第二章可見紫外分光光度法春

第二章可見紫外分光光度法春第一頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日第二章光譜分析法概論主講教師高金波第二頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日本章主要介紹:光學(xué)分析法定義光學(xué)分析的三個主要過程電磁輻射和電磁波譜電磁輻射與物質(zhì)的相互作用光學(xué)分析法的分類第三頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日

基于物質(zhì)發(fā)射的電磁輻射或物質(zhì)與電磁輻射相互作用后產(chǎn)生的輻射信號或發(fā)生的信號變化來測定物質(zhì)的性質(zhì)、含量和結(jié)構(gòu)的一類儀器分析法。一、定義（光學(xué)分析法）第四頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日1.

能源（光源）提供能量2.能量與物質(zhì)相互作用3.產(chǎn)生被檢測的信號二、光學(xué)分析的三個主要過程第五頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日1.電磁輻射—電磁波（光是其中的一部分）

它是一種以極高的速度傳播的光子流在傳播過程中不需要任何的物質(zhì)作為傳播媒介

它具有波動性和粒子性。三、電磁輻射和電磁波譜第六頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日(1)波動性表現(xiàn)在:

每種電磁輻射都有確定不變的頻率(2)粒子性表現(xiàn)在:

每個粒子都具有能量E第七頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日2.電磁波譜:電磁輻射按波長順序排列而成γ射線→x

射線→紫外光→可見光→紅外光→微波→無線電波

高能輻射區(qū)γ射線能量最高，可以引起核能級躍遷

χ射線可以引起內(nèi)層電子能級的躍遷光學(xué)光譜區(qū)紫外光可以引起原子和分子外層可見光電子能級的躍遷紅外光可以引起分子振動和轉(zhuǎn)動能級的躍遷波譜區(qū)微波分子轉(zhuǎn)動能級及電子自旋能級躍遷無線電波以引起原子核自旋能級的躍遷五、光學(xué)分析法分類第八頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日四、電磁輻射與物質(zhì)的相互作用五、光學(xué)分析法分類第九頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日光學(xué)分析法光譜分析法非光譜分析法原子光譜分析法分子光譜分析法原子吸收光譜原子發(fā)射光譜原子熒光光譜X射線熒光光譜折射法圓二色性法X射線衍射法干涉法旋光法紫外光譜法紅外光譜法分子熒光光譜法分子磷光光譜法核磁共振波譜法第十頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日光譜分析法吸收光譜法發(fā)射光譜法原子光譜法分子光譜法原子發(fā)射原子吸收原子熒光X射線熒光原子吸收紫外可見紅外可見核磁共振紫外可見紅外可見分子熒光分子磷光核磁共振化學(xué)發(fā)光原子發(fā)射原子熒光分子熒光分子磷光X射線熒光化學(xué)發(fā)光第十一頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日第十章可見-紫外吸收光度法可見光區(qū)和紫外光區(qū)的劃分:200~400nm為紫外光區(qū)400~760nm為可見光區(qū)可見紫外分光光度法的定義根據(jù)物質(zhì)的分子對200~760nm這一光區(qū)電磁輻射的吸收特性進(jìn)行的物質(zhì)成分分析與分子結(jié)構(gòu)分析的方法第十二頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日第一節(jié)紫外-可見分光光度法

的基本原理和概念轉(zhuǎn)動能級差0.005~0.05V振動能級差0.05~1eV外層價電子能級差1~20eV電子光譜250~25m25000~1250nm1250~60nm吸收光譜分子光譜第十三頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日一、電子躍遷類型預(yù)備知識：價電子：σ電子→飽和的化合物或基團(tuán)

π電子→不飽和的化合物或基團(tuán)

n電子→含有雜質(zhì)原子的基團(tuán)軌道：電子圍繞原子或分子運動的幾率

軌道不同，電子所具有能量不同第十四頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日圖示b1SH1SH*成鍵軌道與反鍵軌道：第十五頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日

一、電子躍遷類型：1.σ→σ*躍遷：飽和烴（甲烷，乙烷）E很高，λ<150nm（遠(yuǎn)紫外區(qū)）2.π→π*躍遷：不飽和基團(tuán)（C＝C，C＝O）E較小，λ~200nm體系共軛，E更小，λ更大第十六頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日一、電子躍遷類型：3.n→π*躍遷：含雜原子不飽和基團(tuán)（C≡NC＝O）E最小，λ200~400nm（近紫外區(qū)）4.n→σ*躍遷：含雜原子飽和基團(tuán)（—OH，—NH2

，—X，—S）E較大，λ150~250nm按能量大小：σ→σ*>n→σ*>π→π*>n→π*第十七頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日續(xù)前結(jié)論：紫外光譜電子躍遷類型：n→π*躍遷

π→π*躍遷飽和化合物無紫外吸收電子躍遷類型與分子結(jié)構(gòu)及存在基團(tuán)有密切聯(lián)系根據(jù)分子結(jié)構(gòu)→推測可能產(chǎn)生的電子躍遷類型；根據(jù)吸收譜帶波長和電子躍遷類型→推測分子中可能存在的基團(tuán)（分子結(jié)構(gòu)鑒定）第十八頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日二、紫外-可見法相關(guān)的基本概念1．吸收光譜（吸收曲線）：不同波長光對樣品作用不同，吸收強(qiáng)度不同

以波長λ—吸光度A作圖，所描繪的曲線為~2．吸收光譜特征：定性依據(jù)吸收峰→λ最大吸收谷→λ最小肩峰→λsh

末端吸收→靠近200nm的呈現(xiàn)第十九頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日圖示第二十頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日3．生色團(tuán)（發(fā)色團(tuán)）：

能吸收紫外-可見光的基團(tuán)有機(jī)化合物：具有不飽和鍵和未成對電子的基團(tuán)具n電子和π電子的基團(tuán)產(chǎn)生n→π*躍遷和π→π*躍遷

E較低例：C＝C；C＝O；C＝N；—N＝N—，

—NO2等第二十一頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日續(xù)前本身無紫外吸收，但可以使生色團(tuán)吸收峰加強(qiáng)，同時使吸收峰長移的基團(tuán)有機(jī)物：連有雜原子的飽和基團(tuán)例：—OH，—OR，—NH2，—SR，—X4．助色團(tuán)第二十二頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日續(xù)前5．紅移和藍(lán)移：

由于化合物結(jié)構(gòu)變化（共軛、引入助色團(tuán)取代基）或采用不同溶劑后吸收峰位置向長波方向的移動，叫紅移（長移）吸收峰位置向短波方向移動，叫藍(lán)移（紫移，短移）第二十三頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日續(xù)前6．增色效應(yīng)和減色效應(yīng)

結(jié)構(gòu)發(fā)生變化時

增色效應(yīng)：吸收強(qiáng)度增強(qiáng)的效應(yīng)

減色效應(yīng)：吸收強(qiáng)度減小的效應(yīng)7．強(qiáng)帶和弱帶：

ε>104→強(qiáng)帶

ε<102→弱帶第二十四頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日三、吸收帶類型和分子結(jié)構(gòu)的關(guān)系1．R帶：由含雜原子的不飽和基團(tuán)的

n→π*躍遷產(chǎn)生C＝O；C＝N；—N＝N—，—NO,—NO2特點：E小，λmax250~400nm，ε最大<100溶劑極性↑，λ最大↓→藍(lán)移（短移）吸收峰的位置第二十五頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日三、吸收帶類型和分子結(jié)構(gòu)的關(guān)系2．K帶：由共軛雙鍵的π→π*躍遷產(chǎn)生特點：λ最大>200nm，ε最大>104(—CH＝CH—)n

，—CH＝C—CO—共軛體系增長，λ最大↑→紅移，ε最大↑溶劑極性↑，λ最大↑→紅移第二十六頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日續(xù)前3．B帶：由π→π*躍遷產(chǎn)生芳香族化合物的主要特征吸收帶λ最大

=254nm，寬帶，具有精細(xì)結(jié)構(gòu)；ε最大=200極性溶劑中，或苯環(huán)連有取代基，其精細(xì)結(jié)構(gòu)消失三、吸收帶類型和分子結(jié)構(gòu)的關(guān)系精細(xì)結(jié)構(gòu)第二十七頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日圖示第二十八頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日續(xù)前4．E帶：由苯環(huán)的環(huán)形共軛系統(tǒng)中的π→π*躍遷產(chǎn)生的芳香族化合物的特征吸收帶

見圖E1180nmε最大>104（常觀察不到）E2200nmε最大=7000強(qiáng)吸收苯環(huán)有發(fā)色團(tuán)取代且與苯環(huán)共軛時，E2

帶與K帶合并一起紅移（長移）。三、吸收帶類型和分子結(jié)構(gòu)的關(guān)系第二十九頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日圖示第三十頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日圖示第三十一頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日*下列化合物K帶的吸收波長最大的是：A：H2C=CH-CH=CH2

；B：H2C=CH2；C：H2C=CH-CH=CH-CH=CH2；D：H2C=CH-C=OR帶是由_________躍遷引起，其特征是波長_______。K帶是由_________躍遷引起，其特征是波長_______。*丙酮能吸收280nm，187nm和154nm的紫外光，其中最長波長的吸收所對應(yīng)的電子躍遷類型為___，該吸收帶為___帶。*符合比耳定律的有色溶液稀釋時，其吸收曲線的最大吸收峰

A．上移；B．下移；C．左移；D．右移*在分光光度法中，吸收曲線指的是：A.A一c曲線；B.A一λ曲線；C.T一c曲線；D.A一T曲線練習(xí)：第三十二頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日續(xù)前1．溶劑效應(yīng)：對λ最大影響：

n-π*躍遷：溶劑極性↑，λ最大↓藍(lán)移π-π*躍遷：溶劑極性↑，λ最大↑紅移見圖解對吸收光譜精細(xì)結(jié)構(gòu)影響

溶劑極性↑，苯環(huán)精細(xì)結(jié)構(gòu)消失溶劑的選擇——極性；純度高；截止波長<λ最大2．pH值的影響：影響物質(zhì)存在型體，影響吸收波長四、影響吸收帶位置的因素：第三十三頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日圖示躍遷類型 正己烷氯仿 甲醇 水→*230 238 237 243n→* 329 315 309 305第三十四頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日五、郎伯比爾定律假設(shè)一束平行單色光通過一個吸光物體（一）lambert-beer第三十五頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日1．Lamber-beer定律的適用條件（前提）

入射光為單色光溶液是稀溶液2．該定律適用于固體、液體和氣體樣品3．在同一波長下，各組分吸光度具有加和性

應(yīng)用：多組分測定討論：第三十六頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日

討論:4.C與A的關(guān)系(成正比關(guān)系)

C=C0，A=A0

；C=2C0，A=2A0；

C=1/2C0

，A=1/2A0

；5.C與T的關(guān)系(指數(shù)關(guān)系)C=C0

，T=T0

；C=2C0，T=T02

；

C=1/2C0，T=T01/2=

；第三十七頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日(二)吸光系數(shù)****1.物理意義：

λ一定，單位濃度、單位厚度的吸光度

討論：1）E=f（組分性質(zhì)，溫度，溶劑，λ）當(dāng)組分性質(zhì),溫度和溶劑一定，E=f（λ）2）不同物質(zhì)在同一波長下E可能不同（選擇性吸收-）同一物質(zhì)在不同波長下,E

一定不同3）

E↑，物質(zhì)對光吸收能力↑,測定靈敏度↑4）定性、定量依據(jù)第三十八頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日續(xù)前2．兩種表示法：

1）摩爾吸光系數(shù)ε：在一定λ下，C=1mol/L，L=1cm時的吸光度

2）百分含量吸光系數(shù)/比吸光系數(shù)：在一定λ下，C=1g/100ml，L=1cm時的吸光度

3）兩者關(guān)系3.吸光系數(shù)能否直接測得？不能？？第三十九頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日六、偏離比爾定律的因素（一）化學(xué)因素（二）光學(xué)因素

1.非單色光

2.非平行光

3.雜散光

4.散射和反射的影響第四十頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日（一）化學(xué)因素Beer定律適用的另一個前提——稀溶液因濃度的改變使C與A關(guān)系偏離Beer定律離解、聚合（締合）、與溶劑作用第四十一頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日（二）光學(xué)因素1．非單色光的影響非單色光是指含有二種或兩種以上波長的光第四十二頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日續(xù)前第四十三頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日續(xù)前討論：

入射光的譜帶寬度嚴(yán)重影響吸光系數(shù)和吸收光譜形狀為什么測定波長常選擇在吸收峰處？E1>E2，A值減少，產(chǎn)生負(fù)誤差;E2>E1，A值增大，產(chǎn)生誤差第四十四頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日續(xù)前2．雜散光的影響：雜散光是指從單色器分出的光不在入射光譜帶寬度范圍內(nèi)，與所選波長相距較遠(yuǎn)雜散光來源：儀器本身缺陷；光學(xué)元件污染造成雜散光可使吸收光譜變形，吸光度變值3．反射光和散色光的影響：一般可用空白對比校正消除4．非平行光的影響：比色池要垂直放置，不同儀器測定A值不同。第四十五頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日四、透光率的測量誤差——ΔT影響測定結(jié)果的相對誤差兩個因素：T和ΔTΔT影響因素：儀器噪音

1）暗噪音

2）訊號噪音第四十六頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日續(xù)前1）暗噪音——與檢測器和放大電路不確切性有關(guān)與光訊號無關(guān)第四十七頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日續(xù)前2）訊號噪音——與光訊號有關(guān)表明測量誤差較小的范圍一直可延至較高吸光度區(qū)，對測定有利第四十八頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日第二節(jié)可見-紫外分光光度計分光光度計構(gòu)成的主要部件分光光度計的類型：第四十九頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日第二節(jié)紫外-可見分光光度計光路示意圖0.575光源單色器吸收池檢測器放大顯示器第五十頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日第二節(jié)紫外-可見分光光度計一、主要部件1.光源：用于提供足夠強(qiáng)度和穩(wěn)定的連續(xù)光譜。分光光度計中常用的光源有熱輻射光源

(鎢燈)和氣體放電光源

(氫燈)兩類。。（1）鎢燈或鹵鎢燈

在350nm~2500nm連續(xù)用于可見光區(qū)（2）氫燈或氘燈

在150nm~400nm連續(xù)用于紫外光區(qū)配穩(wěn)壓器配穩(wěn)流器第五十一頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日第二節(jié)紫外-可見分光光度計2.單色器：單色器是把復(fù)合光分散后，能獲得單色光的裝置。

五個部分作用：將光源發(fā)出的復(fù)色光按波長順序分離成單色光。組成：狹縫2、準(zhǔn)直鏡2、色散元件(棱鏡、光柵)。第五十二頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日單色器光路示意圖入射狹縫準(zhǔn)直透鏡棱鏡聚焦透鏡出射狹縫白光紅紫λ1λ2800600500400單色器的核心部分是色散元件，起分光的作用。第五十三頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日單色器光路示意圖第五十四頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日3．吸收池：玻璃——能吸收紫外線光，僅適用于可見光區(qū)石英——不能吸收紫外光，適用于紫外和可見光區(qū)要求：匹配性（對光的吸收和反射應(yīng)一致）第五十五頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日4．檢測器：將光信號轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘柕难b置光電池光電管光電倍增管二極管陣列檢測器5．記錄裝置：訊號處理和顯示系統(tǒng)第五十六頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日

1、光電池：用半導(dǎo)體材料制成的，用得最多的是硒光電池。其結(jié)構(gòu)和作用原理為：硒光電池第五十七頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日光電管：它是在抽成真空或充有惰性氣體的玻璃或石英泡內(nèi)裝上2個電極構(gòu)成，其結(jié)構(gòu)如圖：2.光電管1234第五十八頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日紅敏管625-1000nm藍(lán)敏管200-625nm光電管第五十九頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日光電倍增管：它是一個非常靈敏的光電器件，可以把微弱的光轉(zhuǎn)換成電流其靈敏度比前2種都要高得多。它是利用九次電子發(fā)射以放大光電流，3.光電倍增管：第六十頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日光電倍增管1個光電子可產(chǎn)生106

～107

個電子第六十一頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日訊號處理及顯示系統(tǒng)放大器表頭顯示熒屏顯示數(shù)字顯示第六十二頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日二、分光光度計的類型：第六十三頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日二、分光光度計的類型：（一）單光束分光光度計：0.575光源單色器吸收池檢測器顯示第六十四頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日特點：使用時來回拉動吸收池

→移動誤差對光源要求高比色池配對單光束分光光度計（751）：第六十五頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日（二）單波長雙光束分光光度計比值光源單色器吸收池檢測器顯示光束分裂器第六十六頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日雙光束分光光度計：特點：不用拉動吸收池，可以減小移動誤差對光源要求不高可以自動掃描吸收光譜第六十七頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日光源單色器單色器檢測器切光器狹縫吸收池（三）雙光束雙波長分光光度計：第六十八頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日3．雙波長分光光度計特點：利用吸光度差值定量消除干擾和吸收池不匹配引起的誤差第六十九頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日第三節(jié)紫外-可見分光光度分析方法一、定性分析二、純度檢測三、單組份的定量分析****四、多組分的定量分析-同時測定法*五、結(jié)構(gòu)分析六、比色分析法*第七十頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日一、定性分析定性鑒別的依據(jù)→吸收光譜吸收光譜的形狀吸收峰的數(shù)目吸收峰的位置（波長）吸收峰的強(qiáng)度（相應(yīng)的吸光系數(shù)）第七十一頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日續(xù)前1．對比吸收光譜的特征值第七十二頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日續(xù)前2．對比吸光度或吸光系數(shù)的比值例：第七十三頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日續(xù)前3．對比吸收光譜的一致性同一測定條件下，與標(biāo)準(zhǔn)對照物譜圖或標(biāo)準(zhǔn)譜圖進(jìn)行對照比較第七十四頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日續(xù)前（二）純度檢查和雜質(zhì)限量測定1．純度檢查（雜質(zhì)檢查）1）峰位不重疊：找λ→使主成分無吸收，雜質(zhì)有吸收→直接考察雜質(zhì)含量2）峰位重疊：主成分強(qiáng)吸收，雜質(zhì)無吸收測定結(jié)果顯示為弱吸收→與純品比較，E↓

雜質(zhì)強(qiáng)吸收>>主成分吸收→與純品比較，E↑，光譜變形第七十五頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日續(xù)前2．雜質(zhì)限量的測定：例：腎上腺素中微量雜質(zhì)——腎上腺酮含量計算

2mg/mL-0.05mol/L的HCL溶液，λ310nm下測定規(guī)定A310≤0.05

即符合要求的雜質(zhì)限量≤0.06%第七十六頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日二、吸收度的測量（補(bǔ)充內(nèi)容）1.比色皿的選擇:1.玻璃;1)石英2.溶劑的選擇:極限波長3.波長的選擇:4.

空白對比5.測定步驟

1)本身調(diào)零;2)空白調(diào)零;3)測量樣品溶液的濃度A=0.2~0.8第七十七頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日1．吸光系數(shù)法2．標(biāo)準(zhǔn)曲線法3．對照法：外標(biāo)一點法4．增量法三、單組分的定量方法第七十八頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日續(xù)前1．吸光系數(shù)法（絕對法）第七十九頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日例：維生素B12

的水溶液在361nm處的百分吸光系數(shù)為207，用1cm比色池測得某維生素B12溶液的吸光度是0.414，求該溶液的濃度解：第八十頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日練習(xí)例：精密稱取B12

樣品25.0mg，用水溶液配成100ml，精密吸取10.00ml，又置100ml容量瓶中，加水至刻度。取此溶液在1cm的吸收池中，于361nm處測定吸光度為0.507，求B12

的百分含量？。解：補(bǔ)充系數(shù)法求含量第八十一頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日續(xù)前2．標(biāo)準(zhǔn)曲線法過程：配制標(biāo)準(zhǔn)系列溶液測定各標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸收度繪制工作曲線C~A曲線求出方程樣品溶液測定A值由方程求出濃度第八十二頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日A200240280320360400440nm2.

標(biāo)準(zhǔn)曲線法max第八十三頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日CxAxA0Concentration要求

1.r>0.9992.n=5-73.待測濃度盡量在標(biāo)準(zhǔn)曲線中間位置標(biāo)準(zhǔn)曲線(A=aC+b,r)第八十四頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日續(xù)前3．對照法(外標(biāo)一點法)注：當(dāng)樣品溶液與標(biāo)準(zhǔn)品溶液的稀釋倍數(shù)相同時第八十五頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日(三)對照法待測樣品(Unknownsample)標(biāo)準(zhǔn)樣品(Referencesample)第八十六頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日要求-標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度應(yīng)盡量接近樣品濃度=A標(biāo)A樣C標(biāo)C樣C樣=C標(biāo)·A樣A標(biāo)第八十七頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日練習(xí)例：維生素B12

的含量測定精密吸取B12

注射液2.50mL，加水稀釋至10.00mL；另配制對照液，精密稱定對照品25.00mg，加水稀釋至1000毫升在361nm處，用1cm吸收池，分別測定吸光度為0.508和0.518，求B12

注射液的濃度以及標(biāo)示量的百分含量（該B12

注射液的標(biāo)示量為100μg/毫升）。第八十八頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日解：

1）對照法第八十九頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日練習(xí)2）吸光系數(shù)法第九十頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日續(xù)前四、多組分的定量方法

三種情況：1．兩組分吸收光譜不重疊（互不干擾）兩組分在各自λ最大下不重疊→分別按單組分定量第九十一頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日續(xù)前2．兩組分吸收光譜部分重疊

λ1→測A1→b組分不干擾→可按單組分定量測Caλ2→測A2→組分干擾→不能按單組分定量測Ca第九十二頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日續(xù)前3．兩組分吸收光譜完全重疊

——混合樣品測定（1）解線性方程組法（2）等吸收點法（3）等吸收雙波長消去法（4）系數(shù)倍率法第九十三頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日（1）解線性方程組法步驟：第九十四頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日2.等吸收點法等吸收點：兩物質(zhì)在某波長處的吸收系數(shù)相等，該波長為~Ca=Cb第九十五頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日3．等吸收雙波長法步驟：消除a的影響后測bab第九十六頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日續(xù)前消去b的影響，測定a組分注：須滿足兩個基本條件選定的兩個波長下干擾組分具有等吸收點選定的兩個波長下待測物的吸光度差值應(yīng)足夠大ab第九十七頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日五、有色化合物的測定方法

——光電比色法（一）顯色反應(yīng)和顯色劑：1.顯色反應(yīng)：在光度分析中將試樣中的待測組分轉(zhuǎn)變成有色化合物的反應(yīng)叫顯色反應(yīng)。第九十八頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日顯色反應(yīng)一般分為兩大類：一類是配位反應(yīng)；另一類是氧化還原反應(yīng)。Fe3＋＋SCN－

=FeSCN2+

；Mn2＋－5e＋4H2O=MnO4－＋8H＋在這兩類反應(yīng)中，用得較多的是配位反應(yīng)。第九十九頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日（2）有機(jī)顯色劑：1）有機(jī)顯色劑的優(yōu)點：A.具有鮮明的顏色，ε都很大（一般可達(dá)到104

以上），所以測定的靈敏度很高；B.生成的一般為螯合物，穩(wěn)定性很好，一般離解常數(shù)都很小；2.顯色劑：

（1）無機(jī)顯色劑：第一百頁，共一百一十二頁，2022年，8月28日C.選擇性好D.有些有色配合物易溶于有