血糖的測定及激素對血糖濃度的影響

關于血糖的測定及激素對血糖濃度的影響第1頁，共13頁，2022年，5月20日，5點38分，星期六一實驗目的掌握GOD-POD法測定血糖的原理及方法。觀察胰島素，腎上腺素對血糖濃度的影響。了解動物實驗的基本知識和兔耳緣靜脈取血的方法。第2頁，共13頁，2022年，5月20日，5點38分，星期六二原理(2)激素對血糖濃度的影響

葡萄糖在葡萄糖氧化酶的催化下生成葡萄糖酸，并產生過氧化氫，過氧化氫被過氧化物酶（POD）催化釋放初生態(tài)氧，氧又對與色原性氧受體4－氨基安替比林偶聯(lián)的酚氧化，并與4－氨基安替比林結合生成紅色醌類化合物。第3頁，共13頁，2022年，5月20日，5點38分，星期六二原理(2)顯色原理

葡萄糖在葡萄糖氧化酶的催化下生成葡萄糖酸，并產生過氧化氫，過氧化氫被過氧化物酶（POD）催化釋放初生態(tài)氧，氧又對與色原性氧受體4－氨基安替比林偶聯(lián)的酚氧化，并與4－氨基安替比林結合生成紅色醌類化合物。第4頁，共13頁，2022年，5月20日，5點38分，星期六

葡萄糖＋O2+H2OGOD葡萄糖酸＋H2O24－氨基安替比林＋酚＋H2O2

POD

紅色醌類化合物+4H2O

葡萄糖越多，生成的醌類物質就越多，顏色就越深，通過所講過的比色法，求出它的葡萄糖含量，即血糖濃度。（標準管法）第5頁，共13頁，2022年，5月20日，5點38分，星期六三操作1．準備抗凝試管：首先放入試管一小勺抗凝劑（草酸鈉）。2．分組。稱重：Kg，共有四只兔子，兩只注射胰島素，兩只注射腎上腺素。兔子抓取方法：一手抓取頸部皮膚，另一只手托臀部，把它放在天平上稱重。第6頁，共13頁，2022年，5月20日，5點38分，星期六

操作3.注射前取血:一般多以心臟取血的方式進行。第7頁，共13頁，2022年，5月20日，5點38分，星期六

操作4．注射激素:抓住兔子，肚皮朝上，在腹部的皮下注射，注意要抓緊兔耳以免被咬住，方法是掂起皮膚，刺入皮下有落空感，然后緩慢注入激素。首先注射胰島素0.75mg/kg（注意記錄時間）然后注入腎上腺素0.5mg/kg，并記錄時間。5．制備無蛋白血慮液:這是注射前的血液，在胰島素等待一個小時，腎上腺素等待半個小時期間制備注射前無蛋白血慮液。方法：蛋白沉淀劑4ml＋全血0.2ml混勻，室溫放置7分鐘后，在漏斗上過濾，這時標記為注射前無蛋白血濾液。第8頁，共13頁，2022年，5月20日，5點38分，星期六

操作6．注射后再次取血7．再制備無蛋白血慮液:標記為注射后8．比色：最后我們用標準管法來測定血糖濃度，按表操作：第9頁，共13頁，2022年，5月20日，5點38分，星期六

混勻，置37℃水浴15分鐘調波長為505nm，以空白管調零，分別讀取A測A標,根據(jù)標準管法求測定管血糖濃度。

加入物（ml）測定管（注射前）測定管（注射后）標準管空白管去蛋白血濾液

0.50.5處理后的葡萄糖

0.5標準應用液

蛋白沉淀劑0.5酶酚混合試劑

3333第10頁，共13頁，2022年，5月20日，5點38分，星期六四結果與計算C測（mmol/l）=（A測/A標）×5mmol/L(5為葡萄糖標準應用液濃度值)通過計算比較一下家兔注射前后血糖濃度的變化情況。第11頁，共13頁，2022年，5月20日，5點38分，星期六五分析

(1)對家兔而言血糖正常值：2.8－5.2mmol/L，驗證是否在此范圍。

(2)