濃縮血小板制備參數(shù)確認(rèn)的方法探討

濃縮血小板制備參數(shù)確認(rèn)的方法討論〔〕:

摘要：目的討論濃縮血小板制備參數(shù)確實(shí)認(rèn)方法，進(jìn)步濃縮血小板制品中血小板數(shù)量，進(jìn)步血小板制品質(zhì)量。方法濃縮血小板制備方法采用富血小板血漿法：分2程離心，先別離出富含血小板血漿，再制備出血小板懸液。采用逐步推進(jìn)法來確定離心時(shí)間和離心力，每份標(biāo)本離心后及時(shí)檢測血小板計(jì)數(shù)。結(jié)果我站大容量冷凍離心機(jī)ThermoFisher第一程離心時(shí)間為10min；離心轉(zhuǎn)速2000r/min，第二程離心時(shí)間為9min；離心轉(zhuǎn)速3200r/min。在設(shè)定的檢測范圍內(nèi)未出現(xiàn)溶血現(xiàn)象和血小板功能損傷。結(jié)論確定大容量冷凍離心機(jī)離心轉(zhuǎn)速和離心時(shí)間能進(jìn)步濃縮血小板制品中血小板數(shù)量。

關(guān)鍵詞：富血小板血漿；濃縮血小板；離心力

本文引用格式：李霞,孫建東.濃縮血小板制備參數(shù)確認(rèn)的方法討論[J].世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘,2022,18(74):163.

0引言

濃縮血小板是在機(jī)采血小板不能滿足臨床供給時(shí)采用的權(quán)宜措施，特別是中小型血站，使用較多。大容量冷凍離心機(jī)離心參數(shù)確實(shí)認(rèn)非常重要【1】。新進(jìn)購或使用兩年以上的離心機(jī)應(yīng)進(jìn)展離心時(shí)間和離心轉(zhuǎn)速確實(shí)認(rèn)。

1材料與方法

1.1標(biāo)本來源。使用去白細(xì)胞濾器血袋，采自安康獻(xiàn)血者，過濾白細(xì)胞后的合格血液。

1.2儀器與試劑

1.2.1大容量冷凍離心機(jī)〔ThermoFisherSCIENTIFIC〕。

1.2.2血細(xì)胞分析儀〔SYSMEX〕。

1.2.34040半自動生化分析儀〔北京瑞爾達(dá)〕。

1.2.4血細(xì)胞比積測定管〔玻璃質(zhì)地，容量1mL，刻度長10cm，分10大格，每大格又分10小格〕。

1.3方法。采用富含血小板血漿制備法。

1.3.1確定第一程離心時(shí)間和轉(zhuǎn)速。暫取離心時(shí)間5min，轉(zhuǎn)速設(shè)置為500、1000、1500、2000、2500、3000、3500、4000r/min，分別離心，測量血漿容積〔mL〕。繪制曲線，離心轉(zhuǎn)速為橫坐標(biāo)，血漿容量為縱坐標(biāo)。根據(jù)血漿容量增長趨勢，找出最正確離心時(shí)間。取值意向：①曲線斜率有明顯變化的轉(zhuǎn)折點(diǎn)〔再延長離心轉(zhuǎn)速，已不能明顯增加容量〕；②取未形成白膜層的離心轉(zhuǎn)速〔如白膜層形成，說明相當(dāng)數(shù)量的血小板已嵌入白膜層〕。選取最正確離心轉(zhuǎn)速〔2000r/min〕，設(shè)定離心時(shí)間〔min〕分別為2.5、5.0、7.5、10.0、12.5、15.0、17.5、20.0，分別進(jìn)展離心，測量血漿容積〔mL〕。繪制曲線，取離心時(shí)間為橫坐標(biāo)，血漿容量為縱坐標(biāo)。根據(jù)血漿容量增長趨勢，找出最正確離心轉(zhuǎn)速。

1.3.2確定第二程離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間。將第一程別離出的富含血小板血漿在3500r/min條件下：①較高的理論值；②未損傷血小板〕，設(shè)置2.5、5.0、7.5、10.0、12.5、15.0、17.5、20.0min分別離心，逐一測量比積管內(nèi)血漿中血小板含量，換算成血小板數(shù)量。繪制曲線，橫坐標(biāo)為離心時(shí)間，縱坐標(biāo)為血小板含量。根據(jù)最下層血漿〔80mL〕血小板含量增加的趨勢，找出最正確離心時(shí)間。取值意向：①曲線斜率有明顯變化的轉(zhuǎn)折點(diǎn)〔再延長時(shí)間，已不能明顯增加最下層血漿中血小板含量〕。②下沉局部不能有血小板凝集〔顯微鏡觀察〕。

1.3.3相關(guān)檢測。①血小板計(jì)數(shù)采用血細(xì)胞分析儀〔SYSMEX〕。②血漿微量血紅蛋白檢測采用4040半自動生化分析儀〔北京瑞爾達(dá)〕，試劑盒為北京瑞爾達(dá)公司。

2結(jié)果

3討論

大容量冷凍離心機(jī)離心效果主要由幾個(gè)關(guān)鍵性因素決定，包括離心轉(zhuǎn)速、離心時(shí)間、溫度、加速度等，其中，離心轉(zhuǎn)速和離心時(shí)間，影響效果更為直接；其他因素可變性較小。確定初次離心時(shí)間為5min的根據(jù)：①懸浮紅細(xì)胞制品紅細(xì)胞比容標(biāo)準(zhǔn)為0.35-0.60〔GB〕，離心時(shí)間5min以下，不易到達(dá)要求；②應(yīng)盡量縮短制備時(shí)間。因制備方法采用富血小板血漿法，第二程離心理論上應(yīng)轉(zhuǎn)速高，時(shí)間稍長，可以最大限度的搜集血小板。新進(jìn)購離心機(jī)在設(shè)置程序時(shí)，轉(zhuǎn)速和時(shí)間是兩個(gè)決定性的因素，直接決定血小板制品的數(shù)量能否到達(dá)最高值。新購進(jìn)的離心機(jī)，即便是同一型號的，參數(shù)設(shè)置一致，離心功能也不盡一樣〔因?yàn)槟Σ磷枇Σ煌?，需要確定離心參數(shù)【2】。同時(shí)建議，使用兩年以上的、或離心效果不佳的離心機(jī)也應(yīng)確認(rèn)離心參數(shù)。

參考文獻(xiàn)：

【1】郭永建.?血站技術(shù)操作規(guī)程?導(dǎo)讀[J].中國輸血雜志,2022,25(4):401-404.