肝功能檢驗(yàn)學(xué)習(xí)課件

肝功能檢驗(yàn)肝功能檢驗(yàn)第一節(jié)概述肝臟結(jié)構(gòu)肝臟的生化功能肝臟疾病的生化改變第一節(jié)概述肝臟結(jié)構(gòu)一、肝臟結(jié)構(gòu)（一）解剖學(xué)特點(diǎn)雙重血液供應(yīng)腹主動脈的分技肝動脈氧門靜脈營養(yǎng)雙重輸出管道肝靜脈代謝降解物

下腔靜脈膽道系統(tǒng)脂溶性物質(zhì)及其代謝產(chǎn)物體外一、肝臟結(jié)構(gòu)（一）解剖學(xué)特點(diǎn)雙重血液供應(yīng)腹主動脈的分技肝（二）肝臟的顯微結(jié)構(gòu)特點(diǎn)1、組織結(jié)構(gòu)2、亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)（三）細(xì)胞的再生（二）肝臟的顯微結(jié)構(gòu)特點(diǎn)1、組織結(jié)構(gòu)2、亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)（三）二、肝臟的生物化學(xué)功能排泄功能物質(zhì)代謝功能生物轉(zhuǎn)化重要生化功能二、肝臟的生物化學(xué)功能排泄功能重要生化功能（一）排泄功能主要排泄對象：膽汁酸、膽紅素、氨1、膽汁酸代謝膽汁功能膽汁的來源：肝膽汁膽囊膽汁十二指腸膽汁的成分：水/膽汁酸（鹽）、卵磷脂、蛋白質(zhì)、脂肪酸和膽固醇（一）排泄功能主要排泄對象：膽汁酸、膽紅素、氨1、膽汁酸代謝（2）膽汁酸生成及種類：初級膽汁酸（肝細(xì)胞）次級膽汁酸（腸道）初級游離膽汁酸初級結(jié)合膽汁酸（甘氨酸/?；撬幔┐渭売坞x膽汁酸次級結(jié)合膽汁酸（甘氨酸/?；撬幔?）膽汁酸生成及種類：初級膽汁酸（肝細(xì)胞）初級游離膽汁酸（3）膽汁酸肝腸循環(huán)：（4）膽汁酸的功能：①促進(jìn)脂類消化②促進(jìn)脂類吸收③抑制膽固醇從膽汁中析出沉淀游離型膽汁酸結(jié)合型膽汁酸（3）膽汁酸肝腸循環(huán)：（4）膽汁酸的功能：①促進(jìn)脂類消化游離2、膽紅素代謝膽色素

尿膽素原

糞膽素原尿膽素糞膽素膽綠素膽紅素膽素原2、膽紅素代謝膽色素尿膽素原膽素原肝功能檢驗(yàn)學(xué)習(xí)課件3、血氨代謝藥物及體內(nèi)含氮物質(zhì)（如嘌呤、嘧啶等）來源去路相對平衡3、血氨代謝藥物及體內(nèi)含氮物質(zhì)（如嘌呤、嘧啶等）來源去路相對部位——肝臟細(xì)胞鳥氨酸瓜氨酸瓜氨酸精氨酸代琥珀酸ATPAMP+PPi延胡索酸鳥氨酸精氨酸H2O尿素天門冬氨酸NH3CO2氨甲酰磷酸+H2O尿素循環(huán)部位——肝臟細(xì)胞鳥氨酸瓜氨酸瓜氨酸精氨酸代琥珀酸ATPAMP（二）物質(zhì)代謝功能1、營養(yǎng)物質(zhì)代謝(1)在蛋白質(zhì)代謝中的作用(2)在氨基酸代謝中的作用(3)在糖代謝中的作用(4)在脂代謝中的作用（二）物質(zhì)代謝功能1、營養(yǎng)物質(zhì)代謝(1)在蛋白質(zhì)代謝中的作用2、激素及維生素代謝激素的滅活多種維生素的儲存與轉(zhuǎn)化

2、激素及維生素代謝激素的滅活（三）肝臟的生物轉(zhuǎn)化定義：

轉(zhuǎn)化對象：藥物、毒物、致癌物轉(zhuǎn)化過程：氧化、還原、水解、結(jié)合生理意義：（三）肝臟的生物轉(zhuǎn)化定義：轉(zhuǎn)化對象：藥物、毒物、致癌三、肝臟疾病的生化改變（一）膽紅素代謝障礙（黃疸）定義:黃疸分類:

黃疸?

阻塞性黃疸

溶血性黃疸肝細(xì)胞性黃疸高膽紅素血癥?三、肝臟疾病的生化改變（一）膽紅素代謝障礙（黃疸）定義:黃疸肝功能檢驗(yàn)學(xué)習(xí)課件（二）膽汁酸代謝障礙1、膽汁酸合成障礙2、膽汁酸向腸道排出障礙3．膽汁酸腸肝循環(huán)紊亂4．膽汁瘀積病變時膽汁酸代謝紊亂

（二）膽汁酸代謝障礙1、膽汁酸合成障礙（三）血漿酶異常1．肝臟合成酶類:膽堿脂酶、凝血因子、銅藍(lán)蛋白；2.

肝細(xì)胞內(nèi)酶:

ALT、AST

3．肝臟阻塞性疾病酶活性改變：ALP、GGT4．肝硬化疾病酶活性改變：單胺氧化酶（MAO）

（四）血漿蛋白異常（三）血漿酶異常1．肝臟合成酶類:膽堿脂酶、凝血因子、銅藍(lán)蛋第二節(jié)肝功能試驗(yàn)血清（漿）蛋白測定血清酶測定血清膽紅素測定血清膽汁酸測定血氨測定第二節(jié)肝功能試驗(yàn)血清（漿）蛋白一、血清（漿）蛋白測定（一）總蛋白、白蛋白、及白蛋白/球蛋白（A/G）比值測定

1．總蛋白測定

化學(xué)法(雙縮脲法)、物理法、染料結(jié)合法、電泳法染料結(jié)合法(BCG、BCP）、沉淀法2.白蛋白測定

3．A/G比值

一、血清（漿）蛋白測定（一）總蛋白、白蛋白、及白蛋白/球蛋白【參考范圍】總蛋白60～80g/L白蛋白35～55g/L球蛋白：15～32g/LA/G比值:1.5～2.0/1【臨床意義】

血中白蛋白（總蛋白濃度）減少:見于嚴(yán)重肝病(??）、腎病（??）

A/G比值減少與A/G比值倒置：表示肝功能損害嚴(yán)重?！緟⒖挤秶靠偟鞍?0～80g/L白蛋白3（二）纖維蛋白原測定

（凝血因子Ⅰ）

測定方法：分為三大類①根據(jù)纖維蛋白原的生物學(xué)特性測定方法②根據(jù)纖維蛋白原理化性質(zhì)而建立的測定方法。③根據(jù)纖維蛋白原免疫學(xué)特點(diǎn)而建立的測定方法?！緟⒖挤秶?.22～4.22g/L(熱沉淀比濁法)【臨床意義】(1)纖維蛋白原增加：①感染；②無菌炎癥；③其它。(2)纖維蛋白原減少:①嚴(yán)重的肝臟疾??；②其它疾病引起纖維蛋白原減少的疾病。（二）纖維蛋白原測定（凝血因子Ⅰ）測定方法：分為三大類（三）甲胎蛋白（α1-fetoprotein，AFP）測定

測定方法：【參考范圍】成人10～30g/L、>400g/L作為肝癌診斷標(biāo)準(zhǔn)【臨床意義】

酶聯(lián)免疫吸附法、放射免疫分析法、斑點(diǎn)免疫結(jié)合法、火箭電泳放射自顯影法、酶聯(lián)火箭電泳法等

(1)原發(fā)性肝細(xì)胞肝癌的診斷標(biāo)：400g/L(400ng/ml)；(2)活動性急、慢性肝炎、肝硬化或其它肝病病人的診斷．（三）甲胎蛋白（α1-fetoprotein，AFP）測定（四）其它【臨床意義】肝豆?fàn)詈俗冃裕╓ilson?。┖瓦z傳性色素沉積癥．1.銅藍(lán)蛋白測定

【參考范圍】52.9～167.7IU/L【臨床意義】

遺傳性血色素沉積癥鐵沉積2．轉(zhuǎn)鐵蛋白【原理】雙聯(lián)吡啶法【原理】銅藍(lán)蛋白具有氧化酶活性

【參考范圍】

TIBC男50～77μmol/L女54～77μmol/L,轉(zhuǎn)鐵蛋白飽和度為33.0%～35.0%

（四）其它1.銅藍(lán)蛋白測定【參考范圍】52.9～16

二、血清酶測定

（1）ALT的測定（賴氏法）原理：丙氨酸+α-酮戊二酸

谷氨酸+丙酮酸

37℃、pH7.4ALT丙酮酸+2，4-二硝基苯肼2，4-二硝基苯腙

二、血清酶測定

37℃、pH7.4（2）方法評價①賴氏法的實(shí)驗(yàn)結(jié)果需與卡門分光法的結(jié)果對比后求出；②NaOH的濃度對顯色有影響；③該法的重復(fù)性差。（2）方法評價卡門氏單位：1.0ml血清在25℃，340nm，反應(yīng)體積3.0ml,光徑1.0cm時每分鐘測定吸光度下降0.001，即消耗4.8210-4μmolNADH為一個卡門氏單位卡門氏單位：1.0ml血清在25℃，340nm，反應(yīng)體積【參考范圍】5～25卡門氏單位

【臨床意義】(2)慢性活動性肝炎或脂肪肝：(1)肝細(xì)胞損傷的靈敏指標(biāo):ALT輕度增高(100～200IU),或?qū)僬７秶?【參考范圍】5～25卡門氏單位【臨床意義】(2)慢性活A(yù)LT測定連續(xù)監(jiān)測法（速率法）原理：L-丙氨酸+α-酮戊二酸

L-谷氨酸+丙酮酸丙酮酸+NAD+

LDH乳酸+NADHALTALT測定連續(xù)監(jiān)測法（速率法）LDH乳酸+NADHA（２）方法評價：①存在著兩個副反應(yīng)，會使測定結(jié)果偏高；A、血清中存在的α-酮酸(如丙酮酸)能消耗NADH。B、血清中谷氨酸脫氫酶(GLDH)增高時，在有氨存在條件下，亦能消耗NADH。

②雙試劑法，因溫育期長，能有效地消除干擾反應(yīng)，測定準(zhǔn)確性高，是ALT測定的首選方法；③血清不宜反復(fù)冰凍保存，以免影響酶活性；避免使用溶血標(biāo)本。

（２）方法評價：3.賴氏法測定AST

（１）原理與方法評價（類似ALT測定）

【參考范圍】

8～28卡門氏單位

【臨床意義】增高見于：心肌梗死、肌炎、胸膜炎、腎炎及肺炎和各種肝病病人3.賴氏法測定AST【臨床意義】增高見于：4．連續(xù)監(jiān)測法測定AST

（１）原理：

L-門冬氨酸+α-酮戊二酸草酰乙酸+L-谷氨酸

草酰乙酸+NADH

L-蘋果酸+NAD+

雙試劑法:同ALT測定MDHAST4．連續(xù)監(jiān)測法測定AST（１）原理：雙試劑法:同（２）方法評價

誤差來源內(nèi)源性干擾:主要來自血清中高濃度丙酮酸和L-谷氨酸脫氫酶(GLDH)。外源性:干擾來自試劑中污染的GLDH和AST。

【參考范圍】

5～40IU/L(連續(xù)監(jiān)測法測定)

【臨床意義】

見賴氏法（２）方法評價誤差來源【參考范圍】5～40IU/L((二)ALP測定化學(xué)法連續(xù)監(jiān)測法：鮑氏法金氏法皮氏法(二)ALP測定化學(xué)法連續(xù)監(jiān)測法：鮑氏法金氏法皮氏法１、金氏法測定ALP（１）原理：

磷酸苯二鈉酚+磷酸酚+4－AA-P紅色醌

ALPOH-K3Fe(CN)6１、金氏法測定ALP（１）原理：ALPK3Fe(CN(2)方法評價：磷酸苯二鈉比色法與更早的β-甘油磷酸鈉法相比具有較大的優(yōu)點(diǎn)，如水解速度快，保溫時間較短、靈敏度較高、顯色穩(wěn)定、不需去蛋白、操作簡單、快速。但與磷酸對硝基酚連續(xù)監(jiān)測法相比，準(zhǔn)確度、精密度較低；操作比較繁瑣,，靈敏度低。(2)方法評價：【參考范圍成人：3～13單位,兒童：5～28單位

ALP金氏單位定義是100ml血清，37℃與底物保溫15分鐘，產(chǎn)生1mg酚為1個金氏單位。ALP主要用于診斷肝膽和骨骼疾病

【臨床意義】

【參考范圍成人：3～13單位,兒童：5～28單位AL2.連續(xù)監(jiān)測法測定ALP（１）原理：

4-NPP+AMP對硝基酚(黃色）

（１）方法評價：

線性范圍可達(dá)500U/L，批內(nèi)CV為2.06%～2.36%，批間CV為2.74%。ALPOH-2.連續(xù)監(jiān)測法測定ALP（１）原理：4-NPP+AMP【參考范圍】

男性：1～12歲<500U/L,女性：1～12歲<500U/L12～15歲<750U/L，>15歲40～150U/L，>25歲40～150U/L。【臨床意義】見金氏法【參考范圍】【臨床意義】見金氏法(三)GGT測定法化學(xué)法（重氮反應(yīng)比色法）和連續(xù)監(jiān)測法。

1.重氮反應(yīng)比色法測定GGT原理：

【參考范圍】男性3～17U/L；女性2～13U/L(2)方法評價：重氮比色法活性單位：100ml血清在37℃下反應(yīng)1hr,生成0.5μmol的α-苯胺為1個GGT活性單位。(三)GGT測定法1.重氮反應(yīng)比色法測定GGT原理：【(1)原理：(2)方法評價：【參考范圍】男性：11～50U/L；(以γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺為底物)女性：7～32U/L男性：≤40U/L；女性：≤30U/L(以γ-谷氨酰-4-硝基苯胺為底物)(1)原理：(2)方法評價：【參考范圍】男性：11～(四)MAO測定

原理MAO主要作用于CH2-NH2基團(tuán)，在氧參與下，氧化脫氨生成相應(yīng)的卞醛、氨及過氧化氫。以芐氨偶氮-β-萘酚為底物,在O2和H20參與下，MAO催化生成芐醛偶氮-β-萘酚、氨及過氧化氫，用環(huán)己烷抽提后進(jìn)行比色測定。(四)MAO測定原理MAO主要作用于CH2-NH2基(2)方法評價【單位定義】：

1ml血清與底物在37℃孵育60分鐘，催化單胺氧化產(chǎn)生1nmol芐醛偶氮-β-萘酚為1個MAO單位?！緟⒖挤秶?2～40U/ml【臨床意義】：肝硬化時，肝纖維化現(xiàn)象十分活躍，MAO活性明顯升高。

(2)方法評價【單位定義】：1ml血清與底物在3三、血清膽紅素測定重氮鹽法膽紅素氧化酶(bilirubinoxidase,BOD)法高效液相色譜法(highperformanceliquidchromatography,HPLC)、導(dǎo)數(shù)分光光度法直接分光光度計(jì)法測定方法三、血清膽紅素測定重氮鹽法膽紅素氧化酶(bilirubin1．重氮鹽改良J-G法(1)原理:

結(jié)合膽紅素+重氮鹽偶氮膽紅素

游離膽紅素+重氮鹽偶氮膽紅素偶氮膽紅素+堿性酒石酸鉀鈉藍(lán)色溶液，

加速劑1．重氮鹽改良J-G法(1)原理:結(jié)合膽紅素+重(2)方法評價1、推薦的常規(guī)方法2、線性范圍較寬3、較好的準(zhǔn)確性和精確性，高濃度時準(zhǔn)確性和精確性降低。因此，建議濃度過高時減少血樣用量測定。

(2)方法評價1、推薦的常規(guī)方法【臨床意義】

【參考范圍】

黃疸的鑒別診斷

總膽紅素:5.1～19.0μmol/L直接膽紅素:1.71～6.8μmol/L【臨床意義】【參考范圍】黃疸的鑒別診斷總膽紅膽紅素BOD測定法原理：

膽紅素膽綠素BODpH8.0測總膽紅素pH4.5直接膽紅素膽紅素BOD測定法BODpH8.0測總膽紅素【參考范圍】血清總膽紅素：10.26±4.10μmol/L血清結(jié)合膽紅素：2.57±2.56μmol/L【臨床意義】見重氮比色法【參考范圍】血清總膽紅素：10.26±4.10μmol四、血清膽汁酸測定高效液相色譜法放射免疫分析法酶免疫分析法比色分析測定法

測定方法四、血清膽汁酸測定高效液相色譜法放射免疫分析法酶免疫分析法比(1)酶比色法測定原理

3α-HSDNADH+NBT甲jie（藍(lán)色化合物)3-氧-5β類固醇+NAD+3-氧-5β類固醇+NADH黃遞酶△4-DH酶比色法膽汁酸+NAD+3-氧-5β類固醇+NADH

(1)酶比色法測定原理3α-HSDNADH酶循環(huán)法測定原理為：NAD+Thio-NADThio-NADH膽汁酸3-氧代膽汁酸NADH3α-HSD酶循環(huán)法測定原理為：NAD+Thio-NADThio-N(2)酶比色測定法評價：

優(yōu)點(diǎn):

快速、簡便、準(zhǔn)確、可靠和適用

缺點(diǎn):試劑價貴、不易保存。對酶量的要求嚴(yán)格，易產(chǎn)生誤差。此外，標(biāo)準(zhǔn)品的制備非常重要。常采用甘氨膽酸溶入小牛血清中制成凍干品。

(2)酶比色測定法評價：優(yōu)點(diǎn):快速、簡便、準(zhǔn)確、【參考范圍】

1～7μmol/L(成人空腹)【臨床意義】

1、

任何引起肝細(xì)胞損傷的病理過程都可能引起血中膽汁酸升高.2、各種類型的肝病、肝硬化、脂肪肝，及急慢性膽道阻塞。3、空腹膽汁酸測定:敏感、特異性強(qiáng);最敏感的肝功能試驗(yàn)之一。特別適用于可疑有肝病但其它生化試驗(yàn)正?；蜉p度異常的病人的診斷。【參考范圍】1～7μmol/L(成人空腹)【臨床五、血氨測定為一步法，也叫直接測定即不需從全血中分離出氨即可直接測定兩步法，即先從全血中分離出氨,而后再進(jìn)行測定；微量擴(kuò)散法、離子交換法酶法和氨電極法

五、血氨測定為一步法，也叫直接測定即不需從全血中分離出氨即可原理：

NH3＋α-酮戊二酸＋NADPH

谷氨酸＋NADP+＋H2O谷氨酸脫氫酶速率法：谷氨酸脫氫酶原理：NH3＋α-酮戊二酸＋NADPH谷氨酸【參考范圍】血氨測定在診斷治療肝性腦病中占有重要作用。【臨床意義】18～72μmol/L(酶法)【參考范圍】血氨測定在診斷治療肝性腦病中占有重要作二、肝功能試驗(yàn)的分類第三節(jié)肝功能試驗(yàn)選擇原則一、肝功能試驗(yàn)選擇原則第三節(jié)肝功能試驗(yàn)選擇原則一、肝功能試驗(yàn)選擇原則謝謝！謝謝?。ㄒ唬┠懠t素的類型未結(jié)合膽紅素又稱“間接反應(yīng)膽紅素”或“間接膽紅素”。結(jié)合膽紅素又稱“直接反應(yīng)膽紅素”或“直接膽紅素”。#11δ-膽紅素與重氮反應(yīng)呈直接陽性

（一）膽紅素的類型未結(jié)合膽紅素又稱“間接反應(yīng)膽紅素”

兩類膽紅素的比較未結(jié)合bilirubin結(jié)合bilirubin水溶性小大與G醛酸結(jié)合未結(jié)合結(jié)合與血漿Alb親和力大小細(xì)胞膜通透性及毒性大小與重氮試劑反應(yīng)間接陽性直接陽性能否通過腎隨尿排出不能能常見其他名稱間接、血bil直接、肝bil

兩類膽紅素的比較δ-膽紅素

在肝C損傷及膽汁郁滯等高結(jié)合膽紅素性黃疸時，Alb中賴氨酸殘基的ε-氨基與膽紅素一個丙酸基的羧基形成酰胺鍵，使得膽紅素與白蛋白共價結(jié)合，這樣形成的膽紅素稱為δ-膽紅素?！疃x：☆臨床意義：可作為判斷嚴(yán)重肝病預(yù)后的指標(biāo)?；謴?fù)期：

δ-膽紅素δ-膽紅素在肝C損傷及膽汁郁滯等高結(jié)合未結(jié)合膽紅素的來源與轉(zhuǎn)運(yùn)：結(jié)合膽紅素的來源與轉(zhuǎn)運(yùn)與代謝：衰老紅細(xì)胞血紅蛋白未結(jié)合膽紅素的來源與轉(zhuǎn)運(yùn)：結(jié)合膽紅素的來源與轉(zhuǎn)運(yùn)與代謝：衰老此課件下載可自行編輯修改，僅供參考！

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下腔靜脈膽道系統(tǒng)脂溶性物質(zhì)及其代謝產(chǎn)物體外一、肝臟結(jié)構(gòu)（一）解剖學(xué)特點(diǎn)雙重血液供應(yīng)腹主動脈的分技肝（二）肝臟的顯微結(jié)構(gòu)特點(diǎn)1、組織結(jié)構(gòu)2、亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)（三）細(xì)胞的再生（二）肝臟的顯微結(jié)構(gòu)特點(diǎn)1、組織結(jié)構(gòu)2、亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)（三）二、肝臟的生物化學(xué)功能排泄功能物質(zhì)代謝功能生物轉(zhuǎn)化重要生化功能二、肝臟的生物化學(xué)功能排泄功能重要生化功能（一）排泄功能主要排泄對象：膽汁酸、膽紅素、氨1、膽汁酸代謝膽汁功能膽汁的來源：肝膽汁膽囊膽汁十二指腸膽汁的成分：水/膽汁酸（鹽）、卵磷脂、蛋白質(zhì)、脂肪酸和膽固醇（一）排泄功能主要排泄對象：膽汁酸、膽紅素、氨1、膽汁酸代謝（2）膽汁酸生成及種類：初級膽汁酸（肝細(xì)胞）次級膽汁酸（腸道）初級游離膽汁酸初級結(jié)合膽汁酸（甘氨酸/?；撬幔┐渭売坞x膽汁酸次級結(jié)合膽汁酸（甘氨酸/?；撬幔?）膽汁酸生成及種類：初級膽汁酸（肝細(xì)胞）初級游離膽汁酸（3）膽汁酸肝腸循環(huán)：（4）膽汁酸的功能：①促進(jìn)脂類消化②促進(jìn)脂類吸收③抑制膽固醇從膽汁中析出沉淀游離型膽汁酸結(jié)合型膽汁酸（3）膽汁酸肝腸循環(huán)：（4）膽汁酸的功能：①促進(jìn)脂類消化游離2、膽紅素代謝膽色素

尿膽素原

糞膽素原尿膽素糞膽素膽綠素膽紅素膽素原2、膽紅素代謝膽色素尿膽素原膽素原肝功能檢驗(yàn)學(xué)習(xí)課件3、血氨代謝藥物及體內(nèi)含氮物質(zhì)（如嘌呤、嘧啶等）來源去路相對平衡3、血氨代謝藥物及體內(nèi)含氮物質(zhì)（如嘌呤、嘧啶等）來源去路相對部位——肝臟細(xì)胞鳥氨酸瓜氨酸瓜氨酸精氨酸代琥珀酸ATPAMP+PPi延胡索酸鳥氨酸精氨酸H2O尿素天門冬氨酸NH3CO2氨甲酰磷酸+H2O尿素循環(huán)部位——肝臟細(xì)胞鳥氨酸瓜氨酸瓜氨酸精氨酸代琥珀酸ATPAMP（二）物質(zhì)代謝功能1、營養(yǎng)物質(zhì)代謝(1)在蛋白質(zhì)代謝中的作用(2)在氨基酸代謝中的作用(3)在糖代謝中的作用(4)在脂代謝中的作用（二）物質(zhì)代謝功能1、營養(yǎng)物質(zhì)代謝(1)在蛋白質(zhì)代謝中的作用2、激素及維生素代謝激素的滅活多種維生素的儲存與轉(zhuǎn)化

2、激素及維生素代謝激素的滅活（三）肝臟的生物轉(zhuǎn)化定義：

轉(zhuǎn)化對象：藥物、毒物、致癌物轉(zhuǎn)化過程：氧化、還原、水解、結(jié)合生理意義：（三）肝臟的生物轉(zhuǎn)化定義：轉(zhuǎn)化對象：藥物、毒物、致癌三、肝臟疾病的生化改變（一）膽紅素代謝障礙（黃疸）定義:黃疸分類:

黃疸?

阻塞性黃疸

溶血性黃疸肝細(xì)胞性黃疸高膽紅素血癥?三、肝臟疾病的生化改變（一）膽紅素代謝障礙（黃疸）定義:黃疸肝功能檢驗(yàn)學(xué)習(xí)課件（二）膽汁酸代謝障礙1、膽汁酸合成障礙2、膽汁酸向腸道排出障礙3．膽汁酸腸肝循環(huán)紊亂4．膽汁瘀積病變時膽汁酸代謝紊亂

（二）膽汁酸代謝障礙1、膽汁酸合成障礙（三）血漿酶異常1．肝臟合成酶類:膽堿脂酶、凝血因子、銅藍(lán)蛋白；2.

肝細(xì)胞內(nèi)酶:

ALT、AST

3．肝臟阻塞性疾病酶活性改變：ALP、GGT4．肝硬化疾病酶活性改變：單胺氧化酶（MAO）

（四）血漿蛋白異常（三）血漿酶異常1．肝臟合成酶類:膽堿脂酶、凝血因子、銅藍(lán)蛋第二節(jié)肝功能試驗(yàn)血清（漿）蛋白測定血清酶測定血清膽紅素測定血清膽汁酸測定血氨測定第二節(jié)肝功能試驗(yàn)血清（漿）蛋白一、血清（漿）蛋白測定（一）總蛋白、白蛋白、及白蛋白/球蛋白（A/G）比值測定

1．總蛋白測定

化學(xué)法(雙縮脲法)、物理法、染料結(jié)合法、電泳法染料結(jié)合法(BCG、BCP）、沉淀法2.白蛋白測定

3．A/G比值

一、血清（漿）蛋白測定（一）總蛋白、白蛋白、及白蛋白/球蛋白【參考范圍】總蛋白60～80g/L白蛋白35～55g/L球蛋白：15～32g/LA/G比值:1.5～2.0/1【臨床意義】

血中白蛋白（總蛋白濃度）減少:見于嚴(yán)重肝病(??）、腎?。??）

A/G比值減少與A/G比值倒置：表示肝功能損害嚴(yán)重?！緟⒖挤秶靠偟鞍?0～80g/L白蛋白3（二）纖維蛋白原測定

（凝血因子Ⅰ）

測定方法：分為三大類①根據(jù)纖維蛋白原的生物學(xué)特性測定方法②根據(jù)纖維蛋白原理化性質(zhì)而建立的測定方法。③根據(jù)纖維蛋白原免疫學(xué)特點(diǎn)而建立的測定方法。【參考范圍】2.22～4.22g/L(熱沉淀比濁法)【臨床意義】(1)纖維蛋白原增加：①感染；②無菌炎癥；③其它。(2)纖維蛋白原減少:①嚴(yán)重的肝臟疾病；②其它疾病引起纖維蛋白原減少的疾病。（二）纖維蛋白原測定（凝血因子Ⅰ）測定方法：分為三大類（三）甲胎蛋白（α1-fetoprotein，AFP）測定

測定方法：【參考范圍】成人10～30g/L、>400g/L作為肝癌診斷標(biāo)準(zhǔn)【臨床意義】

酶聯(lián)免疫吸附法、放射免疫分析法、斑點(diǎn)免疫結(jié)合法、火箭電泳放射自顯影法、酶聯(lián)火箭電泳法等

(1)原發(fā)性肝細(xì)胞肝癌的診斷標(biāo)：400g/L(400ng/ml)；(2)活動性急、慢性肝炎、肝硬化或其它肝病病人的診斷．（三）甲胎蛋白（α1-fetoprotein，AFP）測定（四）其它【臨床意義】肝豆?fàn)詈俗冃裕╓ilson?。┖瓦z傳性色素沉積癥．1.銅藍(lán)蛋白測定

【參考范圍】52.9～167.7IU/L【臨床意義】

遺傳性血色素沉積癥鐵沉積2．轉(zhuǎn)鐵蛋白【原理】雙聯(lián)吡啶法【原理】銅藍(lán)蛋白具有氧化酶活性

【參考范圍】

TIBC男50～77μmol/L女54～77μmol/L,轉(zhuǎn)鐵蛋白飽和度為33.0%～35.0%

（四）其它1.銅藍(lán)蛋白測定【參考范圍】52.9～16

二、血清酶測定

（1）ALT的測定（賴氏法）原理：丙氨酸+α-酮戊二酸

谷氨酸+丙酮酸

37℃、pH7.4ALT丙酮酸+2，4-二硝基苯肼2，4-二硝基苯腙

二、血清酶測定

37℃、pH7.4（2）方法評價①賴氏法的實(shí)驗(yàn)結(jié)果需與卡門分光法的結(jié)果對比后求出；②NaOH的濃度對顯色有影響；③該法的重復(fù)性差。（2）方法評價卡門氏單位：1.0ml血清在25℃，340nm，反應(yīng)體積3.0ml,光徑1.0cm時每分鐘測定吸光度下降0.001，即消耗4.8210-4μmolNADH為一個卡門氏單位卡門氏單位：1.0ml血清在25℃，340nm，反應(yīng)體積【參考范圍】5～25卡門氏單位

【臨床意義】(2)慢性活動性肝炎或脂肪肝：(1)肝細(xì)胞損傷的靈敏指標(biāo):ALT輕度增高(100～200IU),或?qū)僬７秶?【參考范圍】5～25卡門氏單位【臨床意義】(2)慢性活A(yù)LT測定連續(xù)監(jiān)測法（速率法）原理：L-丙氨酸+α-酮戊二酸

L-谷氨酸+丙酮酸丙酮酸+NAD+

LDH乳酸+NADHALTALT測定連續(xù)監(jiān)測法（速率法）LDH乳酸+NADHA（２）方法評價：①存在著兩個副反應(yīng)，會使測定結(jié)果偏高；A、血清中存在的α-酮酸(如丙酮酸)能消耗NADH。B、血清中谷氨酸脫氫酶(GLDH)增高時，在有氨存在條件下，亦能消耗NADH。

②雙試劑法，因溫育期長，能有效地消除干擾反應(yīng)，測定準(zhǔn)確性高，是ALT測定的首選方法；③血清不宜反復(fù)冰凍保存，以免影響酶活性；避免使用溶血標(biāo)本。

（２）方法評價：3.賴氏法測定AST

（１）原理與方法評價（類似ALT測定）

【參考范圍】

8～28卡門氏單位

【臨床意義】增高見于：心肌梗死、肌炎、胸膜炎、腎炎及肺炎和各種肝病病人3.賴氏法測定AST【臨床意義】增高見于：4．連續(xù)監(jiān)測法測定AST

（１）原理：

L-門冬氨酸+α-酮戊二酸草酰乙酸+L-谷氨酸

草酰乙酸+NADH

L-蘋果酸+NAD+

雙試劑法:同ALT測定MDHAST4．連續(xù)監(jiān)測法測定AST（１）原理：雙試劑法:同（２）方法評價

誤差來源內(nèi)源性干擾:主要來自血清中高濃度丙酮酸和L-谷氨酸脫氫酶(GLDH)。外源性:干擾來自試劑中污染的GLDH和AST。

【參考范圍】

5～40IU/L(連續(xù)監(jiān)測法測定)

【臨床意義】

見賴氏法（２）方法評價誤差來源【參考范圍】5～40IU/L((二)ALP測定化學(xué)法連續(xù)監(jiān)測法：鮑氏法金氏法皮氏法(二)ALP測定化學(xué)法連續(xù)監(jiān)測法：鮑氏法金氏法皮氏法１、金氏法測定ALP（１）原理：

磷酸苯二鈉酚+磷酸酚+4－AA-P紅色醌

ALPOH-K3Fe(CN)6１、金氏法測定ALP（１）原理：ALPK3Fe(CN(2)方法評價：磷酸苯二鈉比色法與更早的β-甘油磷酸鈉法相比具有較大的優(yōu)點(diǎn)，如水解速度快，保溫時間較短、靈敏度較高、顯色穩(wěn)定、不需去蛋白、操作簡單、快速。但與磷酸對硝基酚連續(xù)監(jiān)測法相比，準(zhǔn)確度、精密度較低；操作比較繁瑣,，靈敏度低。(2)方法評價：【參考范圍成人：3～13單位,兒童：5～28單位

ALP金氏單位定義是100ml血清，37℃與底物保溫15分鐘，產(chǎn)生1mg酚為1個金氏單位。ALP主要用于診斷肝膽和骨骼疾病

【臨床意義】

【參考范圍成人：3～13單位,兒童：5～28單位AL2.連續(xù)監(jiān)測法測定ALP（１）原理：

4-NPP+AMP對硝基酚(黃色）

（１）方法評價：

線性范圍可達(dá)500U/L，批內(nèi)CV為2.06%～2.36%，批間CV為2.74%。ALPOH-2.連續(xù)監(jiān)測法測定ALP（１）原理：4-NPP+AMP【參考范圍】

男性：1～12歲<500U/L,女性：1～12歲<500U/L12～15歲<750U/L，>15歲40～150U/L，>25歲40～150U/L?！九R床意義】見金氏法【參考范圍】【臨床意義】見金氏法(三)GGT測定法化學(xué)法（重氮反應(yīng)比色法）和連續(xù)監(jiān)測法。

1.重氮反應(yīng)比色法測定GGT原理：

【參考范圍】男性3～17U/L；女性2～13U/L(2)方法評價：重氮比色法活性單位：100ml血清在37℃下反應(yīng)1hr,生成0.5μmol的α-苯胺為1個GGT活性單位。(三)GGT測定法1.重氮反應(yīng)比色法測定GGT原理：【(1)原理：(2)方法評價：【參考范圍】男性：11～50U/L；(以γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺為底物)女性：7～32U/L男性：≤40U/L；女性：≤30U/L(以γ-谷氨酰-4-硝基苯胺為底物)(1)原理：(2)方法評價：【參考范圍】男性：11～(四)MAO測定

原理MAO主要作用于CH2-NH2基團(tuán)，在氧參與下，氧化脫氨生成相應(yīng)的卞醛、氨及過氧化氫。以芐氨偶氮-β-萘酚為底物,在O2和H20參與下，MAO催化生成芐醛偶氮-β-萘酚、氨及過氧化氫，用環(huán)己烷抽提后進(jìn)行比色測定。(四)MAO測定原理MAO主要作用于CH2-NH2基(2)方法評價【單位定義】：

1ml血清與底物在37℃孵育60分鐘，催化單胺氧化產(chǎn)生1nmol芐醛偶氮-β-萘酚為1個MAO單位。【參考范圍】12～40U/ml【臨床意義】：肝硬化時，肝纖維化現(xiàn)象十分活躍，MAO活性明顯升高。

(2)方法評價【單位定義】：1ml血清與底物在3三、血清膽紅素測定重氮鹽法膽紅素氧化酶(bilirubinoxidase,BOD)法高效液相色譜法(highperformanceliquidchromatography,HPLC)、導(dǎo)數(shù)分光光度法直接分光光度計(jì)法測定方法三、血清膽紅素測定重氮鹽法膽紅素氧化酶(bilirubin1．重氮鹽改良J-G法(1)原理:

結(jié)合膽紅素+重氮鹽偶氮膽紅素

游離膽紅素+重氮鹽偶氮膽紅素偶氮膽紅素+堿性酒石酸鉀鈉藍(lán)色溶液，

加速劑1．重氮鹽改良J-G法(1)原理:結(jié)合膽紅素+重(2)方法評價1、推薦的常規(guī)方法2、線性范圍較寬3、較好的準(zhǔn)確性和精確性，高濃度時準(zhǔn)確性和精確性降低。因此，建議濃度過高時減少血樣用量測定。

(2)方法評價1、推薦的常規(guī)方法【臨床意義】

【參考范圍】

黃疸的鑒別診斷

總膽紅素:5.1～19.0μmol/L直接膽紅素:1.71～6.8μmol/L【臨床意義】【參考范圍】黃疸的鑒別診斷總膽紅膽紅素BOD測定法原理：

膽紅素膽綠素BODpH8.0測總膽紅素pH4.5直接膽紅素膽紅素BOD測定法BODpH8.0測總膽紅素【參考范圍】血清總膽紅素：10.26±4.10μmol/L血清結(jié)合膽紅素：2.57±2.56μmol/L【臨床意義】見重氮比色法【參考范圍】血清總膽紅素：10.26±4.10μmol四、血清膽汁酸測定高效液相色譜法放射免疫分析法酶免疫分析法比色分析測定法

測定方法四、血清膽汁酸測定高效液相色譜法放射免疫分析法酶免疫分析法比(1)酶比色法測定原理

3α-HSDNADH+NBT甲jie（藍(lán)色化合物)3-氧-5β類固醇+NAD+3-氧-5β類固醇+NADH黃遞酶△4-DH酶比色法膽汁酸+NAD+3-氧-5β類固醇+NADH

(1)酶比色法測定原理3α-HSDNADH酶循環(huán)法測定原理為：NAD+Thio-NADThio-NADH膽汁酸3-氧代膽汁酸NADH3α-HSD酶循環(huán)法測定原理為：NAD+Thio-NADThio-N(2)酶比色測定法評價：

優(yōu)點(diǎn):

快速、簡便、準(zhǔn)確、可靠和適用

缺點(diǎn):試劑價貴、不易保存。對酶量的要求嚴(yán)格，易產(chǎn)生誤差。此外，標(biāo)準(zhǔn)品的制備非常重要。常采用