厭氧菌蘇州臨檢中心蘇州臨檢蘇州臨床檢驗(yàn)中心蘇州臨課件

2010.5阮斐怡微生物檢驗(yàn)與臨床2010.5阮斐怡微生物檢驗(yàn)與臨床

微生物實(shí)驗(yàn)室設(shè)立目的

協(xié)助臨床醫(yī)生診斷及治療感染癥。檢驗(yàn)結(jié)果提供抗生素治療依據(jù)。提供流行病學(xué)數(shù)據(jù)供醫(yī)院感染管制措施參考。微生物實(shí)驗(yàn)室設(shè)立目的

微生物實(shí)驗(yàn)室功能

檢查及培養(yǎng)臨床標(biāo)本中的微生物。正確鑒定臨床上有意義的分離菌株。對(duì)有意義的分離菌株進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。提供快速正確的檢驗(yàn)報(bào)告。微生物實(shí)驗(yàn)室功能

成功分離病原菌

－標(biāo)本收集、運(yùn)送、保存－標(biāo)本處理方法－醫(yī)務(wù)人員專(zhuān)業(yè)知識(shí)

正確判讀微生物培養(yǎng)報(bào)告選擇適當(dāng)治療方法

成功治療感染癥因素成功分離病原菌成功治療感染癥因素分析前質(zhì)量控制臨床檢驗(yàn)科全面質(zhì)量管理系統(tǒng)用于臨床診斷與治療分析測(cè)定參與臨床診斷、查房等醫(yī)療活動(dòng)，幫助臨床醫(yī)生合理分析、正確使用檢驗(yàn)結(jié)果分析中分析后

通過(guò)實(shí)踐與文獻(xiàn)復(fù)習(xí)進(jìn)行方法學(xué)研究、臨床意義探討、經(jīng)濟(jì)學(xué)評(píng)估，不斷開(kāi)展循征醫(yī)學(xué)工作探討標(biāo)本采集各環(huán)節(jié)影響實(shí)驗(yàn)因素并制定相應(yīng)制度與措施檢驗(yàn)科與臨床密切的信息交流臨床醫(yī)生選擇最直接最有效的,最合理,最經(jīng)濟(jì)的項(xiàng)目用于患者,正確化驗(yàn)單的書(shū)寫(xiě)臨檢科對(duì)臨床醫(yī)生選擇項(xiàng)目時(shí),提出自己的建議對(duì)檢驗(yàn)科工作人員不斷進(jìn)行專(zhuān)業(yè)知識(shí)繼續(xù)教育,不斷提高整體素質(zhì)和學(xué)術(shù)水平

醫(yī)護(hù)人員能正確進(jìn)行標(biāo)本采集與運(yùn)送標(biāo)本采集檢查、監(jiān)督標(biāo)本是否符合要求標(biāo)本運(yùn)送病人準(zhǔn)備建立檢驗(yàn)報(bào)告解釋咨詢(xún)及建議的機(jī)構(gòu)臨床檢驗(yàn)科分析前質(zhì)量控制臨床檢驗(yàn)科全面質(zhì)量管理系統(tǒng)用于臨床診斷與治療分全部檢驗(yàn)流程中各分析階段實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)錯(cuò)誤理解檢驗(yàn)的需求性檢驗(yàn)申請(qǐng)的必要條件32-75%病人準(zhǔn)備分析前標(biāo)本采集標(biāo)本處理4-32%標(biāo)本分析分析中報(bào)告單的生成9-55%報(bào)告單修正分析后報(bào)告判讀

Clin.Lab.Med3:541-551,1983

ClinicalChenistry48:5,691-698,2002全部檢驗(yàn)流程中各分析階段實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)錯(cuò)誤提供最佳的微生物病原菌發(fā)現(xiàn)率，使污染率降至最低及培養(yǎng)結(jié)果容易判讀。提升實(shí)驗(yàn)室工作效率及病患照顧質(zhì)量。降低醫(yī)療成本。

良好的微生物送檢標(biāo)本提供最佳的微生物病原菌發(fā)現(xiàn)率，使污染良好的微生物送需要不需要檢驗(yàn)項(xiàng)目申請(qǐng)標(biāo)本采集指南特殊安全防護(hù)特殊安全防護(hù)處理病人識(shí)別、評(píng)估標(biāo)本采集標(biāo)本標(biāo)簽標(biāo)本轉(zhuǎn)運(yùn)標(biāo)本接收標(biāo)本拒收標(biāo)本儲(chǔ)存標(biāo)本唯一標(biāo)識(shí)微生物實(shí)驗(yàn)室分析前處理流程圖需要不需要檢驗(yàn)項(xiàng)目申請(qǐng)標(biāo)本采集指南特殊安全防護(hù)特殊安全防護(hù)處類(lèi)型檢測(cè)項(xiàng)目常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目普通培養(yǎng)+鑒定厭氧菌培養(yǎng)+鑒定普通培養(yǎng)+鑒定+菌落計(jì)數(shù)血培養(yǎng)+鑒定血培養(yǎng)（厭氧菌）+鑒定藥敏試驗(yàn)特殊檢測(cè)項(xiàng)目革蘭染色涂片抗酸染色涂片分枝桿菌培養(yǎng)沙門(mén)志賀菌培養(yǎng)霍亂弧菌培養(yǎng)嗜鹽菌培養(yǎng)大腸埃希菌O-157培養(yǎng)鑒定B群鏈球菌培養(yǎng)鑒定

檢測(cè)項(xiàng)目一覽表類(lèi)型檢測(cè)項(xiàng)目常普通培養(yǎng)+鑒定厭氧菌培養(yǎng)+鑒定普通培養(yǎng)+鑒定+標(biāo)本采集部位非無(wú)菌部位無(wú)菌部位眼血液耳骨髓呼吸道腦脊液腸胃道胸水泌尿道腹水皮膚關(guān)節(jié)液毛發(fā)標(biāo)本采集部位非無(wú)菌部位無(wú)菌部位眼血液耳骨髓呼吸道腦脊液腸分析前標(biāo)本采集標(biāo)本接收標(biāo)本拒收標(biāo)本儲(chǔ)存分析前標(biāo)本采集標(biāo)本收集與運(yùn)送原則收集急性期真正病灶處的標(biāo)本，不得受到鄰近區(qū)域微生物的污染采用無(wú)菌器材收集標(biāo)本，并裝于堅(jiān)固、密封的無(wú)菌器材中收集“足量”的標(biāo)本在病人使用抗生素或傷口局部治療前收集標(biāo)本標(biāo)本收集與運(yùn)送原則收集急性期真正病灶處的標(biāo)本，不得受到鄰近區(qū)注意生物安全采集：采取標(biāo)準(zhǔn)防護(hù)措施運(yùn)送：不可造成標(biāo)本外漏及容器破損并迅速送到實(shí)驗(yàn)室儲(chǔ)存及操作：避免標(biāo)本中污染菌生長(zhǎng)并保持病原菌活性注意生物安全采集：采取標(biāo)準(zhǔn)防護(hù)措施標(biāo)本采集痰標(biāo)本尿液標(biāo)本血液標(biāo)本尿道、會(huì)陰部穿刺部位皮下感染淺表傷口口腔、呼吸道皮膚、黏膜污染！標(biāo)本采集痰標(biāo)本尿液標(biāo)本血液標(biāo)本尿道、會(huì)陰部穿刺部位皮下感

標(biāo)本采集1.選擇正確的解剖部位。下表列出了一些幾乎為臨床提供不了什么有用信息的標(biāo)本。標(biāo)本類(lèi)型替代方法或建議結(jié)腸造口術(shù)排出物嘔吐物壞疽損傷（拭子）褥瘡（拭子）牙周損傷（拭子）直腸周?chē)撃[（拭子）靜脈曲張性潰瘍（拭子）燒傷，傷口（拭子）不適合做細(xì)菌培養(yǎng)不適合做細(xì)菌培養(yǎng)送交深部組織或抽吸物送交深部組織或抽吸物送交深部組織或抽吸物送交深部組織或抽吸物送交深部組織或抽吸物送交深部組織或抽吸物標(biāo)本采集1.選擇正確的解剖部位。下表列出了一些幾乎為2.選擇合適的部位采集用于厭氧菌培養(yǎng)的標(biāo)本，見(jiàn)下表?；顧z或針頭抽吸物是最佳的選擇，一般不要用厭氧菌拭子標(biāo)本。決不要把厭氧菌培養(yǎng)的標(biāo)本冷藏，相反，要在室溫下保存。標(biāo)本采集可接受材料不可接受材料抽吸物（用注射器和針頭）血液，骨髓培養(yǎng)艱難梭菌的大便外科組織經(jīng)氣管抽吸物經(jīng)恥骨弓上抽吸的尿子宮內(nèi)膜抽吸物鼻咽拭子前列腺液或精液大便或直腸拭子惡露痰經(jīng)膀胱或?qū)Ч芘判沟哪蜃訉m頸拭子2.選擇合適的部位采集用于厭氧菌培養(yǎng)的標(biāo)本，見(jiàn)下表?；钗⑸飿?biāo)本接受或拒絕標(biāo)準(zhǔn)及處理方式項(xiàng)目拒絕標(biāo)準(zhǔn)處理方式標(biāo)本無(wú)標(biāo)簽，不處理對(duì)于非損傷方法獲得的標(biāo)本（尿、痰、咽標(biāo)本），要再送一個(gè)新的標(biāo)本。對(duì)于損傷程序獲得的標(biāo)本（針抽吸物、體液或組織），要和取樣醫(yī)生協(xié)商后，再處理標(biāo)本。在報(bào)告上注明問(wèn)題，并記錄所采取的措施。送檢延遲，不處理提示送檢者并要求再送一個(gè)標(biāo)本。在患者報(bào)告上注明“延遲后接收”。檢測(cè)信息有遺漏電話詢(xún)問(wèn)臨床并記錄，輸入數(shù)據(jù)庫(kù)檢測(cè)項(xiàng)目與申請(qǐng)單不一致（如血培養(yǎng)開(kāi)成一般普通培養(yǎng)）應(yīng)打電話與臨床聯(lián)系，說(shuō)明原因及改正方式，并將檢驗(yàn)單據(jù)號(hào)記錄，輸入數(shù)據(jù)庫(kù)。不合適的或泄漏的容器，不處理通知送檢者并要求再送一個(gè)標(biāo)本。在患者報(bào)告上注明問(wèn)題和所采取的措施。標(biāo)本類(lèi)型/量不合適與送檢者聯(lián)系，指出不符合之處。要求一個(gè)能滿(mǎn)足檢測(cè)條件的標(biāo)本。沒(méi)有提供標(biāo)本所適宜的條件（如厭氧送檢的卻用需氧送檢、拭子標(biāo)本沒(méi)有適當(dāng)?shù)姆栏纱胧?、需要轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基的卻沒(méi)有使用），不處理與送檢者聯(lián)系，闡明檢測(cè)要求，指出不符合之處。并要求一個(gè)能滿(mǎn)足檢測(cè)條件的標(biāo)本。同一天內(nèi)同一檢測(cè)條件的重復(fù)標(biāo)本（血除外），不處理將標(biāo)本置于適宜的保護(hù)劑和正確的保存溫度下。通知送檢者，指出重復(fù)的情況。在報(bào)告上注明問(wèn)題所在。微生物標(biāo)本接受或拒絕標(biāo)準(zhǔn)及處理方式拒絕標(biāo)準(zhǔn)處理方式標(biāo)血培養(yǎng)標(biāo)本1.血培養(yǎng)瓶適用的標(biāo)本血液、骨髓、腦脊液、胸腹水、關(guān)節(jié)液、腹透液等無(wú)菌體液。2.血培養(yǎng)次數(shù)對(duì)懷疑菌血癥的成人患者，上海市院感辦建議在不同部位采集2瓶需氧瓶或2套（1套為一瓶需氧和一瓶厭氧）血培養(yǎng)標(biāo)本。研究證明：血培養(yǎng)只做一套的陽(yáng)性檢出率為65%，做2套和3套檢出率分別為80%和90%。血培養(yǎng)標(biāo)本1.血培養(yǎng)瓶適用的標(biāo)本3.

采血量成人患者建議5-10ml/瓶。嬰幼兒患者建議每瓶不少于2ml。4.

采血時(shí)機(jī)抗菌藥物使用之前。寒戰(zhàn)出現(xiàn)時(shí)至發(fā)熱初期采集血培養(yǎng)最佳。5.血標(biāo)本在需氧和厭氧瓶中的分配推薦以一個(gè)需氧瓶和一個(gè)厭氧瓶作為常規(guī)血培養(yǎng)的組合。當(dāng)采血量不能滿(mǎn)足推薦采血量時(shí)，應(yīng)首先滿(mǎn)足需氧瓶的需要。

分析前～血培養(yǎng)標(biāo)本3.采血量分析前～血培養(yǎng)標(biāo)本血培養(yǎng)標(biāo)本6.影響血培養(yǎng)采樣因素采樣人員技術(shù)采集部位穿刺部位消毒工作采樣數(shù)量與時(shí)機(jī)選擇血培養(yǎng)標(biāo)本6.影響血培養(yǎng)采樣因素血培養(yǎng)標(biāo)本7.特殊的全身性和局部感染患者采血培養(yǎng)的建議急性高燒：10min內(nèi)，由不同部位抽取2套標(biāo)本。非急性高燒疾病：24h內(nèi)，由不同部位抽取2-3套標(biāo)本，每套間隔≥3h。急性心內(nèi)膜炎：在1～2h內(nèi)不同部位采集3套血標(biāo)本，如果24h后陰性，再采集3套以上的血標(biāo)本。亞急性心內(nèi)膜炎：24h內(nèi)從3個(gè)不同部位采3套，每套間隔≥15min，如24h內(nèi)為陰性，要再采2-3套。急性膿毒病：10min內(nèi)從不同的部位采2～3套?？梢杉毙栽l(fā)性菌血癥、腦膜炎、骨髓炎、關(guān)節(jié)炎或肺炎。應(yīng)在不同部位采集2～3套血標(biāo)本。不明原因發(fā)熱，如隱性膿腫、傷寒熱和波浪熱，從不同體位采集2～3套，間隔≥1h，如24h內(nèi)為陰性，需再采2-3套。血培養(yǎng)標(biāo)本7.特殊的全身性和局部感染患者采血培養(yǎng)的建議8.皮膚消毒血培養(yǎng)瓶口應(yīng)以75%酒精的消毒劑處理。徹底消毒皮膚，并用75%酒精由內(nèi)往外的方向涂抹去除碘酒液，以避免碘酒污染血培養(yǎng)液。血培養(yǎng)標(biāo)本8.皮膚消毒血培養(yǎng)標(biāo)本血培養(yǎng)容器需氧血培養(yǎng)瓶厭氧血培養(yǎng)瓶血培養(yǎng)瓶應(yīng)室溫放置，不要放入冰箱冷藏。血培養(yǎng)容器需氧血培養(yǎng)瓶厭氧血培養(yǎng)瓶血培養(yǎng)瓶應(yīng)室溫放置，不血培養(yǎng)容器中和抗生素血培養(yǎng)瓶真菌/分枝桿菌血培養(yǎng)瓶血培養(yǎng)瓶應(yīng)室溫放置，不要放入冰箱冷藏。血培養(yǎng)容器中和抗生素血培養(yǎng)瓶真菌/分枝桿菌血培養(yǎng)瓶血培養(yǎng)1.血管導(dǎo)管及腹膜透析導(dǎo)管培養(yǎng)是監(jiān)測(cè)血流感染源方法之一。2.標(biāo)準(zhǔn)方法：由導(dǎo)管抽取20ml血液，進(jìn)行血培養(yǎng)；導(dǎo)管周?chē)钠つw消毒，然后以無(wú)菌剪刀取下約5公分長(zhǎng)度導(dǎo)管尖，置于無(wú)菌容器中送檢；再由另一處?kù)o脈端抽血進(jìn)行血培養(yǎng)。3.實(shí)驗(yàn)室將導(dǎo)管尖于培養(yǎng)基上滾動(dòng)數(shù)次后進(jìn)行培養(yǎng)，如果菌落數(shù)＞15CFU/TiP以上，則認(rèn)為血流感染是可能與導(dǎo)管有關(guān)。血管導(dǎo)管培養(yǎng)1.血管導(dǎo)管及腹膜透析導(dǎo)管培養(yǎng)是監(jiān)測(cè)血流感染源方法之一。4.導(dǎo)管尖于培養(yǎng)基上滾動(dòng)數(shù)次后進(jìn)行培養(yǎng)，如果菌落數(shù)＜15CFU，可能有意義分離菌：

－白色念珠菌

－金黃色葡萄球菌

－A群鏈球菌－革蘭氏陰性桿菌5.導(dǎo)管血培養(yǎng)陽(yáng)性時(shí)間較靜脈血培養(yǎng)早二小時(shí)，可能為導(dǎo)管引起的血流感染。血管導(dǎo)管培養(yǎng)4.導(dǎo)管尖于培養(yǎng)基上滾動(dòng)數(shù)次后進(jìn)行培養(yǎng)，如果菌落數(shù)＜15C尿液標(biāo)本1.

收集方法中段尿無(wú)菌導(dǎo)尿管收集恥骨上方穿刺抽取2.標(biāo)本收集后若無(wú)法立即送檢應(yīng)置于冰箱（4-8℃）待送，4℃保存不可超過(guò)6小時(shí)。尿液標(biāo)本1.收集方法尿液標(biāo)本1.培養(yǎng)18-24h觀察平板上菌落情況，連續(xù)兩天無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)，報(bào)告“培養(yǎng)兩天無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)”。2.若培養(yǎng)出三種以上細(xì)菌，標(biāo)本可能污染，建議重新送檢。3.尿液中發(fā)現(xiàn)任何細(xì)菌，并不一定表示尿路感染。一般而言，菌落計(jì)數(shù)在105/ml以上代表真正感染；104～105/ml感染可能；>2種視為污染；若病人已服抗生素，104/ml也可能是感染。尿液標(biāo)本1.培養(yǎng)18-24h觀察平板上菌落情況，連續(xù)兩1.

收集標(biāo)本中粘液或血液的部分2.

使用轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基或無(wú)菌容器運(yùn)送

糞便標(biāo)本1.收集標(biāo)本中粘液或血液的部分糞便標(biāo)本糞便標(biāo)本容器標(biāo)本量大標(biāo)本量小糞便標(biāo)本容器標(biāo)本量大標(biāo)本量小傷口、組織、厭氧標(biāo)本1.

厭氧培養(yǎng)標(biāo)本，應(yīng)采集后15-30min內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露空氣中。厭氧菌標(biāo)本不可冷藏。2.

膿腫與癤最好以針筒直接由病灶處抽取。3.

清除傷口表面壞死組織，采集深層部位標(biāo)本。4.組織標(biāo)本應(yīng)放置于無(wú)菌容器中，在容器中放置少量生理鹽水防止標(biāo)本干枯。量少時(shí)傷口、膿液送檢方法傷口、組織、厭氧標(biāo)本1.厭氧培養(yǎng)標(biāo)本，應(yīng)采集后15-305.選擇合適部位采集用于厭氧菌培養(yǎng)的標(biāo)本見(jiàn)下表?？山邮懿牧喜豢山邮懿牧铣槲铮ㄓ米⑸淦骱歪橆^）血液，骨髓培養(yǎng)艱難梭菌的大便外科組織經(jīng)氣管抽吸物經(jīng)恥骨弓上抽吸的尿子宮內(nèi)膜抽吸物鼻咽拭子前列腺液或精液直腸拭子惡露痰經(jīng)膀胱或?qū)Ч芘判沟哪蜃訉m頸拭子傷口、組織、厭氧標(biāo)本5.選擇合適部位采集用于厭氧菌培養(yǎng)的標(biāo)本見(jiàn)下表?？山邮懿奶禈?biāo)本1.標(biāo)本收集前，須先用溫開(kāi)水漱口刷牙。2.收集清晨病人肺深部咳出痰液。3.置于無(wú)菌密閉容器中運(yùn)送，在2小時(shí)內(nèi)送達(dá)實(shí)驗(yàn)室。痰標(biāo)本1.標(biāo)本收集前，須先用溫開(kāi)水漱口刷牙。1.

痰革蘭染色涂片：決定標(biāo)本收集是否適當(dāng)。一般上皮細(xì)胞＞25個(gè)/LP（低倍鏡視野），認(rèn)為此標(biāo)本受口腔污染，培養(yǎng)結(jié)果僅供參考。

合格痰判斷標(biāo)準(zhǔn)上皮細(xì)胞白細(xì)胞1＞25＜102＞2510-253＞25＞25410-25＞255＜10＞25合格痰判斷標(biāo)準(zhǔn)上皮細(xì)胞白細(xì)胞1＞25＜102＞2510-1.腦脊液、胸腹水、關(guān)節(jié)腔液等無(wú)菌體液應(yīng)無(wú)菌收集。2.最好2ml以上。3.無(wú)菌體液應(yīng)做厭氧培養(yǎng)。4.腦脊液、生殖道、眼、耳標(biāo)本不要冷藏。5.迅速將標(biāo)本送至實(shí)驗(yàn)室。其它標(biāo)本1.腦脊液、胸腹水、關(guān)節(jié)腔液等無(wú)菌體液應(yīng)無(wú)菌收集。其它分枝桿菌培養(yǎng)抗酸涂片1.痰液（培養(yǎng)及抗酸涂片）

指導(dǎo)病人于清晨以溫開(kāi)水刷牙漱口。肺深部咳出痰液最佳，量多為宜。痰液分別收集3次標(biāo)本。（一天內(nèi)）2.尿液

分枝桿菌培養(yǎng)：留取清潔中段尿。抗酸涂片：留取24h尿或全夜尿，靜止2小時(shí)棄上清留取沉渣送檢。3.腦脊液（培養(yǎng)及抗酸涂片）需要2ml以上。分枝桿菌培養(yǎng)抗酸涂片1.痰液（培養(yǎng)及抗酸涂片）

診斷肺結(jié)核及分枝桿菌培養(yǎng)結(jié)果比較1234抗酸涂片64819198分枝培養(yǎng)709199100陽(yáng)性率比較建議：抗酸涂片及分枝桿菌培養(yǎng)應(yīng)同時(shí)送檢以提高陽(yáng)性率。診斷肺結(jié)核及分枝桿菌培養(yǎng)結(jié)果比較1234抗酸涂片6481標(biāo)本的轉(zhuǎn)運(yùn)和儲(chǔ)存所有標(biāo)本必須立即送交實(shí)驗(yàn)室，必須在2h內(nèi)。厭氧培養(yǎng)的臨床標(biāo)本，適宜的轉(zhuǎn)運(yùn)首先取決于所獲標(biāo)本的體積。標(biāo)本應(yīng)于采集后15-30min內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)，厭氧培養(yǎng)標(biāo)本應(yīng)避免過(guò)長(zhǎng)時(shí)間暴露于空氣中。對(duì)環(huán)境敏感的微生物包括志賀菌、淋球菌、腦膜炎雙球菌和流感嗜血桿菌（對(duì)低溫敏感）。所以對(duì)腦脊液、生殖道、眼或內(nèi)耳標(biāo)本不要冷凍。標(biāo)本的轉(zhuǎn)運(yùn)和儲(chǔ)存所有標(biāo)本必須立即送交實(shí)驗(yàn)室，必須在2h內(nèi)。標(biāo)本的轉(zhuǎn)運(yùn)和儲(chǔ)存血培養(yǎng)瓶不論是在接種標(biāo)本前或后都應(yīng)室溫放置，不要放入冰箱冷藏。將臨床標(biāo)本或感染性物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)到實(shí)驗(yàn)室，不管距離如何，轉(zhuǎn)運(yùn)的標(biāo)本必須正確地標(biāo)記、包裝，在轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程中應(yīng)以密閉運(yùn)輸箱運(yùn)送。

返回2標(biāo)本的轉(zhuǎn)運(yùn)和儲(chǔ)存血培養(yǎng)瓶不論是在接種標(biāo)本前或后都應(yīng)室溫放置，

細(xì)菌培養(yǎng)標(biāo)本接種須知

標(biāo)本種類(lèi)培養(yǎng)基革蘭涂片備注血平板巧克力中國(guó)藍(lán)XLDTCBS山梨醇麥康凱增菌下呼吸道標(biāo)本＋＋＋＋用無(wú)菌棉簽沾取痰標(biāo)本與平板上，再接種。尿液＋中段尿用1ul定量接種環(huán)，導(dǎo)尿、恥骨穿刺尿用10ul定量接種環(huán)接種。腦脊液＋＋巰基乙酸肉湯＋（離心）收到標(biāo)本立即接種。離心取沉淀接種，剩余沉淀接種增菌液中增菌。穿刺液＋＋腹透液用巰基乙酸肉湯增菌＋（離心）收到標(biāo)本立即接種。離心取沉淀接種。腹透液標(biāo)本將剩余沉淀接種巰基乙酸肉湯中增菌。留置針導(dǎo)管＋導(dǎo)管在血平板上滾動(dòng)接種。鼻咽拭子生殖道眼耳部＋＋糞便一般培養(yǎng)＋＋＋先接種血平板、中國(guó)藍(lán)、XLD平板，并用SBG增菌液35℃孵育6h后，轉(zhuǎn)種XLD平。沙門(mén)、志賀菌培養(yǎng)＋先接種XLD平板，并用SBG增菌液35℃孵育6h后，轉(zhuǎn)種XLD平板?；魜y弧菌副溶血弧菌培養(yǎng)＋先用堿性蛋白胨水增菌35℃孵育6h后，轉(zhuǎn)種TCBS平板。0157腸出血性大腸桿菌＋引流液＋膿、傷口＋＋組織＋巰基乙酸肉湯＋先用無(wú)菌器械盡量將組織搗碎，再接種培養(yǎng)基，將剩余物接種增菌液中。其他＋厭氧菌培養(yǎng)接種厭氧血平板、LBK、CNA做厭氧培養(yǎng)，另需接種做需氧培養(yǎng)。細(xì)菌培養(yǎng)標(biāo)本接種須知 培養(yǎng)基的質(zhì)控外觀檢查無(wú)菌試驗(yàn)生長(zhǎng)試驗(yàn)及生化試驗(yàn)培養(yǎng)基的質(zhì)控外觀檢查培養(yǎng)基質(zhì)控必須的基本條件要求實(shí)驗(yàn)室保存參考菌種；實(shí)驗(yàn)前和實(shí)驗(yàn)時(shí)檢驗(yàn)培養(yǎng)基質(zhì)量；清晰記錄質(zhì)控實(shí)驗(yàn)非常重要；必須有一份NCCLSM-22-A3（商品微生物培養(yǎng)基質(zhì)量保證指南）作為參考工具書(shū)。培養(yǎng)基質(zhì)控必須的基本條件要求實(shí)驗(yàn)室保存參考菌種；試劑質(zhì)控表1常用試驗(yàn)試劑質(zhì)量控制試劑陽(yáng)性對(duì)照陰性對(duì)照監(jiān)測(cè)頻率氧化酶銅綠假單胞菌大腸埃希菌每次新配制時(shí)及使用中每個(gè)工作日觸酶金黃色葡萄球菌A群鏈球菌每個(gè)工作日凝固酶金黃色葡萄球菌表皮葡萄球菌每個(gè)工作日靛基質(zhì)大腸埃希氏菌肺炎克雷伯1%蛋白胨水：每次新配制時(shí)及使用中。靛基質(zhì)試劑：每次新配制時(shí)及使用中。甲基紅大腸埃希氏菌肺炎克雷伯葡萄糖蛋白胨水：每次新配制時(shí)及使用中。甲基紅試驗(yàn)試劑：每次新配制時(shí)及使用中。VP肺炎克雷伯大腸埃希氏菌葡萄糖蛋白胨水：每次新配制時(shí)及使用中。VP試驗(yàn)試劑：每次新配制時(shí)及使用中硝酸鹽還原大腸埃希氏菌洛菲不動(dòng)桿菌（質(zhì)控菌株）每次新配制時(shí)及使用中三氯化鐵奇異變形桿菌大腸埃希氏菌每次新配制時(shí)及使用中Optochin肺炎鏈球菌化膿性鏈球菌每次做Optochin試驗(yàn)時(shí)做質(zhì)控桿菌肽化膿性鏈球菌肺炎鏈球菌每次做桿菌肽抑制試驗(yàn)時(shí)做質(zhì)控β-內(nèi)酰胺酶大腸埃希菌（ATCC35218）金黃色葡萄球菌（ATCC25923）每個(gè)新批號(hào)及每次使用時(shí)試劑質(zhì)控表1常用試驗(yàn)試劑質(zhì)量控制陽(yáng)性對(duì)照陰性對(duì)照監(jiān)測(cè)頻率氧化厭氧菌蘇州臨檢中心蘇州臨檢蘇州臨床檢驗(yàn)中心蘇州臨課件厭氧菌蘇州臨檢中心蘇州臨檢蘇州臨床檢驗(yàn)中心蘇州臨課件觸酶葡萄球菌屬微球菌屬鏈球菌屬腸球菌屬G+球菌革蘭涂片陽(yáng)性陰性七葉苷陽(yáng)性、6.5％Nacl陽(yáng)性腸球菌屬鏈球菌屬需氧革蘭陽(yáng)性球菌鑒定流程圖觸酶葡萄球菌屬微球菌屬鏈球菌屬腸球菌屬G+球菌革蘭涂片陽(yáng)性陰中等大小、黃或灰白、β溶血或不溶血的菌落小、黃色菌落報(bào)微球菌屬金黃色葡萄球菌呋喃唑酮葡萄糖發(fā)酵上機(jī)+試管血漿凝固酶葡萄球菌微球菌屬－24hβ溶血－－++G+球菌觸酶+葡萄球菌、微球菌鑒定流程圖中等大小、黃或灰白、β溶血或不溶血的菌落小、黃色菌落報(bào)微球菌G+球菌觸酶－A群鏈球菌桿菌肽CAMPBAP溶血γβα其他檢測(cè)疑問(wèn)Optochin試驗(yàn)肺炎鏈球菌G+矛頭狀雙球菌、臍窩狀菌落耐藥其他敏感膽汁溶菌+－敏感陽(yáng)性B群鏈球菌其他檢測(cè)七葉苷：－或＋6.5％Nacl：－鏈球菌鑒定流程圖G+球菌觸酶－A群鏈球菌桿菌肽CAMPBAP溶血γβα其他檢G+球菌觸酶七葉苷陽(yáng)性、6.5％Nacl陽(yáng)性腸球菌屬上機(jī)可能屎腸球菌可能糞腸球菌阿拉伯糖：-；山梨醇：+阿拉伯糖：+；山梨醇：-腸球菌鑒定流程圖G+球菌觸酶七葉苷陽(yáng)性、腸球菌屬上機(jī)可能屎腸球菌可能糞腸球菌G-桿菌氧化酶+－產(chǎn)綠色素，有生姜味，溶血雙糖-/-、42℃生長(zhǎng)+可能綠膿桿菌上機(jī)YesYesNoNo腸桿菌科++――IMVIC――++可能大腸埃希菌雙糖:A/AH2S:－動(dòng)力:+尿素:－上機(jī)YesNo結(jié)合菌落特征：中國(guó)藍(lán)上呈深藍(lán)色菌落Yes雙糖：A/A動(dòng)力：-

I：-―鳥(niǎo)氨酸：-賴(lài)氨酸：+結(jié)合菌落特征：大而厚實(shí)、光亮、凸起、灰白色粘液型菌落，可挑出粘液絲可能肺炎克雷伯菌No需氧革蘭陰性桿菌鑒定流程圖G-桿菌氧化酶+－產(chǎn)綠色素，有生姜味，溶血雙糖-/-、42℃嗜血桿菌痰標(biāo)本疑似菌其他標(biāo)本疑似菌上機(jī)上機(jī)菌落特征：BAP不生長(zhǎng)；巧克力培養(yǎng)基上呈小至中等、無(wú)色、半透明灰色菌落，粘性且有鼠臭味副流感嗜血桿菌流感嗜血桿菌X因子-V因子-XV因子+X因子-V因子+XV因子+NoYesYesNo嗜血桿菌鑒定流程圖嗜血桿菌痰標(biāo)本疑似菌其他標(biāo)本疑似菌上機(jī)上機(jī)菌落特征：BAP不在TCBS平板上見(jiàn)扁平、深綠色、粘有辛辣味的菌落氧化酶：+Yes0%Nacl：—；4%Nacl：+8%Nacl：+；10%Nacl：—付溶定位：紅色NoYesNo可能副溶血弧菌上機(jī)轉(zhuǎn)種血平板副溶血弧菌鑒定流程圖在TCBS平板上見(jiàn)扁平黃色菌落可能是霍亂，溶藻進(jìn)一步鑒定+血清凝集等在TCBS平板上見(jiàn)扁平、深綠色、粘有辛辣味的菌落氧化酶：+Y革蘭染色著色不均念珠菌定位平板綠色鏡下圓形、卵圓形折光性較強(qiáng)孢子白色念珠菌、都柏林念珠菌粉紅色可能克柔念珠菌可能熱帶念珠菌藍(lán)灰色紫色白色可能光滑念珠菌酵母菌屬上機(jī)無(wú)菌體液（血、csf、胸腹水等）念珠菌屬鑒定流程圖芽管實(shí)驗(yàn)+革蘭染色著色不均念珠菌定位平板綠色鏡下圓形、卵圓形折光性較強(qiáng)念珠菌定位平板應(yīng)用菌名定位顏色白色念珠菌綠色熱帶念珠菌藍(lán)灰克柔念珠菌粉紅色、表面毛燥光滑念珠菌紫色、光滑其它念珠菌白色等念珠菌定位平板應(yīng)用定位顏色白色念珠菌綠色熱帶念珠菌藍(lán)灰克柔念

常見(jiàn)革蘭氏陰性桿菌的生化反應(yīng)（氧化酶陰性）細(xì)菌血平板中國(guó)蘭定位雙糖IMVPCU動(dòng)力鳥(niǎo)賴(lài)H2S苯丙山梨醇大腸中灰扁中蘭扁紅色+/+++---ddd--肺克大中白凸白帶蘭藍(lán)色+/+--++d--+--鮑曼中白凸中粉無(wú)色+/----+------陰溝中灰扁中粉扁蘭色-/+-d++-++---+摩根中灰(溶血)灰粉扁無(wú)色-/+++--+++--+普變遷徙生長(zhǎng)無(wú)色-/++++++奇變遷徙生長(zhǎng)無(wú)色-/+-+++-++弗勞地小灰扁帶蘭d+/+-+-+-+--+-粘質(zhì)中灰粉色綠色-/+--++-+++--+

d:表示不定常見(jiàn)革蘭氏陰性桿菌的生化反應(yīng)（氧化酶陰性）細(xì)菌血平板中國(guó)厭氧標(biāo)本的接種厭氧標(biāo)本的接種：化膿性感染標(biāo)本或穿刺液等：將標(biāo)本涂布于厭氧血平板、LBK平板等培養(yǎng)基第一區(qū)，四區(qū)劃線接種后，立即置于含厭氧發(fā)生袋、厭氧指示劑的厭氧罐中35℃厭氧培養(yǎng)。此外，將標(biāo)本涂布玻片，待干燥后，進(jìn)行革蘭染色顯微鏡檢。

厭氧標(biāo)本的接種厭氧標(biāo)本的接種：厭氧菌鑒定孵育48-72小時(shí)后檢測(cè)所有培養(yǎng)平板。記錄生長(zhǎng)的每一種菌的形態(tài)，描述包括：大小、形狀、混濁、色素、凹陷、溶血情況。對(duì)每一種生長(zhǎng)的菌落進(jìn)行耐氧試驗(yàn)：挑取單個(gè)菌落，分別接種到巧克力平板、血瓊脂平板和厭氧血平板。巧克力平板和血瓊脂平板放置35℃5%CO2環(huán)境，厭氧血平板放置35℃厭氧環(huán)境下培養(yǎng)。若巧克力平板和血瓊脂平板48小時(shí)孵育后無(wú)生長(zhǎng)，厭氧血平板48小時(shí)孵育后生長(zhǎng)，為專(zhuān)性厭氧菌。將耐氧試驗(yàn)中挑出的厭氧菌進(jìn)行革蘭染色選擇相應(yīng)的鑒定系統(tǒng)進(jìn)行鑒定。厭氧菌鑒定腸桿菌科：當(dāng)試驗(yàn)糞便中分離的沙門(mén)菌和志賀菌株時(shí)，只有氨芐西林、喹諾酮和TMP/SMZ可用于常規(guī)試驗(yàn)報(bào)告。另外，對(duì)沙門(mén)菌屬的腸道外感染分離株，應(yīng)測(cè)試并報(bào)告氯霉素和一種三代頭孢菌素。對(duì)CSF分離株，頭孢噻肟和頭孢曲松將取代頭孢噻吩和頭孢唑啉的試驗(yàn)和報(bào)告。肺炎鏈球菌：對(duì)腦脊液的肺炎鏈球菌分離株，應(yīng)該用可靠的MIC法測(cè)試并常規(guī)報(bào)告青霉素和頭孢噻肟或頭孢曲松或美羅培南的敏感性。對(duì)這些分離株，也應(yīng)該用MIC法或紙片法測(cè)萬(wàn)古霉素的敏感性。對(duì)其他部位的分離株，可用苯唑西林紙片篩選試驗(yàn)。如抑菌環(huán)直徑≤19mm，就應(yīng)該測(cè)試青霉素和頭孢噻肟或頭孢曲松的MIC。鏈球菌屬：對(duì)分離自血液與正常無(wú)菌部位（如腦脊液、血液、骨髓）的草綠色鏈球菌，應(yīng)該用MIC法測(cè)試青霉素的敏感性。

青霉素、氨芐西林、左氧氟沙星、氧氟沙星的紙片法解釋標(biāo)準(zhǔn)僅用于β-溶血鏈球菌。

不同感染部位標(biāo)本抗生素選用原則不同感染部位標(biāo)本抗生素選用原則CLSI/NCCLS建議核實(shí)抗菌藥物敏感性試驗(yàn)結(jié)果和確證菌株鑒定

細(xì)菌或菌群Ⅰ類(lèi)a未曾報(bào)告過(guò)的不常見(jiàn)表型，和/或因技術(shù)錯(cuò)誤造成的結(jié)果Ⅱ類(lèi)b在已知的規(guī)則中可能不常見(jiàn)的表型，和/或因技術(shù)錯(cuò)誤造成的結(jié)果革蘭陰性菌腸桿菌科（任何種）亞胺培南-I或R阿米卡星-R氟喹諾酮類(lèi)-R氟勞地枸櫞酸桿菌腸桿菌屬粘質(zhì)沙雷菌屬氨芐西林、頭孢唑啉，或頭孢噻吩-S大腸埃希菌ESBL確認(rèn)陽(yáng)性克雷伯菌屬氨芐西林-SESBL確認(rèn)陽(yáng)性普通變形桿菌普羅威登斯菌屬氨芐西林-S沙門(mén)菌屬第3代頭孢菌素-I或Rd氟喹諾酮類(lèi)-I或R；或奈啶酸-Rd銅綠假單胞菌慶大霉素、妥布霉素和阿米卡星同時(shí)-R嗜麥芽窄食單胞菌碳青霉烯類(lèi)-S復(fù)方磺胺甲噁唑-R流感嗜血桿菌氨曲南-NS碳青霉烯類(lèi)-NS第3代頭孢菌素c-NS氟喹諾酮類(lèi)-NS氨芐西林-R及?-內(nèi)酰胺酶陰性阿莫西林/克拉維酸-R任何細(xì)菌對(duì)所有常規(guī)試驗(yàn)中的抗菌藥物菌耐藥CLSI/NCCLS建議核實(shí)抗菌藥物敏感性試驗(yàn)結(jié)果和確證菌株

分析后MRS(耐甲氧西林葡萄球菌)

主要細(xì)菌：金黃色葡萄球菌，凝固酶陰性葡萄球菌。

耐藥特點(diǎn)：MRS對(duì)頭孢類(lèi)和其他β內(nèi)酰胺酶類(lèi)如阿莫西林/克拉維酸，氨芐西林/舒巴坦，替卡西林/克拉維酸，派拉西林/三唑巴坦和亞胺培南在體外可顯示活性但臨床應(yīng)用無(wú)效。這是因?yàn)闆Q大多數(shù)文獻(xiàn)報(bào)告的MRS感染用β內(nèi)酰胺酶類(lèi)療效差，而且缺乏令人信服的臨床數(shù)據(jù)證實(shí)這些藥臨床有效。分析后MRS(耐甲氧西林葡萄球菌)1.5下列細(xì)菌的耐藥特點(diǎn)

ESBLs(超廣譜β內(nèi)酰胺酶)（2010年已修正）

產(chǎn)生的細(xì)菌：主要由克雷伯菌屬和大腸埃希菌及奇異變形桿菌產(chǎn)生。耐藥特點(diǎn)：對(duì)青霉素類(lèi)，頭孢菌素、單環(huán)β內(nèi)酰胺酶類(lèi)抗生素耐藥，即使體外可顯示活性但臨床應(yīng)用無(wú)效。通常對(duì)碳青霉烯類(lèi)，頭霉素類(lèi)及酶抑制劑復(fù)合制劑敏感。嗜麥芽窄食單胞菌

對(duì)亞胺培南天然耐藥。

分析后1.5下列細(xì)菌的耐藥特點(diǎn)分析后分析后結(jié)果報(bào)告的管理初級(jí)報(bào)告：當(dāng)實(shí)驗(yàn)室出現(xiàn)臨床上可能引起生命危象的檢測(cè)結(jié)果、檢測(cè)到傳染病報(bào)告（如：志賀菌、沙門(mén)菌、霍亂弧菌、分枝桿菌等）、臨床特別要求提早給予試驗(yàn)結(jié)果信息時(shí)、出現(xiàn)疑難菌株時(shí)，給予臨床的一種口頭報(bào)告方式，以方便臨床及時(shí)采取措施。當(dāng)試驗(yàn)獲得最終結(jié)果時(shí)，必須完成正式報(bào)告。正式報(bào)告：專(zhuān)用微生物檢驗(yàn)報(bào)告，報(bào)告單上應(yīng)有必需的病人信息、標(biāo)本信息、檢測(cè)結(jié)果、檢測(cè)人員信息等。如遇特殊情況需要手寫(xiě)，必須經(jīng)負(fù)責(zé)人簽字和蓋章方可生效。所有檢驗(yàn)報(bào)告都以統(tǒng)一格式電腦打印發(fā)出。分析后結(jié)果報(bào)告的管理由微生物室負(fù)責(zé)人或其指定人員負(fù)責(zé)審核。審核報(bào)告前須先閱讀質(zhì)控結(jié)果，只有質(zhì)控結(jié)果通過(guò)才可進(jìn)行審核工作。藥敏數(shù)據(jù)的審核。警告值的核對(duì)。罕見(jiàn)結(jié)果的核對(duì)：腦脊液、血培養(yǎng)（除凝固酶陰性的細(xì)菌外）等無(wú)菌體液、膿、傷口、厭氧菌標(biāo)本出現(xiàn)稀有細(xì)菌時(shí)，須告知微生物室負(fù)責(zé)人，經(jīng)確認(rèn)后方可發(fā)出報(bào)告。形態(tài)學(xué)檢查，少見(jiàn)的細(xì)菌形態(tài)以及細(xì)菌鑒定應(yīng)由多位微生物工作人員共同討論，只有意見(jiàn)達(dá)成共識(shí)方能出具報(bào)告。分析后結(jié)果報(bào)告的管理由微生物室負(fù)責(zé)人或其指定人員負(fù)責(zé)審核。分析后結(jié)果報(bào)告的管理

分枝桿菌陽(yáng)性報(bào)告須經(jīng)微生物室負(fù)責(zé)人或其指派人員復(fù)核方可報(bào)告，立即聯(lián)系臨床醫(yī)師和填寫(xiě)傳染病報(bào)告及危急值報(bào)告。鑒定出沙門(mén)菌、志賀菌、腦膜炎雙球菌、霍亂弧菌等傳染病細(xì)菌，應(yīng)立即填寫(xiě)傳染病報(bào)告，經(jīng)微生物室負(fù)責(zé)人或其指派人員審核簽字后方可報(bào)告。血培養(yǎng)和腦脊液、標(biāo)本染色涂片發(fā)現(xiàn)或培養(yǎng)出細(xì)菌后，應(yīng)立即做危急值報(bào)告。特殊結(jié)果的核對(duì)分枝桿菌陽(yáng)性報(bào)告須經(jīng)微生物室負(fù)責(zé)人或其指派人員復(fù)核方可取萬(wàn)古霉素MH平板。加104CFU/ml菌液至MH平板上，加樣最好在制備好菌懸液后15min內(nèi)完成。35℃孵育16-20小時(shí)。判斷結(jié)果：有無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)。細(xì)菌懸液的配制：先配制0.5McF的菌懸液，再做10稀釋?zhuān)c(diǎn)種1～2μl。VA-MIC接種VA-MIC接種

葡萄球菌（金葡、路鄧、表葡、腐生、溶葡）腸球菌（糞腸、屎腸）鏈球菌（A群、B群、肺雙）腸桿菌科

H2S、苯丙、尿素、I、氨基酸不動(dòng)桿菌（鮑曼、洛菲）非發(fā)酵（綠膿、糞產(chǎn)堿、洋蔥、嗜麥芽）腸道細(xì)菌鑒定卡他對(duì)臨床常見(jiàn)細(xì)菌的識(shí)別方法葡萄球菌（金葡、路鄧、表葡、腐生、溶葡）對(duì)臨床常見(jiàn)細(xì)菌的識(shí)布魯氏菌人心桿菌腐蝕艾肯菌金氏金氏菌多殺巴斯德斯對(duì)臨床少見(jiàn)細(xì)菌的識(shí)別方法布魯氏菌對(duì)臨床少見(jiàn)細(xì)菌的識(shí)別方法厭氧菌蘇州臨檢中心蘇州臨檢蘇州臨床檢驗(yàn)中心蘇州臨課件厭氧菌蘇州臨檢中心蘇州臨檢蘇州臨床檢驗(yàn)中心蘇州臨課件厭氧菌蘇州臨檢中心蘇州臨檢蘇州臨床檢驗(yàn)中心蘇州臨課件厭氧菌蘇州臨檢中心蘇州臨檢蘇州臨床檢驗(yàn)中心蘇州臨課件厭氧菌蘇州臨檢中心蘇州臨檢蘇州臨床檢驗(yàn)中心蘇州臨課件厭氧菌蘇州臨檢中心蘇州臨檢蘇州臨床檢驗(yàn)中心蘇州臨課件厭氧菌蘇州臨檢中心蘇州臨檢蘇州臨床檢驗(yàn)中心蘇州臨課件定位平板念珠菌尿道菌定位沙門(mén)菌金葡菌付溶血弧菌定位平板念珠菌厭氧菌蘇州臨檢中心蘇州臨檢蘇州臨床檢驗(yàn)中心蘇州臨課件臨床微生物檢驗(yàn)需要積極主動(dòng)與臨床溝通

一、為什么要積極主動(dòng)與臨床溝通？二、溝通些什么內(nèi)容？三、怎樣溝通？臨床微生物檢驗(yàn)需要積極主動(dòng)與臨床溝通

一、為什么要積極主動(dòng)與一、為什么要積極主動(dòng)與臨床溝通？1.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)是一門(mén)為臨床服務(wù)的學(xué)科；2.臨床微生物檢驗(yàn)是病原學(xué)診斷，對(duì)臨床診治非常重要；3.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)都在快速發(fā)展，需要檢驗(yàn)臨床雙方溝通，才能做好。

一、為什么要積極主動(dòng)與臨床溝通？1.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)是一門(mén)為臨床服二、溝通什么內(nèi)容？分析前質(zhì)控程序：標(biāo)本采集。分析中：微生物檢驗(yàn)的新發(fā)展,微生物檢驗(yàn)流程.報(bào)告要與臨床溝通。二、溝通什么內(nèi)容？分析前質(zhì)控程序：標(biāo)本采集。三、如何與臨床溝通？通過(guò)各種形式的學(xué)習(xí)、培訓(xùn)及宣傳活動(dòng)；電話、咨詢(xún)課題合作定期向臨床發(fā)布細(xì)菌耐藥監(jiān)測(cè)結(jié)果等三、如何與臨床溝通？通過(guò)各種形式的學(xué)習(xí)、培訓(xùn)及宣傳活動(dòng)；Case1

病例1，男，68歲。2008年7月初患者偶爾發(fā)現(xiàn)背部有一蠶豆大小腫塊，皮色正常，微有壓痛，無(wú)發(fā)熱。腫塊未處理，一月后增雞蛋大小。其后，病變先后擴(kuò)散至肺部、椎管、右髖等多部位，病人先后在浙江、上海多家醫(yī)院住院診治7次，肺部穿刺吸膿均未檢出檢出細(xì)菌、抗酸桿菌。2009年8月入住我院感染科，9月14日行右髖切開(kāi)引流術(shù)。微生物室進(jìn)行床邊采樣接種，9月22日從引流液、組織等培養(yǎng)出新型隱球菌。9月24日，臨床根據(jù)微生物檢驗(yàn)結(jié)果，該用抗真菌治療方案，9月26日，病情即好轉(zhuǎn)，10月13日康復(fù)出院。Case1Case2病例2，女，66歲。15年前患者無(wú)明顯原因及誘因左眉出現(xiàn)綠豆大小鮮紅丘疹，多次到附近醫(yī)院就診，藥物治療，療效不佳。后皮疹漸增多、增大，部分融合成潰瘍，漸向面、頸、腋下發(fā)展，時(shí)有破潰、結(jié)痂。先后到中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院皮膚病醫(yī)院等多家醫(yī)院診治，期間進(jìn)行過(guò)皮膚病理活檢、創(chuàng)面細(xì)菌培養(yǎng)、真菌培養(yǎng)、PPD試驗(yàn)、ELISPOT試驗(yàn)及皮膚組織分枝桿菌檢查。血常規(guī)白細(xì)胞3.47×10^9/L，真菌培養(yǎng)陰性，細(xì)菌創(chuàng)面多次培養(yǎng)出MRSA，分枝桿菌檢查陰性，PPD試驗(yàn)及ELISPOT試驗(yàn)陽(yáng)性。按非典型分枝桿菌感染治療，效果不佳。2010年2月26日再次入住我院皮膚科，2月29日，性嘴唇結(jié)痂軟化術(shù)，采集新鮮組織行細(xì)菌培養(yǎng)，再次培養(yǎng)出MRSA，采用抗MRSA治療，3月11日，病情好轉(zhuǎn)出院。Case2厭氧菌蘇州臨檢中心蘇州臨檢蘇州臨床檢驗(yàn)中心蘇州臨課件小結(jié)CAP的標(biāo)準(zhǔn)和要求不是高精尖、高科技而是實(shí)驗(yàn)室基本要達(dá)標(biāo)和要做到的基礎(chǔ)標(biāo)準(zhǔn)。CAP的標(biāo)準(zhǔn)和要求不是繁瑣、復(fù)雜而是細(xì)致。CAP的標(biāo)準(zhǔn)和要求是以人為本，人性化管理，人的安全放在第一位。CAP的宗旨是：持續(xù)不斷改進(jìn)。小結(jié)CAP的標(biāo)準(zhǔn)和要求不是高精尖、高科技而是實(shí)驗(yàn)室基本要達(dá)標(biāo)總結(jié)在重復(fù)中尋求變異。在個(gè)別中尋求規(guī)律。總結(jié)在重復(fù)中尋求變異。謝謝！謝謝！2010.5阮斐怡微生物檢驗(yàn)與臨床2010.5阮斐怡微生物檢驗(yàn)與臨床

微生物實(shí)驗(yàn)室設(shè)立目的

協(xié)助臨床醫(yī)生診斷及治療感染癥。檢驗(yàn)結(jié)果提供抗生素治療依據(jù)。提供流行病學(xué)數(shù)據(jù)供醫(yī)院感染管制措施參考。微生物實(shí)驗(yàn)室設(shè)立目的

微生物實(shí)驗(yàn)室功能

檢查及培養(yǎng)臨床標(biāo)本中的微生物。正確鑒定臨床上有意義的分離菌株。對(duì)有意義的分離菌株進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。提供快速正確的檢驗(yàn)報(bào)告。微生物實(shí)驗(yàn)室功能

成功分離病原菌

－標(biāo)本收集、運(yùn)送、保存－標(biāo)本處理方法－醫(yī)務(wù)人員專(zhuān)業(yè)知識(shí)

正確判讀微生物培養(yǎng)報(bào)告選擇適當(dāng)治療方法

成功治療感染癥因素成功分離病原菌成功治療感染癥因素分析前質(zhì)量控制臨床檢驗(yàn)科全面質(zhì)量管理系統(tǒng)用于臨床診斷與治療分析測(cè)定參與臨床診斷、查房等醫(yī)療活動(dòng)，幫助臨床醫(yī)生合理分析、正確使用檢驗(yàn)結(jié)果分析中分析后

通過(guò)實(shí)踐與文獻(xiàn)復(fù)習(xí)進(jìn)行方法學(xué)研究、臨床意義探討、經(jīng)濟(jì)學(xué)評(píng)估，不斷開(kāi)展循征醫(yī)學(xué)工作探討標(biāo)本采集各環(huán)節(jié)影響實(shí)驗(yàn)因素并制定相應(yīng)制度與措施檢驗(yàn)科與臨床密切的信息交流臨床醫(yī)生選擇最直接最有效的,最合理,最經(jīng)濟(jì)的項(xiàng)目用于患者,正確化驗(yàn)單的書(shū)寫(xiě)臨檢科對(duì)臨床醫(yī)生選擇項(xiàng)目時(shí),提出自己的建議對(duì)檢驗(yàn)科工作人員不斷進(jìn)行專(zhuān)業(yè)知識(shí)繼續(xù)教育,不斷提高整體素質(zhì)和學(xué)術(shù)水平

醫(yī)護(hù)人員能正確進(jìn)行標(biāo)本采集與運(yùn)送標(biāo)本采集檢查、監(jiān)督標(biāo)本是否符合要求標(biāo)本運(yùn)送病人準(zhǔn)備建立檢驗(yàn)報(bào)告解釋咨詢(xún)及建議的機(jī)構(gòu)臨床檢驗(yàn)科分析前質(zhì)量控制臨床檢驗(yàn)科全面質(zhì)量管理系統(tǒng)用于臨床診斷與治療分全部檢驗(yàn)流程中各分析階段實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)錯(cuò)誤理解檢驗(yàn)的需求性檢驗(yàn)申請(qǐng)的必要條件32-75%病人準(zhǔn)備分析前標(biāo)本采集標(biāo)本處理4-32%標(biāo)本分析分析中報(bào)告單的生成9-55%報(bào)告單修正分析后報(bào)告判讀

Clin.Lab.Med3:541-551,1983

ClinicalChenistry48:5,691-698,2002全部檢驗(yàn)流程中各分析階段實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)錯(cuò)誤提供最佳的微生物病原菌發(fā)現(xiàn)率，使污染率降至最低及培養(yǎng)結(jié)果容易判讀。提升實(shí)驗(yàn)室工作效率及病患照顧質(zhì)量。降低醫(yī)療成本。

良好的微生物送檢標(biāo)本提供最佳的微生物病原菌發(fā)現(xiàn)率，使污染良好的微生物送需要不需要檢驗(yàn)項(xiàng)目申請(qǐng)標(biāo)本采集指南特殊安全防護(hù)特殊安全防護(hù)處理病人識(shí)別、評(píng)估標(biāo)本采集標(biāo)本標(biāo)簽標(biāo)本轉(zhuǎn)運(yùn)標(biāo)本接收標(biāo)本拒收標(biāo)本儲(chǔ)存標(biāo)本唯一標(biāo)識(shí)微生物實(shí)驗(yàn)室分析前處理流程圖需要不需要檢驗(yàn)項(xiàng)目申請(qǐng)標(biāo)本采集指南特殊安全防護(hù)特殊安全防護(hù)處類(lèi)型檢測(cè)項(xiàng)目常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目普通培養(yǎng)+鑒定厭氧菌培養(yǎng)+鑒定普通培養(yǎng)+鑒定+菌落計(jì)數(shù)血培養(yǎng)+鑒定血培養(yǎng)（厭氧菌）+鑒定藥敏試驗(yàn)特殊檢測(cè)項(xiàng)目革蘭染色涂片抗酸染色涂片分枝桿菌培養(yǎng)沙門(mén)志賀菌培養(yǎng)霍亂弧菌培養(yǎng)嗜鹽菌培養(yǎng)大腸埃希菌O-157培養(yǎng)鑒定B群鏈球菌培養(yǎng)鑒定

檢測(cè)項(xiàng)目一覽表類(lèi)型檢測(cè)項(xiàng)目常普通培養(yǎng)+鑒定厭氧菌培養(yǎng)+鑒定普通培養(yǎng)+鑒定+標(biāo)本采集部位非無(wú)菌部位無(wú)菌部位眼血液耳骨髓呼吸道腦脊液腸胃道胸水泌尿道腹水皮膚關(guān)節(jié)液毛發(fā)標(biāo)本采集部位非無(wú)菌部位無(wú)菌部位眼血液耳骨髓呼吸道腦脊液腸分析前標(biāo)本采集標(biāo)本接收標(biāo)本拒收標(biāo)本儲(chǔ)存分析前標(biāo)本采集標(biāo)本收集與運(yùn)送原則收集急性期真正病灶處的標(biāo)本，不得受到鄰近區(qū)域微生物的污染采用無(wú)菌器材收集標(biāo)本，并裝于堅(jiān)固、密封的無(wú)菌器材中收集“足量”的標(biāo)本在病人使用抗生素或傷口局部治療前收集標(biāo)本標(biāo)本收集與運(yùn)送原則收集急性期真正病灶處的標(biāo)本，不得受到鄰近區(qū)注意生物安全采集：采取標(biāo)準(zhǔn)防護(hù)措施運(yùn)送：不可造成標(biāo)本外漏及容器破損并迅速送到實(shí)驗(yàn)室儲(chǔ)存及操作：避免標(biāo)本中污染菌生長(zhǎng)并保持病原菌活性注意生物安全采集：采取標(biāo)準(zhǔn)防護(hù)措施標(biāo)本采集痰標(biāo)本尿液標(biāo)本血液標(biāo)本尿道、會(huì)陰部穿刺部位皮下感染淺表傷口口腔、呼吸道皮膚、黏膜污染！標(biāo)本采集痰標(biāo)本尿液標(biāo)本血液標(biāo)本尿道、會(huì)陰部穿刺部位皮下感

標(biāo)本采集1.選擇正確的解剖部位。下表列出了一些幾乎為臨床提供不了什么有用信息的標(biāo)本。標(biāo)本類(lèi)型替代方法或建議結(jié)腸造口術(shù)排出物嘔吐物壞疽損傷（拭子）褥瘡（拭子）牙周損傷（拭子）直腸周?chē)撃[（拭子）靜脈曲張性潰瘍（拭子）燒傷，傷口（拭子）不適合做細(xì)菌培養(yǎng)不適合做細(xì)菌培養(yǎng)送交深部組織或抽吸物送交深部組織或抽吸物送交深部組織或抽吸物送交深部組織或抽吸物送交深部組織或抽吸物送交深部組織或抽吸物標(biāo)本采集1.選擇正確的解剖部位。下表列出了一些幾乎為2.選擇合適的部位采集用于厭氧菌培養(yǎng)的標(biāo)本，見(jiàn)下表。活檢或針頭抽吸物是最佳的選擇，一般不要用厭氧菌拭子標(biāo)本。決不要把厭氧菌培養(yǎng)的標(biāo)本冷藏，相反，要在室溫下保存。標(biāo)本采集可接受材料不可接受材料抽吸物（用注射器和針頭）血液，骨髓培養(yǎng)艱難梭菌的大便外科組織經(jīng)氣管抽吸物經(jīng)恥骨弓上抽吸的尿子宮內(nèi)膜抽吸物鼻咽拭子前列腺液或精液大便或直腸拭子惡露痰經(jīng)膀胱或?qū)Ч芘判沟哪蜃訉m頸拭子2.選擇合適的部位采集用于厭氧菌培養(yǎng)的標(biāo)本，見(jiàn)下表?；钗⑸飿?biāo)本接受或拒絕標(biāo)準(zhǔn)及處理方式項(xiàng)目拒絕標(biāo)準(zhǔn)處理方式標(biāo)本無(wú)標(biāo)簽，不處理對(duì)于非損傷方法獲得的標(biāo)本（尿、痰、咽標(biāo)本），要再送一個(gè)新的標(biāo)本。對(duì)于損傷程序獲得的標(biāo)本（針抽吸物、體液或組織），要和取樣醫(yī)生協(xié)商后，再處理標(biāo)本。在報(bào)告上注明問(wèn)題，并記錄所采取的措施。送檢延遲，不處理提示送檢者并要求再送一個(gè)標(biāo)本。在患者報(bào)告上注明“延遲后接收”。檢測(cè)信息有遺漏電話詢(xún)問(wèn)臨床并記錄，輸入數(shù)據(jù)庫(kù)檢測(cè)項(xiàng)目與申請(qǐng)單不一致（如血培養(yǎng)開(kāi)成一般普通培養(yǎng)）應(yīng)打電話與臨床聯(lián)系，說(shuō)明原因及改正方式，并將檢驗(yàn)單據(jù)號(hào)記錄，輸入數(shù)據(jù)庫(kù)。不合適的或泄漏的容器，不處理通知送檢者并要求再送一個(gè)標(biāo)本。在患者報(bào)告上注明問(wèn)題和所采取的措施。標(biāo)本類(lèi)型/量不合適與送檢者聯(lián)系，指出不符合之處。要求一個(gè)能滿(mǎn)足檢測(cè)條件的標(biāo)本。沒(méi)有提供標(biāo)本所適宜的條件（如厭氧送檢的卻用需氧送檢、拭子標(biāo)本沒(méi)有適當(dāng)?shù)姆栏纱胧?、需要轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基的卻沒(méi)有使用），不處理與送檢者聯(lián)系，闡明檢測(cè)要求，指出不符合之處。并要求一個(gè)能滿(mǎn)足檢測(cè)條件的標(biāo)本。同一天內(nèi)同一檢測(cè)條件的重復(fù)標(biāo)本（血除外），不處理將標(biāo)本置于適宜的保護(hù)劑和正確的保存溫度下。通知送檢者，指出重復(fù)的情況。在報(bào)告上注明問(wèn)題所在。微生物標(biāo)本接受或拒絕標(biāo)準(zhǔn)及處理方式拒絕標(biāo)準(zhǔn)處理方式標(biāo)血培養(yǎng)標(biāo)本1.血培養(yǎng)瓶適用的標(biāo)本血液、骨髓、腦脊液、胸腹水、關(guān)節(jié)液、腹透液等無(wú)菌體液。2.血培養(yǎng)次數(shù)對(duì)懷疑菌血癥的成人患者，上海市院感辦建議在不同部位采集2瓶需氧瓶或2套（1套為一瓶需氧和一瓶厭氧）血培養(yǎng)標(biāo)本。研究證明：血培養(yǎng)只做一套的陽(yáng)性檢出率為65%，做2套和3套檢出率分別為80%和90%。血培養(yǎng)標(biāo)本1.血培養(yǎng)瓶適用的標(biāo)本3.

采血量成人患者建議5-10ml/瓶。嬰幼兒患者建議每瓶不少于2ml。4.

采血時(shí)機(jī)抗菌藥物使用之前。寒戰(zhàn)出現(xiàn)時(shí)至發(fā)熱初期采集血培養(yǎng)最佳。5.血標(biāo)本在需氧和厭氧瓶中的分配推薦以一個(gè)需氧瓶和一個(gè)厭氧瓶作為常規(guī)血培養(yǎng)的組合。當(dāng)采血量不能滿(mǎn)足推薦采血量時(shí)，應(yīng)首先滿(mǎn)足需氧瓶的需要。

分析前～血培養(yǎng)標(biāo)本3.采血量分析前～血培養(yǎng)標(biāo)本血培養(yǎng)標(biāo)本6.影響血培養(yǎng)采樣因素采樣人員技術(shù)采集部位穿刺部位消毒工作采樣數(shù)量與時(shí)機(jī)選擇血培養(yǎng)標(biāo)本6.影響血培養(yǎng)采樣因素血培養(yǎng)標(biāo)本7.特殊的全身性和局部感染患者采血培養(yǎng)的建議急性高燒：10min內(nèi)，由不同部位抽取2套標(biāo)本。非急性高燒疾?。?4h內(nèi)，由不同部位抽取2-3套標(biāo)本，每套間隔≥3h。急性心內(nèi)膜炎：在1～2h內(nèi)不同部位采集3套血標(biāo)本，如果24h后陰性，再采集3套以上的血標(biāo)本。亞急性心內(nèi)膜炎：24h內(nèi)從3個(gè)不同部位采3套，每套間隔≥15min，如24h內(nèi)為陰性，要再采2-3套。急性膿毒?。?0min內(nèi)從不同的部位采2～3套?？梢杉毙栽l(fā)性菌血癥、腦膜炎、骨髓炎、關(guān)節(jié)炎或肺炎。應(yīng)在不同部位采集2～3套血標(biāo)本。不明原因發(fā)熱，如隱性膿腫、傷寒熱和波浪熱，從不同體位采集2～3套，間隔≥1h，如24h內(nèi)為陰性，需再采2-3套。血培養(yǎng)標(biāo)本7.特殊的全身性和局部感染患者采血培養(yǎng)的建議8.皮膚消毒血培養(yǎng)瓶口應(yīng)以75%酒精的消毒劑處理。徹底消毒皮膚，并用75%酒精由內(nèi)往外的方向涂抹去除碘酒液，以避免碘酒污染血培養(yǎng)液。血培養(yǎng)標(biāo)本8.皮膚消毒血培養(yǎng)標(biāo)本血培養(yǎng)容器需氧血培養(yǎng)瓶厭氧血培養(yǎng)瓶血培養(yǎng)瓶應(yīng)室溫放置，不要放入冰箱冷藏。血培養(yǎng)容器需氧血培養(yǎng)瓶厭氧血培養(yǎng)瓶血培養(yǎng)瓶應(yīng)室溫放置，不血培養(yǎng)容器中和抗生素血培養(yǎng)瓶真菌/分枝桿菌血培養(yǎng)瓶血培養(yǎng)瓶應(yīng)室溫放置，不要放入冰箱冷藏。血培養(yǎng)容器中和抗生素血培養(yǎng)瓶真菌/分枝桿菌血培養(yǎng)瓶血培養(yǎng)1.血管導(dǎo)管及腹膜透析導(dǎo)管培養(yǎng)是監(jiān)測(cè)血流感染源方法之一。2.標(biāo)準(zhǔn)方法：由導(dǎo)管抽取20ml血液，進(jìn)行血培養(yǎng)；導(dǎo)管周?chē)钠つw消毒，然后以無(wú)菌剪刀取下約5公分長(zhǎng)度導(dǎo)管尖，置于無(wú)菌容器中送檢；再由另一處?kù)o脈端抽血進(jìn)行血培養(yǎng)。3.實(shí)驗(yàn)室將導(dǎo)管尖于培養(yǎng)基上滾動(dòng)數(shù)次后進(jìn)行培養(yǎng)，如果菌落數(shù)＞15CFU/TiP以上，則認(rèn)為血流感染是可能與導(dǎo)管有關(guān)。血管導(dǎo)管培養(yǎng)1.血管導(dǎo)管及腹膜透析導(dǎo)管培養(yǎng)是監(jiān)測(cè)血流感染源方法之一。4.導(dǎo)管尖于培養(yǎng)基上滾動(dòng)數(shù)次后進(jìn)行培養(yǎng)，如果菌落數(shù)＜15CFU，可能有意義分離菌：

－白色念珠菌

－金黃色葡萄球菌

－A群鏈球菌－革蘭氏陰性桿菌5.導(dǎo)管血培養(yǎng)陽(yáng)性時(shí)間較靜脈血培養(yǎng)早二小時(shí)，可能為導(dǎo)管引起的血流感染。血管導(dǎo)管培養(yǎng)4.導(dǎo)管尖于培養(yǎng)基上滾動(dòng)數(shù)次后進(jìn)行培養(yǎng)，如果菌落數(shù)＜15C尿液標(biāo)本1.

收集方法中段尿無(wú)菌導(dǎo)尿管收集恥骨上方穿刺抽取2.標(biāo)本收集后若無(wú)法立即送檢應(yīng)置于冰箱（4-8℃）待送，4℃保存不可超過(guò)6小時(shí)。尿液標(biāo)本1.收集方法尿液標(biāo)本1.培養(yǎng)18-24h觀察平板上菌落情況，連續(xù)兩天無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)，報(bào)告“培養(yǎng)兩天無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)”。2.若培養(yǎng)出三種以上細(xì)菌，標(biāo)本可能污染，建議重新送檢。3.尿液中發(fā)現(xiàn)任何細(xì)菌，并不一定表示尿路感染。一般而言，菌落計(jì)數(shù)在105/ml以上代表真正感染；104～105/ml感染可能；>2種視為污染；若病人已服抗生素，104/ml也可能是感染。尿液標(biāo)本1.培養(yǎng)18-24h觀察平板上菌落情況，連續(xù)兩1.

收集標(biāo)本中粘液或血液的部分2.

使用轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基或無(wú)菌容器運(yùn)送

糞便標(biāo)本1.收集標(biāo)本中粘液或血液的部分糞便標(biāo)本糞便標(biāo)本容器標(biāo)本量大標(biāo)本量小糞便標(biāo)本容器標(biāo)本量大標(biāo)本量小傷口、組織、厭氧標(biāo)本1.

厭氧培養(yǎng)標(biāo)本，應(yīng)采集后15-30min內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露空氣中。厭氧菌標(biāo)本不可冷藏。2.

膿腫與癤最好以針筒直接由病灶處抽取。3.

清除傷口表面壞死組織，采集深層部位標(biāo)本。4.組織標(biāo)本應(yīng)放置于無(wú)菌容器中，在容器中放置少量生理鹽水防止標(biāo)本干枯。量少時(shí)傷口、膿液送檢方法傷口、組織、厭氧標(biāo)本1.厭氧培養(yǎng)標(biāo)本，應(yīng)采集后15-305.選擇合適部位采集用于厭氧菌培養(yǎng)的標(biāo)本見(jiàn)下表?？山邮懿牧喜豢山邮懿牧铣槲铮ㄓ米⑸淦骱歪橆^）血液，骨髓培養(yǎng)艱難梭菌的大便外科組織經(jīng)氣管抽吸物經(jīng)恥骨弓上抽吸的尿子宮內(nèi)膜抽吸物鼻咽拭子前列腺液或精液直腸拭子惡露痰經(jīng)膀胱或?qū)Ч芘判沟哪蜃訉m頸拭子傷口、組織、厭氧標(biāo)本5.選擇合適部位采集用于厭氧菌培養(yǎng)的標(biāo)本見(jiàn)下表。可接受材痰標(biāo)本1.標(biāo)本收集前，須先用溫開(kāi)水漱口刷牙。2.收集清晨病人肺深部咳出痰液。3.置于無(wú)菌密閉容器中運(yùn)送，在2小時(shí)內(nèi)送達(dá)實(shí)驗(yàn)室。痰標(biāo)本1.標(biāo)本收集前，須先用溫開(kāi)水漱口刷牙。1.

痰革蘭染色涂片：決定標(biāo)本收集是否適當(dāng)。一般上皮細(xì)胞＞25個(gè)/LP（低倍鏡視野），認(rèn)為此標(biāo)本受口腔污染，培養(yǎng)結(jié)果僅供參考。

合格痰判斷標(biāo)準(zhǔn)上皮細(xì)胞白細(xì)胞1＞25＜102＞2510-253＞25＞25410-25＞255＜10＞25合格痰判斷標(biāo)準(zhǔn)上皮細(xì)胞白細(xì)胞1＞25＜102＞2510-1.腦脊液、胸腹水、關(guān)節(jié)腔液等無(wú)菌體液應(yīng)無(wú)菌收集。2.最好2ml以上。3.無(wú)菌體液應(yīng)做厭氧培養(yǎng)。4.腦脊液、生殖道、眼、耳標(biāo)本不要冷藏。5.迅速將標(biāo)本送至實(shí)驗(yàn)室。其它標(biāo)本1.腦脊液、胸腹水、關(guān)節(jié)腔液等無(wú)菌體液應(yīng)無(wú)菌收集。其它分枝桿菌培養(yǎng)抗酸涂片1.痰液（培養(yǎng)及抗酸涂片）

指導(dǎo)病人于清晨以溫開(kāi)水刷牙漱口。肺深部咳出痰液最佳，量多為宜。痰液分別收集3次標(biāo)本。（一天內(nèi)）2.尿液

分枝桿菌培養(yǎng)：留取清潔中段尿?？顾嵬科毫羧?4h尿或全夜尿，靜止2小時(shí)棄上清留取沉渣送檢。3.腦脊液（培養(yǎng)及抗酸涂片）需要2ml以上。分枝桿菌培養(yǎng)抗酸涂片1.痰液（培養(yǎng)及抗酸涂片）

診斷肺結(jié)核及分枝桿菌培養(yǎng)結(jié)果比較1234抗酸涂片64819198分枝培養(yǎng)709199100陽(yáng)性率比較建議：抗酸涂片及分枝桿菌培養(yǎng)應(yīng)同時(shí)送檢以提高陽(yáng)性率。診斷肺結(jié)核及分枝桿菌培養(yǎng)結(jié)果比較1234抗酸涂片6481標(biāo)本的轉(zhuǎn)運(yùn)和儲(chǔ)存所有標(biāo)本必須立即送交實(shí)驗(yàn)室，必須在2h內(nèi)。厭氧培養(yǎng)的臨床標(biāo)本，適宜的轉(zhuǎn)運(yùn)首先取決于所獲標(biāo)本的體積。標(biāo)本應(yīng)于采集后15-30min內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)，厭氧培養(yǎng)標(biāo)本應(yīng)避免過(guò)長(zhǎng)時(shí)間暴露于空氣中。對(duì)環(huán)境敏感的微生物包括志賀菌、淋球菌、腦膜炎雙球菌和流感嗜血桿菌（對(duì)低溫敏感）。所以對(duì)腦脊液、生殖道、眼或內(nèi)耳標(biāo)本不要冷凍。標(biāo)本的轉(zhuǎn)運(yùn)和儲(chǔ)存所有標(biāo)本必須立即送交實(shí)驗(yàn)室，必須在2h內(nèi)。標(biāo)本的轉(zhuǎn)運(yùn)和儲(chǔ)存血培養(yǎng)瓶不論是在接種標(biāo)本前或后都應(yīng)室溫放置，不要放入冰箱冷藏。將臨床標(biāo)本或感染性物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)到實(shí)驗(yàn)室，不管距離如何，轉(zhuǎn)運(yùn)的標(biāo)本必須正確地標(biāo)記、包裝，在轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程中應(yīng)以密閉運(yùn)輸箱運(yùn)送。

返回2標(biāo)本的轉(zhuǎn)運(yùn)和儲(chǔ)存血培養(yǎng)瓶不論是在接種標(biāo)本前或后都應(yīng)室溫放置，

細(xì)菌培養(yǎng)標(biāo)本接種須知

標(biāo)本種類(lèi)培養(yǎng)基革蘭涂片備注血平板巧克力中國(guó)藍(lán)XLDTCBS山梨醇麥康凱增菌下呼吸道標(biāo)本＋＋＋＋用無(wú)菌棉簽沾取痰標(biāo)本與平板上，再接種。尿液＋中段尿用1ul定量接種環(huán)，導(dǎo)尿、恥骨穿刺尿用10ul定量接種環(huán)接種。腦脊液＋＋巰基乙酸肉湯＋（離心）收到標(biāo)本立即接種。離心取沉淀接種，剩余沉淀接種增菌液中增菌。穿刺液＋＋腹透液用巰基乙酸肉湯增菌＋（離心）收到標(biāo)本立即接種。離心取沉淀接種。腹透液標(biāo)本將剩余沉淀接種巰基乙酸肉湯中增菌。留置針導(dǎo)管＋導(dǎo)管在血平板上滾動(dòng)接種。鼻咽拭子生殖道眼耳部＋＋糞便一般培養(yǎng)＋＋＋先接種血平板、中國(guó)藍(lán)、XLD平板，并用SBG增菌液35℃孵育6h后，轉(zhuǎn)種XLD平。沙門(mén)、志賀菌培養(yǎng)＋先接種XLD平板，并用SBG增菌液35℃孵育6h后，轉(zhuǎn)種XLD平板?；魜y弧菌副溶血弧菌培養(yǎng)＋先用堿性蛋白胨水增菌35℃孵育6h后，轉(zhuǎn)種TCBS平板。0157腸出血性大腸桿菌＋引流液＋膿、傷口＋＋組織＋巰基乙酸肉湯＋先用無(wú)菌器械盡量將組織搗碎，再接種培養(yǎng)基，將剩余物接種增菌液中。其他＋厭氧菌培養(yǎng)接種厭氧血平板、LBK、CNA做厭氧培養(yǎng)，另需接種做需氧培養(yǎng)。細(xì)菌培養(yǎng)標(biāo)本接種須知 培養(yǎng)基的質(zhì)控外觀檢查無(wú)菌試驗(yàn)生長(zhǎng)試驗(yàn)及生化試驗(yàn)培養(yǎng)基的質(zhì)控外觀檢查培養(yǎng)基質(zhì)控必須的基本條件要求實(shí)驗(yàn)室保存參考菌種；實(shí)驗(yàn)前和實(shí)驗(yàn)時(shí)檢驗(yàn)培養(yǎng)基質(zhì)量；清晰記錄質(zhì)控實(shí)驗(yàn)非常重要；必須有一份NCCLSM-22-A3（商品微生物培養(yǎng)基質(zhì)量保證指南）作為參考工具書(shū)。培養(yǎng)基質(zhì)控必須的基本條件要求實(shí)驗(yàn)室保存參考菌種；試劑質(zhì)控表1常用試驗(yàn)試劑質(zhì)量控制試劑陽(yáng)性對(duì)照陰性對(duì)照監(jiān)測(cè)頻率氧化酶銅綠假單胞菌大腸埃希菌每次新配制時(shí)及使用中每個(gè)工作日觸酶金黃色葡萄球菌A群鏈球菌每個(gè)工作日凝固酶金黃色葡萄球菌表皮葡萄球菌每個(gè)工作日靛基質(zhì)大腸埃希氏菌肺炎克雷伯1%蛋白胨水：每次新配制時(shí)及使用中。靛基質(zhì)試劑：每次新配制時(shí)及使用中。甲基紅大腸埃希氏菌肺炎克雷伯葡萄糖蛋白胨水：每次新配制時(shí)及使用中。甲基紅試驗(yàn)試劑：每次新配制時(shí)及使用中。VP肺炎克雷伯大腸埃希氏菌葡萄糖蛋白胨水：每次新配制時(shí)及使用中。VP試驗(yàn)試劑：每次新配制時(shí)及使用中硝酸鹽還原大腸埃希氏菌洛菲不動(dòng)桿菌（質(zhì)控菌株）每次新配制時(shí)及使用中三氯化鐵奇異變形桿菌大腸埃希氏菌每次新配制時(shí)及使用中Optochin肺炎鏈球菌化膿性鏈球菌每次做Optochin試驗(yàn)時(shí)做質(zhì)控桿菌肽化膿性鏈球菌肺炎鏈球菌每次做桿菌肽抑制試驗(yàn)時(shí)做質(zhì)控β-內(nèi)酰胺酶大腸埃希菌（ATCC35218）金黃色葡萄球菌（ATCC25923）每個(gè)新批號(hào)及每次使用時(shí)試劑質(zhì)控表1常用試驗(yàn)試劑質(zhì)量控制陽(yáng)性對(duì)照陰性對(duì)照監(jiān)測(cè)頻率氧化厭氧菌蘇州臨檢中心蘇州臨檢蘇州臨床檢驗(yàn)中心蘇州臨課件厭氧菌蘇州臨檢中心蘇州臨檢蘇州臨床檢驗(yàn)中心蘇州臨課件觸酶葡萄球菌屬微球菌屬鏈球菌屬腸球菌屬G+球菌革蘭涂片陽(yáng)性陰性七葉苷陽(yáng)性、6.5％Nacl陽(yáng)性腸球菌屬鏈球菌屬需氧革蘭陽(yáng)性球菌鑒定流程圖觸酶葡萄球菌屬微球菌屬鏈球菌屬腸球菌屬G+球菌革蘭涂片陽(yáng)性陰中等大小、黃或灰白、β溶血或不溶血的菌落小、黃色菌落報(bào)微球菌屬金黃色葡萄球菌呋喃唑酮葡萄糖發(fā)酵上機(jī)+試管血漿凝固酶葡萄球菌微球菌屬－24hβ溶血－－++G+球菌觸酶+葡萄球菌、微球菌鑒定流程圖中等大小、黃或灰白、β溶血或不溶血的菌落小、黃色菌落報(bào)微球菌G+球菌觸酶－A群鏈球菌桿菌肽CAMPBAP溶血γβα其他檢測(cè)疑問(wèn)Optochin試驗(yàn)肺炎鏈球菌G+矛頭狀雙球菌、臍窩狀菌落耐藥其他敏感膽汁溶菌+－敏感陽(yáng)性B群鏈球菌其他檢測(cè)七葉苷：－或＋6.5％Nacl：－鏈球菌鑒定流程圖G+球菌觸酶－A群鏈球菌桿菌肽CAMPBAP溶血γβα其他檢G+球菌觸酶七葉苷陽(yáng)性、6.5％Nacl陽(yáng)性腸球菌屬上機(jī)可能屎腸球菌可能糞腸球菌阿拉伯糖：-；山梨醇：+阿拉伯糖：+；山梨醇：-腸球菌鑒定流程圖G+球菌觸酶七葉苷陽(yáng)性、腸球菌屬上機(jī)可能屎腸球菌可能糞腸球菌G-桿菌氧化酶+－產(chǎn)綠色素，有生姜味，溶血雙糖-/-、42℃生長(zhǎng)+可能綠膿桿菌上機(jī)YesYesNoNo腸桿菌科++――IMVIC――++可能大腸埃希菌雙糖:A/AH2S:－動(dòng)力:+尿素:－上機(jī)YesNo結(jié)合菌落特征：中國(guó)藍(lán)上呈深藍(lán)色菌落Yes雙糖：A/A動(dòng)力：-

I：-―鳥(niǎo)氨酸：-賴(lài)氨酸：+結(jié)合菌落特征：大而厚實(shí)、光亮、凸起、灰白色粘液型菌落，可挑出粘液絲可能肺炎克雷伯菌No需氧革蘭陰性桿菌鑒定流程圖G-桿菌氧化酶+－產(chǎn)綠色素，有生姜味，溶血雙糖-/-、42℃嗜血桿菌痰標(biāo)本疑似菌其他標(biāo)本疑似菌上機(jī)上機(jī)菌落特征：BAP不生長(zhǎng)；巧克力培養(yǎng)基上呈小至中等、無(wú)色、半透明灰色菌落，粘性且有鼠臭味副流感嗜血桿菌流感嗜血桿菌X因子-V因子-XV因子+X因子-V因子+XV因子+NoYesYesNo嗜血桿菌鑒定流程圖嗜血桿菌痰標(biāo)本疑似菌其他標(biāo)本疑似菌上機(jī)上機(jī)菌落特征：BAP不在TCBS平板上見(jiàn)扁平、深綠色、粘有辛辣味的菌落氧化酶：+Yes0%Nacl：—；4%Nacl：+8%Nacl：+；10%Nacl：—付溶定位：紅色NoYesNo可能副溶血弧菌上機(jī)轉(zhuǎn)種血平板副溶血弧菌鑒定流程圖在TCBS平板上見(jiàn)扁平黃色菌落可能是霍亂，溶藻進(jìn)一步鑒定+血清凝集等在TCBS平板上見(jiàn)扁平、深綠色、粘有辛辣味的菌落氧化酶：+Y革蘭染色著色不均念珠菌定位平板綠色鏡下圓形、卵圓形折光性較強(qiáng)孢子白色念珠菌、都柏林念珠菌粉紅色可能克柔念珠菌可能熱帶念珠菌藍(lán)灰色紫色白色可能光滑念珠菌酵母菌屬上機(jī)無(wú)菌體液（血、csf、胸腹水等）念珠菌屬鑒定流程圖芽管實(shí)驗(yàn)+革蘭染色著色不均念珠菌定位平板綠色鏡下圓形、卵圓形折光性較強(qiáng)念珠菌定位平板應(yīng)用菌名定位顏色白色念珠菌綠色熱帶念珠菌藍(lán)灰克柔念珠菌粉紅色、表面毛燥光滑念珠菌紫色、光滑其它念珠菌白色等念珠菌定位平板應(yīng)用定位顏色白色念珠菌綠色熱帶念珠菌藍(lán)灰克柔念

常見(jiàn)革蘭氏陰性桿菌的生化反應(yīng)（氧化酶陰性）細(xì)菌血平板中國(guó)蘭定位雙糖IMVPCU動(dòng)力鳥(niǎo)賴(lài)H2S苯丙山梨醇大腸中灰扁中蘭扁紅色+/+++---ddd--肺克大中白凸白帶蘭藍(lán)色+/+--++d--+--鮑曼中白凸中粉無(wú)色+/----+------陰溝中灰扁中粉扁蘭色-/+-d++-++---+摩根中灰(溶血)灰粉扁無(wú)色-/+++--+++--+普變遷徙生長(zhǎng)無(wú)色-/++++++奇變遷徙生長(zhǎng)無(wú)色-/+-+++-++弗勞地小灰扁帶蘭d+/+-+-+-+--+-粘質(zhì)中灰粉色綠色-/+--++-+++--+

d:表示不定常見(jiàn)革蘭氏陰性桿菌的生化反應(yīng)（氧化酶陰性）細(xì)菌血平板中國(guó)厭氧標(biāo)本的接種厭氧標(biāo)本的接種：化膿性感染標(biāo)本或穿刺液等：將標(biāo)本涂布于厭氧血平板、LBK平板等培養(yǎng)基第一區(qū)，四區(qū)劃線接種后，立即置于含厭氧發(fā)生袋、厭氧指示劑的厭氧罐中35℃厭氧培養(yǎng)。此外，將標(biāo)本涂布玻片，待干燥后，進(jìn)行革蘭染色顯微鏡檢。

厭氧標(biāo)本的接種厭氧標(biāo)本的接種：厭氧菌鑒定孵育48-72小時(shí)后檢測(cè)所有培養(yǎng)平板。記錄生長(zhǎng)的每一種菌的形態(tài)，描述包括：大小、形狀、混濁、色素、凹陷、溶血情況。對(duì)每一種生長(zhǎng)的菌落進(jìn)行耐氧試驗(yàn)：挑取單個(gè)菌落，分別接種到巧克力平板、血瓊脂平板和厭氧血平板。巧克力平板和血瓊脂平板放置35℃5%CO2環(huán)境，厭氧血平板放置35℃厭氧環(huán)境下培養(yǎng)。若巧克力平板和血瓊脂平板48小時(shí)孵育后無(wú)生長(zhǎng)，厭氧血平板48小時(shí)孵育后生長(zhǎng)，為專(zhuān)性厭氧菌。將耐氧試驗(yàn)中挑出的厭氧菌進(jìn)行革蘭染色選擇相應(yīng)的鑒定系統(tǒng)進(jìn)行鑒定。厭氧菌鑒定腸桿菌科：當(dāng)試驗(yàn)糞便中分離的沙門(mén)菌和志賀菌株時(shí)，只有氨芐西林、喹諾酮和TMP/SMZ可用于常規(guī)試驗(yàn)報(bào)告。另外，對(duì)沙門(mén)菌屬的腸道外感染分離株，應(yīng)測(cè)試并報(bào)告氯霉素和一種三代頭孢菌素。對(duì)CSF分離株，頭孢噻肟和頭孢曲松將取代頭孢噻吩和頭孢唑啉的試驗(yàn)和報(bào)告。肺炎鏈球菌：對(duì)腦脊液的肺炎鏈球菌分離株，應(yīng)該用可靠的MIC法測(cè)試并常規(guī)報(bào)告青霉素和頭孢噻肟或頭孢曲松或美羅培南的敏感性。對(duì)這些分離株，也應(yīng)該用MIC法或紙片法測(cè)萬(wàn)古霉素的敏感性。對(duì)其他部位的分離株，可用苯唑西林紙片篩選試驗(yàn)。如抑菌環(huán)直徑≤19mm，就應(yīng)該測(cè)試青霉素和頭孢噻肟或頭孢曲松的MIC。鏈球菌屬：對(duì)分離自血液與正常無(wú)菌部位（如腦脊液、血液、骨髓）的草綠色鏈球菌，應(yīng)該用MIC法測(cè)試青霉素的敏感性。

青霉素、氨芐西林、左氧氟沙星、氧氟沙星的紙片法解釋標(biāo)準(zhǔn)僅用于β-溶血鏈球菌。

不同感染部位標(biāo)本抗生素選用原則不同感染部位標(biāo)本抗生素選用原則CLSI/NCCLS建議核實(shí)抗菌藥物敏感性試驗(yàn)結(jié)果和確證菌株鑒定

細(xì)菌或菌群Ⅰ類(lèi)a未曾報(bào)告過(guò)的不常見(jiàn)表型，和/或因技術(shù)錯(cuò)誤造成的結(jié)果Ⅱ類(lèi)b在已知的規(guī)則中可能不常見(jiàn)的表型，和/或因技術(shù)錯(cuò)誤造成的結(jié)果革蘭陰性菌腸桿菌科（任何種）亞胺培南-I或R阿米卡星-R氟喹諾酮類(lèi)-R氟勞地枸櫞酸桿菌腸桿菌屬粘質(zhì)沙雷菌屬氨芐西林、頭孢唑啉，或頭孢噻吩-S大腸埃希菌ESBL確認(rèn)陽(yáng)性克雷伯菌屬氨芐西林-SESBL確認(rèn)陽(yáng)性普通變形桿菌普羅威登斯菌屬氨芐西林-S沙門(mén)菌屬第3代頭孢菌素-I或Rd氟喹諾酮類(lèi)-I或R；或奈啶酸-Rd銅綠假單胞菌慶大霉素、妥布霉素和阿米卡星同時(shí)-R嗜麥芽窄食單胞菌碳青霉烯類(lèi)-S復(fù)方磺胺甲噁唑-R流感嗜血桿菌氨曲南-NS碳青霉烯類(lèi)-NS第3代頭孢菌素c-NS氟喹諾酮類(lèi)-NS氨芐西林-R及?-內(nèi)酰胺酶陰性阿莫西林/克拉維酸-R任何細(xì)菌對(duì)所有常規(guī)試驗(yàn)中的抗菌藥物菌耐藥CLSI/NCCLS建議核實(shí)抗菌藥物敏感性試驗(yàn)結(jié)果和確證菌株

分析后MRS(耐甲氧西林葡萄球菌)

主要細(xì)菌：金黃色葡萄球菌，凝固酶陰性葡萄球菌。

耐藥特點(diǎn)：MRS對(duì)頭孢類(lèi)和其他β內(nèi)酰胺酶類(lèi)如阿莫西林/克拉維酸，氨芐西林/舒巴坦，替卡西林/克拉維酸，派拉西林/三唑巴坦和亞胺培南在體外可顯示活性但臨床應(yīng)用無(wú)效。這是