免疫球蛋白檢測(cè)

免疫球蛋白檢測(cè)第1頁(yè)，共48頁(yè)，2023年，2月20日，星期三第十七章免疫球蛋白檢測(cè)馮珍如第2頁(yè)，共48頁(yè)，2023年，2月20日，星期三目錄第一節(jié)

免疫球蛋白的生物學(xué)功能第二節(jié)IgG、IgM、IgA測(cè)定方法及臨床意義第三節(jié)

血液IgE和IgD測(cè)定方法及臨床意義第四節(jié)

冷球蛋白測(cè)定方法及臨床意義第3頁(yè)，共48頁(yè)，2023年，2月20日，星期三第一節(jié)免疫球蛋白生物學(xué)功能第4頁(yè)，共48頁(yè)，2023年，2月20日，星期三重點(diǎn)提示免疫球蛋白異質(zhì)性的表現(xiàn)類型免疫球蛋白V區(qū)和C區(qū)功能特點(diǎn)五類免疫球蛋白的不同功能特點(diǎn)第5頁(yè)，共48頁(yè)，2023年，2月20日，星期三

一、免疫球蛋白的異質(zhì)性

免疫球蛋白的類型免疫球蛋白的多樣性免疫球蛋白的血清型第6頁(yè)，共48頁(yè)，2023年，2月20日，星期三二、免疫球蛋白的功能免疫球蛋白的V區(qū)作用免疫球蛋白的C區(qū)作用五類免疫球蛋白不同的生物學(xué)功能第7頁(yè)，共48頁(yè)，2023年，2月20日，星期三第二節(jié)IgG、IgM、IgA測(cè)定方法及臨床意義第8頁(yè)，共48頁(yè)，2023年，2月20日，星期三重點(diǎn)提示不同標(biāo)本類型的IgG、IgM、IgA檢測(cè)方法血液IgG、IgM、IgA檢測(cè)方法的比較不同標(biāo)本類型的IgG、IgM、IgA檢測(cè)意義IgG亞型檢測(cè)的臨床意義選擇性蛋白尿指數(shù)白蛋白商值IgG生成指數(shù)第9頁(yè)，共48頁(yè)，2023年，2月20日，星期三一、血液IgG、IgM、IgA測(cè)定方法及臨床意義第10頁(yè)，共48頁(yè)，2023年，2月20日，星期三測(cè)定方法單向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）放射免疫試驗(yàn)（RIA）免疫固定電泳免疫比濁法：免疫透射比濁法、免疫散射比濁法第11頁(yè)，共48頁(yè)，2023年，2月20日，星期三測(cè)定方法血液IgG、IgM、IgA檢測(cè)方法的比較優(yōu)點(diǎn)缺陷單向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)操作簡(jiǎn)便，不需特殊設(shè)備耗時(shí)長(zhǎng)，靈敏度較低，免疫球蛋白在固相中的沉淀環(huán)不明，導(dǎo)致結(jié)果不準(zhǔn)確。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）靈敏度高，特異性好檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)，批量檢測(cè)。放射免疫試驗(yàn)（RIA）靈敏度高，特異性好放射性核素污染，試劑有效期短。免疫固定電泳主要用于M蛋白測(cè)定屬定性測(cè)定免疫透射比濁法靈敏度比單向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)高5～10倍，結(jié)果準(zhǔn)確，操作簡(jiǎn)單，可使用全自動(dòng)或簡(jiǎn)單比色計(jì)比濁進(jìn)行檢測(cè)，特別適合臨床基層單位應(yīng)用。耗時(shí)長(zhǎng)，靈敏度較免疫散射比濁法低。免疫散射比濁法線性范圍寬、靈敏度高（最小檢測(cè)量可達(dá)μg/L）、準(zhǔn)確度高、精密度高、檢測(cè)時(shí)間短（一般在幾分鐘內(nèi)即可完成測(cè)試）和穩(wěn)定性好。儀器和試劑較免疫透射比濁法貴，對(duì)抗體質(zhì)量要求高。第12頁(yè)，共48頁(yè)，2023年，2月20日，星期三臨床意義年齡的差異：年齡不同其血液中的免疫球蛋白的含量有一定變化。新生兒可由母體獲得通過胎盤轉(zhuǎn)移來的IgG，故血液中含量較高，接近成人水平。嬰幼兒體液免疫功能尚不成熟，免疫球蛋白含量低于成人。血液免疫球蛋白隨年齡、性別、血型、種族及測(cè)定方法不同而有所差別。第13頁(yè)，共48頁(yè)，2023年，2月20日，星期三臨床意義多克隆高免疫球蛋白血癥：肝臟疾病如慢性活動(dòng)性肝炎、原發(fā)性膽汁性肝硬化、隱匿性肝硬化等患者血清中三類免疫球蛋白均可升高。慢性細(xì)菌感染如肺結(jié)核、麻風(fēng)、慢性支氣管炎等血中IgG可升高。宮內(nèi)感染時(shí)臍血或出生后的新生兒血清中IgM含量可增高。自身免疫病時(shí)免疫球蛋白均可升高，如系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者以IgG、IgA升高較多見，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者以IgM升高為主。第14頁(yè)，共48頁(yè)，2023年，2月20日，星期三臨床意義單克隆免疫球蛋白升高：主要是指患者血清中某一類免疫球蛋白含量顯著增多，大多在30g/L以上。這種異常增多的免疫球蛋白理化性質(zhì)十分一致，稱為單克隆蛋白（monoclonalprotein，MP）即M蛋白。此類異常增多的免疫球蛋白多無免疫活性，故又稱副蛋白（paraprotein）。由M蛋白所致的疾病稱為免疫增殖性疾病，如：多發(fā)性骨髓瘤、巨球蛋白血癥、惡性淋巴瘤、重鏈病、輕鏈病等。第15頁(yè)，共48頁(yè)，2023年，2月20日，星期三臨床意義低免疫球蛋白血癥：先天性低免疫球蛋白血癥：體液免疫缺陷病聯(lián)合免疫缺陷病獲得性低免疫球蛋白血癥：患者血清中IgG常小于5g/L，引起的原因較多。大量蛋白丟失：如燒傷、剝脫性皮炎、腎病綜合征等淋巴系統(tǒng)腫瘤：如白血病、霍奇金淋巴瘤等感染性疾?。喝绨滩￠L(zhǎng)期使用免疫抑制劑第16頁(yè)，共48頁(yè)，2023年，2月20日，星期三二、血液IgG亞類測(cè)定方法及臨床意義第17頁(yè)，共48頁(yè)，2023年，2月20日，星期三測(cè)定方法單向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)：最早用于IgG亞類測(cè)定，但靈敏度低，檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)等缺陷，臨床已不用。ELISA：因抗原特異性較差，檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)，臨床應(yīng)用較少。免疫散射比濁法：以檢測(cè)速度快，靈敏度高，準(zhǔn)確性好，自動(dòng)化程度高等為優(yōu)點(diǎn)，在臨床廣泛應(yīng)用。第18頁(yè)，共48頁(yè)，2023年，2月20日，星期三臨床意義年齡：IgG亞類在不同年齡、種族以及不同測(cè)定方法的情況下，檢測(cè)結(jié)果都存在差異。IgG亞類的含量隨年齡的不同而變化。在兒童時(shí)期，男性IgG亞類缺陷比女性常見，其比例為3:1；成年男女的比例為4:2。兒童中IgG2缺陷最常見，成年人IgG1和IgG3缺陷最常見。第19頁(yè)，共48頁(yè)，2023年，2月20日，星期三臨床意義IgG亞類缺陷：

臨床上可表現(xiàn)為反復(fù)呼吸道感染、腹瀉、中耳炎、鼻竇炎、支氣管擴(kuò)張以及哮喘等。有些患者IgG亞類異常，但總IgG正常甚至還偏高，因此認(rèn)為IgG亞類測(cè)定比總IgG測(cè)定更有價(jià)值。IgA缺乏癥常伴有IgG2缺陷某些病毒感染時(shí)IgG1、IgG2、IgG3顯著下降腎病綜合征出現(xiàn)低IgG血癥時(shí)，IgG亞類并非呈比例降低，以IgG1下降為主，而IgG3代償性增高。糖尿病患者以IgG1下降為主IgG亞類異常增高可見于Ⅰ型超敏反應(yīng)，如變應(yīng)原可刺激機(jī)體使IgG4含量增加。第20頁(yè)，共48頁(yè)，2023年，2月20日，星期三臨床意義IgG4相關(guān)性疾?。菏且唤M以血清IgG4水平升高、受累組織IgG4陽(yáng)性漿細(xì)胞浸潤(rùn)及纖維化為特征的疾病。該病可累及全身多個(gè)組織器官，受累器官因纖維化、慢性炎癥等出現(xiàn)增生腫大，從而導(dǎo)致相應(yīng)壓迫阻塞癥狀或功能障礙，其中胰腺、淚腺和涎腺的受累最為常見。第21頁(yè)，共48頁(yè)，2023年，2月20日，星期三三、尿液免疫球蛋白測(cè)定方法及臨床意義第22頁(yè)，共48頁(yè)，2023年，2月20日，星期三測(cè)定方法單向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)：臨床已基本不用。ELISA：臨床應(yīng)用較少。免疫散射比濁法：臨床廣泛應(yīng)用。第23頁(yè)，共48頁(yè)，2023年，2月20日，星期三測(cè)定方法選擇性蛋白尿指數(shù)（selectiveproteinuriaindex，SPI）：同時(shí)測(cè)定尿液和血液中的轉(zhuǎn)鐵蛋白（transferrin，TF）及IgG的含量，以此來判斷尿液Ig測(cè)定的臨床意義。SPI計(jì)算公式：SPI=(尿IgG/血清IgG)/（尿TF/血清TF）。第24頁(yè)，共48頁(yè)，2023年，2月20日，星期三臨床意義當(dāng)SPI≤0.1時(shí)，表明腎臟高選擇性排泌分子量較小的蛋白質(zhì)：微小病變型腎病。當(dāng)SPI≥0.2時(shí)，表明腎臟是非選擇性排泌分子量較大的蛋白質(zhì)：膜性腎病、膜增殖性腎炎、腎病綜合征。第25頁(yè)，共48頁(yè)，2023年，2月20日，星期三臨床意義尿中IgG升高：原發(fā)性腎小球腎炎、慢性腎炎尿內(nèi)IgA：

原發(fā)性腎小球腎病和慢性腎炎腎病：含量最高

慢性腎炎高血壓型及普通型：輕度增高

隱匿性腎炎及急性腎炎：含量很少尿內(nèi)IgM：慢性腎炎尿游離輕鏈：輕鏈病、多發(fā)性骨髓瘤等第26頁(yè)，共48頁(yè)，2023年，2月20日，星期三四、腦脊液免疫球蛋白測(cè)定方法及臨床意義第27頁(yè)，共48頁(yè)，2023年，2月20日，星期三測(cè)定方法免疫散射比濁法：正常人腦脊液（CSF）免疫球蛋白含量低，故臨床應(yīng)用靈敏度高的免疫散射比濁法來測(cè)定CSF中免疫球蛋白。白蛋白商值：同時(shí)測(cè)定CSF和血液中的白蛋白（Alb）,計(jì)算白蛋白商值（Albquotient，QAlb）的大小來反映血腦屏障受損程度。QAlb計(jì)算公式：QAlb=〔(AlbCSF/AlbS)×1000〕第28頁(yè)，共48頁(yè)，2023年，2月20日，星期三測(cè)定方法IgG生成指數(shù)（IgGindex）：通過計(jì)算IgG生成指數(shù)來反應(yīng)CSF鞘內(nèi)免疫球蛋白合成。其計(jì)算公式為：IgG生成指數(shù)=

(IgGCSF/AlbS)/(IgGS/AlbCSF)第29頁(yè)，共48頁(yè)，2023年，2月20日，星期三臨床意義血液中免疫球蛋白通過血腦屏障的難易程度與免疫球蛋白分子量大小直接相關(guān)。IgG較易通過血腦屏障，而IgA略難，IgM更難。所以IgG、IgA、IgM在CSF中的含量依次遞減。當(dāng)腦組織或腦膜出現(xiàn)病變時(shí)，導(dǎo)致血腦屏障發(fā)生破壞，通透性增加，或自身病變組織產(chǎn)生的病理性產(chǎn)物進(jìn)入CSF，使CSF成分發(fā)生改變。第30頁(yè)，共48頁(yè)，2023年，2月20日，星期三臨床意義QAlb不僅可以檢測(cè)血腦屏障損傷的程度，還可以提示神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)生疾病的類型。QAlb＜9：提示血腦屏障無明顯受損。QAlb9～15：急慢性病毒感染、多發(fā)性硬化、神經(jīng)梅毒、帶狀皰疹性神經(jīng)節(jié)炎、腦萎縮等神經(jīng)系統(tǒng)疾病。QAlb15～33：急性神經(jīng)疏螺旋體病、條件致病性腦膜炎、吉蘭-巴雷綜合征等。QAlb33～100：化膿性腦膜炎、單純皰疹性腦炎、結(jié)核性腦膜炎等嚴(yán)重細(xì)菌感染性疾病。QAlb＞100為完全破裂。第31頁(yè)，共48頁(yè)，2023年，2月20日，星期三臨床意義當(dāng)IgG生成指數(shù)升高時(shí)，表明CSF中的IgG主要由中樞神經(jīng)系統(tǒng)鞘內(nèi)合成。IgG生成指數(shù)升高多見于多發(fā)性硬化癥。CSF中IgG增高：腦血栓、蛛網(wǎng)膜下腔出血、系統(tǒng)性紅斑狼瘡腦病、神經(jīng)梅毒、重癥肌無力等。CSF中IgG、IgA均增高：化膿性腦膜炎及結(jié)核性腦膜炎。CSF中IgA和IgM升高：神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤。CSF中IgG和IgM明顯升高：精神分裂癥。第32頁(yè)，共48頁(yè)，2023年，2月20日，星期三第三節(jié)血液IgE和IgD測(cè)定方法及臨床意義第33頁(yè)，共48頁(yè)，2023年，2月20日，星期三重點(diǎn)提示血液IgE檢測(cè)方法血液IgE檢測(cè)的臨床意義血液IgE水平的影響因素第34頁(yè)，共48頁(yè)，2023年，2月20日，星期三一、血液IgE測(cè)定方法及臨床意義第35頁(yè)，共48頁(yè)，2023年，2月20日，星期三測(cè)定方法ELISA熒光酶免疫試驗(yàn)（FEIA）化學(xué)發(fā)光免疫試驗(yàn)（CLIA）

三種方法在臨床均常用。相比ELISA，F(xiàn)EIA和CLIA因檢測(cè)速度快，自動(dòng)化程度高等優(yōu)點(diǎn)在臨床應(yīng)用更為廣泛。第36頁(yè)，共48頁(yè)，2023年，2月20日，星期三臨床意義Ⅰ型超敏反應(yīng)：血清IgE升高。嬰兒：高水平的IgE預(yù)測(cè)未來有超敏反應(yīng)的可能寄生蟲?。篒gE水平明顯升高。某些非超敏反應(yīng)：IgE水平升高還可見于其它一些非超敏反應(yīng)，如感染性疾病、IgE型骨髓瘤、高IgE綜合征、嗜酸性粒細(xì)胞增多癥、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等。其它：原發(fā)性無丙種球蛋白血癥、腫瘤及化療藥物應(yīng)用后IgE可下降。第37頁(yè)，共48頁(yè)，2023年，2月20日，星期三臨床意義影響IgE水平的因素：年齡：新生兒IgE水平非常低，隨著年齡的增長(zhǎng)，IgE的水平隨之增高，學(xué)齡前兒童IgE可接近成人水平，青春期水平最高，30歲后逐漸下降，老年人IgE水平處于較低的水平，這可能與老年人Th細(xì)胞功能低下，Ts細(xì)胞功能相對(duì)較高有關(guān)。性別：男性高于女性，其機(jī)制尚不清楚。種族：混血人種的IgE比白人高3～4倍，黑人水平更高，黃種人水平也較高。這可能受遺傳的影響。第38頁(yè)，共48頁(yè)，2023年，2月20日，星期三二、血液IgD測(cè)定方法及臨床應(yīng)用因IgD生物學(xué)功能尚不清楚，血液IgD定量檢測(cè)臨床基本不做。血液IgD的定性檢測(cè)有免疫固定電泳等，見第二十四章。血液中IgD升高主要見于IgD型骨髓瘤等免疫增值性疾病。第39頁(yè)，共48頁(yè)，2023年，2月20日，星期三第四節(jié)冷球蛋白測(cè)定及臨床意義第40頁(yè)，共48頁(yè)，2023年，2月20日，星期三重點(diǎn)提示冷球蛋白的特點(diǎn)冷球蛋白檢測(cè)流程保溫的重要性冷球蛋白分型的意義第41頁(yè)，共48頁(yè)，2023年，2月20日，星期三測(cè)定方法冷球蛋白的測(cè)定方法有兩種：定性測(cè)定：血細(xì)胞比容管法定量測(cè)定：分光光度法在冷球蛋白的測(cè)定中樣本采集及處理的保溫過程是保證檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確的關(guān)鍵。第42頁(yè)，共48頁(yè)，2023年，2月20日，星期三臨床意義冷球蛋白可分為Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型，各型具有不同的臨床意義。Ⅰ型：為單克隆冷球蛋白，由IgM、IgG、IgA或本-周蛋白組成，大約25%的冷球蛋白屬于此類型。臨床上多見于多發(fā)性骨髓瘤、巨球蛋白血癥、淋巴瘤、慢性淋巴細(xì)胞白血病等疾病。第43頁(yè)，共48頁(yè)，2023年，2月20日，星期三臨床意義冷球蛋白可分為Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型，各型具有不同的臨床意義。Ⅱ型：為單克隆混合冷球蛋白，由單克隆免疫球蛋白和自身IgG組成，分為IgM-IgG、IgG-IgG、IgA-IgG，大約2