實(shí)驗(yàn)7-種子生活力的快速測(cè)定課件

1、實(shí)驗(yàn)6 植物種子生活力的快速測(cè)定實(shí)驗(yàn)6 植物種子生活力的快速測(cè)定種子生活力：指種子能夠萌發(fā)的潛在能力或種胚具有的生命力。種子生活力：指種子能夠萌發(fā)的潛在能力或種胚具有的生命力。實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)材料與設(shè)備實(shí)驗(yàn)步驟數(shù)據(jù)處理與結(jié)果分析注意事項(xiàng)思考題實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康牧私夥N子生活力快速測(cè)定的方法理解TTC/BTB/染料法測(cè)定種子生活力的原理實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私夥N子生活力快速測(cè)定的方法TTC法凡有生活力的種子胚部在呼吸作用過(guò)程中都有氧化-還原反應(yīng)，而無(wú)生活力的種胚則無(wú)此反應(yīng)。當(dāng)TTC溶液滲入種胚的活細(xì)胞內(nèi)，并作為氫受體被脫氫輔酶（NADH或NADPH）還原時(shí)，可產(chǎn)生紅色的三苯甲腙（TTF），胚便染成紅色。如種

2、胚死亡便不被染色；如種胚生活力下降，呼吸作用明顯減弱，脫氫酶的活性亦大大下降，染色較淺；故可根據(jù)種胚染色的部位或深淺來(lái)鑒定種子的生活力。 實(shí)驗(yàn)原理 TTC法凡有生活力的種子胚部在呼吸作用過(guò)程中都有氧化-還原反TTC還原反應(yīng)如下：氯化三苯基四氮唑 三苯甲腙TTC還原反應(yīng)如下：氯化三苯基四氮唑 活種子死種子活種子死種子BTB溴麝香草酚藍(lán)法活細(xì)胞呼吸釋放CO2， CO2溶于水成H2CO3解離，使種胚周?chē)h(huán)境酸度增加，用BTB來(lái)反映酸度的改變；BTB變色范圍為pH6.0-7.6，酸性呈黃色，堿性呈藍(lán)色，中間經(jīng)過(guò)綠色（變色點(diǎn)為pH7.1）。本實(shí)驗(yàn)觀察種胚周?chē)狞S色暈圈。BTB溴麝香草酚藍(lán)法活細(xì)胞呼吸釋放

3、CO2， CO2溶于水成H實(shí)驗(yàn)7_種子生活力的快速測(cè)定課件染料染色法 有生命力種子胚細(xì)胞的原生質(zhì)膜具有半透性，有選擇吸收外界物質(zhì)的能力，一般染料不能進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，胚部不染色。而喪失生命力的種子，其胚部細(xì)胞原生質(zhì)膜喪失了選擇吸收能力，染料可自由進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)使胚部染色。所以可根據(jù)種子胚部是否被染色來(lái)判斷種子的生命力。 染料染色法 有生命力種子胚細(xì)胞的原生質(zhì)膜具有半透性，有選活種子死種子活種子死種子材料、設(shè)備及試劑 （一）材料：小麥種子（二）儀器設(shè)備：1. 小燒杯；2. 刀片；3. 鑷子；4. 溫箱（三）試劑： 1. 0.12-0.5TTC溶液（TTC可直接溶于水，溶于水后，呈中性，pH70.5，不宜久

4、藏，應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配）。 2. 0.02-0.2靛紅溶液或5紅墨水（酸性大紅G） 3. BTB溶膠 材料、設(shè)備及試劑 （一）材料：小麥種子BTB法煮沸的1BTB瓊脂膠約20 ml，冷卻倒膠至培養(yǎng)皿（1/3皿）；取30粒完好的小麥種子，種胚向下插入膠(不軟不硬)；將培養(yǎng)皿置于35 下培養(yǎng) 1hr，對(duì)光觀察，如種胚附近呈現(xiàn)較深黃色暈圈是活種子，否則是死種子。實(shí)驗(yàn)步驟BTB法煮沸的1BTB瓊脂膠約20 ml，冷卻倒膠至培養(yǎng)皿TTC/紅墨水染色法將種子用溫水（30）浸泡2-6h，使種子充分吸脹；隨機(jī)取小麥種子30粒，沿種胚中央準(zhǔn)確切開(kāi)，取其一半TTC備用，另一半紅墨水法備用；將TTC備用的一半種子浸于5 m

5、l TTC 中，于恒溫箱（30-35）中保溫30min；將紅墨水法的另一半種子用5 ml紅墨水浸5 min（室溫）；染色結(jié)束后要立即進(jìn)行鑒定，因放久會(huì)褪色。倒出TTC / 紅墨水，再用清水沖洗種子1-2次，觀察種胚被染色的情況。TTC/紅墨水染色法將種子用溫水（30）浸泡2-6h，使種不同方法測(cè)定種子生活力統(tǒng)計(jì)表方法供試粒數(shù)有生活力種子粒數(shù)無(wú)生活力種子粒數(shù)有生活力種子占供試粒數(shù)的%TTC30紅墨水30BTB 30數(shù)據(jù)記錄與處理不同方法測(cè)定種子生活力統(tǒng)計(jì)表方法供試粒數(shù)有生活力種子粒數(shù)無(wú)生沿種胚中央準(zhǔn)確切開(kāi)，同粒TTC/紅墨水法各一半TTC溶液最好現(xiàn)配現(xiàn)用，如需貯藏則應(yīng)貯于棕色瓶中，放在陰涼黑暗處，如溶液變紅則不可再用。染色結(jié)束后立即進(jìn)行鑒定，因放久會(huì)褪色。顯色時(shí)要使漂浮的種子全部浸入試劑中溶膠倒至培養(yǎng)皿1/3處；取完好小麥種子，將種胚向下插入BTB瓊脂膠。注意事項(xiàng)沿種