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用什么方法可以達(dá)到呢??jī)H僅依靠有性生殖可以達(dá)到預(yù)期的目的嗎?為什么?思考:該過程的幾個(gè)問題(1)去除細(xì)胞壁的方法有哪些?(2)融合完成的標(biāo)志是什么?參與該過程的細(xì)胞器有哪些?(3)人工誘導(dǎo)融合的方法有哪些?(4)僅考慮兩兩融合,融合細(xì)胞有幾種類型?(5)該植物體細(xì)胞雜交過程中的理論基礎(chǔ)是什么?(6)得到的雜種植株可育嗎?為什么?(7)從中你知道獲得多倍體的方法還有哪些?(8)該技術(shù)最大的優(yōu)點(diǎn)(意義)是什么?(一)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)(9)雖然得到的植物體沒有達(dá)到人民預(yù)期目的(地上結(jié)番茄,地下結(jié)馬鈴薯塊莖),但一些科學(xué)家卻堅(jiān)信人們的目標(biāo)終將實(shí)現(xiàn),你能說出其中的理由嗎?(一)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)1.原理植物細(xì)胞的
,即具有某種生物全部遺傳信息的任何一個(gè)細(xì)胞,都具有發(fā)育成完整生物體的潛能。全能性(二)植物組織培養(yǎng)技術(shù)已經(jīng)分化愈傷組織2.過程:
的組織形成
幼根和芽→完整植株。4.植物組織培養(yǎng)條件:離體、無(wú)菌、植物激素(生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素等)、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、及適宜溫度、PH、光照(再分化時(shí))等外界條件3.理論基礎(chǔ):植物細(xì)胞的全能性脫分化、再分化的原因:基因選擇性表達(dá)(二)植物組織培養(yǎng)技術(shù)5.應(yīng)用(1)植物脫毒(2)快速繁殖(3)細(xì)胞培養(yǎng)獲得大量代謝產(chǎn)物如紫杉醇、人參皂甙、紫草素(4)人工種子(5)單倍體育種(二)植物組織培養(yǎng)技術(shù)(三)動(dòng)物組織、細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)1、過程2、理論基礎(chǔ):3、培養(yǎng)條件①無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境——無(wú)菌處理、加抗生素殺菌、定期更換培養(yǎng)液。②營(yíng)養(yǎng)——葡萄糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽和微量元素+血清或血漿等天然成分。③溫度和pH——(36.5±0.5)℃和(7.2~7.4)。④氣體環(huán)境——95%空氣+5%CO2。(三)動(dòng)物組織、細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)4.應(yīng)用
(1)生產(chǎn)細(xì)胞產(chǎn)品:干擾素、疫苗、單克隆抗體。
(2)檢測(cè)并判斷某毒性物質(zhì)毒性的大小。
(3)臨床醫(yī)學(xué)研究。(三)動(dòng)物組織、細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)(四)動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)1、過程2、融合的基礎(chǔ)3、人工誘導(dǎo)融合方法4、僅考慮兩兩融合,融合的細(xì)胞有幾種類型?(五)單克隆抗體制備技術(shù)1、過程2、需要篩選幾次?目的是什么?3、雜交瘤細(xì)胞有什么特點(diǎn)?4、為什么先用抗原刺激小鼠,再提取小鼠B細(xì)胞?5、單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)是:6、單克隆抗體的應(yīng)用:抗原抗體雜交、生物導(dǎo)彈(六)動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)1、過程2、選擇卵母細(xì)胞的原因是什么?3、理論基礎(chǔ)4、克隆羊的遺傳物質(zhì)來(lái)源5、應(yīng)用:生殖性克隆與治療性克隆重組干細(xì)胞預(yù)想的克隆人技術(shù)路線(六)動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)1.人的DNA分子可以和大腸桿菌的DNA分子重組在一起的理論基礎(chǔ)是什么?2.人的胰島素基因可以在大腸桿菌內(nèi)表達(dá)出人的胰島素,該過程的理論基礎(chǔ)是什么?大腸桿菌作為受體細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn)有哪些?3.人的干擾素是一種糖蛋白,將人的干擾素基因?qū)氪竽c桿菌中表達(dá)出大量的基因產(chǎn)物,但卻沒有活性。你認(rèn)為其中的原因是什么?4.你認(rèn)為細(xì)胞全能性大小與哪些因素有關(guān)?5.請(qǐng)舉例說明克隆動(dòng)物的大致過程,你認(rèn)為卵(母)細(xì)胞質(zhì)在該過程中的作用是什么?6.通過自己的學(xué)習(xí),你認(rèn)為獲得全能性的動(dòng)物細(xì)胞有哪些方法?(一)植物組織培養(yǎng)技術(shù)(二)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)(三)動(dòng)物組織、細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)(四)動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)(六)動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)(五)單克隆抗體制備技術(shù)一、細(xì)胞工程概念二、細(xì)胞工程技術(shù)手段
是指應(yīng)用現(xiàn)代細(xì)胞生物學(xué)、發(fā)育生物學(xué)、遺傳學(xué)和分子生物學(xué)的理論與方法,按照人們的需要和設(shè)計(jì),在細(xì)胞水平上的遺傳操作,重組細(xì)胞結(jié)構(gòu)和內(nèi)含物,以改變生物的結(jié)構(gòu)和功能,即通過細(xì)胞融合、核質(zhì)移植、染色體或基因移植以及組織和細(xì)胞培養(yǎng)等方法,快速繁殖和培養(yǎng)出人們所需要的新物種的生物工程技術(shù).
總結(jié)練習(xí)1.關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的有關(guān)敘述,正確的是()A.細(xì)胞的癌變發(fā)生于原代培養(yǎng)向傳代培養(yǎng)的過渡過程中
B.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液中通常含有葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)素和動(dòng)物血清等
C.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的目的只是獲得大量的細(xì)胞分泌蛋白
D.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)前和培養(yǎng)過程中都要用胰蛋白酶處理2.回答下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的問題:(1)在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中,當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到細(xì)胞表面
時(shí),細(xì)胞會(huì)停止分裂增殖,這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的
。此時(shí),瓶壁上形成的細(xì)胞層數(shù)是
。要使貼壁的細(xì)胞從瓶壁上分離下來(lái),需要用酶處理,可用的酶是
。(2)隨著細(xì)胞傳代次數(shù)的增多,絕大部分細(xì)胞分裂停止,進(jìn)而出現(xiàn)
的現(xiàn)象;但極少數(shù)細(xì)胞可以連續(xù)增殖,其中有些細(xì)胞會(huì)因遺傳物質(zhì)發(fā)生改變而變成
細(xì)胞,該種細(xì)胞的黏著性降低,細(xì)胞膜表面蛋白質(zhì)(糖蛋白)的量
。相互接觸接觸抑制單層(或一層)胰蛋白酶衰老甚至死亡不死性減少(3)現(xiàn)用某種大分子染料,對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色時(shí),觀察到死細(xì)胞被染色,而活細(xì)胞不染色,原因是
。(4)檢查某種毒物是否能改變細(xì)胞染色體的數(shù)目,最好選用細(xì)胞分裂到
期的細(xì)胞用顯微鏡進(jìn)行觀察。由于活細(xì)胞的膜具有選擇透過性,大分子染料不能進(jìn)入活細(xì)胞內(nèi),故活細(xì)胞不能著色(或由于死細(xì)胞的膜喪失了選擇透過性,大分子染料能夠進(jìn)入死細(xì)胞內(nèi)而著色)中(5)在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,通常在
條件下保存細(xì)胞。因?yàn)樵谶@種條件下,細(xì)胞中
的活性降低,細(xì)胞
的速率降低。(6)給患者移植經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)形成的皮膚組織后,發(fā)生了排斥現(xiàn)象,這是因?yàn)闄C(jī)體把移植的皮膚組織當(dāng)作
進(jìn)行攻擊。冷凍(或超低溫、液氮)酶新陳代謝抗原3.利用細(xì)胞工程方法,以SARS病毒核衣殼蛋白為抗原制備出單克隆抗體。下列相關(guān)敘述正確的是()
A.用純化的核衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi),產(chǎn)生的血清抗體為單克隆抗體
B.體外培養(yǎng)單個(gè)B淋巴細(xì)胞可以獲得大量針對(duì)SARS
病毒的單克隆抗體
C.將等量B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞混合,經(jīng)PEG誘導(dǎo)融合后的細(xì)胞均為雜交瘤細(xì)胞
D.利用該單克隆抗體與SARS病毒核衣殼蛋白特異性結(jié)合的方法可診斷出病毒感染者4.下列哪項(xiàng)不屬于體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用()
A.加速家畜遺傳改良進(jìn)程,促進(jìn)優(yōu)良畜群繁育
B.保護(hù)瀕危物種
C.獲得組織器官異體移植的供體
D.大量產(chǎn)生紫杉醇5.下列有關(guān)體細(xì)胞核移植技術(shù)的說法,不正確的是()
A.體細(xì)胞核移植技術(shù)在多種動(dòng)物中獲得了成功,成功率非常高
B.克隆技術(shù)的各個(gè)環(huán)節(jié)有待于進(jìn)一步改進(jìn)
C.大多數(shù)克隆動(dòng)物還存在一些遺傳和生理缺陷類的健康問題
D.克隆動(dòng)物食品的安全性問題仍然存在爭(zhēng)
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