fish應(yīng)用技術(shù)簡介

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Situ

Hybridization技術(shù)

，被廣泛應(yīng)用到基因圖譜研究

，染色體變異序

E列識別（腫瘤診斷

，遺傳病診斷

，產(chǎn)前診斷〉等研

！究「h。

｜。利用的是DNA的結(jié)構(gòu)特性和免疫熒光標(biāo)記技術(shù)

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Hybridization令

是一種利用熒光分子去標(biāo)記基因或者染色體片段的

技術(shù)

，被廣泛應(yīng)用到基因圖譜研究

，染色體變異序

列識別

（腫瘤診斷，遺傳病診斷

F

產(chǎn)前診斷〉

等研究中。令

利用的是DNA的結(jié)構(gòu)特性和免疫熒光標(biāo)記技術(shù)

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脫氧核糖核酸GENE

遺傳子

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DNA鏈，，’1含有大量

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片斷2.

DNA鏈形成染色體3.

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總盞是非11同的－般將細(xì)胞內(nèi)

副主信息的攜帶者；染色體m包含的ONA

包：本稱為基肉組（genome)納民i科技l、圃，同t什么是GENE

?DNA

脫紙核糖核酸GENE

遺傳子

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DNA鏈形成染色體3.

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裂別色細(xì)個上

人素差染個一性的兩同特胞成從腫細(xì)裂是物（

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通復(fù)兩制致

但萬復(fù)致納Ji前科技納

喻科技f納瑞科技遺傳和變異與我們的關(guān)系心

變異令

遺傳令

子代繼承父代的特征

，

0

物種的進(jìn)化和淘汰保持物種的穩(wěn)定性令

但同時也會把不利的基因保留下來々人類基因組計劃是人類

企圖認(rèn)識自身的龐大科

研計劃。希望揭示人類

的秘密)飛。腫瘤等備種疾病的產(chǎn)生

、令

都和DNA的變異有直接或者間接的變化心

如何鑒別這種變異的發(fā)

生，是臨床的一個重要

目標(biāo)納J1M科技納L賀科技FISH是怎么使用的·:· FISH技術(shù)需要準(zhǔn)備

一小段單

鏈DNA序列

，稱作Probe

C

探

針）

。令 這段探專i二與研究者研究的

I標(biāo)DNA廳，州是互

補(bǔ)的

。F 通過

DNA雜交技術(shù)，將這段

探針與互補(bǔ)的染色體結(jié)

合。

由于探針上標(biāo)記了特殊顏包的熒光，使得研究者可以通過熒光顯微鏡

，找到被標(biāo)記

上探針的染色體

。進(jìn)而可

以

確定該序列在染色體

上的定

位?！薄瓏崱?FISH技術(shù)的應(yīng)用根據(jù)探針的不同

，大體分為三類應(yīng)用1.

特別位點探針2. 端粒或者著絲粒重復(fù)探針3. 全染色體探針叫l(wèi)、1．‘‘納

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準(zhǔn)備特定序列的探針

，與標(biāo)

本雜交后

，通過特異的熒光信號確定該序列在染色體上

的定位各

用于功能基囚的染色體定

位，或者某些遺傳?。[瘤

的診斷。納

命科以端?；蛘咧z粒重復(fù)探針令 利用某種染色體端粒或者著絲粒上的重復(fù)序列，設(shè)計此染色體的特征探

針，可以明確找到某特定染色體。爭

應(yīng)用于某些遺傳病的診斷納L賀科技圖例：用不｜叫顏巴探針標(biāo)記出的人

才

7號染色體全染色體探針條

是一組探針的組合應(yīng)用。會

針對每條染色體的特征序列設(shè)計不同的探針

，每種探針

標(biāo)記上不同的顏色。條

同時雜交后

，通過圖像的光不同的顏色。各

比傳統(tǒng)的Karyotyping能夠

提供更多的信息公

用于染色體缺失

，易位等異

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是一組探針的組合應(yīng)用。爭

針對每條染色體的特征序列設(shè)計不同的探針，每種探針

標(biāo)記上不同的顏色。爭

同時雜交后，通過圖像的光i普分析給每個染色體標(biāo)記

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，易位等異

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｜bMFISH

或者SKY令

屬于前述的“全染色體探針

”令

MFISH-Multi-color

FISH令

SKY-

Spectral

Karyotype光譜染色體組型分

’析令

將人的23對染色體以不同的熒光顏色標(biāo)記

出

來一可以明顯的觀察到DNA序列的易位或者

缺失

。需要軟件配合。納J1M科技‘一’－÷--－

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左

圖為正常人的血細(xì)胞SKY圖令

右圖為癌細(xì)胞

，可以看到大量的

DNA易位和失常納瑞科技Fiber

FISH令

在FISH基礎(chǔ)上發(fā)展出

來的更高分辨率的技

術(shù)。將染色體拉伸為絲

狀，提高堿基對的分

辨率到

1-2K

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來的更高分辨率的技

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供用戶邊擇實驗室步驟

熒光顯微鏡觀察拍照

專門的染色體組型分析軟件，

M-FISH或者SKY更需要專門的分析軟件叮正噸。A斗探針的準(zhǔn)備和標(biāo)記；

探針和染色體的雜交

；

信號檢測：

雜交信號與分帶染色體的比較。43叮L句JA件EFMH？nT工『忖？”千MH？字”

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專門的染色體組型分析軟件

，M-FISH或者SKY更需要專門的分析軟件叮L句JA斗探針的準(zhǔn)備和標(biāo)記

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信號檢測

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::我們提供什么（

1

)1.

熒光顯微鏡－

CUBE要根據(jù)肘戶的探針選常見熒光色素：，而

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·

·『

最大吸收光譜490-495nm

，最大發(fā)射光譜520-530nm

，呈

明亮的黃綠色熒光會

囚甲基異硫氨酸羅丹明（

TRITC

）

最大吸收光譜

550nm

，最

大發(fā)射光譜600-620nm

，呈現(xiàn)橙紅色熒光

，用于雙標(biāo)記示蹤

技術(shù)會

藻紅蛋白（

PE）

最大吸收光譜490-560nm

，最大發(fā)射光譜575nm

，星紅色熒光

，雙標(biāo)記爭

7

氨基

4

甲基香豆素（AMC

)

最大吸收光譜

354nm，最

大發(fā)射光譜430nm

，呈藍(lán)色熒光

，雙、多標(biāo)記令

鏘系元素銷（

Eu3＋）、夠（Sm3＋）、鎖（Tb3＋）等，在

紫外光

C

340nm

）激發(fā)下，發(fā)射出高強(qiáng)度熒光（

613nm

)

,持續(xù)時間較長（

10-1000

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熒光顯微鏡一CUBE要根據(jù)用戶

的探針選常見熒光色素

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最大吸收光譜490-495nm

，最大發(fā)射光譜520-530nm

，呈明亮的黃綠色熒光條

囚甲基異硫氨酸羅丹明（

TRITC

）

最大吸收光譜

550nm

，最

大發(fā)射光譜600-620nm

，果現(xiàn)橙紅色熒光，用于雙標(biāo)記示蹤

技術(shù)條

藻紅蛋白

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）

最大吸收光譜490-560nm

，最大發(fā)射光譜575nm

，皇紅色熒光

，雙標(biāo)記會 7

氨基

4

甲基香豆素

（AMC

)

最大吸收光譜354nm

，最

大發(fā)射光譜430nm

，墾荒色熒光

，雙、多標(biāo)記令

鏘系元素錯

C

Eu3＋）、夠

C

Sm3＋）、鎖

C

Tb3＋）等，在

紫外光

C

340nm）激發(fā)下，發(fā)射出高強(qiáng)度熒光

C

613nm

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,持續(xù)時間較長（

10-1000

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｜b我們提供什么

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CCD和軟件嗡黑

白CCD

C

QICAM

、EXI、RETIGA系列〉

d高靈敏度

，制冷CCD更適合

d分辨率不是關(guān)鍵

，140萬左右足夠

咱不需要Karyotype

的應(yīng)用可

以提供IPP/IPE『臺需要Karyotype和M-FISH,SKY, CGH的用戶需要與其他專業(yè)軟件廠家合作， OLYMPUS不能提功納J1M科技ι4『..’甸回’『．『『圃”『．．-‘-一－‘÷一、．‘’‘回F『1、崎．啕l我們提供什么。）？令

物鏡和聚光鏡40X

,

100X推薦使用

UPLSAPO

的汕鏡6其他低倍可以使用

UPLFLN系列的物鏡6如果要作明場的

Karyotype

，需要配高數(shù)值孔徑的聚光鏡

C

U-AAC

,

NA1.4

）也配上，最好汕式］頁透鏡納J

科技‘圃，烏龜圃，．．Fish軟件廠家Lucia納T擊科技Fish軟件廠家‘納Jj;科技·l‘回國·．一’

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高校／研究所用戶喝細(xì)）町遺傳學(xué)附基因組學(xué)…可能

：是目標(biāo)用戶。令

｜｜伍床用戶喝IVF的用戶，ICSI用戶等搞人工輔助生殖的單位

，都有可

能開展產(chǎn)前診斷的項目

。應(yīng)該高度關(guān)注

！咱腫瘤醫(yī)院，或者腫瘤科

，也可能開展臨床檢驗或者科研

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｜｜伍床用戶喝IVF的用戶，ICSI用戶等搞人工輔助生殖的單位

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，都有可

能開展產(chǎn)前診斷的項目

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：是目標(biāo)用戶。令

｜｜伍床用戶喝IVF的用戶，ICSI用戶等搞人工輔助生殖的單位

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能開展產(chǎn)前診斷的項目