月至數(shù)年2-3周主要用途預(yù)防治療或緊急預(yù)防接種次數(shù)1到3次1次第21頁(yè),共25頁(yè),2022年,5月20日,9點(diǎn)46分,星期四是給機(jī)體輸入抗原性物質(zhì),剌激機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫力一、疫苗 1. 滅活疫苗/死疫苗 2. 減毒活疫苗 3. 類毒素 4. 新型疫苗第22頁(yè),共25頁(yè),2022年,5月20日,9點(diǎn)46分,星期四三、計(jì)劃免疫和預(yù)防接種注意事項(xiàng)有計(jì)劃地使用生物制品(主要是疫苗)進(jìn)行預(yù)防接種,提
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