乳與乳制品非常規(guī)理化指標檢驗維生素C的檢測_第1頁
乳與乳制品非常規(guī)理化指標檢驗維生素C的檢測_第2頁
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文檔簡介

乳與乳制非常規(guī)理化標檢驗維生素C檢測YLNB5.41.依GB/T5413.18—2.范本方法規(guī)定了用熒光測定維生素C的法。本方法適用于嬰幼兒方食品和乳粉中維生素C的測定。3.法提要抗壞血酸(維生素C)在活性炭存在下可氧化成脫氫抗壞血酸,它與鄰苯二反應(yīng)生成一熒光團,該熒光團在約350nm處有最大激發(fā)長,而在約30nm熒光最強,熒光強度與濃度成正比。加鄰苯二胺以前,使抗壞血酸形成HBO3-脫氫抗壞血酸合物,可阻止其形成熒光產(chǎn)物,任何殘留的熒光均由外來引起,可將它們作為“空白”。比較經(jīng)相同氧化處理的品和標樣的熒光強度可計算出抗壞血酸的含量。4.劑、菌種和培養(yǎng)所有試劑如未注明格指分析純所有實驗用水,如未注明其他要求,指三級水。4.1高峰氏淀粉酶Taka-Disatase)4.偏磷酸-乙酸溶:稱取5g磷酸及40mL乙酸于2

水中,溶解后稀釋至00mL用。4.3酸性活性炭:取200g性炭(化學(xué)純),加入L積1:的鹽酸,加至沸騰,真空過濾,取下結(jié)塊于一個大燒杯中入1L水拌過濾后用水清洗一次10~120℃烘箱中干燥過后使用。4.4乙酸鈉溶液:水溶解00g三乙酸鈉,并稀釋至1L4.5硼酸乙酸鈉:取g酸,用乙酸鈉溶液(3.4)溶解并稀釋至00mL,用前現(xiàn)配。46鄰苯二胺溶液量濃度00mg/L稱20mg鄰苯二胺,用水稀釋至00mL,用現(xiàn)配。4.7維生素C準溶:濃100g/mL稱0.0500g抗壞血酸用偏磷酸-乙酸溶3.2解并稀釋至50mL10mL該溶液用偏磷酸乙溶液3.2)稀至100mL,制成標準溶液?,F(xiàn)用現(xiàn)配。5.器:熒光分光光度計。6.法6.1樣品處理6..1含淀粉的樣確稱取g品于150mL三角瓶中,加0.5g高峰氏淀粉(3.1),再加入15mL45~℃的蒸餾水混合均勻后氮排除瓶中空氣蓋上瓶塞至45℃烘箱內(nèi)0min,取出卻至室溫,用偏磷酸乙酸溶液(3.2)轉(zhuǎn)100mL容量瓶內(nèi)定容。

bb61.2不含淀粉的品準確稱取.5g品,用偏磷酸-乙酸溶液()溶,定容至0mL。6.2測定6將上述樣液至放有約1酸性活性(3.3250mL三角瓶中,劇烈振動過濾,棄去頭幾毫升濾液,然后分別吸5mL樣品及標準液的濾液分置于25mL100mL放有5mL硼-乙酸鈉溶液(的容量瓶中,靜止15min,用蒸餾水定容。以此作為準溶液及樣品的空白溶液。62.2在此15min,吸取另mL品及標樣于其他兩個25ml及100mL放有mL酸鈉溶液(3.4和約15mL水的容量瓶中,用水稀釋至刻。6.2.3分別吸取mL樣品、標樣及樣品和標樣的空白溶液4支試管中。62.4向每支試管加入mL鄰苯二胺(3.6),搖勻,在避光條件下放置35min后立刻于激發(fā)波350nm發(fā)射波長30nm條件下測定熒光值。7.結(jié)果計算樣品中維生素量mg/100g)=

Sb式中:I——樣品熒光值;Ib——樣品空白溶熒光值;Is—標樣熒光值;Isb——標

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