侵襲性真菌感染的實(shí)驗(yàn)室檢查

侵襲性真菌感染的實(shí)驗(yàn)室檢查第1頁，共32頁，2023年，2月20日，星期三條件致病酵母菌念珠菌屬白色念珠菌非白色念珠菌熱帶念珠菌光滑念珠菌克柔念珠菌近平滑念珠菌葡萄牙念珠菌非念珠菌屬隱球菌屬毛孢子菌屬酵母屬紅酵母屬重要醫(yī)學(xué)酵母菌分類第2頁，共32頁，2023年，2月20日，星期三絲狀真菌曲霉屬煙曲霉非煙曲霉屬黃曲霉黑曲霉土曲霉構(gòu)巢曲霉非曲霉屬鐮刀菌屬尖孢鐮刀菌茄病鐮刀菌暗色孢霉鏈格孢霉屬雙極菌屬萬氏霉屬彎孢屬賽多孢屬尖端賽多孢多育賽多孢接合菌根霉屬毛霉屬根毛霉屬犁頭霉屬醫(yī)學(xué)重要的絲狀真菌分類第3頁，共32頁，2023年，2月20日，星期三白色念珠菌（Candidaalbicans)光滑念珠菌(C.glabrata)熱帶念珠菌(C.Tropicalis)近平滑念珠菌(C.Parapsilisis)克柔念珠菌(C.Krusei)煙曲霉(A.fumigatus)黃曲霉(A.flavus)臨床常見病原真菌第4頁，共32頁，2023年，2月20日，星期三真菌菌落形態(tài)第5頁，共32頁，2023年，2月20日，星期三真菌菌落形態(tài)第6頁，共32頁，2023年，2月20日，星期三真菌菌落形態(tài)第7頁，共32頁，2023年，2月20日，星期三區(qū)分念珠菌和絲狀真菌第8頁，共32頁，2023年，2月20日，星期三假菌絲和真菌絲的區(qū)別—曲霉菌菌絲分隔第9頁，共32頁，2023年，2月20日，星期三假菌絲第10頁，共32頁，2023年，2月20日，星期三血涂片革蘭染色馬內(nèi)菲青霉菌的菌絲第11頁，共32頁，2023年，2月20日，星期三膿標(biāo)本直接涂片革蘭染色接合菌菌絲第12頁，共32頁，2023年，2月20日，星期三表現(xiàn)念珠菌絲狀真菌發(fā)熱++++++++多發(fā)性關(guān)節(jié)炎++-血++-皮膚損害++-肝損害++罕見竇道-++呼吸系統(tǒng)++++中樞系統(tǒng)稀少++真菌感染的臨床表現(xiàn)第13頁，共32頁，2023年，2月20日，星期三形態(tài)學(xué)檢查顯微鏡檢查

（革蘭染色、KOH壓片，乳酸棉芬蘭染色）培養(yǎng)檢查-培養(yǎng)時(shí)間5-7天組織病理學(xué)特殊檢查血清學(xué)試驗(yàn)（G實(shí)驗(yàn)，GM實(shí)驗(yàn)）分子生物學(xué)真菌感染的實(shí)驗(yàn)室診斷方法第14頁，共32頁，2023年，2月20日，星期三念珠菌直接涂片結(jié)果解讀可見真菌孢子及假絲（念珠菌）可見真菌孢子未見假絲（念珠菌）找到真菌菌絲（絲狀真菌，如曲霉，毛霉）

第15頁，共32頁，2023年，2月20日，星期三是最簡(jiǎn)單也是最實(shí)用的檢查方法陽性結(jié)果可以確定真菌感染，陰性結(jié)果亦不能排除診斷如果在無菌體液的直接鏡檢中發(fā)現(xiàn)有真菌成分?？纱_立深部真菌病的診斷；但一般在有菌部位則只有發(fā)現(xiàn)大量真菌菌絲方可作出診斷快速，常在1-2小時(shí)出結(jié)果經(jīng)常是唯一的診斷依據(jù)真菌標(biāo)本的直接鏡鑒第16頁，共32頁，2023年，2月20日，星期三曲霉菌形態(tài)學(xué)鑒定—煙曲霉菌落第17頁，共32頁，2023年，2月20日，星期三棉蘭染色煙曲霉鏡下圖第18頁，共32頁，2023年，2月20日，星期三棉蘭染色—黃曲霉第19頁，共32頁，2023年，2月20日，星期三棉蘭染色—黑曲霉第20頁，共32頁，2023年，2月20日，星期三棉蘭染色—構(gòu)巢曲霉第21頁，共32頁，2023年，2月20日，星期三棉蘭染色—小孢根霉第22頁，共32頁，2023年，2月20日，星期三棉蘭染色—稻根霉第23頁，共32頁，2023年，2月20日，星期三棉蘭染色制片第24頁，共32頁，2023年，2月20日，星期三（1，3）-β-D葡聚糖（簡(jiǎn)稱G實(shí)驗(yàn)）：可特異性激活鱟變形細(xì)胞溶解產(chǎn)物中的G因子，引起裂解物的凝固，故稱G試驗(yàn)。

可檢測(cè)多種致病真菌感染：念珠菌，曲霉菌，肺孢子菌，鐮刀菌，地霉，組織胞漿菌，毛孢子菌等。不能用于檢測(cè)隱球菌和接合菌的感染早期診斷：可先于臨床診斷4天臨床常見的真菌血清學(xué)診斷方法第25頁，共32頁，2023年，2月20日，星期三假陽性血液透析、腹膜透析（應(yīng)用纖維素膜）某些抗腫瘤藥物的應(yīng)用如香菇多糖和磺胺類藥物病人輸入白蛋白、球蛋白、脂肪乳、凝血因子某些細(xì)菌敗血癥（尤其是鏈球菌敗血癥）手術(shù)中使用棉紗，棉拭子對(duì)策：動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)葡聚糖的變化假陰性:隱球菌具有厚壁胞膜，在免疫缺陷患者體內(nèi)生長(zhǎng)緩慢，導(dǎo)致試驗(yàn)呈假陰性。假陽性假陰性第26頁，共32頁，2023年，2月20日，星期三診斷：侵襲性曲霉菌感染（IPA），對(duì)侵襲性曲霉病的診斷具有較高的靈敏度和特異度，尤其在骨髓移植和血液病等免疫抑制的患者中。檢測(cè)范圍：曲霉菌、青霉菌，擬青霉。鏈格孢。GM試驗(yàn)第27頁，共32頁，2023年，2月20日，星期三應(yīng)用哌拉西林/他唑巴坦、阿莫西林/克拉維酸。谷類食物和脂質(zhì)甜點(diǎn)中的GM抗原。腸道中定值的曲霉釋放GM進(jìn)入血液循環(huán)。假陽性第28頁，共32頁，2023年，2月20日，星期三侵襲性念珠菌病是導(dǎo)致危重病患者死亡的主要疾病之一，在美國及許多發(fā)達(dá)國家位居醫(yī)院血源性感染的第四位，許多權(quán)威人士估計(jì)由其導(dǎo)致的成人死亡率為15%-25%,新生兒和兒童死亡率為10%-15%。侵襲性曲霉病病死率達(dá)50%?？拐婢幾饔糜谡婢?xì)胞的同時(shí)也容易對(duì)人體細(xì)胞產(chǎn)生毒性作用。臨床治療真菌感染的藥物有限、用藥劑量較大、療程長(zhǎng)、因此不良反應(yīng)較多、毒性較大，成為臨床應(yīng)用抗真菌藥物的主要瓶頸。侵襲性真菌感染的流行病學(xué)第29頁，共32頁，2023年，2月20日，星期三侵襲性念珠菌病念珠菌血癥播散性念珠菌病心內(nèi)膜和腦膜念珠菌病深部器官念珠菌病侵襲性念珠菌病的定義第30頁，共32頁，2023年，2月20日，星期三患者簡(jiǎn)介：女性，37歲，農(nóng)民，因“咳嗽，咳痰4天，加重伴喘憋1天，意識(shí)不清2小時(shí)”于2014年5月7日入院。當(dāng)日下午即行支氣管鏡檢查，示氣管粘膜充血，水腫，糜爛，大量黃粘痰，留標(biāo)本送檢。入院診斷考慮“重癥支氣管哮喘”，予甲基強(qiáng)的松龍80mg,氨茶堿0.25，硫酸鎂2.5分次點(diǎn)滴，癥狀不見好轉(zhuǎn)。結(jié)合支氣管鏡所見，絲狀真菌感染不能除外。病例分析第31頁，共32頁，2023年，2月20日，星期三病原學(xué)診斷：5月7日痰涂片可見真菌菌絲，菌絲呈45度折角，似曲霉菌絲。痰培養(yǎng)及BALF培養(yǎng)為煙曲霉菌。5月9日BALF培養(yǎng)為煙曲霉菌；5月11，12，13，16日氣道分泌物培養(yǎng)為煙曲霉菌。