初始污染菌檢驗標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

初始污染菌檢驗標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程初始污染菌檢驗標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程初始污染菌檢驗標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程資料僅供參考文件編號：2022年4月初始污染菌檢驗標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程版本號：A修改號：1頁次：1.0審核：批準(zhǔn):發(fā)布日期：1目的：建立產(chǎn)品初始污染菌數(shù)檢驗及分析標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。

2責(zé)任：質(zhì)量檢驗人員負(fù)責(zé)執(zhí)行此規(guī)程。3范圍：適用于未滅菌產(chǎn)品初始污染菌數(shù)驗證試驗的檢測分析。

4內(nèi)容：初始污染菌檢測器材與試劑

器材

（1）生化培養(yǎng)箱、霉菌培養(yǎng)箱

（2）立式滅菌柜

（3）超凈工作臺

（4）無菌過濾裝置

（5）無菌鑷子、無菌剪子

（6）電子天平

（7）移液器

（8）接種環(huán)

稀釋液、沖洗液無菌氯化鈉蛋白胨緩沖液培養(yǎng)基

營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基：按說明書方法保存配制。

檢驗方法：平皿法供試液的制備供試品是紗布可用無菌手續(xù)稱取10g,放入無菌氯化鈉蛋白胨緩沖液中充分振蕩后取樣。作為1：10的供試液。供試液10倍遞減稀釋。供試品是液體取樣10ml加至無菌氯化鈉蛋白胨緩沖液中充分振蕩后取樣。作為1：10的供試液。供試液10倍遞減稀釋。

供試液操作方法每個稀釋級各吸取1ml至直徑90mm的無菌平皿中，注入15～20ml溫度不超過45℃的溶化的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，混勻，凝固，倒置培養(yǎng)。每個稀釋級注2個平皿。陰性對照取無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液1ml，置無菌平皿中，注入培養(yǎng)基，凝固，倒置培養(yǎng)。每種計數(shù)用的培養(yǎng)基各制備2個平板，均不得有菌生長。培養(yǎng)條件將已經(jīng)凝固的平板倒置于37℃培養(yǎng)箱中，一般培養(yǎng)48±2h。計數(shù).1菌落計數(shù)基本規(guī)則①選取平均菌落數(shù)在30～300之間的稀釋級作為報告菌落數(shù)測定范圍。如只有1個稀釋級平均菌落數(shù)在30～300之間，則將稀釋級的菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告。②如有兩個相鄰稀釋級的平均菌落數(shù)在30～300之間，則先計算兩稀釋級菌落數(shù)的比值。高稀釋級的平均平板菌落數(shù)×稀釋倍數(shù)比值=————————————————————低稀釋級的平均平板菌落數(shù)×稀釋倍數(shù)當(dāng)比值≤2時，則以2個稀釋級的平均菌落數(shù)均值報告。當(dāng)比值>2時，則以低稀釋級的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告。③如各稀釋級平均菌落數(shù)均在300以上，則按最高平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告；如各稀釋級平均菌落數(shù)均在30以下，則按最低平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告。④如各稀釋級平均菌落數(shù)均不在30～300之間，則以最接近30或300的稀釋級平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告。⑤如各稀釋級平均菌落數(shù)均無菌落生長或最低稀釋級平均菌落數(shù)小于1時，應(yīng)報告菌數(shù)為<10個/g或ml。⑥如有3個稀釋級平均菌落數(shù)均在30～300之間，則以后2級計算級間比值報告。⑦菌落計數(shù)的報告，菌落數(shù)在10以內(nèi)時，按實有數(shù)值報告。大于100時，采用二位有效數(shù)字，在兩位有效數(shù)值后面，應(yīng)以四舍五入法計算。在報告菌落數(shù)為“不可計”時，應(yīng)表明樣品的稀釋度。清場

檢驗完畢，將使用的試劑歸位，清理臺面，并將用過的工具進(jìn)行清洗。檢測人員應(yīng)及時填寫《初始污染菌數(shù)檢測記錄》，并對檢驗結(jié)果進(jìn)行判定。注意事項

產(chǎn)品取樣應(yīng)在完成整個灌裝或包裝過程以后，而又在滅菌前取樣；本操作應(yīng)在環(huán)境潔凈度10000級下的局部潔凈度100級的無菌操作臺內(nèi)進(jìn)行。操作過程應(yīng)盡量避免任何可能使結(jié)果發(fā)生偏差的污染。

無菌操作臺必需定期進(jìn)行潔凈度檢測，試驗前提前開紫外燈15min后方可進(jìn)行實驗操作。

過濾器、濾膜、鑷子以及無菌設(shè)備使用前應(yīng)進(jìn)行滅菌，使用時應(yīng)保證濾膜在過濾前后的完整性。5依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)及相關(guān)文件

2010版《中華人民共和國藥典（