實(shí)驗(yàn)室環(huán)境與生殖風(fēng)險(xiǎn)課件

實(shí)驗(yàn)室環(huán)境與生殖風(fēng)險(xiǎn)

實(shí)驗(yàn)室環(huán)境與生殖風(fēng)險(xiǎn)EmmaLucas，ReproductiveBioMedicineOnline,(2013)LaboratoryEmmaLucas，ReproductiveBioMed體外培養(yǎng)技術(shù)已趨成熟，體外培養(yǎng)環(huán)境仍無(wú)法完全模擬輸卵管及子宮內(nèi)條件;體外培養(yǎng)技術(shù)已趨成熟，體外培養(yǎng)環(huán)境仍無(wú)法完全模擬輸卵管及子宮暴露于體外的配子/胚胎時(shí)刻受到實(shí)驗(yàn)室環(huán)境潛在的威脅。

Chemical/MetabolicToxins/PollutantsMechanicalTemperaturepHLightOsmolalityOxidants暴露于體外的配子/胚胎時(shí)刻受到實(shí)驗(yàn)室環(huán)境潛在的威脅。CheART風(fēng)險(xiǎn)ART風(fēng)險(xiǎn)2022/11/15盡管尚無(wú)充分的數(shù)據(jù)證明ART技術(shù)顯著增加生殖風(fēng)險(xiǎn)，但越來越多的文獻(xiàn)提示ART生殖風(fēng)險(xiǎn)是增加的。2022/11/10盡管尚無(wú)充分的數(shù)據(jù)證明ART技術(shù)顯著增加2022/11/15影響ART風(fēng)險(xiǎn)因素高劑量的外源性激素（AimeeSC,etal,FS,2005）實(shí)驗(yàn)室技術(shù)體外操作操作技術(shù)（JHYan,etal,FS.2011;MJDavies,etal.NEJM.2012）體外培養(yǎng)（JC.Dumoulin,etal.HR,2010）操作環(huán)境2022/11/10影響ART風(fēng)險(xiǎn)因素高劑量的外源性激素（A目前尚無(wú)充分?jǐn)?shù)據(jù)顯示實(shí)驗(yàn)室環(huán)境因素導(dǎo)致生殖風(fēng)險(xiǎn)等增加，但越來越多的研究顯示諸如溫度、空氣質(zhì)量等顯著影響胚胎的發(fā)育潛能。目前尚無(wú)充分?jǐn)?shù)據(jù)顯示實(shí)驗(yàn)室環(huán)境因素導(dǎo)致生殖風(fēng)險(xiǎn)等增加，但越來

實(shí)驗(yàn)室環(huán)境空氣質(zhì)量溫度濕度光照強(qiáng)度實(shí)驗(yàn)室環(huán)境空氣質(zhì)量2022/11/15霧霾2022/11/10霧霾一、空氣質(zhì)量塵埃粒子空氣中有害氣體成分一、空氣質(zhì)量影響因素：

室外大環(huán)境的空氣質(zhì)量

實(shí)驗(yàn)室內(nèi):

選址、裝修使用的耗材、儀器、電腦…

清潔、洗滌劑工作人員

……影響因素：城市氣候及環(huán)境污染不同地區(qū)氣候及環(huán)境影響IVF實(shí)驗(yàn)室成功率大氣候?qū)VF結(jié)局是有很大影響室外大氣污染懸浮顆粒物（…PM10，PM2.5）CO、SO2、NO2

、NO….臭氧、揮發(fā)性有機(jī)化合物(VOCs)……城市氣候及環(huán)境污染空氣中PM10濃度的增加，IVF早期流產(chǎn)增加——PerinP,etal.JAssistReprodGenet，2010空氣中PM10濃度的增加，IVF早期流產(chǎn)增加——PerinNO2濃度↑出生率↓微細(xì)顆粒（PM2.5）濃度↑妊娠率↓NO2濃度↑出生率↓層流裝置可以降低室內(nèi)空氣塵埃粒子的數(shù)量但層流不能去除VOCs層流裝置可以降低室內(nèi)空氣塵埃粒子的數(shù)量作者年份實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)對(duì)象結(jié)果LittleandMirkes1990基礎(chǔ)研究體外培養(yǎng)兔胚胎高水平丙烯醛與胚胎毒性相關(guān)Mayer,etal1999臨床前瞻性研究IVF治療不孕夫婦胚胎培養(yǎng)于有VOC濾膜CO2培養(yǎng)箱可獲得較高妊娠率Racowsky,etal1999臨床觀察研究IVF治療不孕夫婦胚胎培養(yǎng)于有活性炭濾膜CO2培養(yǎng)箱，可降低自發(fā)流產(chǎn)率Worrilw,etal2002臨床觀察研究IVF治療不孕夫婦季節(jié)性溫度濕度變化影響LabVOC濃度，最終影響胚胎種植率Esteves,etal2004臨床觀察研究IVF治療不孕夫婦安裝VOC濾膜可提高優(yōu)胚率、臨床妊娠率并降低自發(fā)流產(chǎn)率——FabiolaBentoetal,QualityManagementinARTClinics,2013

VOCs影響胚胎發(fā)育潛能的研究作者年份實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)對(duì)象結(jié)果LittleandMirkes1體外胚胎特點(diǎn)無(wú)自身免疫系統(tǒng)

無(wú)防御VOCs的入侵的生理屏障---HallJetal,1998空氣質(zhì)量↓胚胎的發(fā)育潛能↓胚胎形態(tài)可能無(wú)明顯異常

---CohenJetal,1997體外胚胎特點(diǎn)VOCs總量＜0.1/10億時(shí)，不影響臨床結(jié)局VOCs總量＞2/10億時(shí)，顯著影響臨床結(jié)局---AlexCvargheseetal,ApractialguidetosettingupanIVFlab,embryoculturesystemsandrunningtheunit.2013VOCs總量＜0.1/10億時(shí)，不影響臨床結(jié)局---Al改善IVF室內(nèi)的空氣質(zhì)量，可能改善IVF治療結(jié)局。改善IVF室內(nèi)的空氣質(zhì)量，可能改善IVF治療結(jié)局。2022/11/15VOCs對(duì)IVF的影響研究使用凈化器前后IVF妊娠結(jié)局的變化P1（Period1）：使用凈化器前（未測(cè)量VOCs)P2：使用凈化器后（VOCs在0~0.8ppm）P3：使用改進(jìn)的凈化器，VOCs維持0.0ppm——CottinV,etal,ESHRE，2011，P-1552022/11/10VOCs對(duì)IVF的影響研究使用凈化器前后結(jié)果：階段2(P2)空氣中測(cè)出含有二甲苯和丙苯成分；OPU周期：組間受精率無(wú)顯著性差異；P1與P2妊娠率無(wú)差異P3期間生化妊娠率顯著高于P1+P2（33.8%vs19.8%；p<0.05);P3臨床妊娠率顯著高于P1+P2（p<0.01)。FET周期三組間無(wú)差異。結(jié)論：VOCs（二甲苯、丙苯）影響新鮮周期的臨床妊娠率。——CottinV,etal,ESHRE，2011，P-155結(jié)果：結(jié)論：VOCs（二甲苯、丙苯）影響新鮮周期的臨床妊娠率不同空氣凈化裝置處理后IVF實(shí)驗(yàn)室空氣質(zhì)量Firstsampling:活性炭濾膜更換前Secondsampling:活性炭濾膜更換后Thirdsampling:活性炭濾膜+Landson?系統(tǒng)——RabeaYoucefKhoudjaetal.JAssistReprodGenet.2013不同空氣凈化裝置處理后IVF實(shí)驗(yàn)室空氣質(zhì)量FirstsamTT1:活性炭濾膜更換前；TT2活性炭濾膜更換后；TT3:活性炭濾膜+Landson?系統(tǒng)IVF實(shí)驗(yàn)室空氣改善可以提高胚胎質(zhì)量，妊娠及種植率?！猂abeaYoucefKhoudjaetal.JAssistReprodGenet.2013TT1:活性炭濾膜更換前；TT2活性炭濾膜更換后；TT3:千級(jí)配子/胚胎操作區(qū)的空氣質(zhì)量(1)千級(jí)配子/胚胎操作區(qū)的空氣質(zhì)量(1)千級(jí)配子/胚胎操作區(qū)的空氣質(zhì)量(2)千級(jí)配子/胚胎操作區(qū)的空氣質(zhì)量(2)凈化后空氣中VOCs含量二氧化氮氨臭氧甲醛苯甲苯二甲苯空氣凈化（-）0.0300.047<0.030.025<0.025<0.005<0.1空氣凈化（+）0.0170.029<0.030.017<0.025<0.005<0.1——重慶市婦幼保健院，2009單位：mg/m3凈化后空氣中VOCs含量二氧化氮氨臭氧甲醛苯甲苯二甲苯空氣凈二、溫度可能影響MII卵紡錘體可能影響胚胎相關(guān)基因的表達(dá)可能影響胚胎代謝胚胎發(fā)育潛能二、溫度可能影響MII卵紡錘體胚胎發(fā)育潛能IVF實(shí)驗(yàn)室一般情況下：每間隔3分鐘，工作3分鐘傳統(tǒng)的溫度濕度控制系統(tǒng)IVF實(shí)驗(yàn)室一般情況下：每間隔3分鐘，工作3分鐘傳統(tǒng)的溫度濕IVF實(shí)驗(yàn)室不同時(shí)間溫度及濕度濕度溫度——CQ-RGI2013平均溫度：24.3℃；平均濕度：59.2IVF實(shí)驗(yàn)室不同時(shí)間溫度及濕度濕度溫度——CQ-RGI實(shí)驗(yàn)室溫度設(shè)定24

℃時(shí)不同位置溫度和濕度進(jìn)風(fēng)口風(fēng)速和溫度距地面1m風(fēng)速和溫度回風(fēng)口風(fēng)速和溫度實(shí)驗(yàn)室溫度設(shè)定24℃時(shí)不同位置溫度和濕度進(jìn)風(fēng)口風(fēng)速和溫度

實(shí)驗(yàn)室溫度分別設(shè)置為20℃和26℃

使用實(shí)施溫度測(cè)定探針分別測(cè)定培養(yǎng)箱、顯微鏡熱臺(tái)表面以及載玻片加熱器等設(shè)備的溫度

5min/次，連續(xù)測(cè)量12h實(shí)驗(yàn)室溫度分別設(shè)置為20℃和26℃設(shè)備名稱20℃26℃PaireddifferencePvalue尼康倒置顯微鏡34.30±0.0236.16±0.071.86±0.07＜0.0001尼康熒光顯微鏡3,435.15±1.1336.90±0.212.05±0.17＜0.0001尼康體視顯微鏡2,533.08±0.7935.02±0.361.75±1.32＜0.0001尼康TE2000-S35.00±0.0737.05±0.161.94±0.46＜0.0001載玻片加熱器134.38±0.1636.38±0.083.39±0.20＜0.0001載玻片加熱器332.74±0.3635.89±0.473.14±0.55＜0.0001載玻片加熱器2,4,532.82±0.2935.76±0.392.94±0.48＜0.0001熱塊334.70±0.9335.19±0.900.49±1.21＜0.0001熱塊537.12±0.0837.67±0.050.55±0.09＜0.0001干燥培養(yǎng)箱236.79±0.1737.7±0.160.88±0.27＜0.0001培養(yǎng)箱137.0±0.0837.0±00.008±0.090.32培養(yǎng)箱1136.60±0.0237.0±0.0090.10±0.009＜0.0001培養(yǎng)箱1236.4±036.6±00.20±0.0＜0.0001室溫20℃和26℃時(shí)不同設(shè)備的溫度變化JuliaM,etal,Reproduction,JAssistReprodGenet,2013設(shè)備名稱20℃26℃PaireddifferencePv實(shí)驗(yàn)室溫度突然變化時(shí)顯微鏡熱臺(tái)溫度的恢復(fù)情況JuliaM,etal,Reproduction,JAssistReprodGenet,2013實(shí)驗(yàn)室溫度突然變化時(shí)顯微鏡熱臺(tái)溫度的恢復(fù)情況JuliaM,取卵時(shí)卵泡液溫度與囊胚形成、活產(chǎn)率密切相關(guān)＜36.4℃(組1)36.4-36.9℃(組2)＞36.9℃(組3)囊胚形成率1408/4165（33.8%）VS.組2：p＜0.00012331/5684（41.0%）139/457（30.4%）VS.組2：p＜0.0001種植率482/1406（34.3%）VS.組2：p=0.0006716/1898（40.1%）39/170（22.9%）VS.組2：p＜0.0001活產(chǎn)率293/665（44.1%）VS.組2：p=0.0006484/917（52.8%）29/77（37.7%）VS.組2：p=0.015理想的卵泡液溫度為36.4~36.9℃，過高過低都會(huì)影響著床率及活產(chǎn)率。Sherbahn.R.,etal,ARSM,2010取卵時(shí)卵泡液溫度與囊胚形成、活產(chǎn)率密切相關(guān)＜36.4℃36.

人的成熟卵在低溫下紡錘體的形態(tài)變化溫度冷卻前紡錘體冷卻后5min冷卻后10min加熱后10min加熱后20min37℃5/5*5/55/55/55/533℃5/55/50/55/55/528℃5/50/50/50/52/525℃5/50/50/50/50/5*同一卵子用紡錘體顯示儀進(jìn)行動(dòng)態(tài)觀察。

第一個(gè)數(shù)為有紡錘體的卵子數(shù)，第二個(gè)數(shù)字為檢查的總卵數(shù)。WangWH,etalHumReprod,2001,16:137433℃時(shí)10分鐘后紡錘體消失；28℃時(shí)5分鐘后紡錘體消失，且加熱后10分鐘紡錘體無(wú)恢復(fù)。人的成熟卵在低溫下紡錘體的形態(tài)變化溫度冷卻前紡錘體冷卻后537℃與室溫下分別收集小鼠合子其囊胚形成和囊胚細(xì)胞數(shù)不受影響（收集用時(shí)＜5分鐘）M.Lane,etal,Reproduction,FertilityandDevelopment,2008,20,23-3237℃與室溫下分別收集小鼠合子其囊胚形成和囊胚細(xì)胞數(shù)不受影響兩組間IGF2和IGF2R表達(dá)存在顯著差異M.Lane,etal，Reproduction,FertilityandDevelopment，2008，20,23-32兩組間IGF2和IGF2R表達(dá)存在顯著差異M.Lane,三、濕度滲透壓對(duì)配子/胚胎的影響：滲透壓的改變，擾亂配子/胚胎內(nèi)離子平衡影響配子/胚胎的結(jié)構(gòu)和功能濕度雖然不會(huì)直接影響胚胎，但在準(zhǔn)備培養(yǎng)皿時(shí)濕

度可能影響微滴的滲透壓三、濕度滲透壓對(duì)配子/胚胎的影響：濕度雖然不會(huì)直接影響胚胎，——DawsonKM,BaltzJM1997.BiologyofReproduction56,1550–1558.滲透壓的改變降低鼠胚胎4-cell以上胚胎以及囊胚發(fā)育率——DawsonKM,BaltzJM1997.A,B：正常紡錘體滲透壓改變會(huì)影響豬卵母細(xì)胞紡錘體形態(tài)——S.F.Mullen,etal.Cryobiology,200754,281-289.A,B：正常紡錘體滲透壓改變會(huì)影響豬卵母細(xì)胞紡錘體形態(tài)——

分別把GV和MII期牛卵母細(xì)胞放入75、150、600、1200、2400和4800mOsm/kgNaCl溶液內(nèi)10min,然后進(jìn)行體外成熟或者授精

比較卵母細(xì)胞成熟以及胚胎發(fā)育分別把GV和MII期牛卵母細(xì)胞放入75、150、600不同滲透壓處理對(duì)牛卵母細(xì)胞成熟及多精受精率的影響MII期處理GV期處理滲透壓改變顯著影響牛卵母細(xì)胞成熟率及多精受精率不同滲透壓處理對(duì)牛卵母細(xì)胞成熟及多精受精率的影響MII期處理不同滲透壓處理對(duì)牛卵母細(xì)胞受精率及卵裂率的影響MII期處理GV期處理

相對(duì)于MII期，GV期牛卵母細(xì)胞對(duì)滲透

壓改變更敏感不同滲透壓處理對(duì)牛卵母細(xì)胞受精率及卵裂率的影響MII期處理G制備微滴的環(huán)境因素影響培養(yǎng)基的滲透壓和鼠胚的發(fā)育

——JESwain.,etal,RBM-Onilne.2012

Std：標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)備方法：制作10(20or40)ul微滴后迅速覆蓋油Wash：標(biāo)準(zhǔn)方法完成準(zhǔn)備后，用吸管吸出培養(yǎng)基，從新注入新的培養(yǎng)基

制備微滴的環(huán)境因素影響培養(yǎng)基的滲透壓和鼠胚的發(fā)育Std：標(biāo)準(zhǔn)——JESwain.,etal,RBMOnilne.2012——JESwain.,etal,RBMOnilne.——JESwain,etal,RBMOnilne.2012——JESwain,etal,RBMOnilne.2——JESwain,etal,RBMOnilne.2012——JESwain,etal,RBMOnilne.2植入前胚胎體外暴露于400－700nm波長(zhǎng)的光就會(huì)受到非自然應(yīng)激的影響。有報(bào)道研究了IVF過程中光的組成和強(qiáng)度，并計(jì)算了到達(dá)胚胎的輻射計(jì)量。結(jié)果表明，如果不使用慮光器，常規(guī)IVF過程中可以導(dǎo)致一個(gè)應(yīng)激的計(jì)量。五、光照強(qiáng)度L.D.M.Ottosen,etal.JAssistReprodGenet,2007植入前胚胎體外暴露于400－700nm波長(zhǎng)的光就會(huì)受到非自然——L.D.M.Ottosen,etal.JAssistReprodGenet,2007光線對(duì)胚胎的影響可能因胚胎發(fā)育時(shí)期以及物種不同而存在差異——L.D.M.Ottosen,etal.JAL.D.M.Ottosen,etal.JAssistReprodGenet,2007L.D.M.Ottosen,etal.JAss——TakenakaM,etal,ProcNatlAcadSci2007——TakenakaM,etal,ProcNatl光線損傷胚胎的機(jī)理（氧毒性）氧離子→分子氧→O2ˉ（顯著降低O2）→→→→H2O2→→→→→過氧化物→Fe、Cu→OH0

（強(qiáng)氧化劑、強(qiáng)毒性）→細(xì)胞損傷CattandHenman,2000氧化物破壞→培養(yǎng)基中氧濃度增加過氧化物歧化酶過氧化物酶光線損傷胚胎的機(jī)理（氧毒性）過氧化物歧化酶過氧化物酶牛胚胎操作過程中，體視顯微鏡加綠色濾光片與不加濾光片雖然不影響胚胎的發(fā)育，但用無(wú)濾光片體視顯微鏡操作的胚胎可以檢測(cè)到誘導(dǎo)型應(yīng)激蛋白的表達(dá)牛胚胎操作過程中，體視顯微鏡加綠色濾光片與不加濾光片雖然不影比較光照對(duì)鼠胚的影響，A示受精卵暴露于白色熒光（1200lx）15分鐘后形成的囊胚，細(xì)胞碎片增多，凋亡小體增加（TUNELassay），B示沒有暴露于光照的囊胚——ManamiTakenaka,etal,2007比較光照對(duì)鼠胚的影響，A示受精卵暴露于白色熒光（1200l盡量縮短配子、胚胎暴露顯微鏡下觀察或操作時(shí)間但使實(shí)驗(yàn)室過暗是不安全的也是沒有必要的相對(duì)于胚胎而言，光線影響的閾值不明確使用紅色濾光片日光燈？白熾燈？實(shí)驗(yàn)室環(huán)境與生殖風(fēng)險(xiǎn)課件小結(jié)IVF實(shí)驗(yàn)室空氣質(zhì)量影響胚胎發(fā)育，降低其發(fā)育潛能，通過安裝空氣凈化系統(tǒng)，可以改善IVF實(shí)驗(yàn)室空氣質(zhì)量，提高胚胎質(zhì)量和妊娠結(jié)局。

IVF實(shí)驗(yàn)室溫度變化影響卵子紡錘體、胚胎細(xì)胞器以及相關(guān)基因

表達(dá)，而影響其發(fā)育潛能，增加生殖風(fēng)險(xiǎn).小結(jié)IVF實(shí)驗(yàn)室空氣質(zhì)量影響胚胎發(fā)育，降低其發(fā)育潛能，通過安IVF實(shí)驗(yàn)室濕度可能通過影響培養(yǎng)液滲透壓,影響胚胎發(fā)育潛能。

IVF實(shí)驗(yàn)室光照強(qiáng)度也會(huì)影響胚胎發(fā)育潛能，甚至改變其表觀遺傳學(xué)，增加胎兒的安全風(fēng)險(xiǎn)。實(shí)驗(yàn)室環(huán)境對(duì)生殖風(fēng)險(xiǎn)的影響需要進(jìn)一步的研究。IVF實(shí)驗(yàn)室濕度可能通過影響培養(yǎng)液滲透壓,影響胚胎發(fā)育潛能。實(shí)驗(yàn)室環(huán)境與生殖風(fēng)險(xiǎn)課件實(shí)驗(yàn)室環(huán)境與生殖風(fēng)險(xiǎn)

實(shí)驗(yàn)室環(huán)境與生殖風(fēng)險(xiǎn)EmmaLucas，ReproductiveBioMedicineOnline,(2013)LaboratoryEmmaLucas，ReproductiveBioMed體外培養(yǎng)技術(shù)已趨成熟，體外培養(yǎng)環(huán)境仍無(wú)法完全模擬輸卵管及子宮內(nèi)條件;體外培養(yǎng)技術(shù)已趨成熟，體外培養(yǎng)環(huán)境仍無(wú)法完全模擬輸卵管及子宮暴露于體外的配子/胚胎時(shí)刻受到實(shí)驗(yàn)室環(huán)境潛在的威脅。

Chemical/MetabolicToxins/PollutantsMechanicalTemperaturepHLightOsmolalityOxidants暴露于體外的配子/胚胎時(shí)刻受到實(shí)驗(yàn)室環(huán)境潛在的威脅。CheART風(fēng)險(xiǎn)ART風(fēng)險(xiǎn)2022/11/15盡管尚無(wú)充分的數(shù)據(jù)證明ART技術(shù)顯著增加生殖風(fēng)險(xiǎn)，但越來越多的文獻(xiàn)提示ART生殖風(fēng)險(xiǎn)是增加的。2022/11/10盡管尚無(wú)充分的數(shù)據(jù)證明ART技術(shù)顯著增加2022/11/15影響ART風(fēng)險(xiǎn)因素高劑量的外源性激素（AimeeSC,etal,FS,2005）實(shí)驗(yàn)室技術(shù)體外操作操作技術(shù)（JHYan,etal,FS.2011;MJDavies,etal.NEJM.2012）體外培養(yǎng)（JC.Dumoulin,etal.HR,2010）操作環(huán)境2022/11/10影響ART風(fēng)險(xiǎn)因素高劑量的外源性激素（A目前尚無(wú)充分?jǐn)?shù)據(jù)顯示實(shí)驗(yàn)室環(huán)境因素導(dǎo)致生殖風(fēng)險(xiǎn)等增加，但越來越多的研究顯示諸如溫度、空氣質(zhì)量等顯著影響胚胎的發(fā)育潛能。目前尚無(wú)充分?jǐn)?shù)據(jù)顯示實(shí)驗(yàn)室環(huán)境因素導(dǎo)致生殖風(fēng)險(xiǎn)等增加，但越來

實(shí)驗(yàn)室環(huán)境空氣質(zhì)量溫度濕度光照強(qiáng)度實(shí)驗(yàn)室環(huán)境空氣質(zhì)量2022/11/15霧霾2022/11/10霧霾一、空氣質(zhì)量塵埃粒子空氣中有害氣體成分一、空氣質(zhì)量影響因素：

室外大環(huán)境的空氣質(zhì)量

實(shí)驗(yàn)室內(nèi):

選址、裝修使用的耗材、儀器、電腦…

清潔、洗滌劑工作人員

……影響因素：城市氣候及環(huán)境污染不同地區(qū)氣候及環(huán)境影響IVF實(shí)驗(yàn)室成功率大氣候?qū)VF結(jié)局是有很大影響室外大氣污染懸浮顆粒物（…PM10，PM2.5）CO、SO2、NO2

、NO….臭氧、揮發(fā)性有機(jī)化合物(VOCs)……城市氣候及環(huán)境污染空氣中PM10濃度的增加，IVF早期流產(chǎn)增加——PerinP,etal.JAssistReprodGenet，2010空氣中PM10濃度的增加，IVF早期流產(chǎn)增加——PerinNO2濃度↑出生率↓微細(xì)顆粒（PM2.5）濃度↑妊娠率↓NO2濃度↑出生率↓層流裝置可以降低室內(nèi)空氣塵埃粒子的數(shù)量但層流不能去除VOCs層流裝置可以降低室內(nèi)空氣塵埃粒子的數(shù)量作者年份實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)對(duì)象結(jié)果LittleandMirkes1990基礎(chǔ)研究體外培養(yǎng)兔胚胎高水平丙烯醛與胚胎毒性相關(guān)Mayer,etal1999臨床前瞻性研究IVF治療不孕夫婦胚胎培養(yǎng)于有VOC濾膜CO2培養(yǎng)箱可獲得較高妊娠率Racowsky,etal1999臨床觀察研究IVF治療不孕夫婦胚胎培養(yǎng)于有活性炭濾膜CO2培養(yǎng)箱，可降低自發(fā)流產(chǎn)率Worrilw,etal2002臨床觀察研究IVF治療不孕夫婦季節(jié)性溫度濕度變化影響LabVOC濃度，最終影響胚胎種植率Esteves,etal2004臨床觀察研究IVF治療不孕夫婦安裝VOC濾膜可提高優(yōu)胚率、臨床妊娠率并降低自發(fā)流產(chǎn)率——FabiolaBentoetal,QualityManagementinARTClinics,2013

VOCs影響胚胎發(fā)育潛能的研究作者年份實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)對(duì)象結(jié)果LittleandMirkes1體外胚胎特點(diǎn)無(wú)自身免疫系統(tǒng)

無(wú)防御VOCs的入侵的生理屏障---HallJetal,1998空氣質(zhì)量↓胚胎的發(fā)育潛能↓胚胎形態(tài)可能無(wú)明顯異常

---CohenJetal,1997體外胚胎特點(diǎn)VOCs總量＜0.1/10億時(shí)，不影響臨床結(jié)局VOCs總量＞2/10億時(shí)，顯著影響臨床結(jié)局---AlexCvargheseetal,ApractialguidetosettingupanIVFlab,embryoculturesystemsandrunningtheunit.2013VOCs總量＜0.1/10億時(shí)，不影響臨床結(jié)局---Al改善IVF室內(nèi)的空氣質(zhì)量，可能改善IVF治療結(jié)局。改善IVF室內(nèi)的空氣質(zhì)量，可能改善IVF治療結(jié)局。2022/11/15VOCs對(duì)IVF的影響研究使用凈化器前后IVF妊娠結(jié)局的變化P1（Period1）：使用凈化器前（未測(cè)量VOCs)P2：使用凈化器后（VOCs在0~0.8ppm）P3：使用改進(jìn)的凈化器，VOCs維持0.0ppm——CottinV,etal,ESHRE，2011，P-1552022/11/10VOCs對(duì)IVF的影響研究使用凈化器前后結(jié)果：階段2(P2)空氣中測(cè)出含有二甲苯和丙苯成分；OPU周期：組間受精率無(wú)顯著性差異；P1與P2妊娠率無(wú)差異P3期間生化妊娠率顯著高于P1+P2（33.8%vs19.8%；p<0.05);P3臨床妊娠率顯著高于P1+P2（p<0.01)。FET周期三組間無(wú)差異。結(jié)論：VOCs（二甲苯、丙苯）影響新鮮周期的臨床妊娠率?！狢ottinV,etal,ESHRE，2011，P-155結(jié)果：結(jié)論：VOCs（二甲苯、丙苯）影響新鮮周期的臨床妊娠率不同空氣凈化裝置處理后IVF實(shí)驗(yàn)室空氣質(zhì)量Firstsampling:活性炭濾膜更換前Secondsampling:活性炭濾膜更換后Thirdsampling:活性炭濾膜+Landson?系統(tǒng)——RabeaYoucefKhoudjaetal.JAssistReprodGenet.2013不同空氣凈化裝置處理后IVF實(shí)驗(yàn)室空氣質(zhì)量FirstsamTT1:活性炭濾膜更換前；TT2活性炭濾膜更換后；TT3:活性炭濾膜+Landson?系統(tǒng)IVF實(shí)驗(yàn)室空氣改善可以提高胚胎質(zhì)量，妊娠及種植率?！猂abeaYoucefKhoudjaetal.JAssistReprodGenet.2013TT1:活性炭濾膜更換前；TT2活性炭濾膜更換后；TT3:千級(jí)配子/胚胎操作區(qū)的空氣質(zhì)量(1)千級(jí)配子/胚胎操作區(qū)的空氣質(zhì)量(1)千級(jí)配子/胚胎操作區(qū)的空氣質(zhì)量(2)千級(jí)配子/胚胎操作區(qū)的空氣質(zhì)量(2)凈化后空氣中VOCs含量二氧化氮氨臭氧甲醛苯甲苯二甲苯空氣凈化（-）0.0300.047<0.030.025<0.025<0.005<0.1空氣凈化（+）0.0170.029<0.030.017<0.025<0.005<0.1——重慶市婦幼保健院，2009單位：mg/m3凈化后空氣中VOCs含量二氧化氮氨臭氧甲醛苯甲苯二甲苯空氣凈二、溫度可能影響MII卵紡錘體可能影響胚胎相關(guān)基因的表達(dá)可能影響胚胎代謝胚胎發(fā)育潛能二、溫度可能影響MII卵紡錘體胚胎發(fā)育潛能IVF實(shí)驗(yàn)室一般情況下：每間隔3分鐘，工作3分鐘傳統(tǒng)的溫度濕度控制系統(tǒng)IVF實(shí)驗(yàn)室一般情況下：每間隔3分鐘，工作3分鐘傳統(tǒng)的溫度濕IVF實(shí)驗(yàn)室不同時(shí)間溫度及濕度濕度溫度——CQ-RGI2013平均溫度：24.3℃；平均濕度：59.2IVF實(shí)驗(yàn)室不同時(shí)間溫度及濕度濕度溫度——CQ-RGI實(shí)驗(yàn)室溫度設(shè)定24

℃時(shí)不同位置溫度和濕度進(jìn)風(fēng)口風(fēng)速和溫度距地面1m風(fēng)速和溫度回風(fēng)口風(fēng)速和溫度實(shí)驗(yàn)室溫度設(shè)定24℃時(shí)不同位置溫度和濕度進(jìn)風(fēng)口風(fēng)速和溫度

實(shí)驗(yàn)室溫度分別設(shè)置為20℃和26℃

使用實(shí)施溫度測(cè)定探針分別測(cè)定培養(yǎng)箱、顯微鏡熱臺(tái)表面以及載玻片加熱器等設(shè)備的溫度

5min/次，連續(xù)測(cè)量12h實(shí)驗(yàn)室溫度分別設(shè)置為20℃和26℃設(shè)備名稱20℃26℃PaireddifferencePvalue尼康倒置顯微鏡34.30±0.0236.16±0.071.86±0.07＜0.0001尼康熒光顯微鏡3,435.15±1.1336.90±0.212.05±0.17＜0.0001尼康體視顯微鏡2,533.08±0.7935.02±0.361.75±1.32＜0.0001尼康TE2000-S35.00±0.0737.05±0.161.94±0.46＜0.0001載玻片加熱器134.38±0.1636.38±0.083.39±0.20＜0.0001載玻片加熱器332.74±0.3635.89±0.473.14±0.55＜0.0001載玻片加熱器2,4,532.82±0.2935.76±0.392.94±0.48＜0.0001熱塊334.70±0.9335.19±0.900.49±1.21＜0.0001熱塊537.12±0.0837.67±0.050.55±0.09＜0.0001干燥培養(yǎng)箱236.79±0.1737.7±0.160.88±0.27＜0.0001培養(yǎng)箱137.0±0.0837.0±00.008±0.090.32培養(yǎng)箱1136.60±0.0237.0±0.0090.10±0.009＜0.0001培養(yǎng)箱1236.4±036.6±00.20±0.0＜0.0001室溫20℃和26℃時(shí)不同設(shè)備的溫度變化JuliaM,etal,Reproduction,JAssistReprodGenet,2013設(shè)備名稱20℃26℃PaireddifferencePv實(shí)驗(yàn)室溫度突然變化時(shí)顯微鏡熱臺(tái)溫度的恢復(fù)情況JuliaM,etal,Reproduction,JAssistReprodGenet,2013實(shí)驗(yàn)室溫度突然變化時(shí)顯微鏡熱臺(tái)溫度的恢復(fù)情況JuliaM,取卵時(shí)卵泡液溫度與囊胚形成、活產(chǎn)率密切相關(guān)＜36.4℃(組1)36.4-36.9℃(組2)＞36.9℃(組3)囊胚形成率1408/4165（33.8%）VS.組2：p＜0.00012331/5684（41.0%）139/457（30.4%）VS.組2：p＜0.0001種植率482/1406（34.3%）VS.組2：p=0.0006716/1898（40.1%）39/170（22.9%）VS.組2：p＜0.0001活產(chǎn)率293/665（44.1%）VS.組2：p=0.0006484/917（52.8%）29/77（37.7%）VS.組2：p=0.015理想的卵泡液溫度為36.4~36.9℃，過高過低都會(huì)影響著床率及活產(chǎn)率。Sherbahn.R.,etal,ARSM,2010取卵時(shí)卵泡液溫度與囊胚形成、活產(chǎn)率密切相關(guān)＜36.4℃36.

人的成熟卵在低溫下紡錘體的形態(tài)變化溫度冷卻前紡錘體冷卻后5min冷卻后10min加熱后10min加熱后20min37℃5/5*5/55/55/55/533℃5/55/50/55/55/528℃5/50/50/50/52/525℃5/50/50/50/50/5*同一卵子用紡錘體顯示儀進(jìn)行動(dòng)態(tài)觀察。

第一個(gè)數(shù)為有紡錘體的卵子數(shù)，第二個(gè)數(shù)字為檢查的總卵數(shù)。WangWH,etalHumReprod,2001,16:137433℃時(shí)10分鐘后紡錘體消失；28℃時(shí)5分鐘后紡錘體消失，且加熱后10分鐘紡錘體無(wú)恢復(fù)。人的成熟卵在低溫下紡錘體的形態(tài)變化溫度冷卻前紡錘體冷卻后537℃與室溫下分別收集小鼠合子其囊胚形成和囊胚細(xì)胞數(shù)不受影響（收集用時(shí)＜5分鐘）M.Lane,etal,Reproduction,FertilityandDevelopment,2008,20,23-3237℃與室溫下分別收集小鼠合子其囊胚形成和囊胚細(xì)胞數(shù)不受影響兩組間IGF2和IGF2R表達(dá)存在顯著差異M.Lane,etal，Reproduction,FertilityandDevelopment，2008，20,23-32兩組間IGF2和IGF2R表達(dá)存在顯著差異M.Lane,三、濕度滲透壓對(duì)配子/胚胎的影響：滲透壓的改變，擾亂配子/胚胎內(nèi)離子平衡影響配子/胚胎的結(jié)構(gòu)和功能濕度雖然不會(huì)直接影響胚胎，但在準(zhǔn)備培養(yǎng)皿時(shí)濕

度可能影響微滴的滲透壓三、濕度滲透壓對(duì)配子/胚胎的影響：濕度雖然不會(huì)直接影響胚胎，——DawsonKM,BaltzJM1997.BiologyofReproduction56,1550–1558.滲透壓的改變降低鼠胚胎4-cell以上胚胎以及囊胚發(fā)育率——DawsonKM,BaltzJM1997.A,B：正常紡錘體滲透壓改變會(huì)影響豬卵母細(xì)胞紡錘體形態(tài)——S.F.Mullen,etal.Cryobiology,200754,281-289.A,B：正常紡錘體滲透壓改變會(huì)影響豬卵母細(xì)胞紡錘體形態(tài)——

分別把GV和MII期牛卵母細(xì)胞放入75、150、600、1200、2400和4800mOsm/kgNaCl溶液內(nèi)10min,然后進(jìn)行體外成熟或者授精

比較卵母細(xì)胞成熟以及胚胎發(fā)育分別把GV和MII期牛卵母細(xì)胞放入75、150、600不同滲透壓處理對(duì)牛卵母細(xì)胞成熟及多精受精率的影響MII期處理GV期處理滲透壓改變顯著影響牛卵母細(xì)胞成熟率及多精受精率不同滲透壓處理對(duì)牛卵母細(xì)胞成熟及多精受精率的影響MII期處理不同滲透壓處理對(duì)牛卵母細(xì)胞受精率及卵裂率的影響MII期處理GV期處理

相對(duì)于MII期，GV期牛卵母細(xì)胞對(duì)滲透

壓改變更敏感不同滲透壓處理對(duì)牛卵母細(xì)胞受精率及卵裂率的影響MII期處理G制備微滴的環(huán)境因素影響培養(yǎng)基的滲透壓和鼠胚的發(fā)育

——JESwain.,etal,RBM-Onilne.2012