4種黃連生物堿的抑菌作用

1、4種黃連生物堿的抑菌作用【摘要】目的小檗堿，藥根堿，黃連堿和巴馬亭是黃連中4種重要的生物堿，為深化研究4種黃連生物堿身分的抑菌特性差異，本實(shí)行對(duì)它們的抑菌譜和抑菌活性舉行了實(shí)行研究。要領(lǐng)以從石柱黃連中提取的4種生物堿為實(shí)行藥物，接納抑菌圈實(shí)行法，在2000g/L藥液濃度下對(duì)常見的19種微生物舉行了藥物敏感性試驗(yàn),并通過比濁法對(duì)敏感菌的最小抑菌濃度I舉行了檢測。效果4種生物堿身分的敏感菌范疇雷同但抑菌活性差異，此中小檗堿的抑菌活性最大,黃連堿和巴馬亭次之，藥根堿最小；4種黃連生物堿對(duì)革蘭氏陽性菌的按捺活性大于革蘭氏陰性菌和酵母菌；每種生物堿對(duì)耐藥金葡菌R和金葡菌的抑菌本領(lǐng)根本雷同。結(jié)論4種黃連生

2、物堿均為黃連的抗菌活性身分，抑菌譜雷同，但抑菌活性有較大差異；4種黃連生物堿對(duì)耐藥金葡菌的耐藥性具有消除作用。【關(guān)鍵詞】黃連小檗堿藥根堿巴馬亭黃連堿抑菌Keyrdsptidisrhize;Berberine;Jatrrrhizine;Palatine;ptisine;Antiirbialativity黃連是中醫(yī)臨床上的常見抗菌消炎中藥，在臨床上除重要用于治療菌立腸炎、腹瀉、胃炎等細(xì)菌性胃腸炎疾玻研究表白，黃連中的抗菌消炎的物質(zhì)底子重要是此中所含的原小檗堿類生物堿身分，而小檗堿，藥根堿，黃連堿和巴馬亭是黃連中4種重要的生物堿身分，在分子布局特點(diǎn)上均屬異喹啉類生物堿,具季銨基團(tuán)1。為深化研究黃連中

3、差異生物堿身分的抑菌活性差異和拓展黃連生物堿的應(yīng)用范疇，從石柱黃連中提取了小檗堿、藥根堿、黃連堿和巴馬亭，以常見的19種動(dòng)植物病原菌為實(shí)行菌舉行藥物敏感性實(shí)行并對(duì)敏感菌的最小抑菌濃度I舉行檢測，以期為擴(kuò)展小檗堿和別的黃連生物堿的應(yīng)用范疇和臨床用藥提供科學(xué)根據(jù)。1東西實(shí)行藥物：小檗堿、藥根堿、黃連堿和巴馬亭由實(shí)行室從石柱黃連中提取分散制備，HPL檢測純度均在97%以上。實(shí)行菌株：金黃色葡萄球菌(AT25923)，金黃色葡萄球菌耐藥菌R，膿腫分枝桿菌，傷寒桿菌，綠膿桿菌，志賀氏痢疾桿菌，克雷伯氏菌，腸炎沙門菌，宏大芽孢桿菌，枯草桿菌，大腸桿菌變形桿菌，白色葡萄球菌，假絲酵母，白色念珠菌，四聯(lián)球菌，

4、魚害粘球菌和魚腸型點(diǎn)狀產(chǎn)氣單胞菌實(shí)行菌株由重慶醫(yī)科大學(xué)底子醫(yī)學(xué)院病原微生物教研室和西南大學(xué)資源與環(huán)境科學(xué)學(xué)院微生物教研室提供。造就基：真菌接納改進(jìn)沙保氏造就基配方為：卵白胨10g，葡萄糖20g，蒸餾水1000l，魚病原菌鮭腎桿菌，魚害粘球菌和魚腸型點(diǎn)狀產(chǎn)氣單胞菌接納胰卵白胨醋酸鈉造就基配方：胰卵白胨5.0g，醋酸鈉2.0g，酵母膏5.0g，牛肉膏0.2g，蒸餾水1000l，別的細(xì)菌接納平凡細(xì)菌造就基加減身分舉行造就。配制時(shí)固體造就基參加1.5%的瓊脂，液體造就基不加。實(shí)行裝備：96微孔板，酶標(biāo)儀，超凈事情臺(tái)，滅菌鍋，恒溫造就箱。2要領(lǐng)2.1微生物敏感性實(shí)行將備選的菌種接納較高濃度的藥液舉行藥物

5、敏感實(shí)行，開端確定3種生物堿對(duì)實(shí)行菌的抑菌作用，為進(jìn)一步研究藥物對(duì)敏感菌的抑菌本領(lǐng)提供根據(jù)。要領(lǐng)為：藥液配制及紙片制備：將每種藥液均配制成濃度為2.0g/l的溶液，將直徑6.35的紙片浸泡于藥液，100/30in滅菌，冷卻后置冰箱保存。菌液制備：將實(shí)行菌種先接種到歪面活化造就24h,膿腫分枝桿菌造就2d后用滅菌生理鹽水洗下，計(jì)數(shù)后用液體造就基配成108fu/l的菌液。抑菌圈試驗(yàn)：用滅菌后的涂布環(huán)將試驗(yàn)菌液勻稱涂抹于固體瓊脂平板上，每個(gè)平板放上3個(gè)藥物紙片，膿腫分枝桿菌造就2d，別的實(shí)行菌造就24h后不雅察，記載抑菌環(huán)直經(jīng)。2.2敏感菌的I定量實(shí)行對(duì)3種藥液舉行藥物敏感性實(shí)行以后，選擇敏感的菌種

6、，接納液體造就基一連稀釋法造就后檢測每種黃連生物堿對(duì)敏感菌的最小抑菌濃度I。18，116，132，164，1128，1256，1512和11024共11個(gè)濃度。實(shí)行操縱在96微孔板上舉行，每試驗(yàn)微孔用移液槍參加液體造就基100l，試驗(yàn)菌液20l，藥液120l，混勻后置37造就，膿腫分枝桿菌造就2d，別的實(shí)行菌造就24h后不雅察。每個(gè)實(shí)行3個(gè)重復(fù)并設(shè)立不加實(shí)行菌的本底比較120l藥液120l液體造就基。接納酶標(biāo)儀檢測微孔板實(shí)行菌的生長環(huán)境，檢測指標(biāo)為微孔中造就液體系的光密度D值，檢測波長620n。實(shí)行微孔的D值減去同濃度的本底比較的D值即為實(shí)行微孔的D凈值。按照D凈值判斷藥物對(duì)該實(shí)行菌的I。3效

7、果與討論3.1藥物敏感性實(shí)行表1為黃連中4種生物堿對(duì)常見19種微生物藥物敏感性試驗(yàn)的不雅察效果，從表中可以看出，4種黃連生物堿的敏感菌菌譜除了藥根堿以外別的3種根本雷同，從表中數(shù)據(jù)不難創(chuàng)造，黃連生物堿類對(duì)G+菌比對(duì)G菌和真菌的作用越發(fā)顯著。表1黃連生物堿對(duì)19種病原菌的藥敏實(shí)行略3.2黃連生物堿敏感菌的I測定表2為4種黃連生物堿在2000g/l濃度紙片法條件下挑選出的14種敏感菌的I測定效果，從表中數(shù)據(jù)可知：4種生物堿對(duì)同種敏感菌的抑菌本擁有必然的差異，總體闡發(fā)來看，小檗堿的抑菌作用和抑菌譜好似更大一些，黃連堿和巴馬亭次之，藥根堿最弱。由于藥物的難溶性而限定進(jìn)一步進(jìn)步藥物濃度，在外貌看來是抑菌

8、譜的差異現(xiàn)實(shí)上大概是抑菌本領(lǐng)的差異。同時(shí)在試驗(yàn)中還不雅察到4種生物堿對(duì)耐藥金黃色葡萄球菌有較強(qiáng)的按捺作用，小檗堿，黃連堿和巴馬亭對(duì)膿腫分枝桿菌具有必然的按捺作用。表24種黃連生物堿對(duì)敏感菌的Igl-1略小檗堿，黃連堿，巴馬亭和藥根堿是黃連中含量最為富厚的4種生物堿，4種生物堿具有雷同的基天職子骨架即原小檗堿類生物堿分子骨架和芳型季銨氮布局，4種生物堿均具有雷同的異喹啉基天職子骨架，抑菌譜理論上不會(huì)產(chǎn)生較大差異。而Iasa等2報(bào)道原小檗堿類生物堿的藥效必須布局為7位的芳環(huán)季銨氮布局，4種生物堿在分子布局上的區(qū)別在于A環(huán)2，3位代替基團(tuán)和D環(huán)9，10位的代替基團(tuán)的差異，而在A環(huán)和D環(huán)代替基團(tuán)差異對(duì)

9、原小檗堿類化合物的抑菌活性會(huì)有增減作用。張傳美等3創(chuàng)造黃連復(fù)方三黃湯或黃連小檗堿對(duì)慶大霉素大腸桿菌具有很好的按捺活性，以為它們能按捺和消除耐藥菌株的抗藥性。本實(shí)行中4種黃連生物堿對(duì)金葡菌和耐藥金葡菌R的I根本雷同，進(jìn)一步證實(shí)白黃連生物堿對(duì)耐藥菌株有較好的按捺作用，就此征象舉行研究具有很高的醫(yī)學(xué)代價(jià)。對(duì)原小檗堿類化合物藥理作用的深化研究后創(chuàng)造，該類化合物除了具有較強(qiáng)的抗菌消炎作用外，并且還具有落血脂，落血糖，抗腫瘤和抗瘧疾等藥理作用35。因此，對(duì)原小檗堿類生物堿藥物化學(xué)的深化研究具有較高的科研代價(jià)?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1JiYB.Thepharalgyandappliatinftheativepnent

10、fhineseherbs.Harbin:HEilngjiangtehnlgialpress,1995：691.2KIasa,Kaigauhi,Ueki,etal.Antibaterialativityandstruture-ativityrelatinshipsfberberineanalgsJ.EurJedhe,1996,31:469.3Zhang,LiuNB,Yu,etal.InhibitinfpundingfGentayin,SanhuangtangandBerberinetE.liinVitrJ.JLaiyangAgri,2022，21(1):14.4eiJ,JiangJD,uJD,etal.Researhntheeffeti