臨床檢驗(yàn)概論

關(guān)于臨床檢驗(yàn)概論第1頁，共50頁，2023年，2月20日，星期二第一節(jié)血液生理概要§血液的組成§血液主要理化性質(zhì)§血液功能第2頁，共50頁，2023年，2月20日，星期二血液的組成血漿=血清+凝血因子第3頁，共50頁，2023年，2月20日，星期二第4頁，共50頁，2023年，2月20日，星期二血液理化性質(zhì)血量：占體重6%-8%，小兒>成人，男性>女性，女性妊娠期間可增加23%-25%(血漿增加量大于紅細(xì)胞增加量)。顏色：紅色（血紅蛋白），動(dòng)脈鮮紅色（HbO2高），靜脈暗紅色（Hbred高），脂血乳白色，嚴(yán)重貧血患者顏色變淺。CO或氰化物中毒血液櫻紅色。懸浮穩(wěn)定性：紅細(xì)胞表面唾液酸根帶負(fù)電荷，形成Zeta電位使紅細(xì)胞相互排斥。粘滯性：主要取決于紅細(xì)胞比容和血漿粘度，粘度受血漿中纖維蛋白原、球蛋白等大分子影響，其濃度越高，粘度越高。凝固性：數(shù)分鐘內(nèi)自行凝固。比密和滲透濃度pH7.35-7.45第5頁，共50頁，2023年，2月20日，星期二考點(diǎn)2血液的功能§運(yùn)輸功能運(yùn)送氧氣、營養(yǎng)（葡萄糖、氨基酸、礦物質(zhì)）、代謝產(chǎn)物（CO、尿素）§協(xié)調(diào)功能激素、酶§維護(hù)機(jī)體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定水電解質(zhì)平衡、酸堿平衡、體溫穩(wěn)定§防御功能白細(xì)胞、抗體、補(bǔ)體、細(xì)胞因子、血小板、凝血因子第6頁，共50頁，2023年，2月20日，星期二第二節(jié)

血液標(biāo)本采集一、血液標(biāo)本種類：全血=血細(xì)胞+血漿，用于：臨床血液學(xué)分析血漿=全血-血細(xì)胞，用于：臨床生化

凝血因子測(cè)定

血清=血自然凝固后析出的液體用于：臨床生化臨床免疫學(xué)分析第7頁，共50頁，2023年，2月20日，星期二二、采血方法靜脈采血法F:\臨檢視屏\靜脈采血1.flv動(dòng)脈采血法皮膚采血法采血方法第8頁，共50頁，2023年，2月20日，星期二（一）靜脈采血法1、適用：適用于絕大多數(shù)臨床檢驗(yàn)2、部位：體表的淺靜脈均可肘部靜脈——最常用手背靜脈內(nèi)踝靜脈股靜脈頸外靜脈靜脈采血部位第9頁，共50頁，2023年，2月20日，星期二3、器材：①注射器：不同型號(hào)（5~10ml）②容器：硅化處理玻璃試管塑料試管③壓脈帶④消毒碘酒棉球4、優(yōu)點(diǎn)：可滿足絕大部分檢驗(yàn)需要第10頁，共50頁，2023年，2月20日，星期二第11頁，共50頁，2023年，2月20日，星期二5、注意：①注射器和容器必須干燥②抽血不宜過快，以免產(chǎn)生氣泡或溶血③要拔掉針頭再徐徐注入容器④若遇病人暈厥時(shí)勿驚慌，可采?。浩脚P休息嗅芳香氨酊指按“人中”“合谷”等穴位措施第12頁，共50頁，2023年，2月20日，星期二（二）皮膚采血法（毛細(xì)血管采血法）1、適用：需血微量的檢查2、部位：手指耳垂指足跟WHO推薦：左手無名指指端內(nèi)側(cè)第13頁，共50頁，2023年，2月20日，星期二3、器材：①采血針：一次性采血針②75%酒精棉球和消毒干棉球③微量吸管(20微升)第14頁，共50頁，2023年，2月20日，星期二4、優(yōu)缺點(diǎn)：

優(yōu)點(diǎn)：方便，快捷末梢循環(huán)受多種因素影響(血液末梢循環(huán)、溫度、采血情況、局部感染)標(biāo)本混有組織液采血量受限疼痛明顯缺點(diǎn)第15頁，共50頁，2023年，2月20日，星期二5、注意：1.穿刺部位消毒酒精干后方可穿刺2.燒傷病人應(yīng)選擇皮膚完整處采血3.拭去第一滴血液4.血流不暢時(shí)，自采血部位遠(yuǎn)端向指尖稍加壓力，切勿用力擠壓皮膚，防止組織液混入5.一人一針第16頁，共50頁，2023年，2月20日，星期二（三）動(dòng)脈采血法1、適用：用于血?dú)夥治?、部位：股動(dòng)脈等3、器材：專用采血器4、注意：采血后立即封閉針頭，避免與空氣接觸，及時(shí)送檢，最好在30分鐘內(nèi)檢測(cè)第17頁，共50頁，2023年，2月20日，星期二（四）真空采血法（負(fù)壓采血法）1、適用：適用絕大多數(shù)臨床檢驗(yàn)尤其適宜于病房和野外流動(dòng)采血2、部位：全身淺靜脈①真空采血裝置套筒式頭皮靜脈式②真空采血管：③壓脈帶④消毒碘酒棉球3、器材第18頁，共50頁，2023年，2月20日，星期二真空采血裝置套筒式頭皮靜脈式第19頁，共50頁，2023年，2月20日，星期二真空采血管第20頁，共50頁，2023年，2月20日，星期二第21頁，共50頁，2023年，2月20日，星期二4、優(yōu)點(diǎn)：①封閉：減少醫(yī)務(wù)人員感染減少容器間轉(zhuǎn)移減少交叉污染保護(hù)環(huán)境②減少溶血③保證標(biāo)本質(zhì)量第22頁，共50頁，2023年，2月20日，星期二【方法學(xué)評(píng)價(jià)】皮膚采血法＜開放式靜脈采血法＜真空采血法第23頁，共50頁，2023年，2月20日，星期二【質(zhì)量控制】要注意影響標(biāo)本質(zhì)量的因素(qualitycontrol)1.患者飲食、運(yùn)動(dòng)和精神狀態(tài)（結(jié)果假性偏高）2.勿擠壓皮膚3壓脈帶使用時(shí)間應(yīng)少于1分鐘(濃縮、瘀滯、缺氧)4.避免溶血（AST、K+）5.一側(cè)手臂靜脈輸液時(shí)應(yīng)從對(duì)側(cè)手臂取血6.二側(cè)手臂同時(shí)進(jìn)行靜脈輸液，應(yīng)選擇輸液穿刺點(diǎn)的遠(yuǎn)心端取血第24頁，共50頁，2023年，2月20日，星期二第25頁，共50頁，2023年，2月20日，星期二5、血標(biāo)本處理：盡快檢驗(yàn)、生物安全唯一標(biāo)識(shí)、接收拒收合適的條件保存（一般置于4℃，1個(gè)月（-20℃），3個(gè)月以上（-70℃），標(biāo)本存放需加塞，防止水分揮發(fā)）6、實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析：影響因素結(jié)合臨床及時(shí)與臨床溝通第26頁，共50頁，2023年，2月20日，星期二鞏固血漿與血清區(qū)別？嚴(yán)重貧血從血外觀怎樣辨認(rèn)？靜脈采血最常用采血部位？末梢采血最常用采血部位？皮膚采血法缺點(diǎn)？末梢采血時(shí)為什么切勿用力擠壓？靜脈采血時(shí)為什么避免溶血？靜脈采血時(shí)為什么不能在輸液端采血?第27頁，共50頁，2023年，2月20日，星期二思考？為什么末梢采血推薦左手無名指指尖內(nèi)側(cè)？第28頁，共50頁，2023年，2月20日，星期二松馳的琴弦，永遠(yuǎn)奏不出時(shí)代的強(qiáng)音。謝謝大家第29頁，共50頁，2023年，2月20日，星期二第三節(jié)抗凝劑選擇常用的抗凝劑有EDTA草酸鹽肝素枸櫞酸鹽抗凝——用物理或化學(xué)方法除去或抑制血液中的某些凝血因子的活性，阻止血液凝固?？鼓齽軌蜃柚寡耗痰奈镔|(zhì)。第30頁，共50頁，2023年，2月20日，星期二第31頁，共50頁，2023年，2月20日，星期二1）抗凝原理：與血中鈣離子結(jié)合成螯合物，使Ca2+失去凝血作用，從而阻止血液凝固。1、乙二胺四乙酸鹽（EDTA-Na2,EDTA-K2）第32頁，共50頁，2023年，2月20日，星期二2）應(yīng)用：①適用：多項(xiàng)血液學(xué)檢查，尤其是血小板計(jì)數(shù)特別適用于全血細(xì)胞分析血細(xì)胞比容測(cè)定②不適用：凝血象檢查和血小板功能檢查

因?yàn)椋篍DTA影響血小板聚集

第33頁，共50頁，2023年，2月20日，星期二2、草酸鹽1）抗凝原理：溶解后解離的草酸根與血中鈣離子結(jié)合成草酸鈣沉淀，使Ca2+失去凝血作用。2）應(yīng)用：溶解度好、價(jià)廉①適用：一般血液學(xué)檢查

②不適用：凝血象檢查

因?yàn)椋骸鴮?duì)凝血V因子保護(hù)差

▲形成的草酸鹽沉淀影響自動(dòng)凝血儀

第34頁，共50頁，2023年，2月20日，星期二3、肝素1）抗凝原理：抗凝機(jī)制復(fù)雜

①與ＡT-Ⅲ結(jié)合抑制凝血活酶的形成②抑制血小板聚集與釋放反應(yīng)③滅活絲氨酸蛋白酶,抑制凝血酶形成

2）應(yīng)用：①適用：適用于絕大多數(shù)檢查（不影響細(xì)胞體積,不易溶血）尤其是細(xì)胞培養(yǎng)和紅細(xì)胞滲透脆性實(shí)驗(yàn)②不適用：不適合血液學(xué)一般檢查因?yàn)椋骸滓鸢准?xì)胞聚集▲血涂片羅氏染色有藍(lán)色背景第35頁，共50頁，2023年，2月20日，星期二4、枸櫞酸鹽1）抗凝原理：與鈣離子結(jié)合成螯合物，從而阻止血液凝固。2）應(yīng)用：①適用：血沉測(cè)定（1:4）凝血功能測(cè)定（1:9）輸血保養(yǎng)液第36頁，共50頁，2023年，2月20日，星期二①含有K+、Na+的抗凝劑不能用于測(cè)定K+、Na+的標(biāo)本；②EDTA、氟化物、草酸鹽等不能用于測(cè)定Ca2+的標(biāo)本，因?yàn)镃a2+可與它們形成不溶性物質(zhì)。5、使用抗凝劑應(yīng)注意：第37頁，共50頁，2023年，2月20日，星期二嚴(yán)格掌握抗凝劑與血液的比例血液和抗凝劑的比例過高或過低都會(huì)影響標(biāo)本的質(zhì)量。血液比例過高時(shí)(采血過量)，由于抗凝劑相對(duì)不足。血漿中出現(xiàn)微凝血塊的可能性增加，阻塞檢驗(yàn)儀器，影響檢驗(yàn)指標(biāo)血液比例過低

(采血不足)，抗凝劑相對(duì)過剩對(duì)許多檢驗(yàn)指標(biāo)會(huì)造成嚴(yán)重影響第38頁，共50頁，2023年，2月20日，星期二

第四節(jié)血液涂片制備和細(xì)胞染色一、血液涂片制備F:\臨檢視屏\末梢采血、血涂片制備.flv臨檢視屏\末梢采血、血涂片制備.flv二、血液細(xì)胞染色F:\臨檢視屏\血涂片染色.flv臨檢視屏\血涂片染色.flv第39頁，共50頁，2023年，2月20日，星期二一、血液涂片制備厚薄要適宜，頭體尾要明顯，細(xì)胞分布要均勻，血膜邊緣要整齊，并留有一定的空隙。第40頁，共50頁，2023年，2月20日，星期二引起血涂片分布不均的主要原因：推片邊緣不整齊，用力不均勻，載片不清潔。第41頁，共50頁，2023年，2月20日，星期二染料堿性染料：為陽離子染料，能接受質(zhì)子，與細(xì)胞內(nèi)酸性成分結(jié)合，染成藍(lán)色。主要用于細(xì)胞核染色。如美藍(lán)/亞甲藍(lán)、天青酸性染料：為陰離子染料，能釋放質(zhì)子，與細(xì)胞內(nèi)堿性成分結(jié)合，染成紅色。主要用于細(xì)胞質(zhì)染色。如伊紅第42頁，共50頁，2023年，2月20日，星期二二、血液細(xì)胞染色(一)瑞氏染色法(Wright'sstain)1．瑞氏染料（復(fù)合染料）酸性染料伊紅(E-)堿性染料亞甲藍(lán)(M+，又名美藍(lán))美藍(lán)容易氧化為一、二、三甲基硫堇等次級(jí)染料(即天青)瑞士染液放置越久，染色效果越好。原因：越多亞甲藍(lán)轉(zhuǎn)化為天青B.甲醇的作用：①溶解美藍(lán)和伊紅，解離為M+和E-；②脫水作用，固定細(xì)胞形態(tài)，增強(qiáng)染色效果。第43頁，共50頁，2023年，2月20日，星期二(一)瑞氏染色法2．染色原理是染料透入被染物并存留其內(nèi)部的一種過程，①物理的吸附作用，②化學(xué)的親和作用，嗜酸性顆?！獕A性——與酸性染料——粉紅色；細(xì)胞核蛋白——酸性——與堿性染料——紫藍(lán)色或藍(lán)色；中性顆?！入姞顟B(tài)——與伊紅和美藍(lán)——染淡紫紅色。第44頁，共50頁，2023年，2月20日，星期二瑞士染色原理pI蛋白質(zhì)pH+伊紅(E-)pH-亞甲藍(lán)(M+)3pH值的影響:細(xì)胞各種成分均屬蛋白質(zhì)