微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用 【知識(shí)精講+備課精研+高效課堂】 高考生物一輪復(fù)習(xí) （全國(guó)通用）

新教材新高考高三一輪復(fù)習(xí)第57講微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用課前小熱身1．培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽，有時(shí)還需要加入一些特殊的物質(zhì)。

(

)2．消毒的原則是既殺死材料表面的微生物，又減少消毒劑對(duì)細(xì)胞的傷害。

(

)3．倒平板時(shí)，應(yīng)將打開(kāi)的皿蓋放到一邊，以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上。

(

)4．平板劃線法中每一次劃線前要將接種環(huán)灼燒。

(

)5．為了防止污染，接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)趁熱快速挑取菌落。

(

)6．選擇培養(yǎng)基可以鑒定某種微生物的種類。

(

)7．對(duì)細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)只能采用稀釋涂布平板法，而不能用平板劃線法。

(

)8．篩選能分解尿素的細(xì)菌所利用的培養(yǎng)基中，尿素是唯一的氮源。

(

)9．分解尿素的細(xì)菌在分解尿素時(shí)，可以將尿素轉(zhuǎn)化為氨，使培養(yǎng)基的酸堿度降低()

10．統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目時(shí)為保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)目最多的平板進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。(

)

√√×√×××√××微生物的選擇培養(yǎng)和計(jì)數(shù)考點(diǎn)一培養(yǎng)基及微生物的純培養(yǎng)技術(shù)目錄CONTENTS考點(diǎn)二重溫高考真題演練1培養(yǎng)基的配制人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。用以培養(yǎng)、分離、鑒定、保存微生物或積累其代謝物。(1)概念：(2)作用：(3)類型：固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基劃分標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基種類特點(diǎn)用途物理性質(zhì)化學(xué)成分用途不加凝固劑加凝固劑，如瓊脂工業(yè)生產(chǎn)觀察微生物的運(yùn)動(dòng)微生物分離、鑒定、活菌計(jì)數(shù)、保藏菌種含化學(xué)成分不明確的天然物質(zhì)工業(yè)生產(chǎn)培養(yǎng)基成分明確分類、鑒定允許特定種類的微生物生長(zhǎng),同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基培養(yǎng)、分離出特定微生物在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品,用以鑒別不同種類的微生物鑒別不同種類微生物天然培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加氨芐青霉素具有抗氨芐青霉素能力的菌落沒(méi)有氨芐青霉素抗性的細(xì)菌選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)基+氨芐青霉素培養(yǎng)基沒(méi)有抗氨芐青霉素能力的菌落被淘汰怎樣選擇出抗氨芐青霉素能力的細(xì)菌?鑒別培養(yǎng)基：在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品(不影響微生物正常生長(zhǎng))，使微生物的某種代謝產(chǎn)物與培養(yǎng)基中的特定指示劑或化學(xué)藥品發(fā)生反應(yīng)。從而達(dá)到鑒定的作用。伊紅和美藍(lán)培養(yǎng)基鑒別大腸桿菌剛果紅培養(yǎng)基鑒別纖維素分解菌(4)營(yíng)養(yǎng)成分:a.基本成分：碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽①碳源：無(wú)機(jī)碳源：CO2、CO32-、HCO3-有機(jī)碳源：葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨等自養(yǎng)微生物異養(yǎng)微生物②氮源：無(wú)機(jī)氮源：NH4＋、NO3-、NH3等有機(jī)氮源：牛肉膏、蛋白胨、尿素、氨基酸等注：含C、H、O、N的有機(jī)物是異養(yǎng)型微生物的碳源、氮源、能源③無(wú)機(jī)鹽：Ca、K、Mg為大量元素Zn、Cu、Mn、Co、Mo等微量元素凡是能夠?yàn)槲⑸锾峁〤、N等元素的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。表1-11000ml牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)組成組分含量提供的主要營(yíng)養(yǎng)牛肉膏5g碳源、磷酸鹽和維生素等蛋白胨10g氮源和維生素等NaCl5g無(wú)機(jī)鹽H2O定容至1000ml水（牛肉膏、酵母膏、蛋白胨中含有）b.還需滿足微生物對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、氧氣的需求維生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等舉例說(shuō)明：培養(yǎng)乳酸菌需要添加維生素培養(yǎng)霉菌時(shí)需將PH調(diào)至酸性，培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)將PH調(diào)至中性或微堿性培養(yǎng)厭氧微生物時(shí)需要提供無(wú)氧條件牛肉膏蛋白胨【自主探究】請(qǐng)結(jié)合教材P10-11面，思考下列問(wèn)題：1.獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是什么？2.消毒和滅菌的區(qū)別是什么？3.為了防止雜菌污染，具體措施有哪些？（四個(gè)方面）4.如何針對(duì)不同的作用對(duì)象選擇合適的消毒/滅菌方法？(1)目的：獲得

。(2)關(guān)鍵：

。純凈的培養(yǎng)物防止雜菌污染2無(wú)菌技術(shù)條件結(jié)果常用方法應(yīng)用范圍消毒較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物，不能消滅芽孢和孢子煮沸消毒法日常用品巴氏消毒法不耐高溫的液體化學(xué)藥劑消毒法用酒精擦拭雙手，用氯氣消毒水源紫外線消毒法用紫外燈照射接種室、接種箱、超凈工作臺(tái)。滅菌強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子灼燒滅菌法接種工具(涂布器、接種環(huán))、試管口或瓶口干熱滅菌法玻璃器皿、金屬用具濕熱滅菌法培養(yǎng)基及容器(3)常用的滅菌、消毒方法比較3微生物的純培養(yǎng)(1)概念：由

繁殖所獲得的微生物群體是純培養(yǎng)物，獲得

的過(guò)程就是純培養(yǎng)。2．常用方法：

法和

法。微生物群分散單個(gè)細(xì)胞單個(gè)菌落繁殖不同菌落的形狀、大小、顏色等不同。菌落是鑒定菌種的重要依據(jù)。(3)實(shí)例——酵母菌的純培養(yǎng)1.為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時(shí)，

仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？灼燒時(shí)期目的取菌種前每次劃線前接種結(jié)束后殺死接種環(huán)上原有微生物。殺死上次劃線時(shí)殘留菌種，使下一次劃線的菌種直接來(lái)源上次劃線的末端殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。2.在灼燒接種環(huán)之后，要等其冷卻后再進(jìn)行劃線的原因？以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。3.在作第二次以及其后的劃線操作時(shí)，總是從上一次劃線的末端開(kāi)始劃線的原因？

使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，以便獲得單個(gè)菌落?！鲦溄滩馁Y料·發(fā)展科學(xué)思維■———————問(wèn)題探討————————■鏈教材資料·發(fā)展科學(xué)思維■———————問(wèn)題探討4.平板冷凝后，要將平板倒置的原因是什么？提示因?yàn)槠桨謇淠?，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，平板倒置后，既可避免培養(yǎng)基表面的水分過(guò)快地?fù)]發(fā)，又可防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。5.在接種前隨機(jī)取若干個(gè)滅菌后的未接種的平板，先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是

。檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格1．(2022·沈陽(yáng)模擬)大腸桿菌是寄生于人和動(dòng)物腸道中的細(xì)菌，利用其代謝產(chǎn)物能與染料伊紅美藍(lán)反應(yīng)，使菌落呈黑色的特性，從而將其鑒別出來(lái)。表格是其培養(yǎng)基配方，相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是

(

)A.培養(yǎng)基配方中X的成分可以是瓊脂B．該培養(yǎng)基中蛋白胨提供的主要營(yíng)養(yǎng)有碳源、氮源和維生素C．可采用干熱滅菌法對(duì)該培養(yǎng)基滅菌D．可利用培養(yǎng)基上菌落的特征來(lái)判斷和鑒別大腸桿菌的存在解析：對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌應(yīng)該采用高壓蒸汽滅菌法，C錯(cuò)誤。成分蛋白胨乳糖磷酸二氫鉀X蒸餾水2%伊紅水溶液0.5%美藍(lán)水溶液含量10g10g2g20～30g1000mL20mL13mL答案：C

2.無(wú)菌技術(shù)包括以下幾個(gè)方面的敘述，其中正確的是A.紫外線照射前，適量噴灑石炭酸等消毒液，可以加強(qiáng)消毒效果B.牛奶的消毒常用紫外線消毒法C.為了防止污染，接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)趁熱快速挑取菌落D.在微生物接種的實(shí)驗(yàn)中，用95%酒精對(duì)實(shí)驗(yàn)者的雙手和超凈工作臺(tái)進(jìn)

行消毒答案：A3．下列關(guān)于微生物實(shí)驗(yàn)操作的敘述，錯(cuò)誤的是

(

)A．微生物培養(yǎng)基中并不都必須添加碳源或氮源B．倒平板時(shí)，應(yīng)將打開(kāi)的培養(yǎng)皿皿蓋放到一邊，以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上C．接種前后，接種環(huán)都要在酒精燈火焰上進(jìn)行灼燒D．實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，帶菌的培養(yǎng)基必須經(jīng)滅菌處理后才能倒掉解析：倒平板時(shí)，用左手拇指和食指將培養(yǎng)皿打開(kāi)一條稍大于瓶口的縫隙，右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基(約10～20mL)倒入培養(yǎng)皿，左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋，B錯(cuò)誤。答案：B

4．鯨死亡后會(huì)沉入海底，俗稱“鯨落”。“鯨落”后期會(huì)形成一個(gè)以厭氧菌和硫細(xì)菌等為主體的生態(tài)系統(tǒng)。厭氧菌以“鯨落”肌肉中的脂肪為食，同時(shí)產(chǎn)生一些硫化氫等硫化物。硫細(xì)菌將硫化物氧化成硫酸鹽，并以該過(guò)程中釋放的能量合成有機(jī)物。請(qǐng)回答相關(guān)問(wèn)題：(1)培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基中一般都會(huì)含有水、無(wú)機(jī)鹽、氮源和碳源，培養(yǎng)“鯨落”群落中厭氧菌的碳源必須是________。要培養(yǎng)硫細(xì)菌，培養(yǎng)基中的成分需要特殊配制，主要體現(xiàn)在_________________________________________，這種培養(yǎng)基可以用來(lái)專一性培養(yǎng)硫細(xì)菌，所以稱為_(kāi)_____培養(yǎng)基。(2)在分離“鯨落”中的微生物時(shí)要制備固體培養(yǎng)基，在倒平板操作后，將平板倒置，這樣做的目的是_________________________________________________。含碳有機(jī)物(或脂肪)碳源必須是含碳無(wú)機(jī)物(或碳酸鹽)，同時(shí)加入硫化物選擇防止培養(yǎng)皿皿蓋上凝結(jié)的水珠落入培養(yǎng)皿造成污染，防止培養(yǎng)基中的水分過(guò)快揮發(fā)(3)為了研究“鯨落”中含有微生物的情況，需將“鯨落”提取物加水稀釋，然后將稀釋水樣用涂布器分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，這種方法稱為_(kāi)_______________。下面所示的四種菌落分布情況中，不可能由該方法得到的是________。(4)若想得到“鯨落”中某目標(biāo)菌種，可用平板劃線法進(jìn)行純化。若下圖甲是接種培養(yǎng)后的菌落分布圖，對(duì)應(yīng)的平板劃線操作示意圖為_(kāi)_______。圖甲中的③更易獲得單菌落，判斷依據(jù)是_________________________________________。每次劃線的菌種都來(lái)自上一次劃線的末端，最后

一次劃線結(jié)束時(shí)更容易獲得單菌落稀釋涂布平板法D丙微生物的選擇培養(yǎng)和計(jì)數(shù)考點(diǎn)一培養(yǎng)基及微生物的純培養(yǎng)技術(shù)目錄CONTENTS考點(diǎn)二重溫高考真題演練歡迎加入，更多資源疑難突破一：選擇培養(yǎng)基配方的設(shè)計(jì)

尿素［CO(NH2)2］含氮量高，化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，是現(xiàn)代農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中一種重要的氮肥。尿素被土壤中某些細(xì)菌分解成NH3,再被轉(zhuǎn)化為NO3-、NH4+等被植物吸收。這些細(xì)菌之所以能分解尿素，是因?yàn)槟芎铣呻迕福瑏?lái)催化尿素分解。1.你如何設(shè)計(jì)培養(yǎng)基配方，將土壤稀釋液中能分解尿素的細(xì)菌分離出來(lái)？2.該培養(yǎng)基與普通培養(yǎng)基有哪些共同點(diǎn)和不同點(diǎn)？培養(yǎng)基添加尿素作唯一氮源，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素、缺乏氮源而不能生長(zhǎng)發(fā)育繁殖。見(jiàn)P18頁(yè)培養(yǎng)基配方牛肉膏5.0g蛋白胨10.0gNaCl5.0g瓊脂20.0g蒸餾水定容到1000mlKH2PO41.4gNaH2PO42.1gMgSO4·7H2O0.2g葡萄糖10.0g尿素CO(NH2)21.0g瓊脂15.0g蒸餾水定容到1000ml培養(yǎng)基一培養(yǎng)基二①兩種培養(yǎng)基中共有哪些成分？碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、水培養(yǎng)基一的碳源為_(kāi)______，氮源為_(kāi)______；培養(yǎng)基二的碳源為_(kāi)______，氮源為_(kāi)______；牛肉膏蛋白胨葡萄糖尿素②從用途上來(lái)講，哪個(gè)屬于選擇培養(yǎng)基？將得到何種細(xì)菌？培養(yǎng)基二屬于選擇培養(yǎng)基；其可獲得能分解尿素的微生物。1微生物的選擇培養(yǎng)(1)選擇培養(yǎng)基：允許特定種類的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)___________其他種類微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基。(2)稀釋涂布平板法：將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋后，將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基表面，進(jìn)行培養(yǎng)。①系列稀釋操作系列稀釋：移液管需要經(jīng)過(guò)滅菌。操作時(shí)，試管口和移液管應(yīng)離酒精燈火焰1～2cm。操作過(guò)程如下：抑制或阻止在火焰旁將10g土樣加入盛有90mL無(wú)菌水的錐形瓶中，充分搖勻，制成菌液。②涂布平板操作序號(hào)圖示操作1取0.1mL菌液，滴加到__________2將涂布器浸在盛有_____的燒杯中3將沾有少量酒精的涂布器在火焰上灼燒，待酒精燃盡、涂布器冷卻后，再進(jìn)行涂布4用涂布器將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面。涂布時(shí)可轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)皿，使菌液__________培養(yǎng)基表面酒精涂布均勻③培養(yǎng)：待涂布的菌液被培養(yǎng)基吸收后，將平板______，放入30～37℃的____________中培養(yǎng)1～2d。倒置恒溫培養(yǎng)箱（1）顯微鏡直接計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)原理利用特定的細(xì)菌計(jì)數(shù)板或_____________，在顯微鏡下觀察、計(jì)數(shù)，然后再計(jì)算一定體積的樣品中微生物的數(shù)量?jī)?yōu)點(diǎn)是一種常用的、________的測(cè)定微生物數(shù)量的方法缺點(diǎn)統(tǒng)計(jì)的結(jié)果一般是死菌數(shù)和活菌數(shù)的總和血細(xì)胞計(jì)數(shù)板快速直觀2微生物的數(shù)量測(cè)定2微生物的數(shù)量測(cè)定計(jì)數(shù)原理當(dāng)樣品的_____________時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)_______，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的_______，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌計(jì)數(shù)標(biāo)準(zhǔn)為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)為_(kāi)_______的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)計(jì)數(shù)方法通常選用一定稀釋范圍的樣品液進(jìn)行培養(yǎng)，以保證獲得菌落數(shù)為_(kāi)________、適于計(jì)數(shù)的平板。在同一稀釋度下，應(yīng)至少對(duì)3個(gè)平板進(jìn)行重復(fù)計(jì)數(shù)，然后求出________稀釋度足夠高單菌落菌落數(shù)30～30030～300平均值（2）稀釋涂布平板法(3)土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)微生物的計(jì)數(shù)方法比較內(nèi)容直接計(jì)數(shù)法間接計(jì)數(shù)法主要用具顯微鏡、細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板涂布器計(jì)數(shù)依據(jù)細(xì)菌個(gè)數(shù)培養(yǎng)基上菌落數(shù)優(yōu)點(diǎn)計(jì)數(shù)方便、操作簡(jiǎn)單計(jì)數(shù)的是活菌計(jì)算公式每毫升原液含菌株數(shù)＝每小格平均菌株數(shù)×400×104×稀釋倍數(shù)每克樣品中的菌株數(shù):(C÷V)×M

C:某稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù);V:涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積(mL);M:稀釋倍數(shù)缺點(diǎn)不能區(qū)分死菌與活菌當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)菌體連在一起時(shí),平板上觀察到的只是一個(gè)菌落結(jié)果比實(shí)際值偏大比實(shí)際值偏小歸納總結(jié)方法平板劃線法稀釋涂布平板法純化原理接種工具單菌落的獲得用途接種效果圖相同點(diǎn)通過(guò)連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散將菌液進(jìn)行一系列的等比稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)，以得到單菌落。接種環(huán)涂布器從最后劃線區(qū)挑取稀釋度合適的整個(gè)平板上都可找到單菌落分離純化菌種，獲得單菌落①分離純化菌種，獲得單菌落②用于計(jì)數(shù)①都能分離純化菌種

②都在固體培養(yǎng)基上進(jìn)行的平板劃線法vs稀釋涂布平板法歸納總結(jié)5．(2022·菏澤二模)精氨酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型谷氨酸棒狀桿菌缺乏將鳥氨酸轉(zhuǎn)化為精氨酸的酶，不能在缺少精氨酸的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，但可作為鳥氨酸發(fā)酵的優(yōu)良菌種。如圖為野生型谷氨酸棒狀桿菌經(jīng)誘變獲得精氨酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型谷氨酸棒狀桿菌并進(jìn)行篩選的過(guò)程示意圖，過(guò)程②將紫外線照射處理的菌液接種在某培養(yǎng)基上。培養(yǎng)至菌落不再增加時(shí)，平板上的菌落如圖甲所示。過(guò)程③向培養(yǎng)基中添加某種物質(zhì)繼續(xù)培養(yǎng)得到如圖乙所示平板。下列敘述正確的是

(

)A．紫外線照射可導(dǎo)致谷氨酸棒狀桿菌發(fā)生基因突變或染色體變異B．圖乙中菌落B為精氨酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型谷氨酸棒狀桿菌C．過(guò)程③向培養(yǎng)基中添加的某種物質(zhì)是谷氨酸D．過(guò)程②所用培養(yǎng)基是一種鑒別培養(yǎng)基解析：谷氨酸棒狀桿菌為原核生物，其細(xì)胞中不含染色體，因此不會(huì)發(fā)生染色體變異，A錯(cuò)誤；與圖甲平板相比，圖乙平板上菌落多，說(shuō)明過(guò)程③向培養(yǎng)基中添加的某種物質(zhì)是精氨酸，新出現(xiàn)的菌落為精氨酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型谷氨酸棒狀桿菌，B正確，C錯(cuò)誤；過(guò)程②所用培養(yǎng)基缺少精氨酸，只有能產(chǎn)生精氨酸的微生物才能生存，因此該培養(yǎng)基是一種選擇培養(yǎng)基，D錯(cuò)誤。答案：B

6．下表為某公司研發(fā)的一種培養(yǎng)大腸桿菌的培養(yǎng)基配方：請(qǐng)結(jié)合所學(xué)知識(shí)分析，下列相關(guān)敘述不正確的是

(

)A．根據(jù)用途劃分，該培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基B．若要分離能分解尿素的細(xì)菌，需將蛋白胨換成尿素C．若還需鑒定分解尿素的細(xì)菌，需將伊紅美藍(lán)換成酚紅D．該培養(yǎng)基中蛋白胨只是提供了氮源成分蛋白胨乳糖蔗糖K2HPO4顯色劑(伊紅美藍(lán))瓊脂含量10.0g5.0g5.0g2.0g0.2g12.0g將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1000mL答案：D

7．用稀釋涂布平板法測(cè)定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)，在對(duì)應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中，對(duì)該實(shí)驗(yàn)有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是

(

)A．涂布了三個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是210、240和250，取平均值233B．涂布了一個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是230C．設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)的主要目的是排除實(shí)驗(yàn)組中非測(cè)試因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度D．統(tǒng)計(jì)某一稀釋度的5個(gè)平板的菌落數(shù)依次為M1、M2、M3、M4、M5，取其平均值作為該樣品菌落數(shù)估計(jì)值解析：該實(shí)驗(yàn)中，至少要涂布3個(gè)平板，選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，求平均值，A、D正確；實(shí)驗(yàn)應(yīng)設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)和重復(fù)實(shí)驗(yàn)，排除實(shí)驗(yàn)組中非測(cè)試因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度，B錯(cuò)誤，C正確。答案：B

微生物的選擇培養(yǎng)和計(jì)數(shù)考點(diǎn)一培養(yǎng)基及微生物的純培養(yǎng)技術(shù)目錄CONTENTS考點(diǎn)二重溫高考真題演練1.(2021·山東，14)解脂菌能利用分泌的脂肪酶將脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收利用。脂肪酸會(huì)使醇溶青瓊脂平板變?yōu)樯钏{(lán)色。將不能直接吸收脂肪的甲、乙兩種菌分別等量接種在醇溶青瓊脂平板上培養(yǎng)。甲菌菌落周圍呈現(xiàn)深藍(lán)色，乙菌菌落周圍不變色，下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是A.甲菌屬于解脂菌B.實(shí)驗(yàn)中所用培養(yǎng)基以脂肪為唯一碳源C.可將兩種菌分別接種在同一平板的不同區(qū)域進(jìn)行對(duì)比D.該平板可用來(lái)比較解脂菌分泌脂肪酶的能力√2.(2021·山東，20)含硫蛋白質(zhì)在某些微生物的作用下產(chǎn)生硫化氫導(dǎo)致生活污水發(fā)臭。硫化氫可以與硫酸亞鐵銨結(jié)合形成黑色沉淀。為探究發(fā)臭水體中甲、乙菌是否產(chǎn)生硫化氫及兩種菌的運(yùn)動(dòng)能力，用穿刺接種的方法，分別將兩種菌接種在含有硫酸亞鐵銨的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，如圖所示。若兩種菌繁殖速度相等，下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是A.乙菌的運(yùn)動(dòng)能力比甲菌強(qiáng)B.為不影響菌的運(yùn)動(dòng)需選用液體培養(yǎng)基C.該實(shí)驗(yàn)不能比較出兩種菌產(chǎn)生硫化氫的量D.穿刺接種等接種技術(shù)的核心是防止雜菌的污染√3.(2020·江蘇，19)為純化菌種，在鑒別培養(yǎng)基上劃線接種纖維素降解細(xì)菌，培養(yǎng)結(jié)果如圖所示。下列敘述正確的是A.倒平板后需間歇晃動(dòng)，以保證表面平整B.圖中Ⅰ、Ⅱ區(qū)的細(xì)菌數(shù)量均太多，應(yīng)從Ⅲ區(qū)挑取單菌落C.該實(shí)驗(yàn)結(jié)果因單菌落太多，不能達(dá)到菌種純化的目的D.菌落周圍的纖維素被降解后，可被剛果紅染成紅色√4.(2020·江蘇，31)產(chǎn)脂肪酶酵母可用于含油廢水處理。為篩選產(chǎn)脂肪酶酵母菌株，科研人員開(kāi)展了相關(guān)研究。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)常規(guī)微生物實(shí)驗(yàn)中，下列物品及其滅菌方法錯(cuò)誤的是

(填編號(hào))。編號(hào)①②③④物品培養(yǎng)基接種環(huán)培養(yǎng)皿涂布器滅菌方法高壓蒸汽火焰灼燒干熱臭氧④(2)稱取1.0g某土壤樣品，轉(zhuǎn)入99mL無(wú)菌水中，制備成菌懸液，經(jīng)_____

后，獲得細(xì)胞密度不同的菌懸液。分別取0.1mL菌懸液涂布在固體培養(yǎng)基上，其中10倍稀釋的菌懸液培養(yǎng)后平均長(zhǎng)出了46個(gè)酵母菌落，則該樣本中每克土壤約含酵母菌

個(gè)。梯度稀釋4.6×105(或460000)(3)為了進(jìn)一步提高酵母菌產(chǎn)酶能力，對(duì)分離所得的菌株，采用射線輻照進(jìn)行

育種。將輻照處理后的酵母菌涂布在以

為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時(shí)間后，按照菌落直徑大小進(jìn)行初篩，選擇直徑____的菌落，純化后獲得A、B兩突變菌株。誘變脂肪較大(