中藥制劑控制菌檢查控制菌檢查

貳叁肆伍壹目錄中藥制劑分析概述中藥制劑的鑒別技術(shù)中藥制劑的常規(guī)檢查技術(shù)中藥制劑的雜質(zhì)檢查技術(shù)中藥制劑的衛(wèi)生學(xué)檢查陸中藥制劑的含量測(cè)定技術(shù)精誠(chéng)制藥本草濟(jì)民伍項(xiàng)目五中藥制劑的衛(wèi)生學(xué)檢查任務(wù)一中藥制劑微生物限度檢查知識(shí)點(diǎn)四中藥制劑控制菌檢查12一、基礎(chǔ)知識(shí)中藥制劑控制菌檢查(二)培養(yǎng)基適用性(一)控制菌的檢查內(nèi)容控制菌檢查用的成品培養(yǎng)基、由脫水培養(yǎng)基或按處方配制的培養(yǎng)基均應(yīng)進(jìn)行培養(yǎng)基的適用性檢查?？刂凭鷻z査用培養(yǎng)基的適用性檢查項(xiàng)目包括促生長(zhǎng)能力、抑制能力及指示特性的檢查。34上面的圖片可自行更換，動(dòng)畫效果不變，方法是對(duì)圖片點(diǎn)右鍵->設(shè)置對(duì)象格式->填充->填充效果->圖片，選擇事先準(zhǔn)備好的圖片即可。(三)陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照4(四)控制菌檢查基本程序陽(yáng)性對(duì)照試驗(yàn)：陽(yáng)性對(duì)照試驗(yàn)的對(duì)照菌的加量應(yīng)不大于l00cfu。陽(yáng)性對(duì)照試驗(yàn)應(yīng)檢出相應(yīng)的控制菌。陰性對(duì)照試驗(yàn)：以稀釋劑代替供試液照相應(yīng)控制菌檢查法檢查，陰性對(duì)照試驗(yàn)應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng)。如果陰性對(duì)照有菌生長(zhǎng)，應(yīng)進(jìn)行偏差調(diào)查。中藥制劑控制菌檢查一、基礎(chǔ)知識(shí)二、必備知識(shí)-大腸埃希菌檢查膽鹽乳糖液體培養(yǎng)基；曙紅亞甲藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基；MUG液體培養(yǎng)基；pH7.0無(wú)菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液；(一)培養(yǎng)基和稀釋液中藥制劑控制菌檢查二、必備知識(shí)-大腸埃希菌檢查IMVpC試驗(yàn)材料，待檢測(cè)藥品。酒精燈、酒精棉、火柴、鑷子、吸球、記號(hào)筆、剪刀、廢物缸、水浴鍋、光學(xué)顯微鏡、革蘭氏染色試劑、超凈工作臺(tái)、生化培養(yǎng)箱、電爐子等。(二)材料用具中藥制劑控制菌檢查1、供試液制備取兩支供試品，無(wú)菌操作加入空三角瓶中，混合均勻，取10ml滅菌吸管取10ml藥品放入裝有90ml稀釋液的三角瓶中，混勻，制備成1:10的供試液。2、増菌培養(yǎng)取乳糖膽鹽培養(yǎng)基3瓶，每瓶100ml，2瓶分別加入規(guī)定量的供試液（相當(dāng)于1g或1ml供試品），其中1瓶加入對(duì)照菌50～100個(gè)作陽(yáng)性對(duì)照菌，第3瓶加入與供試液等量的稀釋液作陰性對(duì)照，30～35℃培養(yǎng)18～24h。3、MUG-I檢查搖勻上述乳糖膽鹽增菌培養(yǎng)基，用滅菌吸管吸取0.2ml分別接種至5mlMuG培養(yǎng)基管內(nèi)培養(yǎng)，分別在5h與24h時(shí)，取未接種的MUG培養(yǎng)基管做本底對(duì)照，將各管置365nm紫外光觀察有無(wú)熒光。然后加靛基質(zhì)試液4-5滴于上述MUG管中，觀察液面顏色，供試液按結(jié)果進(jìn)行判斷或做進(jìn)一步檢查。4、分離培養(yǎng)取供試液增菌液及陽(yáng)性對(duì)照培養(yǎng)液輕輕搖動(dòng)，以接種環(huán)蘸取1～2環(huán)培養(yǎng)物劃線接種于曙紅亞甲藍(lán)瓊脂平板或麥康凱瓊脂平板，培養(yǎng)18～24h，當(dāng)陽(yáng)性對(duì)照的平板呈典型菌落生長(zhǎng)，供試液培養(yǎng)物的分離平板無(wú)菌落生長(zhǎng)，判為未檢出大腸桿菌。若有疑似大腸桿菌的菌落生長(zhǎng)，則進(jìn)行生化反應(yīng)試驗(yàn)。5、生化試驗(yàn)①靛基質(zhì)試驗(yàn)（I）②甲基紅試驗(yàn)（M）③乙酰甲基甲醇生成試驗(yàn)（V-P）④枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)（C）6結(jié)果判斷步驟中藥制劑控制菌檢查二、必備知識(shí)-大腸埃希菌檢查二、必備知識(shí)-大腸埃希菌檢查(四)結(jié)果判斷中藥制劑控制菌檢查MUG靛基質(zhì)有藍(lán)白熒光:MUG陽(yáng)性無(wú)藍(lán)白熒光:MUG陰性有玫瑰紅:陽(yáng)性無(wú)玫瑰紅:陰性MUG陰性(無(wú)熒光)靛基質(zhì)陰性(試劑本色)判未檢出大腸埃希菌MUG陰性(無(wú)熒光)靛基質(zhì)陰性(試劑本色)判未檢出大腸埃希菌MUG陽(yáng)性、靛基質(zhì)陰性MUG陰性、靛基質(zhì)陽(yáng)性疑似,需做進(jìn)一步檢查劃線分離中藥制劑控制菌檢查二、必備知識(shí)-大腸埃希菌檢查革蘭染色、鏡檢疑似菌的確證試驗(yàn)靛基質(zhì)試驗(yàn)甲基紅試驗(yàn)乙酰甲基甲醇生成試驗(yàn)枸鹽酸鹽利用試驗(yàn)生化試驗(yàn)IMVPC膽鹽乳糖疑似培養(yǎng)物疑似菌落報(bào)告未檢出18～24h無(wú)菌或無(wú)疑似菌落EMB/MacC營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面純培養(yǎng)18～24h(四)結(jié)果判斷M-甲基紅實(shí)驗(yàn)（M）乙酰甲基甲醇試驗(yàn)（VP）靛基質(zhì)試驗(yàn)（I）枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)（C）中藥制劑控制菌檢查二、必備知識(shí)-大腸埃希菌檢查(四)結(jié)果判斷大腸埃希菌IMVpC試驗(yàn)中藥制劑控制菌檢查二、必備知識(shí)-大腸埃希菌檢查(四)結(jié)果判斷若MUG陽(yáng)性靛基質(zhì)陰性IMViC試驗(yàn)為－＋――革蘭氏陰性短桿菌若MUG陰性靛基質(zhì)陽(yáng)性IMViC試驗(yàn)為＋＋――革蘭氏陰性短桿菌判檢出大腸埃希菌其余情況，判未檢出大腸埃希菌檢查結(jié)果判斷三、拓展知識(shí)沙門菌為腸桿菌科沙門菌屬細(xì)菌，廣泛分布于自然界，是人畜共患的腸道病原菌，常引起傷寒、腸炎、腸熱癥和食物中毒，危害人類健康。沙門菌可通過(guò)人、畜、禽的糞便或帶菌者直接或間接地污染藥品原