食品微生物檢驗(yàn)：志賀氏菌、弧菌課件

志賀氏菌檢驗(yàn)志賀氏菌屬(Shigella)的細(xì)菌通稱(chēng)為痢疾桿菌，是細(xì)菌性痢疾的病原菌。臨床上能引起痢疾癥狀的病原微生物很多，如志賀氏菌屬、沙門(mén)氏菌屬、變形桿菌屬、艾希氏菌屬等，還有阿米巴原蟲(chóng)、鞭毛蟲(chóng)及病毒等均可引起人類(lèi)痢疾，其中以志賀氏菌引起的細(xì)菌性痢疾最為常見(jiàn)。志賀氏菌檢驗(yàn)志賀氏菌屬(Shigella)的細(xì)菌通稱(chēng)為痢人類(lèi)對(duì)志賀氏菌的易感性較高，所以在食物和飲用水的衛(wèi)生檢驗(yàn)時(shí)，常以是否含有志賀氏菌作為指標(biāo)。人類(lèi)對(duì)志賀氏菌的易感性較高，所以在食物和飲用水的衛(wèi)生檢驗(yàn)時(shí)志賀氏菌屬是由四個(gè)亞群組成，即A、B、C、D四個(gè)亞群。A群:痢疾志賀氏菌，有10個(gè)抗原組成各不相同的血清型，其中包括最知名的志賀氏桿菌(1型痢疾志賀氏菌)和舒密次桿菌(2型痢疾志賀氏菌)。志賀氏菌屬是由四個(gè)亞群組成，即A、B、C、D四個(gè)亞群。B群:福氏志賀氏菌，有6個(gè)血清型，其中的1～5又可分為兩個(gè)亞型，還有x、y兩個(gè)變種，這些型、亞型和變種之間通過(guò)大量的共同抗原聯(lián)系在一起。B群:福氏志賀氏菌，有6個(gè)血清型，其中的1～5又可分為兩個(gè)C群:鮑氏志賀氏菌，有15個(gè)血清型，其中有的血清型有甘露醇陰性的變種。D群:宋內(nèi)氏志賀氏菌，只有一個(gè)種(血清型)，它具有I相(光滑型)和Ⅱ相(粗糙型)的變異。C群:鮑氏志賀氏菌，有15個(gè)血清型，其中有的血清型有甘露醇(一)形態(tài)與染色志賀氏菌屬的形態(tài)，與腸桿菌科細(xì)菌的形態(tài)相似。為革蘭氏陰性短桿菌，兩側(cè)平行、末端鈍圓，長(zhǎng)約2μm～3μm，寬約0.5μm～0.7μm。無(wú)莢膜、無(wú)鞭毛、不形成芽胞，無(wú)動(dòng)力，是與沙門(mén)氏菌不同之處。福氏志賀氏菌的1a、2a、2b、3、4a、5、x、y血清型有I型菌毛，容易附著在腸粘膜上皮細(xì)胞上。(一)形態(tài)與染色本菌為兼性厭氧菌，但厭氧培養(yǎng)時(shí)，生長(zhǎng)較不旺盛。營(yíng)養(yǎng)要求不高，在普通培養(yǎng)基上易于生長(zhǎng)。最適溫度為37℃左右，但在10℃～40℃范圍內(nèi)亦可生長(zhǎng)，最適pH約為7.2。本菌為兼性厭氧菌，但厭氧培養(yǎng)時(shí)，生長(zhǎng)較不旺盛。在固體培養(yǎng)基上經(jīng)培養(yǎng)18h～24h后，菌落圓形、透明、隆起并微凸、直徑約2mm～3mm、表面光滑、濕潤(rùn)、邊緣整齊。在普通瓊脂培養(yǎng)基上無(wú)色。在固體培養(yǎng)基上經(jīng)培養(yǎng)18h～24h后，菌落圓形、透明、隆起志賀氏菌菌落形態(tài)志賀氏菌在SS和Mac上形成較小的，無(wú)色半透明不發(fā)酵乳糖的菌落在HE上形成不發(fā)酵乳糖的深綠色菌落HE上不發(fā)酵乳糖的腸道菌，可能就是志賀氏菌SS（Salmonella-ShigellaMediun）上無(wú)黑色中心很可能是志賀氏菌了Mac（麥康凱培養(yǎng)基）志賀氏菌菌落形態(tài)志賀氏菌在SS和Mac上形成較小的，無(wú)色半選擇性培養(yǎng)基上可呈現(xiàn)不同的顏色，例如，宋內(nèi)氏志賀氏菌在SS瓊脂平板上生長(zhǎng)出邊緣較整齊，因能遲緩發(fā)酵乳糖而呈玫瑰紅色的菌落，應(yīng)注意勿當(dāng)大腸桿菌處理。選擇性培養(yǎng)基上可呈現(xiàn)不同的顏色，例如，宋內(nèi)氏志賀氏菌在SS瓊(三)生化特性志賀氏菌屬的細(xì)菌發(fā)酵糖類(lèi)和醇類(lèi)的能力遠(yuǎn)比艾希氏菌屬弱，但都能發(fā)酵葡萄糖，對(duì)側(cè)金盞花醇、肌醇和水楊苷均不發(fā)酵，對(duì)其他糖類(lèi)多為少數(shù)發(fā)酵：如宋內(nèi)氏志賀氏菌對(duì)乳糖能遲緩發(fā)酵，鮑氏志賀氏菌9型的一些培養(yǎng)物能發(fā)酵，痢疾志賀氏菌I型少數(shù)培養(yǎng)物能遲緩發(fā)酵。(三)生化特性食品微生物檢驗(yàn)：志賀氏菌、弧菌課件

(四)抗原結(jié)構(gòu)志賀氏桿菌有O抗原和K抗原。(四)抗原結(jié)構(gòu)1、O抗原脂多糖，耐熱，穩(wěn)定。不同的志賀氏菌O抗原不同。每群志賀氏菌中不同的O抗原用羅馬數(shù)字表示Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ····同一群志賀氏菌中不同菌型所帶的O抗原也不同。1、O抗原2、K抗原K抗原包繞于某些新分離的痢疾桿菌表面，不耐熱，加熱100℃1h即被破壞。此抗原可以阻止菌體抗原與相應(yīng)免疫血清發(fā)生凝集。2、K抗原(五)抵抗力志賀氏菌屬的細(xì)菌與沙門(mén)氏菌屬及其他腸道桿菌相比，對(duì)理化因素抵抗力較低。

對(duì)酸較敏感，必須使用含有緩沖劑的培養(yǎng)基。(五)抵抗力在外界環(huán)境中的生存力，宋內(nèi)氏志賀氏菌最強(qiáng)、福氏志賀氏菌次之，而痢疾志賀氏菌最弱。一般潮濕的土壤中能生存34d，37℃的水中存活20d，而在冰塊中可存活3個(gè)月，糞便中的細(xì)菌在室溫情況下(20℃左右)可存活11d。含有高濃度膽汁的培養(yǎng)基能抑制某些志賀氏菌株的生長(zhǎng)。在外界環(huán)境中的生存力，宋內(nèi)氏志賀氏菌最強(qiáng)、福氏志賀氏菌次之日光直射30min可殺死，56℃～60℃只需19min可殺死，1％石炭酸中15min～30min可殺死。對(duì)磺胺、鏈霉素和氯霉素敏感但很容易產(chǎn)生耐藥性。日光直射30min可殺死，56℃～60℃只需19min可

(六)變異性

1．S—R型變異菌落由光滑型變?yōu)榇植谛蜁r(shí)，常伴有生化反應(yīng)，抗原結(jié)構(gòu)和致病性的變異。在機(jī)體內(nèi)，尤其是慢性患者和恢復(fù)期患者，痢疾志賀氏菌可發(fā)生變異而失去原來(lái)的生化和抗原特性，成為不典型菌株。其中部分不典型菌株，可通過(guò)10％膽汁肉湯等又轉(zhuǎn)變?yōu)榈湫途辍?六)變異性2、耐藥性變異自從廣泛使用抗菌素以來(lái)，志賀氏菌屬的耐藥菌株不斷增加，給防治工作帶來(lái)許多因難。國(guó)內(nèi)部分地區(qū)報(bào)告，志賀氏菌對(duì)四環(huán)素的耐藥率達(dá)74％、氯霉素73.6％～97％、鏈霉素84％～98％、金霉素75％～100％、磺胺類(lèi)97％～100％，可見(jiàn)對(duì)國(guó)內(nèi)常用幾種抗菌素的耐藥率相當(dāng)高。2、耐藥性變異(七)致病性志賀氏菌的致病作用，主要是侵襲力和菌體內(nèi)毒素，個(gè)別菌株能產(chǎn)生外毒素，常使人得痢疾及食物中毒。(七)致病性

1、侵襲力志賀氏菌進(jìn)入大腸后，由于菌毛的作用，粘附在大腸和回腸末端腸粘膜的上皮細(xì)胞上，繼而在上皮層繁殖，擴(kuò)散至鄰近細(xì)胞及上皮下層。由于毒素的作用，上皮細(xì)胞死亡，粘膜下發(fā)炎，并有毛細(xì)血管血栓形成，以致壞死、脫落、形成潰瘍，志賀氏菌一般不侵犯其他組織，偶爾可引起敗血癥。1、侵襲力目前認(rèn)為不論是產(chǎn)生外毒素的還是只產(chǎn)生內(nèi)毒素的志賀氏菌，必須侵入腸壁才能致病，非侵襲性痢疾桿菌突變菌株不能引起疾病。因此，對(duì)粘膜組織的侵襲力是決定致病力的主要因素。目前認(rèn)為不論是產(chǎn)生外毒素的還是只產(chǎn)生內(nèi)毒素的志賀氏菌，必須2、內(nèi)毒素志賀氏菌屬中各菌株都有強(qiáng)烈的內(nèi)毒素。作用于腸壁，使通透性增高，從而促進(jìn)毒素的吸收，引起一系列毒血癥癥狀，如發(fā)熱、神志障礙、甚至中毒性休克。毒素破壞粘膜形成炎癥、潰瘍，呈現(xiàn)典型的痢疾膿血粘液便。毒素作用于腸壁植物神經(jīng)，使腸功能紊亂，腸蠕動(dòng)共濟(jì)失調(diào)和痙攣，尤其直腸括約肌最明顯，因而發(fā)生腹痛、里急、后重等癥狀。2、內(nèi)毒素3．腸毒素痢疾志賀氏菌I型和II型能產(chǎn)生腸毒素，腸毒素的活性主要在小腸發(fā)生，而菌痢的病變主要在大腸。痢疾志賀氏菌I型突變菌株不產(chǎn)腸毒素但仍有侵襲力。3．腸毒素(八)志賀氏菌的食物中毒1、流行病學(xué)志賀氏菌食物中毒常稱(chēng)作志賀氏菌痢疾，傳染是從人到人，無(wú)動(dòng)物宿主。傳染源是病人和帶菌者，主要通過(guò)消化道傳播。(八)志賀氏菌的食物中毒人類(lèi)對(duì)志賀氏菌的易感性極高，大約10個(gè)～200個(gè)細(xì)菌即可使10％～50％受攻擊的人致病。病后有一定的免疫力，但是免疫期短，也不穩(wěn)固?？赡芤蚣?xì)菌菌型多，各型細(xì)菌之間無(wú)交叉免疫性之故。人類(lèi)對(duì)志賀氏菌的易感性極高，大約10個(gè)～200個(gè)細(xì)菌即可使

2、臨床癥狀志賀氏菌食物中毒引起的細(xì)菌性痢疾可分為急性和慢性?xún)纱箢?lèi)、6個(gè)不同的型。2、臨床癥狀（1）急性細(xì)菌性痢疾急性細(xì)菌性痢疾又分為急性典型、急性非典型和急性中毒性菌痢三型。（1）急性細(xì)菌性痢疾急性典型痢疾癥狀典型，有腹痛、腹瀉、膿血粘液便、里急、后重、發(fā)熱等，經(jīng)治療預(yù)后良好。如治療不徹底可轉(zhuǎn)為慢性。急性非典型痢疾癥狀不典型，易診斷錯(cuò)誤，延誤治療，常導(dǎo)致帶菌或慢性。急性典型痢疾癥狀典型，有腹痛、腹瀉、膿血粘液便、里急、后重急性中毒性菌痢常見(jiàn)于小兒，各菌型都可發(fā)生，常常無(wú)明顯的消化道癥狀，而是以全身中毒性癥狀為主。中毒性菌痢一系列的病理生理變化，主要是內(nèi)毒素造成機(jī)體微循環(huán)障礙的結(jié)果，導(dǎo)致內(nèi)臟淤血、周?chē)h(huán)衰竭，主要功能器官灌注不足，引起心力衰竭、腹水腫、急性腎功能衰竭，嚴(yán)重微循環(huán)障礙，再加上內(nèi)毒素?fù)p傷血管內(nèi)上皮細(xì)胞、激活凝血因子等，而發(fā)生彌散性血管內(nèi)凝血。急性中毒性菌痢常見(jiàn)于小兒，各菌型都可發(fā)生，常常無(wú)明顯的消化（2）慢性細(xì)菌性痢疾慢性菌痢又分為遷延型、慢性隱伏型和急性發(fā)作型。常因急性期治療不徹底或人體防御機(jī)能低下、營(yíng)養(yǎng)不良或合并其他慢性病，例如低酸性或無(wú)酸性胃炎、膽囊炎、腸道寄生蟲(chóng)病等等，一般認(rèn)為福氏志賀氏菌感染的慢性者較多。（2）慢性細(xì)菌性痢疾細(xì)菌性痢疾的帶菌者有三種類(lèi)型，即恢復(fù)期帶菌者、慢性帶菌者和健康帶菌者。健康帶菌者是指臨床上無(wú)腸道癥狀而又能排出志賀氏菌者。這種帶菌者是主要的傳染源，特別是在飲食上，炊事員和保育員中的帶菌者危險(xiǎn)性更大。細(xì)菌性痢疾的帶菌者有三種類(lèi)型，即恢復(fù)期帶菌者、慢性帶菌者和(九)防治措施志賀氏菌隨糞便排出體外，通過(guò)食物、水和手經(jīng)口傳染給健康人。但只要我們切實(shí)地把好“病從口入”這一關(guān)，志賀氏菌痢是可以預(yù)防的。(九)防治措施1．加強(qiáng)飲水衛(wèi)生要保護(hù)水源，便桶不下河洗滌，新糞不下田，菌痢病人的衣褲、病兒的尿褲不下河洗滌。搞好飲水消毒，嚴(yán)格做到不喝生水。1．加強(qiáng)飲水衛(wèi)生

2．注意飲食衛(wèi)生嚴(yán)格執(zhí)行《食品衛(wèi)生法》的各項(xiàng)規(guī)定。飯萊現(xiàn)燒現(xiàn)吃，隔頓隔夜的菜肴要回鍋。集體食堂和飲食店還要做到飯萊燒熟燒透，生熟分開(kāi)，嚴(yán)格消毒食具。要自覺(jué)做到四不吃，即不吃生冷蔬菜、不吃不潔瓜果、不吃腐敗變質(zhì)食物、不吃未經(jīng)回鍋煮透的剩菜剩飯。2．注意飲食衛(wèi)生

3．自覺(jué)養(yǎng)成衛(wèi)生習(xí)慣工作后、學(xué)習(xí)后、外出回家后要洗手，特別是食前、便后要洗手，勤剪指甲。4．早期發(fā)現(xiàn)病人早期隔離治療如發(fā)現(xiàn)有大便性狀改變，次數(shù)頻多等情況應(yīng)及時(shí)就診。特別是托兒所、幼兒園要加強(qiáng)入托前的檢查，午間檢查和全日觀察，發(fā)現(xiàn)可疑病兒要立即送醫(yī)院診治，確診后嚴(yán)格隔離，還應(yīng)及時(shí)進(jìn)行消毒處理。急性病例應(yīng)一直到癥狀消失，大便培養(yǎng)二次陰性為止。3．自覺(jué)養(yǎng)成衛(wèi)生習(xí)慣（十）檢驗(yàn)原理：1、增菌志賀氏菌國(guó)標(biāo)用GN增菌液。目前志賀氏菌增菌液都不理想，關(guān)鍵是抑菌效果差，GN相對(duì)來(lái)說(shuō)是較好的，但也存在著同樣的問(wèn)題，因此用其增菌時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，一般為6～8h，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，其他雜菌就會(huì)大量繁殖。（十）檢驗(yàn)原理：2、選擇性鑒別培養(yǎng)基分離志賀氏菌志賀氏菌常用的選擇性瓊脂平板HE、SS、麥康凱（MC）、伊紅美藍(lán)，這些平板中都含有乳糖。由于志賀氏菌不發(fā)酵乳糖或遲緩發(fā)酵乳糖(24h內(nèi)不發(fā)酵乳糖，24h后才發(fā)酵乳糖)，硫化氫陰性，所以在這些平板上呈現(xiàn)出無(wú)色半透明不發(fā)酵乳糖的菌落。2、選擇性鑒別培養(yǎng)基分離志賀氏菌HE、SS相對(duì)于志賀氏菌來(lái)說(shuō)選擇性較強(qiáng)，麥康凱、伊紅美藍(lán)相對(duì)于志賀氏菌來(lái)說(shuō)選擇性較弱，同時(shí)用兩種平板分離志賀氏菌，可互補(bǔ)提高檢出率，防止漏檢。HE、SS相對(duì)于志賀氏菌來(lái)說(shuō)選擇性較強(qiáng)，麥康凱、伊紅美藍(lán)相

3、初步生化試驗(yàn)、血清學(xué)分型和進(jìn)一步生化試驗(yàn)首先用三糖鐵培養(yǎng)基（TSI）做初步生化試驗(yàn)，用半固體培養(yǎng)基做動(dòng)力試驗(yàn)。志賀氏菌在三糖鐵培養(yǎng)基上的反應(yīng)為：斜面產(chǎn)堿(紅色)，底層產(chǎn)酸(黃色)，不產(chǎn)氣(福氏志賀氏菌6型可微量產(chǎn)氣)，硫化氫試驗(yàn)為陰性，無(wú)動(dòng)力(不能運(yùn)動(dòng)）3、初步生化試驗(yàn)、血清學(xué)分型和進(jìn)一步生化試驗(yàn)福氏志賀氏菌各型和亞型的型抗原和群抗原

型和亞型型抗原群抗原1aⅠ1、2、4、5、9……1bⅠ1、2、4、5、6、9……2aⅡ1、3、4……2bⅡ1、7、8、9……3aⅢ1、6、7、8、9……3bⅢ1、4、6、（7、8、9）……3cⅢ1、6……4aⅣ1、（3）…4bⅣ1、6……5aⅤ1、4……5bⅤ1、5、7、9……6Ⅵ1、2、（4）……x-1、7、8、9……y-1、3、4……挑取三糖鐵瓊脂上的培養(yǎng)物，做玻片凝集試驗(yàn)。煮沸菌液可消除K抗原對(duì)O抗原凝集的阻礙。4種志賀氏菌多價(jià)血清A1、A2群多價(jià)血清B群血清D群血清群和型因子血清四種多價(jià)血清不凝集者用鮑氏（C群）多價(jià)1，2，3分別檢查，并用1~15各型因子檢查。若鮑氏多價(jià)不凝集則用痢疾志賀氏菌3-12型多價(jià)血清及各型因子血清檢查。福氏志賀氏菌各型和亞型的型抗原和群抗原型和亞型型抗原群抗原（十一）檢驗(yàn)程序GB4789.5-2012（十一）檢驗(yàn)程序志賀氏菌檢驗(yàn)流程志賀氏菌屬生化特性試驗(yàn)挑取平板上的可疑菌落，接種三糖鐵瓊脂和半固體瓊脂各一管。志賀氏菌在三糖鐵瓊脂內(nèi)的反應(yīng)結(jié)果為底層產(chǎn)酸而不產(chǎn)氣(福氏志賀氏菌6型可微產(chǎn)氣)，斜面產(chǎn)堿，不產(chǎn)生硫化氫，無(wú)動(dòng)力，在半固體管內(nèi)沿穿剌線生長(zhǎng)。然后再做V-P/苯丙氨酸脫氨酶、賴(lài)氨酸脫羧酶、西蒙氏檸檬酸鹽和葡萄糖銨試驗(yàn)，結(jié)果均應(yīng)陰性反應(yīng)。葡萄糖半固體（無(wú)動(dòng)力）志賀氏菌檢驗(yàn)流程志賀氏菌屬生化特性試驗(yàn)葡萄糖半固體血清學(xué)分型血清學(xué)分型食品微生物檢驗(yàn)：志賀氏菌、弧菌課件進(jìn)一步的生理生化鑒定進(jìn)一步的生理生化鑒定食品微生物檢驗(yàn)：志賀氏菌、弧菌課件（十二）檢驗(yàn)注意事項(xiàng)1、檢驗(yàn)報(bào)告凡是與志賀氏菌多價(jià)血清之一發(fā)生凝集反應(yīng)的革蘭氏陰性桿菌，生化反應(yīng)符合志賀氏菌特性，即報(bào)告“發(fā)現(xiàn)志賀氏菌”（十二）檢驗(yàn)注意事項(xiàng)不與任何一種志賀氏菌多價(jià)血清發(fā)生凝集反應(yīng)者，判定為非志賀氏菌，即報(bào)告“未發(fā)現(xiàn)志賀氏菌”。生化反應(yīng)判定為志賀氏菌，而血清學(xué)實(shí)驗(yàn)未能確定的，報(bào)告為“發(fā)現(xiàn)可疑志賀氏菌，待定”，并送有條件的實(shí)驗(yàn)室做進(jìn)一步鑒定。不與任何一種志賀氏菌多價(jià)血清發(fā)生凝集反應(yīng)者，判定為非志賀氏2、志賀氏菌在常溫下存活期較短，因此，采樣后應(yīng)盡快進(jìn)行檢驗(yàn)。如果在24小時(shí)內(nèi)檢驗(yàn)，樣品可保存在冰箱內(nèi)；如果要保存時(shí)間比較長(zhǎng)，必須放在低溫冰箱里。2、志賀氏菌在常溫下存活期較短，因此，采樣后應(yīng)盡快進(jìn)行檢驗(yàn)3、增加鑒別培養(yǎng)基的數(shù)目，可以增加志賀氏菌陽(yáng)性檢出率。用于分離的鑒別培養(yǎng)基一般不少于兩個(gè)。3、增加鑒別培養(yǎng)基的數(shù)目，可以增加志賀氏菌陽(yáng)性檢出率。用于分第五節(jié)其他致病菌的檢驗(yàn)一、副溶血性弧菌的檢驗(yàn)副溶血性弧菌系分布在海洋及鹽湖極為廣泛的一種致病性嗜鹽菌。引起人的食物中毒是近20年才被發(fā)現(xiàn)和重視的，尤其在夏秋季節(jié)的沿海地區(qū)，經(jīng)常由于食用含有大量副溶血性弧菌的海產(chǎn)品而引起爆發(fā)性食物中毒；在非沿海地區(qū)，食用被此菌污染的鹽漬食品亦常有中毒發(fā)生。一般冬季不易檢出此菌。第五節(jié)其他致病菌的檢驗(yàn)一、副溶血性弧菌的檢驗(yàn)食品微生物檢驗(yàn)：志賀氏菌、弧菌課件二、生物學(xué)特性（一）形態(tài)與染色革蘭氏陰性無(wú)芽胞多形態(tài)桿菌，單端鞭毛、兩端濃染。桿狀、棒狀、甚至球狀、絲狀等.二、生物學(xué)特性（一）形態(tài)與染色SS瓊脂上：菌體呈卵圓形，兩端濃染，中間淡或不著色，少數(shù)成桿狀。血瓊脂上：菌體多為卵圓形，少數(shù)為球桿狀，也有成絲狀。嗜鹽瓊脂上：主要為兩頭小、中間稍胖的球桿菌。羅氏雙糖培養(yǎng)基上：24h培養(yǎng)后菌體基本形似，48h后菌體形態(tài)變化很大，有球狀、絲狀、桿狀、弧狀、逗點(diǎn)狀等，其大小形態(tài)的差異也很大。副溶血弧菌的多形性與球狀體是它與氣單胞菌屬在形態(tài)學(xué)上的主要鑒別特征。SS瓊脂上：菌體呈卵圓形，兩端濃染，中間淡或不著色，少數(shù)成（二）培養(yǎng)特性：1、需氧或兼性厭氧：生長(zhǎng)最好2、在2-3%NaCL培養(yǎng)基中生長(zhǎng)最好，無(wú)鹽或食鹽>10%不能生長(zhǎng)。3、最適溫度36℃，PH7.5-7.8（7.7）4、在專(zhuān)用選擇性平板上，菌落呈圓形凸起，混濁不透明，表面光滑，較濕潤(rùn)，邊緣不整齊。5、血平板：可見(jiàn)溶血環(huán)。（二）培養(yǎng)特性：1、需氧或兼性厭氧：生長(zhǎng)最好副溶血性弧菌生長(zhǎng)特性在TCBS平板上分解蔗糖產(chǎn)酸的菌落為黃色。副溶血性弧菌等不分解蔗糖為藍(lán)綠色菌落。TSI-NaCl副溶血弧菌分解葡萄糖產(chǎn)酸，所以底部為黃色，不產(chǎn)硫化氫，而分解蛋白胨產(chǎn)生的堿使斜面變紅。副溶血性弧菌生長(zhǎng)特性在TCBS平板上分解蔗糖產(chǎn)酸的菌落為黃色食品微生物檢驗(yàn)：志賀氏菌、弧菌課件食品微生物檢驗(yàn)：志賀氏菌、弧菌課件（四）抗原結(jié)構(gòu)已明確本菌有三種抗原成分，即O抗原、K抗原及H抗原。本菌的O抗原有耐熱性，100℃2h仍保持抗原性；K抗原存在于菌體表面，不耐熱，能阻止菌體與O抗血清凝集；H抗原不耐熱，100℃30min即破壞，特異性低，無(wú)助于分類(lèi)，副溶血性弧菌所有的菌株具有共同的H抗原。目前，至少有13個(gè)O抗原，65個(gè)K抗原。根據(jù)O、K抗原可以進(jìn)行血清學(xué)分型。腸道致病性血清有O1:K38、O1:K56、O2:K1.....等。（四）抗原結(jié)構(gòu)已明確本菌有三種抗原成分，即O抗原、K抗原及H食品微生物檢驗(yàn)：志賀氏菌、弧菌課件（六）致病性此菌能引起人的急性胃腸炎，攝入致病菌達(dá)106個(gè)即可發(fā)病，潛伏期1h-26h不等，主要癥狀為腹痛、腹瀉、惡心、嘔吐、發(fā)熱等，糞便多呈水樣，常混有粘液或膿血，一般病程1d-7d。嘔吐、腹瀉嚴(yán)重，失水過(guò)多者可引起虛脫并伴有血壓下降。大部分病人發(fā)病后2-3天恢復(fù)正常，少數(shù)嚴(yán)重病人由于休克、昏迷而死亡。病后一周血清抗體效價(jià)可達(dá)1:80，二周后下降到1:10。（六）致病性此菌能引起人的急性胃腸炎，攝入致病菌達(dá)106個(gè)(七)檢驗(yàn)原理1、增菌根據(jù)副溶血性弧菌具有嗜鹽特性利用氯化鈉結(jié)晶紫增菌液（氯化鈉濃度為4%）進(jìn)行增菌。(七)檢驗(yàn)原理2、分離培養(yǎng)根據(jù)副溶血性弧菌嗜鹽的特點(diǎn)，利用氯化鈉瓊脂和嗜鹽菌選擇平板進(jìn)行選擇培養(yǎng)。2、分離培養(yǎng)3、選擇性培養(yǎng)3.5%氯化鈉三糖鐵斜面37℃培養(yǎng)24小時(shí)?？梢删甑默F(xiàn)象是：三糖鐵培養(yǎng)基底層變黃，葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，斜面不變色，乳糖、蔗糖不分解，有動(dòng)力，不產(chǎn)生硫化氫。3、選擇性培養(yǎng)4、涂片鏡檢可疑菌株進(jìn)行涂片革蘭氏鏡檢形態(tài)。副溶血性弧菌為不產(chǎn)芽孢的革蘭氏陰性多形態(tài)桿菌。4、涂片鏡檢（八）檢驗(yàn)程序GB4789.7-2013（八）檢驗(yàn)程序食品微生物檢驗(yàn)：志賀氏菌、弧菌課件食品微生物檢驗(yàn)：志賀氏菌、弧菌課件3.培養(yǎng)基和試劑3.培養(yǎng)基和試劑食品微生物檢驗(yàn)：志賀氏菌、弧菌課件食品微生物檢驗(yàn)：志賀氏菌、弧菌課件食品微生物檢驗(yàn)：志賀氏菌、弧菌課件食品微生物檢驗(yàn)：志賀氏菌、弧菌課件食品微生物檢驗(yàn)：志賀氏菌、弧菌課件食品微生物檢驗(yàn)：志賀氏菌、弧菌課件食品微生物檢驗(yàn)：志賀氏菌、弧菌課件食品微生物檢驗(yàn)：志賀氏菌、弧菌課件食品微生物檢驗(yàn)：志賀氏菌、弧菌課件食品微生物檢驗(yàn)：志賀氏菌、弧菌課件食品微生物檢驗(yàn)：志賀氏菌、弧菌課件食品微生物檢驗(yàn)：志賀氏菌、弧菌課件食品微生物檢驗(yàn)：志賀氏菌、弧菌課件4.檢驗(yàn)程序4.檢驗(yàn)程序5.操作步驟5.操作步驟食品微生物檢驗(yàn)：志賀氏菌、弧菌課件食品微生物檢驗(yàn)：志賀氏菌、弧菌課件志賀氏菌檢驗(yàn)志賀氏菌屬(Shigella)的細(xì)菌通稱(chēng)為痢疾桿菌，是細(xì)菌性痢疾的病原菌。臨床上能引起痢疾癥狀的病原微生物很多，如志賀氏菌屬、沙門(mén)氏菌屬、變形桿菌屬、艾希氏菌屬等，還有阿米巴原蟲(chóng)、鞭毛蟲(chóng)及病毒等均可引起人類(lèi)痢疾，其中以志賀氏菌引起的細(xì)菌性痢疾最為常見(jiàn)。志賀氏菌檢驗(yàn)志賀氏菌屬(Shigella)的細(xì)菌通稱(chēng)為痢人類(lèi)對(duì)志賀氏菌的易感性較高，所以在食物和飲用水的衛(wèi)生檢驗(yàn)時(shí)，常以是否含有志賀氏菌作為指標(biāo)。人類(lèi)對(duì)志賀氏菌的易感性較高，所以在食物和飲用水的衛(wèi)生檢驗(yàn)時(shí)志賀氏菌屬是由四個(gè)亞群組成，即A、B、C、D四個(gè)亞群。A群:痢疾志賀氏菌，有10個(gè)抗原組成各不相同的血清型，其中包括最知名的志賀氏桿菌(1型痢疾志賀氏菌)和舒密次桿菌(2型痢疾志賀氏菌)。志賀氏菌屬是由四個(gè)亞群組成，即A、B、C、D四個(gè)亞群。B群:福氏志賀氏菌，有6個(gè)血清型，其中的1～5又可分為兩個(gè)亞型，還有x、y兩個(gè)變種，這些型、亞型和變種之間通過(guò)大量的共同抗原聯(lián)系在一起。B群:福氏志賀氏菌，有6個(gè)血清型，其中的1～5又可分為兩個(gè)C群:鮑氏志賀氏菌，有15個(gè)血清型，其中有的血清型有甘露醇陰性的變種。D群:宋內(nèi)氏志賀氏菌，只有一個(gè)種(血清型)，它具有I相(光滑型)和Ⅱ相(粗糙型)的變異。C群:鮑氏志賀氏菌，有15個(gè)血清型，其中有的血清型有甘露醇(一)形態(tài)與染色志賀氏菌屬的形態(tài)，與腸桿菌科細(xì)菌的形態(tài)相似。為革蘭氏陰性短桿菌，兩側(cè)平行、末端鈍圓，長(zhǎng)約2μm～3μm，寬約0.5μm～0.7μm。無(wú)莢膜、無(wú)鞭毛、不形成芽胞，無(wú)動(dòng)力，是與沙門(mén)氏菌不同之處。福氏志賀氏菌的1a、2a、2b、3、4a、5、x、y血清型有I型菌毛，容易附著在腸粘膜上皮細(xì)胞上。(一)形態(tài)與染色本菌為兼性厭氧菌，但厭氧培養(yǎng)時(shí)，生長(zhǎng)較不旺盛。營(yíng)養(yǎng)要求不高，在普通培養(yǎng)基上易于生長(zhǎng)。最適溫度為37℃左右，但在10℃～40℃范圍內(nèi)亦可生長(zhǎng)，最適pH約為7.2。本菌為兼性厭氧菌，但厭氧培養(yǎng)時(shí)，生長(zhǎng)較不旺盛。在固體培養(yǎng)基上經(jīng)培養(yǎng)18h～24h后，菌落圓形、透明、隆起并微凸、直徑約2mm～3mm、表面光滑、濕潤(rùn)、邊緣整齊。在普通瓊脂培養(yǎng)基上無(wú)色。在固體培養(yǎng)基上經(jīng)培養(yǎng)18h～24h后，菌落圓形、透明、隆起志賀氏菌菌落形態(tài)志賀氏菌在SS和Mac上形成較小的，無(wú)色半透明不發(fā)酵乳糖的菌落在HE上形成不發(fā)酵乳糖的深綠色菌落HE上不發(fā)酵乳糖的腸道菌，可能就是志賀氏菌SS（Salmonella-ShigellaMediun）上無(wú)黑色中心很可能是志賀氏菌了Mac（麥康凱培養(yǎng)基）志賀氏菌菌落形態(tài)志賀氏菌在SS和Mac上形成較小的，無(wú)色半選擇性培養(yǎng)基上可呈現(xiàn)不同的顏色，例如，宋內(nèi)氏志賀氏菌在SS瓊脂平板上生長(zhǎng)出邊緣較整齊，因能遲緩發(fā)酵乳糖而呈玫瑰紅色的菌落，應(yīng)注意勿當(dāng)大腸桿菌處理。選擇性培養(yǎng)基上可呈現(xiàn)不同的顏色，例如，宋內(nèi)氏志賀氏菌在SS瓊(三)生化特性志賀氏菌屬的細(xì)菌發(fā)酵糖類(lèi)和醇類(lèi)的能力遠(yuǎn)比艾希氏菌屬弱，但都能發(fā)酵葡萄糖，對(duì)側(cè)金盞花醇、肌醇和水楊苷均不發(fā)酵，對(duì)其他糖類(lèi)多為少數(shù)發(fā)酵：如宋內(nèi)氏志賀氏菌對(duì)乳糖能遲緩發(fā)酵，鮑氏志賀氏菌9型的一些培養(yǎng)物能發(fā)酵，痢疾志賀氏菌I型少數(shù)培養(yǎng)物能遲緩發(fā)酵。(三)生化特性食品微生物檢驗(yàn)：志賀氏菌、弧菌課件

(四)抗原結(jié)構(gòu)志賀氏桿菌有O抗原和K抗原。(四)抗原結(jié)構(gòu)1、O抗原脂多糖，耐熱，穩(wěn)定。不同的志賀氏菌O抗原不同。每群志賀氏菌中不同的O抗原用羅馬數(shù)字表示Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ····同一群志賀氏菌中不同菌型所帶的O抗原也不同。1、O抗原2、K抗原K抗原包繞于某些新分離的痢疾桿菌表面，不耐熱，加熱100℃1h即被破壞。此抗原可以阻止菌體抗原與相應(yīng)免疫血清發(fā)生凝集。2、K抗原(五)抵抗力志賀氏菌屬的細(xì)菌與沙門(mén)氏菌屬及其他腸道桿菌相比，對(duì)理化因素抵抗力較低。

對(duì)酸較敏感，必須使用含有緩沖劑的培養(yǎng)基。(五)抵抗力在外界環(huán)境中的生存力，宋內(nèi)氏志賀氏菌最強(qiáng)、福氏志賀氏菌次之，而痢疾志賀氏菌最弱。一般潮濕的土壤中能生存34d，37℃的水中存活20d，而在冰塊中可存活3個(gè)月，糞便中的細(xì)菌在室溫情況下(20℃左右)可存活11d。含有高濃度膽汁的培養(yǎng)基能抑制某些志賀氏菌株的生長(zhǎng)。在外界環(huán)境中的生存力，宋內(nèi)氏志賀氏菌最強(qiáng)、福氏志賀氏菌次之日光直射30min可殺死，56℃～60℃只需19min可殺死，1％石炭酸中15min～30min可殺死。對(duì)磺胺、鏈霉素和氯霉素敏感但很容易產(chǎn)生耐藥性。日光直射30min可殺死，56℃～60℃只需19min可

(六)變異性

1．S—R型變異菌落由光滑型變?yōu)榇植谛蜁r(shí)，常伴有生化反應(yīng)，抗原結(jié)構(gòu)和致病性的變異。在機(jī)體內(nèi)，尤其是慢性患者和恢復(fù)期患者，痢疾志賀氏菌可發(fā)生變異而失去原來(lái)的生化和抗原特性，成為不典型菌株。其中部分不典型菌株，可通過(guò)10％膽汁肉湯等又轉(zhuǎn)變?yōu)榈湫途辍?六)變異性2、耐藥性變異自從廣泛使用抗菌素以來(lái)，志賀氏菌屬的耐藥菌株不斷增加，給防治工作帶來(lái)許多因難。國(guó)內(nèi)部分地區(qū)報(bào)告，志賀氏菌對(duì)四環(huán)素的耐藥率達(dá)74％、氯霉素73.6％～97％、鏈霉素84％～98％、金霉素75％～100％、磺胺類(lèi)97％～100％，可見(jiàn)對(duì)國(guó)內(nèi)常用幾種抗菌素的耐藥率相當(dāng)高。2、耐藥性變異(七)致病性志賀氏菌的致病作用，主要是侵襲力和菌體內(nèi)毒素，個(gè)別菌株能產(chǎn)生外毒素，常使人得痢疾及食物中毒。(七)致病性

1、侵襲力志賀氏菌進(jìn)入大腸后，由于菌毛的作用，粘附在大腸和回腸末端腸粘膜的上皮細(xì)胞上，繼而在上皮層繁殖，擴(kuò)散至鄰近細(xì)胞及上皮下層。由于毒素的作用，上皮細(xì)胞死亡，粘膜下發(fā)炎，并有毛細(xì)血管血栓形成，以致壞死、脫落、形成潰瘍，志賀氏菌一般不侵犯其他組織，偶爾可引起敗血癥。1、侵襲力目前認(rèn)為不論是產(chǎn)生外毒素的還是只產(chǎn)生內(nèi)毒素的志賀氏菌，必須侵入腸壁才能致病，非侵襲性痢疾桿菌突變菌株不能引起疾病。因此，對(duì)粘膜組織的侵襲力是決定致病力的主要因素。目前認(rèn)為不論是產(chǎn)生外毒素的還是只產(chǎn)生內(nèi)毒素的志賀氏菌，必須2、內(nèi)毒素志賀氏菌屬中各菌株都有強(qiáng)烈的內(nèi)毒素。作用于腸壁，使通透性增高，從而促進(jìn)毒素的吸收，引起一系列毒血癥癥狀，如發(fā)熱、神志障礙、甚至中毒性休克。毒素破壞粘膜形成炎癥、潰瘍，呈現(xiàn)典型的痢疾膿血粘液便。毒素作用于腸壁植物神經(jīng)，使腸功能紊亂，腸蠕動(dòng)共濟(jì)失調(diào)和痙攣，尤其直腸括約肌最明顯，因而發(fā)生腹痛、里急、后重等癥狀。2、內(nèi)毒素3．腸毒素痢疾志賀氏菌I型和II型能產(chǎn)生腸毒素，腸毒素的活性主要在小腸發(fā)生，而菌痢的病變主要在大腸。痢疾志賀氏菌I型突變菌株不產(chǎn)腸毒素但仍有侵襲力。3．腸毒素(八)志賀氏菌的食物中毒1、流行病學(xué)志賀氏菌食物中毒常稱(chēng)作志賀氏菌痢疾，傳染是從人到人，無(wú)動(dòng)物宿主。傳染源是病人和帶菌者，主要通過(guò)消化道傳播。(八)志賀氏菌的食物中毒人類(lèi)對(duì)志賀氏菌的易感性極高，大約10個(gè)～200個(gè)細(xì)菌即可使10％～50％受攻擊的人致病。病后有一定的免疫力，但是免疫期短，也不穩(wěn)固?？赡芤蚣?xì)菌菌型多，各型細(xì)菌之間無(wú)交叉免疫性之故。人類(lèi)對(duì)志賀氏菌的易感性極高，大約10個(gè)～200個(gè)細(xì)菌即可使

2、臨床癥狀志賀氏菌食物中毒引起的細(xì)菌性痢疾可分為急性和慢性?xún)纱箢?lèi)、6個(gè)不同的型。2、臨床癥狀（1）急性細(xì)菌性痢疾急性細(xì)菌性痢疾又分為急性典型、急性非典型和急性中毒性菌痢三型。（1）急性細(xì)菌性痢疾急性典型痢疾癥狀典型，有腹痛、腹瀉、膿血粘液便、里急、后重、發(fā)熱等，經(jīng)治療預(yù)后良好。如治療不徹底可轉(zhuǎn)為慢性。急性非典型痢疾癥狀不典型，易診斷錯(cuò)誤，延誤治療，常導(dǎo)致帶菌或慢性。急性典型痢疾癥狀典型，有腹痛、腹瀉、膿血粘液便、里急、后重急性中毒性菌痢常見(jiàn)于小兒，各菌型都可發(fā)生，常常無(wú)明顯的消化道癥狀，而是以全身中毒性癥狀為主。中毒性菌痢一系列的病理生理變化，主要是內(nèi)毒素造成機(jī)體微循環(huán)障礙的結(jié)果，導(dǎo)致內(nèi)臟淤血、周?chē)h(huán)衰竭，主要功能器官灌注不足，引起心力衰竭、腹水腫、急性腎功能衰竭，嚴(yán)重微循環(huán)障礙，再加上內(nèi)毒素?fù)p傷血管內(nèi)上皮細(xì)胞、激活凝血因子等，而發(fā)生彌散性血管內(nèi)凝血。急性中毒性菌痢常見(jiàn)于小兒，各菌型都可發(fā)生，常常無(wú)明顯的消化（2）慢性細(xì)菌性痢疾慢性菌痢又分為遷延型、慢性隱伏型和急性發(fā)作型。常因急性期治療不徹底或人體防御機(jī)能低下、營(yíng)養(yǎng)不良或合并其他慢性病，例如低酸性或無(wú)酸性胃炎、膽囊炎、腸道寄生蟲(chóng)病等等，一般認(rèn)為福氏志賀氏菌感染的慢性者較多。（2）慢性細(xì)菌性痢疾細(xì)菌性痢疾的帶菌者有三種類(lèi)型，即恢復(fù)期帶菌者、慢性帶菌者和健康帶菌者。健康帶菌者是指臨床上無(wú)腸道癥狀而又能排出志賀氏菌者。這種帶菌者是主要的傳染源，特別是在飲食上，炊事員和保育員中的帶菌者危險(xiǎn)性更大。細(xì)菌性痢疾的帶菌者有三種類(lèi)型，即恢復(fù)期帶菌者、慢性帶菌者和(九)防治措施志賀氏菌隨糞便排出體外，通過(guò)食物、水和手經(jīng)口傳染給健康人。但只要我們切實(shí)地把好“病從口入”這一關(guān)，志賀氏菌痢是可以預(yù)防的。(九)防治措施1．加強(qiáng)飲水衛(wèi)生要保護(hù)水源，便桶不下河洗滌，新糞不下田，菌痢病人的衣褲、病兒的尿褲不下河洗滌。搞好飲水消毒，嚴(yán)格做到不喝生水。1．加強(qiáng)飲水衛(wèi)生

2．注意飲食衛(wèi)生嚴(yán)格執(zhí)行《食品衛(wèi)生法》的各項(xiàng)規(guī)定。飯萊現(xiàn)燒現(xiàn)吃，隔頓隔夜的菜肴要回鍋。集體食堂和飲食店還要做到飯萊燒熟燒透，生熟分開(kāi)，嚴(yán)格消毒食具。要自覺(jué)做到四不吃，即不吃生冷蔬菜、不吃不潔瓜果、不吃腐敗變質(zhì)食物、不吃未經(jīng)回鍋煮透的剩菜剩飯。2．注意飲食衛(wèi)生

3．自覺(jué)養(yǎng)成衛(wèi)生習(xí)慣工作后、學(xué)習(xí)后、外出回家后要洗手，特別是食前、便后要洗手，勤剪指甲。4．早期發(fā)現(xiàn)病人早期隔離治療如發(fā)現(xiàn)有大便性狀改變，次數(shù)頻多等情況應(yīng)及時(shí)就診。特別是托兒所、幼兒園要加強(qiáng)入托前的檢查，午間檢查和全日觀察，發(fā)現(xiàn)可疑病兒要立即送醫(yī)院診治，確診后嚴(yán)格隔離，還應(yīng)及時(shí)進(jìn)行消毒處理。急性病例應(yīng)一直到癥狀消失，大便培養(yǎng)二次陰性為止。3．自覺(jué)養(yǎng)成衛(wèi)生習(xí)慣（十）檢驗(yàn)原理：1、增菌志賀氏菌國(guó)標(biāo)用GN增菌液。目前志賀氏菌增菌液都不理想，關(guān)鍵是抑菌效果差，GN相對(duì)來(lái)說(shuō)是較好的，但也存在著同樣的問(wèn)題，因此用其增菌時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，一般為6～8h，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，其他雜菌就會(huì)大量繁殖。（十）檢驗(yàn)原理：2、選擇性鑒別培養(yǎng)基分離志賀氏菌志賀氏菌常用的選擇性瓊脂平板HE、SS、麥康凱（MC）、伊紅美藍(lán)，這些平板中都含有乳糖。由于志賀氏菌不發(fā)酵乳糖或遲緩發(fā)酵乳糖(24h內(nèi)不發(fā)酵乳糖，24h后才發(fā)酵乳糖)，硫化氫陰性，所以在這些平板上呈現(xiàn)出無(wú)色半透明不發(fā)酵乳糖的菌落。2、選擇性鑒別培養(yǎng)基分離志賀氏菌HE、SS相對(duì)于志賀氏菌來(lái)說(shuō)選擇性較強(qiáng)，麥康凱、伊紅美藍(lán)相對(duì)于志賀氏菌來(lái)說(shuō)選擇性較弱，同時(shí)用兩種平板分離志賀氏菌，可互補(bǔ)提高檢出率，防止漏檢。HE、SS相對(duì)于志賀氏菌來(lái)說(shuō)選擇性較強(qiáng)，麥康凱、伊紅美藍(lán)相

3、初步生化試驗(yàn)、血清學(xué)分型和進(jìn)一步生化試驗(yàn)首先用三糖鐵培養(yǎng)基（TSI）做初步生化試驗(yàn)，用半固體培養(yǎng)基做動(dòng)力試驗(yàn)。志賀氏菌在三糖鐵培養(yǎng)基上的反應(yīng)為：斜面產(chǎn)堿(紅色)，底層產(chǎn)酸(黃色)，不產(chǎn)氣(福氏志賀氏菌6型可微量產(chǎn)氣)，硫化氫試驗(yàn)為陰性，無(wú)動(dòng)力(不能運(yùn)動(dòng)）3、初步生化試驗(yàn)、血清學(xué)分型和進(jìn)一步生化試驗(yàn)福氏志賀氏菌各型和亞型的型抗原和群抗原

型和亞型型抗原群抗原1aⅠ1、2、4、5、9……1bⅠ1、2、4、5、6、9……2aⅡ1、3、4……2bⅡ1、7、8、9……3aⅢ1、6、7、8、9……3bⅢ1、4、6、（7、8、9）……3cⅢ1、6……4aⅣ1、（3）…4bⅣ1、6……5aⅤ1、4……5bⅤ1、5、7、9……6Ⅵ1、2、（4）……x-1、7、8、9……y-1、3、4……挑取三糖鐵瓊脂上的培養(yǎng)物，做玻片凝集試驗(yàn)。煮沸菌液可消除K抗原對(duì)O抗原凝集的阻礙。4種志賀氏菌多價(jià)血清A1、A2群多價(jià)血清B群血清D群血清群和型因子血清四種多價(jià)血清不凝集者用鮑氏（C群）多價(jià)1，2，3分別檢查，并用1~15各型因子檢查。若鮑氏多價(jià)不凝集則用痢疾志賀氏菌3-12型多價(jià)血清及各型因子血清檢查。福氏志賀氏菌各型和亞型的型抗原和群抗原型和亞型型抗原群抗原（十一）檢驗(yàn)程序GB4789.5-2012（十一）檢驗(yàn)程序志賀氏菌檢驗(yàn)流程志賀氏菌屬生化特性試驗(yàn)挑取平板上的可疑菌落，接種三糖鐵瓊脂和半固體瓊脂各一管。志賀氏菌在三糖鐵瓊脂內(nèi)的反應(yīng)結(jié)果為底層產(chǎn)酸而不產(chǎn)氣(福氏志賀氏菌6型可微產(chǎn)氣)，斜面產(chǎn)堿，不產(chǎn)生硫化氫，無(wú)動(dòng)力，在半固體管內(nèi)沿穿剌線生長(zhǎng)。然后再做V-P/苯丙氨酸脫氨酶、賴(lài)氨酸脫羧酶、西蒙氏檸檬酸鹽和葡萄糖銨試驗(yàn)，結(jié)果均應(yīng)陰性反應(yīng)。葡萄糖半固體（無(wú)動(dòng)力）志賀氏菌檢驗(yàn)流程志賀氏菌屬生化特性試驗(yàn)葡萄糖半固體血清學(xué)分型血清學(xué)分型食品微生物檢驗(yàn)：志賀氏菌、弧菌課件進(jìn)一步的生理生化鑒定進(jìn)一步的生理生化鑒定食品微生物檢驗(yàn)：志賀氏菌、弧菌課件（十二）檢驗(yàn)注意事項(xiàng)1、檢驗(yàn)報(bào)告凡是與志賀氏菌多價(jià)血清之一發(fā)生凝集反應(yīng)的革蘭氏陰性桿菌，生化反應(yīng)符合志賀氏菌特性，即報(bào)告“發(fā)現(xiàn)志賀氏菌”（十二）檢驗(yàn)注意事項(xiàng)不與任何一種志賀氏菌多價(jià)血清發(fā)生凝集反應(yīng)者，判定為非志賀氏菌，即報(bào)告“未發(fā)現(xiàn)志賀氏菌”。生化反應(yīng)判定為志賀氏菌，而血清學(xué)實(shí)驗(yàn)未能確定的，報(bào)告為“發(fā)現(xiàn)可疑志賀氏菌，待定”，并送有條件的實(shí)驗(yàn)室做進(jìn)一步鑒定。不與任何一種志賀氏菌多價(jià)血清發(fā)生凝集反應(yīng)者，判定為非志賀氏2、志賀氏菌在常溫下存活期較短，因此，采樣后應(yīng)盡快進(jìn)行檢驗(yàn)。如果在24小時(shí)內(nèi)檢驗(yàn)，樣品可保存在冰箱內(nèi)；如果要保存時(shí)間比較長(zhǎng)，必須放在低溫冰箱里。2、志賀氏菌在常溫下存活期較短，因此，采樣后應(yīng)盡快進(jìn)行檢驗(yàn)3、增加鑒別培養(yǎng)基的數(shù)目，可以增加志賀氏菌陽(yáng)性檢出率。用于分離的鑒別培養(yǎng)基一般不少于兩個(gè)。3、增加鑒別培養(yǎng)基的數(shù)目，可以增加志賀氏菌陽(yáng)性檢出率。用于分第五節(jié)其他致病菌的檢驗(yàn)一、副溶血性弧菌的檢驗(yàn)副溶血性弧菌系分布在海洋及鹽湖極為廣泛的一種致病性嗜鹽菌。引起人的食物中毒是近20年才被發(fā)現(xiàn)和重視的，尤其在夏秋季節(jié)的沿海地區(qū)，經(jīng)常由于食用含有大量副溶血性弧菌的海產(chǎn)品而引起爆發(fā)性食物中毒；在非沿海地區(qū)，食用被此菌污染的鹽漬食品亦常有中毒發(fā)生。一般冬季不易檢出此菌。第五節(jié)其他致病菌的檢驗(yàn)一、副溶血性弧菌的檢驗(yàn)食品微生物檢驗(yàn)：志賀氏菌、弧菌課件二、生物學(xué)特性（一）形態(tài)與染色革蘭氏陰性無(wú)芽胞多形態(tài)桿菌，單端鞭毛、兩端濃染。桿狀、棒狀、甚至球狀、絲狀等.二、生物學(xué)特性（一）形態(tài)與染色SS瓊脂上：菌體呈卵圓形，兩端濃染，中間淡或不著色，少數(shù)成桿狀。血瓊脂上：菌體多為卵圓形，少數(shù)為球桿狀，也有成絲狀。嗜鹽瓊脂上：主要為兩頭小、中間稍胖的球桿菌。羅氏雙