樣品前處理-常規(guī)技術(shù)課件

1、樣品前處理及實(shí)際樣品分析氣態(tài)分離法沉淀與過(guò)濾分離萃取分離法離子交換分離法色譜分離法電分離法氣浮分離法（浮選分離）膜分離分析化學(xué)中的常用分離和富集方法 固相萃取()：是 由液固萃取和柱液相色譜技術(shù)結(jié)合發(fā)展而來(lái)的一種樣品預(yù)處理（分離、純化和濃縮）的技術(shù)。固相萃取微處理小柱通常由粒徑為40m的各種不同的填料（活性炭、硅藻土、氧化鋁、硅膠、反相、離子交換等）壓縮于聚丙烯塑料管。它的優(yōu)點(diǎn)是：節(jié)省時(shí)間，交叉污染機(jī)會(huì)小，重現(xiàn)性好，回收率高。特別適用微量試液處理。 原理：固相萃取是一個(gè)包括液相和固相的物理萃取過(guò)程。 SPE操作步驟如下： 一 固相萃取( Solid phase exaction)I 柱的預(yù)處理

2、 為了獲得高的回收率和良好的重現(xiàn)性：除去填料中可能存在的雜質(zhì)；使填料溶劑化，提高固相萃取的重現(xiàn)性。 II 樣品的添加試樣溶液被加至并以一定的流速通過(guò)柱子。在該步驟分析物被保留在吸附劑上。III 柱的洗滌在樣品通過(guò)萃取柱時(shí)，不僅分析物被吸附在柱子上，一些雜質(zhì)也同時(shí)被吸附，選擇適當(dāng)?shù)娜軇?，將干擾組分洗脫下來(lái)，同時(shí)保持分析物仍留在柱上。IV 分析物的洗脫用洗脫劑將分析物洗脫在收集管中，為了提高分析物的濃度或?yàn)橐院蠓治稣{(diào)整溶劑雜質(zhì)，可以把收集到的分析物用氮?dú)獯蹈?，再溶于小體積適當(dāng)?shù)娜軇┲小?與SPE 相比SPME具有以下優(yōu)點(diǎn)：(1 ) 不使用有機(jī)溶劑萃取，降低了成本，避免了二次污染；(2) 操作時(shí)間短

3、，從萃取進(jìn)樣到分析結(jié)束不足1；(3) 樣品用量少，幾L幾十L； (4) 操作簡(jiǎn)便，可減少待測(cè)組分的揮發(fā)損失 ； (5) 檢測(cè)限達(dá) /水平； (6) 適于揮發(fā)性有機(jī)物、半揮發(fā)性有機(jī)物及不具揮發(fā)性的有機(jī)物。 1.壓桿 2筒體 3壓桿卡持螺釘 4.Z形槽 5.簡(jiǎn)體視窗 6調(diào)節(jié)針頭長(zhǎng)度的定位器 7.拉伸彈簧 8.密封隔膜 9注射針管 10.纖維聯(lián)結(jié)管 11熔融石英纖維返回固相微萃取技術(shù)條件的選擇 纖維表面固定相 表1 常用固定相和適用范圍 固定相類(lèi)型極性適用樣品PDMS(聚二甲基硅氧烷)PA（聚丙稀酸酯）聚乙二醇/二乙烯基苯非極性極性極性有機(jī)氯、有機(jī)磷、有機(jī)氮農(nóng)藥；藥品和麻醉品；食品中香味；揮發(fā)物；食

4、品中咖啡因、鹵化物有機(jī)氮農(nóng)藥；脂肪酸；藥物；食品中香味、酚體液中乙醇常用萃取頭類(lèi)型 聚二甲規(guī)氧烷類(lèi)厚膜（100um）適用于分析水樣中低沸點(diǎn)、低極性的物質(zhì)，如苯類(lèi)、有機(jī)合成農(nóng)藥等；薄膜（7um）適用于分析中等沸點(diǎn)高沸點(diǎn)的物質(zhì)，如苯甲酸酯、多環(huán)芳烴等聚丙酸酯類(lèi)適用于分析強(qiáng)極性化合物如苯酚等活性炭適用于分析極低沸點(diǎn)的強(qiáng)親脂性物質(zhì) 樣品量、容器體積 萃取時(shí)間 使用無(wú)機(jī)鹽 pH值 衍生化 加熱 磁力轉(zhuǎn)子攪拌、高速勻漿、超聲波 管內(nèi)固相微萃取(in-tube-SPME) 將萃取涂層涂在毛細(xì)管的內(nèi)表面，可采用氣相色譜毛細(xì)管 優(yōu)點(diǎn)：毛細(xì)管柱方便易得，使用壽命長(zhǎng)，內(nèi)徑小涂層薄，樣品擴(kuò)散快，平衡時(shí)間短。In-tu

5、be-SPMEGC聯(lián)用方式 熱解析：用注射器將樣品溶液注入毛細(xì)管柱，萃取平衡后將水吹出，然后用石英壓接頭將萃取柱與分析柱連接，放入氣相色譜儀爐箱中熱解吸。這種方法不適于日常分析。 溶劑解吸：水樣用氮?dú)庖詷O緩慢的流速吹入毛細(xì)管萃取柱中，再將水吹出萃取柱，將適當(dāng)溶劑注入萃取柱中解吸，收集解吸溶液注入氣相色譜中分析。 三 種不同涂層的毛細(xì)管柱：OV-1、SE-54、FFAP對(duì)5種芳烴的萃取效率比較。 結(jié)果表明， OV-1、SE-54萃取效率高于FFAP，符合相似相溶原則。應(yīng)用1）固相萃取測(cè)定生物檢材中安眠酮（導(dǎo)數(shù)紫外）2）雙柱富集固相萃取測(cè)定鈀、鍶（FAAS）3）固相萃取富集水中多環(huán)芳烴（HPLC)

6、4）固相微萃取富集多環(huán)芳烴GC-MS三.超臨界流體萃取分離法超臨界流體是介于氣液之間的一種既非氣態(tài)又非液態(tài)的物態(tài)它只能在物質(zhì)的溫度和壓力超過(guò)臨界點(diǎn)時(shí)才能存在。超臨界流體的密度較大，與液體相仿所以它與溶質(zhì)分子的作用力很強(qiáng)，像大多數(shù)液體一樣，很容易溶解其他物質(zhì)。另一方面，它的粘度較小，接近于氣體，所以傳質(zhì)速率很高；加上表面張力小，容易滲透固體顆粒，并保持較大的流速，可使萃取過(guò)程在高效、快速又經(jīng)濟(jì)的條件下完成。二氧化碳與氨。返回四. 液膜萃取和微滴萃取分離法由浸透了與水互不相溶的有機(jī)溶劑的多孔聚四氟乙烯薄膜把水溶液分隔成兩相萃取相與被萃取相；其中與流動(dòng)的試樣水溶液系統(tǒng)相連的相為被萃取相，靜止不動(dòng)的相

7、為萃取相。試樣水溶液的離子流入被萃取相與其中加入的某些試劑形成中性分子(處于活化態(tài))。這種中性分子通過(guò)擴(kuò)散溶人吸附在多孔聚四氟乙烯上的有機(jī)液膜中，再進(jìn)一步擴(kuò)散進(jìn)入萃取相，一旦進(jìn)入萃取相，中性分子受萃取相中化學(xué)條件的影響又分解為離子(處于非活化態(tài))而無(wú)法再返回液膜中去。其結(jié)果使被萃取相中的物質(zhì)離子通過(guò)液膜進(jìn)入萃取相中。微滴萃取1996年Jeannot等提出的液相微萃取(LPME)是一種建立在懸掛于微進(jìn)樣器針端有機(jī)溶劑微滴基礎(chǔ)之上的新型試樣前處理技術(shù)，它是微型化的LLE，結(jié)合了LLE和SPME的優(yōu)點(diǎn)并可以根據(jù)不同的分析儀器選擇合適的萃取體積，極大的滿(mǎn)足了色譜儀器的檢測(cè)要求，填補(bǔ)了SPME在應(yīng)用領(lǐng)域

8、上的很多空白。 五.微波萃取分離法 微波萃取分離法是利用微波能強(qiáng)化溶劑萃取的效率，使固體或半固體試樣中的某些有機(jī)物成分與基體有效地分離，并能保持分析對(duì)象的原本化合物狀態(tài)。微波萃取分離法包括試樣粉碎、與溶劑混合、微波輻射、分離萃取等步驟，萃取過(guò)程一般在特定的密閉容器中進(jìn)行。微波萃取分離法具有快速、節(jié)能、節(jié)省溶劑、污染小、儀器設(shè)備簡(jiǎn)單廉價(jià)，并可同時(shí)處理多份試樣等優(yōu)點(diǎn)，所以應(yīng)用很廣。返回六. 超聲波輔助萃取超聲波提取技術(shù)是近年來(lái)應(yīng)用到中草藥有效成份提取分離的一種最新的較為成熟的手段。其原理主要是利用超聲波在液體中的空化作用加速植物有效成份的浸出提取。另外,還利用其次效應(yīng),如機(jī)械振動(dòng),擴(kuò)散,擊碎等，使其加速被提取成份的擴(kuò)散,釋放. 與水煮、醇沉工藝相比，超聲波萃取的特點(diǎn) （1）無(wú)需高溫。（2）常壓萃取，安全性好，操作簡(jiǎn)單易行，維護(hù)保養(yǎng)方便。 （3）萃取效率高。（4）具有廣譜性。（5）超聲波萃取對(duì)溶劑和目標(biāo)萃取物的性質(zhì)（如極性）關(guān)系不大。（6）減少能耗。 （7）藥材原料處理量大，成倍或數(shù)倍提高，且雜質(zhì)少，有效成分易于分離、凈化。 （8）萃取工藝成本低，綜合經(jīng)濟(jì)效益顯著。 返回七、微透析微透析：利用膜透析原理，微量地對(duì)細(xì)胞液進(jìn)行流動(dòng)性連續(xù)采樣。 微透析系統(tǒng)的關(guān)鍵部件是微透析探針，它是由膜、導(dǎo)管及套官等組成，探針的長(zhǎng)度一般在0.5-10mm，膜材料常用纖維素膜、聚丙烯腈膜