尿液分析的標(biāo)準(zhǔn)化及其尿沉渣定量檢測(cè)技術(shù)新進(jìn)展課件

尿液分析的標(biāo)準(zhǔn)化及其尿沉渣定量檢測(cè)技術(shù)新進(jìn)展1尿液分析的發(fā)展回顧1590年荷蘭人詹森發(fā)明了世界上第一臺(tái)復(fù)合顯微鏡1673年，F(xiàn)rederickDekkers用加熱醋酸酸化尿液的方法檢測(cè)蛋白1896年，Daiber出版了他的尿沉渣圖譜1911年，Benedict提出了穩(wěn)定方便的尿糖檢測(cè)方法JohnsHopkinsHospital的CharlesEmerson發(fā)表名著《臨床診斷》1956年AlfredFree發(fā)明的CLINISTIX，尿液分析史上第一個(gè)“浸入即讀”的測(cè)試方法

2國(guó)內(nèi)尿液分析方法回顧50~60 手工化學(xué)分析70~80 手工化學(xué)分析 尿沉渣鏡檢80~90 尿液干化學(xué)分析2K~2K1 尿液干化學(xué)分析 尿沉渣鏡檢2K2 完整的尿液分析=干化學(xué)+尿流式+鏡檢確認(rèn)3目前尿液分析所存在的問(wèn)題更準(zhǔn)？過(guò)分依賴尿液干化學(xué)分析尿沉渣鏡檢的方法學(xué)不精密性樣品處理過(guò)程所帶來(lái)的干擾人工鏡檢主觀因素的影響更快？單個(gè)樣品：9.75分鐘*批量處理：5.25分鐘*更多？*尿液分析最佳方法,FrankBailey，ASCP5尿液干化學(xué)檢測(cè)方法的局限性例如：白細(xì)胞：腎移植病人淋巴尿不表現(xiàn)脂酶尿糖：受其它還原物質(zhì)的影響造成假陰性細(xì)菌：只能檢測(cè)革蘭氏陰性桿菌……定性結(jié)果，不能用于療效的監(jiān)測(cè)結(jié)論：不能代替鏡檢6尿沉渣分析的重要性紅細(xì)胞：泌尿系出血、泌尿系惡變、出血性疾病白細(xì)胞：泌尿系感染、急性腎小球腎炎、腎移植排異上皮細(xì)胞：腎小管病變管型紅細(xì)胞管型：急性腎小球腎炎、腎梗塞白細(xì)胞管型：急性腎小球腎炎、腎綜合癥、腎盂腎炎上皮細(xì)胞管型：腎小管病變，如腎臟疾病、多種中毒透明管型：腎小球毛細(xì)管損害顆粒管型：腎盂腎炎、慢性腎疾病細(xì)菌：泌尿道感染7顯微鏡檢查的不精密度UF-100、CD-3500、計(jì)數(shù)板三種方法對(duì)比檢測(cè)104份腦脊液在低白細(xì)胞數(shù)的檢測(cè)中，UF-100的CV為4.9%CD-3500的CV為28%鏡檢法的CV為40%8顯微鏡檢查的影響因素標(biāo)本在分析前形態(tài)改變標(biāo)本混合不當(dāng)離心的尿量不同離心速度和時(shí)間不同尿沉渣重懸的液量不同尿沉渣重懸的方法不同鏡檢一滴沉渣的液量不同蓋片或計(jì)數(shù)板的差異視野數(shù)目和位置的差異成份識(shí)別上的人員差異顯微鏡視野大小的差異10尿沉渣檢查標(biāo)準(zhǔn)化的建議標(biāo)本的收集及運(yùn)送2.2標(biāo)本的運(yùn)送按上述要求留取尿液應(yīng)在2小時(shí)內(nèi)完成檢驗(yàn)。尿沉渣檢驗(yàn)的操作步驟3.2鏡檢計(jì)數(shù)細(xì)胞數(shù)或管型，按××/μl報(bào)告。材料與器械1.5自動(dòng)化設(shè)備有條件的實(shí)驗(yàn)室也可使用各類自動(dòng)、半自動(dòng)的尿沉渣分析儀作為尿沉渣分析，或用作過(guò)篩，但此類儀器必須經(jīng)權(quán)威機(jī)構(gòu)認(rèn)可。12DiaSysR/S2000系統(tǒng)14國(guó)聯(lián)在線UD-S自動(dòng)染色工作站15普利生AMP2000自動(dòng)掃描式尿沉渣工作站16DiaSysR/S2000系統(tǒng)主要部件為一個(gè)玻璃的光學(xué)計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)板固定在顯微鏡上并連接一個(gè)加樣泵尿液標(biāo)本首先按照常規(guī)步驟進(jìn)行處理將加樣管插入離心管的底部，啟動(dòng)加樣泵吸取180微升的沉渣并利用渦流混合重懸在加樣泵作用下尿沉渣流入檢測(cè)區(qū)，分布在光學(xué)計(jì)數(shù)板上計(jì)數(shù)后，系統(tǒng)自動(dòng)用700微升的鹽水沖洗管路和計(jì)數(shù)板以防止交叉污染17為什么要使用全自動(dòng)尿沉渣分析儀？18為什么要使用全自動(dòng)尿沉渣分析儀？徹底排除樣品處理過(guò)程的干擾因素以及人工鏡檢主觀因素的影響，提高分析中質(zhì)量控制提高篩選效率，保證樣品的質(zhì)量，強(qiáng)化分析前質(zhì)量控制20全自動(dòng)尿沉渣分析儀UF-100/UF-5021結(jié)果準(zhǔn)確、重復(fù)性好UF-100和人工鏡檢法精密度比較（n=10）239-氮雜菲（Phenanthridine）染色DNA和RNA發(fā)射熒光為:橙色對(duì)死細(xì)胞胞膜穿透性強(qiáng)羰花青（Carbocyanine）細(xì)胞膜、核膜以及線粒體等膜性物質(zhì)被染色發(fā)射熒光為：綠色特異的熒光染色技術(shù)24彩色打印報(bào)告-科研報(bào)告26質(zhì)量控制27臨床應(yīng)用

血尿來(lái)源的鑒別診斷28UF-100對(duì)血尿來(lái)源的判斷ToruHyodo,KazuoKumanoetal.Detectionofglomerularandnon-glomerularredbloodcellbyautomatedurinarysedimentanalyzer.JpnJNephrol37:35-43,1995.

UF-100：敏感性100％，特異性92.54%*鏡檢法：敏感性95.83%，特異性93.33%馬駿龍，叢玉隆等。全自動(dòng)尿沉渣分析儀檢測(cè)尿紅細(xì)胞鑒別血尿來(lái)源的探討。中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志V20(5),1997。

UF-100：敏感性100％，特異性78.2%*Hyodo所選非腎小球病變對(duì)象排除了血尿同時(shí)伴菌尿病人30臨床應(yīng)用

藥物治療療效的觀察31臨床應(yīng)用－急性腎盂腎炎32臨床應(yīng)用－輸尿管結(jié)石，腎盂腎炎33臨床應(yīng)用－腎病綜合癥34臨床應(yīng)用

用于檢測(cè)腦脊液中的白細(xì)胞35尿流式細(xì)胞儀檢查腦脊液中白細(xì)胞UF-100、CD-3500、計(jì)數(shù)板三種方法對(duì)比檢測(cè)104份腦脊液在低白細(xì)胞數(shù)的檢測(cè)中，UF-100的CV為4.9%CD-3500的CV為28%鏡檢法的CV為40%ReinhardZiebig,AndreasLun,PranavSinHA.LeukocyteCountsinCerebrospinalFluidwiththeAutomatedHematologyAnalyzerCellDyn3500andtheUrineFlowCytometerUF-100.ClinicalChemistry46:2242~247(2000)36流式細(xì)胞儀分析腦脊液標(biāo)本UF-100及顯微鏡檢測(cè)紅細(xì)胞有好的相關(guān)性，r=0.919UF-100與白細(xì)胞的相關(guān)性為r=0.886UF-100與細(xì)菌的相關(guān)性為r=0.605，CSF出血標(biāo)本細(xì)菌計(jì)數(shù)不可信顱咽管瘤病人的CSF中新形隱球菌、酵母菌及膽固醇結(jié)晶可檢測(cè)出JosT.VanAcker,JorisR.Delangheetal.AutomatedFlowCytometricAnalysisofCerebrospinalFluid.ClinicalChemistry47:3556-560(2001)37UF在常規(guī)工作中的作用UF的快速篩選功能大大降低人工鏡檢的工作量解決陽(yáng)性樣品的漏檢問(wèn)題，避免了醫(yī)療糾紛定量的標(biāo)準(zhǔn)化報(bào)告方式大大提高結(jié)果的準(zhǔn)確性適用于臨床治療監(jiān)測(cè)提供新的臨床信息RBC形態(tài)信息，用于血尿來(lái)源的鑒別診斷38簡(jiǎn)化工作流程沒(méi)有UF有了UF報(bào)告報(bào)告報(bào)告39試紙條篩選、沉渣分析、化學(xué)定量、微生物檢查等是尿液分析不可缺少的內(nèi)容。采用自動(dòng)化儀器對(duì)這些顆粒進(jìn)行分析是減少手工操作，滿足臨床尿也分析所需要的檢驗(yàn)方法。Kouri博士(歐洲尿分析組主席)