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PAGE7PAGE10專題一傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用課題1果酒和果醋的制作1.果酒制作的原理(1)人類利用微生物發(fā)酵制作果酒,該過(guò)程用到的微生物是,它的代謝類型是,與異化作用有關(guān)的方程式有。生活狀態(tài):進(jìn)行發(fā)酵,產(chǎn)生大量。(2)果酒制作條件傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)所使用的酵母菌的來(lái)源是。酵母菌生長(zhǎng)的最適溫度是;PH呈;(3)紅色葡萄酒呈現(xiàn)顏色的原因是:酒精發(fā)酵過(guò)程中,隨著的提高,紅色葡萄皮的進(jìn)入發(fā)酵液,使葡萄酒呈色。(4)在、的發(fā)酵液中,酵母菌可以生長(zhǎng)繁殖,而絕大多數(shù)其它微生物都因無(wú)法適應(yīng)這一環(huán)境而受到抑制。2.果醋的制作原理(1)果醋發(fā)酵菌種是,新陳代謝類型。(2)當(dāng)氧氣和糖源充足時(shí)醋酸菌將糖分解成,當(dāng)糖源不足時(shí)醋酸菌將變?yōu)樵僮兂纱姿?,其反?yīng)式。3.操作過(guò)程應(yīng)注意的問(wèn)題(1)為防止發(fā)酵液被污染,發(fā)酵瓶要用消毒。(2)葡萄汁裝入發(fā)酵瓶時(shí),要留出大約的空間。(3)制作葡萄酒時(shí)將溫度嚴(yán)格控制在,時(shí)間控制在d左右,可通過(guò)對(duì)發(fā)酵的情況進(jìn)行及時(shí)的監(jiān)測(cè)。(4)制葡萄醋的過(guò)程中,將溫度嚴(yán)格控制在,時(shí)間控制在d,并注意適時(shí)在充氣。4.酒精的檢驗(yàn)(1)檢驗(yàn)試劑:。(2)反應(yīng)條件及現(xiàn)象:在條件下,反應(yīng)呈現(xiàn)。5.制作果酒、果醋的實(shí)驗(yàn)流程挑選葡萄→→→→↓↓果酒果醋P4旁欄思考題1.你認(rèn)為應(yīng)該先洗葡萄還是先除去枝梗,為什么?應(yīng)該先沖洗葡萄,然后再除去枝梗,以避免除去枝梗時(shí)引起葡萄破損,增加被雜菌污染的機(jī)會(huì)。2.你認(rèn)為應(yīng)該從哪些方面防止發(fā)酵液被污染?需要從發(fā)酵制作的過(guò)程進(jìn)行全面的考慮,因?yàn)椴僮鞯拿恳徊蕉伎赡芑烊腚s菌。例如:榨汁機(jī)、發(fā)酵裝置要清洗干凈;每次排氣時(shí)只需擰松瓶蓋、不要完全揭開(kāi)瓶蓋等。3.制作葡萄酒時(shí),為什么要將溫度控制在18~250C?制作葡萄醋時(shí),為什么要將溫度控制在30~350C?溫度是酵母菌生長(zhǎng)和發(fā)酵的重要條件。200C左右最適合酵母菌繁殖,因此需要將溫度控制在其最適溫度范圍內(nèi)。而醋酸菌是嗜溫菌,最適生長(zhǎng)溫度為30~350C,因此要將溫度控制在30~350C。4.制葡萄醋時(shí),為什么要適時(shí)通過(guò)充氣口充氣?醋酸菌是好氧菌,再將酒精變成醋酸時(shí)需要養(yǎng)的參與,因此要適時(shí)向發(fā)酵液中充氣。P4:A同學(xué):每次排氣時(shí)只需擰松瓶蓋,不要完全揭開(kāi)瓶蓋;制醋時(shí),再將瓶蓋打開(kāi),蓋上一層紗布,進(jìn)行葡萄醋的發(fā)酵。來(lái)防止發(fā)酵液被污染,因?yàn)椴僮鞯拿恳徊蕉伎赡芑烊腚s菌B同學(xué):分析果酒和果醋的發(fā)酵裝置中充氣口、排氣口和出料口分別有哪些作用。為什么排氣口要通過(guò)一個(gè)長(zhǎng)而彎曲的膠管與瓶身連接?充氣口:是在醋酸發(fā)酵時(shí)連接充氣泵進(jìn)行充氣用的;排氣口:是在酒精發(fā)酵時(shí)用來(lái)排出二氧化碳的;出料口:是用來(lái)取樣的。排氣口要通過(guò)一個(gè)長(zhǎng)而彎曲的膠管與瓶身連接,其目的是防止空氣中微生物的污染。使用該裝置制酒時(shí),應(yīng)該關(guān)閉充氣口;制醋時(shí),應(yīng)將充氣口連接氣泵,輸入氧氣。課題2腐乳的制作1.制作原理(1).經(jīng)過(guò)微生物的發(fā)酵,豆腐中的蛋白質(zhì)被分解成小分子的和,脂肪被分解成和,因而更利于消化吸收。(2).腐乳的發(fā)酵有多種微生物參與,如、、、等,其中起主要作用的是。它是一種絲狀,常見(jiàn)、、、上。(3).現(xiàn)代的腐乳生產(chǎn)是在嚴(yán)格的條件下,將優(yōu)良菌種直接接種在豆腐上,這樣可以避免其他菌種的,保證產(chǎn)品的質(zhì)量。2.腐乳制作的實(shí)驗(yàn)流程:讓豆腐長(zhǎng)出→ → →密封腌制。3.實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)(1)在豆腐上長(zhǎng)出毛霉時(shí),溫度控制在,自然條件下毛霉的菌種來(lái)自空氣中的。(2)將長(zhǎng)滿毛霉的豆腐塊分層加鹽,加鹽量要隨著擺放層數(shù)的加高而,近瓶口的表層要。加鹽的目的是使豆腐塊失水,利于,同時(shí)也能的生長(zhǎng)。鹽的濃度過(guò)低,;鹽的濃度過(guò)高,。(3)鹵湯中酒精的含量應(yīng)控制在左右,它能微生物的生長(zhǎng),同時(shí)也與豆腐乳獨(dú)特的形成有關(guān)。酒精含量過(guò)高,;酒精含量過(guò)低,。香辛料可以調(diào)制腐乳的風(fēng)味,同時(shí)也有作用。(4)瓶口密封時(shí),最好將瓶口,防止瓶口污染。P6旁欄思考題1.你能利用所學(xué)的生物學(xué)知識(shí),解釋豆腐長(zhǎng)白毛是怎么一回事?豆腐上生長(zhǎng)的白毛是毛霉的白色菌絲。嚴(yán)格地說(shuō)是直立菌絲,在豆腐中還有匍匐菌絲。2.王致和為什么要撒許多鹽,將長(zhǎng)毛的豆腐腌起來(lái)?鹽能防止雜菌污染,避免豆腐腐敗。3.你能總結(jié)出王致和做腐乳的方法嗎?讓豆腐長(zhǎng)出毛霉→加鹽腌制→密封腌制。P7旁欄思考題1.我們平常吃的豆腐,哪種適合用來(lái)做腐乳?含水量為70%左右的豆腐適于作腐乳。用含水量過(guò)高的豆腐制腐乳,不易成形。2.吃腐乳時(shí),你會(huì)發(fā)現(xiàn)腐乳外部有一層致密的“皮”。這層“皮”是怎樣形成的呢?它對(duì)人體有害嗎?它的作用是什么?“皮”是前期發(fā)酵時(shí)在豆腐表面上生長(zhǎng)的菌絲(匍匐菌絲),它能形成腐乳的“體”,使腐乳成形。“皮”對(duì)人體無(wú)害。P8練習(xí)1.腌制腐乳時(shí),為什么要隨豆腐層的加高而增加鹽的含量?為什么在接近瓶口的表面要將鹽厚鋪一些?越接近瓶口,雜菌污染的可能性越大,因此要隨著豆腐層的加高增加鹽的用量,在接近瓶口的表面,鹽要鋪厚一些,以有效防止雜菌污染。2.怎樣用同樣的原料制作出不同風(fēng)味的腐乳?(可以不看)在酒和料上作變動(dòng)紅腐乳:又稱紅方,指在后期發(fā)酵的湯料中,配以著色劑紅曲,釀制而成的腐乳。白腐乳:又稱白方,指在后期發(fā)酵過(guò)程中,不添加任何著色劑,湯料以黃酒、白酒、香料為主釀制而成的腐乳,在釀制過(guò)程中因添加不同的調(diào)味輔料,使其呈現(xiàn)不同的風(fēng)味特色,目前大致包括糟方、油方、霉香、醉方、辣方等品種。青腐乳:又稱青方,俗稱“臭豆腐”,指在后期發(fā)酵過(guò)程中,以低度鹽水為湯料釀制而成的腐乳,具有特有的氣味,表面呈青色。醬腐乳:又稱醬方,指在后期發(fā)酵過(guò)程中,以醬曲(大豆醬曲、蠶豆醬曲、面醬曲等)為主要輔料釀制而成的腐乳。課題3制作泡菜并檢測(cè)亞硝酸鹽含量1.乳酸菌代謝類型為,在情況狂下,將葡萄糖分解為乳酸。在自然界中分布廣泛,在、、、內(nèi)都有分布。常見(jiàn)的乳酸菌有和兩種,其中常用于生產(chǎn)酸奶。2.亞硝酸鹽為,易溶于,在食品生產(chǎn)中用作。一般不會(huì)危害人體健康,但當(dāng)人體攝入硝酸鹽總量達(dá)g時(shí),會(huì)引起中毒;當(dāng)攝入總量達(dá)到g時(shí),會(huì)引起死亡。在特定的條件下,如、和的作用下,會(huì)轉(zhuǎn)變成致癌物質(zhì)——亞硝胺,亞硝胺對(duì)動(dòng)物有致畸和致突變作用。3.泡菜制作大致流程:原料處理→→裝壇→→成品(1)配制鹽水:清水和鹽的比例為,鹽水后備用。(2)裝壇:蔬菜裝至?xí)r加入香辛料,裝至?xí)r加鹽水,鹽水要,蓋好壇蓋。壇蓋邊沿水槽中,保證壇內(nèi)環(huán)境。(3)腌制過(guò)程種要注意控制腌制的、和。溫度過(guò)高、食鹽用量不足10%、過(guò)短,容易造成,。4.測(cè)亞硝酸鹽含量的原理是。將顯色反應(yīng)后的樣品與已知濃度的進(jìn)行比較,可以大致出泡菜中亞硝酸鹽的含量。測(cè)定步驟:配定溶液→→制備樣品處理液→P9旁欄思考題:為什么含有抗生素的牛奶不能發(fā)酵成酸奶?酸奶的制作依靠的是乳酸菌的發(fā)酵作用。抗生素能夠殺死或抑制乳酸菌的生長(zhǎng),因此含有抗生素的牛奶不能發(fā)酵成酸奶。P10旁欄思考題:1.為什么日常生活中要多吃新鮮蔬菜,不宜多吃腌制蔬菜?有些蔬菜,入小白菜和蘿卜等,含有豐富的硝酸鹽。當(dāng)這些蔬菜放置過(guò)久發(fā)生變質(zhì)(發(fā)黃、腐爛)或者煮熟后存放太久時(shí),蔬菜中的硝酸鹽會(huì)被微生物還原成亞硝酸鹽,危害人體健康。2.為什么泡菜壇內(nèi)有時(shí)會(huì)長(zhǎng)一層白膜?你認(rèn)為這層白膜是怎么形成的?形成白膜是由于產(chǎn)膜酵母的繁殖。酵母菌是兼性厭氧微生物,泡菜發(fā)酵液營(yíng)養(yǎng)豐富,其表面氧氣含量也很豐富,適合酵母菌繁殖。P12練習(xí):2.你能總結(jié)果酒、果醋、腐乳、泡菜這幾種發(fā)酵食品在利用微生物的種類和制作原理方面的不同嗎?你能總結(jié)出傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的共同特點(diǎn)嗎?果酒的制作主要利用的是酵母菌的酒精發(fā)酵,果醋的制作利用的是醋酸菌將酒精轉(zhuǎn)變成醋酸的代謝,腐乳的制作利用的主要是毛霉分泌的蛋白酶等酶類,泡菜的制作利用的是乳酸菌的乳酸發(fā)酵。傳統(tǒng)的發(fā)酵技術(shù)都巧妙的利用了天然菌種,都為特定的菌種提供了良好的生存條件,最終的發(fā)酵產(chǎn)物不是單一的組分,而是成分復(fù)雜的混合物。技術(shù)都需要為培養(yǎng)物提供充足的營(yíng)養(yǎng),但無(wú)土栽培技術(shù)的操作并不需要保證無(wú)菌的條件,而其他兩種技術(shù)都要求嚴(yán)格的無(wú)菌條件。3.提示:這是一道開(kāi)放性的問(wèn)題,答案并不惟一,重點(diǎn)在于鼓勵(lì)學(xué)生積極參與,從不同的角度思考問(wèn)題。例如,正是由于證明了微生物不是自發(fā)產(chǎn)生的,微生物學(xué)才可能發(fā)展成為一門(mén)獨(dú)立的學(xué)科;巴斯德實(shí)驗(yàn)中用到的加熱滅菌的方法導(dǎo)致了有效的滅菌方法的出現(xiàn),而這一滅菌原理也適用于食品的保存等。課題2土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)1.尿素只有被分解成之后,才能被植物吸收利用。選擇分解尿素細(xì)菌的培養(yǎng)基特點(diǎn):惟一氮源,按物理性質(zhì)歸類為培養(yǎng)基。2..PCR()是一種在體外將。此項(xiàng)技術(shù)的自動(dòng)化,要求使用耐高溫的DNA聚合酶。3實(shí)驗(yàn)室中微生物的篩選應(yīng)用的原理是:人為提供有利于生長(zhǎng)的條件(包括等),同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)。4.選擇培養(yǎng)基是指。5.常用來(lái)統(tǒng)計(jì)樣品中活菌數(shù)目的方法是。即當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí),培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落,來(lái)源于樣品稀釋液中的。通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù),就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確,一般選擇菌落數(shù)在的平板進(jìn)行計(jì)數(shù),計(jì)數(shù)公式是。利用稀釋涂布平板法成功統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的關(guān)鍵是。另外,也是測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法。6.一般來(lái)說(shuō),統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目。這是因?yàn)?。因此,統(tǒng)計(jì)結(jié)果一般用而不是活菌數(shù)來(lái)表示。7.設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)的主要目的是,提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。對(duì)照實(shí)驗(yàn)是。滿足該條件的稱為,未滿足該條件的稱為。8.實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)包括的內(nèi)容有:、、和,具體的實(shí)驗(yàn)步驟以及時(shí)間安排等的綜合考慮和安排。9.不同種類的微生物,往往需要不同的培養(yǎng)和培養(yǎng)。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,一般每隔24小時(shí)統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目,選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果,這樣可以。10.土壤有“”之稱,同其他生物環(huán)境相比,土壤中微生物、。11.土壤中的微生物約是細(xì)菌,細(xì)菌適宜在酸堿度接近潮濕土壤中生長(zhǎng)。土壤中微生物的數(shù)量不同,分離不同微生物采用的的稀釋度不同。12.一般來(lái)說(shuō),在一定的培養(yǎng)條件下,同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征。這些特征包括菌落的、、和等方面。13.在進(jìn)行多組實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,應(yīng)注意做好標(biāo)記,其目的是。14.對(duì)所需的微生物進(jìn)行初步篩選,只是分離純化菌種的第一步,要對(duì)分離的菌種進(jìn)行一步的鑒定,還需要借助的方法。15.在細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反應(yīng)中,細(xì)菌合成的將尿素分解成了。氨會(huì)使培養(yǎng)基的堿性,PH。因此,我們可以通過(guò)檢測(cè)培養(yǎng)基變化來(lái)判斷該化學(xué)反應(yīng)是否發(fā)生。在以為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入指示劑。培養(yǎng)某種細(xì)菌后,如果PH升高,指示劑將變,說(shuō)明該細(xì)菌能夠。P22旁欄思考題1.想一想,如何從平板上的菌落數(shù)推測(cè)出每克樣品中的菌落數(shù)?答:統(tǒng)計(jì)某一稀釋度下平板上的菌落數(shù),最好能統(tǒng)計(jì)3個(gè)平板,計(jì)算出平板菌落數(shù)的平均值,然后按課本旁欄的公式進(jìn)行計(jì)算。P22兩位同學(xué)用稀釋涂布平板法測(cè)定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù),在對(duì)應(yīng)稀釋倍數(shù)106的培養(yǎng)集中,得到以下兩種統(tǒng)計(jì)結(jié)果:1.第一位同學(xué)在該濃度下涂布了一個(gè)平板,統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)為230;2.第二位同學(xué)在該濃度下涂布了三個(gè)平板……第一位同學(xué)只涂布了一個(gè)平板,沒(méi)有設(shè)置重復(fù)組,因此結(jié)果不具有說(shuō)服力。第二位同學(xué)考慮到設(shè)置重復(fù)組的問(wèn)題,涂布了3個(gè)平板,但是,其中1個(gè)平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與另2個(gè)相差太遠(yuǎn),說(shuō)明在操作過(guò)程中可能出現(xiàn)了錯(cuò)誤,因此,不能簡(jiǎn)單地將3個(gè)平板的計(jì)數(shù)值用來(lái)求平均值。P22設(shè)置對(duì)照A同學(xué)的結(jié)果與其他同學(xué)不同,可能的解釋有兩種。一是由于土樣不同,二是由于培養(yǎng)基污染或操作失誤。究竟是哪個(gè)原因,可以通過(guò)實(shí)驗(yàn)來(lái)證明。實(shí)驗(yàn)方案有兩種。一種方案是可以由其他同學(xué)用與A同學(xué)一樣的土樣進(jìn)行實(shí)驗(yàn),如果結(jié)果與A同學(xué)一致,則證明A無(wú)誤;如果結(jié)果不同,則證明A同學(xué)存在操作失誤或培養(yǎng)基的配制有問(wèn)題。另一種方案是將A同學(xué)配制的培養(yǎng)基在不加土樣的情況下進(jìn)行培養(yǎng),作為空白對(duì)照,以證明培養(yǎng)基是否受到污染。通過(guò)這個(gè)事例可以看出,實(shí)驗(yàn)結(jié)果要有說(shuō)服力,對(duì)照的設(shè)置是必不可少的。P24旁欄思考題為什么分離不同的微生物要采用不同的稀釋度?測(cè)定土壤中細(xì)菌的總量和測(cè)定土壤中能分解尿素的細(xì)菌的數(shù)量,選用的稀釋范圍相同嗎?這是因?yàn)橥寥乐懈黝愇⑸锏臄?shù)量(單位:株/kg)是不同的,例如在干旱土壤中的上層樣本中:好氧及兼性厭氧細(xì)菌數(shù)約為2185萬(wàn),放線菌數(shù)約為477萬(wàn),霉菌數(shù)約為23.1萬(wàn)。因此,為獲得不同類型的微生物,就需要按不同的稀釋度進(jìn)行分離,同時(shí)還應(yīng)當(dāng)有針對(duì)性地提供選擇培養(yǎng)的條件。P25結(jié)果分析與評(píng)價(jià)1.培養(yǎng)物中是否有雜菌污染以及選擇培養(yǎng)基是否篩選出菌落對(duì)照的培養(yǎng)皿在培養(yǎng)過(guò)程中沒(méi)有菌落生長(zhǎng),說(shuō)明培養(yǎng)基沒(méi)有被雜菌污染。牛肉膏培養(yǎng)基的菌落數(shù)目明顯大于選擇培養(yǎng)基的數(shù)目,說(shuō)明選擇培養(yǎng)基已篩選出一些菌落。2.樣品的稀釋操作是否成功如果得到了2個(gè)或2個(gè)以上菌落數(shù)目在30~300的平板,則說(shuō)明稀釋操作比較成功,并能夠進(jìn)行菌落的計(jì)數(shù)。3.重復(fù)組的結(jié)果是否一致如果學(xué)生選取的是同一種土樣,統(tǒng)計(jì)的結(jié)果應(yīng)該接近。如果結(jié)果相差太遠(yuǎn),教師需要引導(dǎo)學(xué)生一起分析產(chǎn)生差異的原因。P26練習(xí)2.提示:反芻動(dòng)物的瘤胃中含有大量的微生物,其中也包括分解尿素的微生物。由于瘤胃中的微生物多為厭氧菌,接觸空氣后會(huì)死亡,因此分離其中能分解尿素的微生物除了需要準(zhǔn)備選擇培養(yǎng)基外,還應(yīng)參照厭氧菌的培養(yǎng)方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。課題3分解纖維素的微生物的分離1.纖維素是類物質(zhì),是自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物,此外,木材、作物秸稈等也富含纖維素。2.纖維素酶是一種酶,一般認(rèn)為它至少包括三種組分,即、和,前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖,第三種酶將纖維二糖分解成。正是在這三種酶的協(xié)同作用下,纖維素最終被水解成葡萄糖,為微生物的生長(zhǎng)提供營(yíng)養(yǎng),同樣,也可以為人類所利用。3.篩選纖維素分解菌可以用法,這種方法能夠通過(guò)直接對(duì)微生物進(jìn)行篩選。可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成,但并不和水解后的和發(fā)生這種反應(yīng)。纖維素分解菌能產(chǎn)生分解纖維素,從而使菌落周?chē)纬伞?.分離分解纖維素的微生物的實(shí)驗(yàn)流程圖如下:→→梯度稀釋→→。5.為確定得到的菌是否是纖維素分解菌,還學(xué)進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)。纖維素酶的發(fā)酵方法有發(fā)酵和發(fā)酵。測(cè)定方法一般是對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的進(jìn)行定量測(cè)定。P28旁欄思考題1.本實(shí)驗(yàn)的流程與課題2中的實(shí)驗(yàn)流程有哪些異同?本實(shí)驗(yàn)流程與課題2的流程的區(qū)別如下。課題2是將土樣制成的菌懸液直接涂布在以尿素為惟一氮源的選擇性培養(yǎng)基上,直接分離得到菌落。本課題通過(guò)選擇培養(yǎng),使纖維素分解菌得到增殖后,再將菌液涂布在選擇培養(yǎng)基上。其他步驟基本一致。2.為什么要在富含纖維素的環(huán)境中尋找纖維素分解菌?由于生物與環(huán)境的相互依存關(guān)系,在富含纖維素的環(huán)境中,纖維素分解菌的含量相對(duì)提高,因此從這種土樣中獲得目的微生物的幾率要高于普通環(huán)境。3.將濾紙埋在土壤中有什么作用?你認(rèn)為濾紙應(yīng)該埋進(jìn)土壤多深?將濾紙埋在土壤中能使纖維素分解菌相對(duì)聚集,實(shí)際上是人工設(shè)置纖維素分解菌生存的適宜環(huán)境。一般應(yīng)將紙埋于深約10cm左右腐殖土壤中。P29旁欄思考題1.想一想,這兩種方法各有哪些優(yōu)點(diǎn)與不足?你打算選用哪一種方法?(兩種剛果紅染色法的比較)方法一是傳統(tǒng)的方法,缺點(diǎn)是操作繁瑣,加入剛果紅溶液會(huì)使菌落之間發(fā)生混雜;其優(yōu)點(diǎn)是這樣顯示出的顏色反應(yīng)基本上是纖維素分解菌的作用。方法二的優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便,不存在菌落混雜問(wèn)題,缺點(diǎn)是由于纖維素和瓊脂、土豆汁中都含有淀粉類物質(zhì),可以使能夠產(chǎn)生淀粉酶的微生物出現(xiàn)假陽(yáng)性反應(yīng)。但這種只產(chǎn)生淀粉酶的微生物產(chǎn)生的透明圈較為模糊,因?yàn)榕囵B(yǎng)基中纖維素占主要地位,因此可以與纖維素酶產(chǎn)生的透明圈相區(qū)分。方法二的另一缺點(diǎn)是:有些微生物具有降解色素的能力,它們?cè)陂L(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)降解剛果紅形成明顯的透明圈,與纖維素分解菌不易區(qū)分。2.為什么選擇培養(yǎng)能夠“濃縮”所需的微生物?在選擇培養(yǎng)的條件下,可以使那些能夠適應(yīng)這種營(yíng)養(yǎng)條件的微生物得到迅速繁殖,而那些不適應(yīng)這種營(yíng)養(yǎng)條件的微生物的繁殖被抑制,因此可以起到“濃縮”的作用。P29六、課題成果評(píng)價(jià)1.培養(yǎng)基的制作是否合格以及選擇培養(yǎng)基是否篩選出菌落:對(duì)照的培養(yǎng)基在培養(yǎng)過(guò)程中沒(méi)有菌落生長(zhǎng)則說(shuō)明培養(yǎng)基制作合格。如果觀察到產(chǎn)生透明圈的菌落,則說(shuō)明可能獲得了分解纖維素的微生物。2.分離的結(jié)果是否一致:由于在土壤中細(xì)菌的數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于真菌和放線菌的數(shù)量,因此最容易分離得到的是細(xì)菌。但由于所取土樣的環(huán)境不同,學(xué)生也可能得到真菌和放線菌等不同的分離結(jié)果。P30練習(xí)2.答:流程圖表示如下。土壤取樣→選擇培養(yǎng)(此步是否需要,應(yīng)根據(jù)樣品中目的菌株數(shù)量的多少來(lái)確定)→梯度稀釋→將菌懸液涂布到有特定選擇作用的培養(yǎng)基上→挑選單菌落→發(fā)酵培養(yǎng)專題六植物有效成分的提取課題1植物芳香油的提取【導(dǎo)學(xué)誘思】1.植物芳香油的來(lái)源天然香料的主要來(lái)源是和。動(dòng)物香料主要來(lái)源于麝、靈貓、海貍和抹香鯨等,植物香料的來(lái)源更為廣泛。植物芳香油可以從大約50多個(gè)科的植物中提取。例如,工業(yè)生產(chǎn)中,玫瑰花用于提取,樟樹(shù)樹(shù)干用于提取。提取出的植物芳香油具有很強(qiáng)的,其組成也,主要包括及其思考:你能說(shuō)出一些用于提取某些植物芳香油的器官嗎?并分別可提取哪種芳香油?2.植物芳香油的提取方法植物芳香油的提取方法有、和等。具體采用那種方法要根據(jù)植物原料的特點(diǎn)來(lái)決定。是植物芳香油提取的常用方法,它的原理是。根據(jù)蒸餾過(guò)程中的位置,可以將水蒸氣蒸餾法劃分為、和。其中,水中蒸餾的方法對(duì)于有些原料不適用,如柑橘和檸檬。這是因?yàn)榈葐?wèn)題。因此,柑橘、檸檬芳香油的制備通常使用法。植物芳香油不僅,而且易溶于,如石油醚、酒精、乙醚和戊烷等。不適于用水蒸氣蒸餾的原料,可以考慮使用法。萃取法是將的方法。芳香油溶解于有機(jī)溶劑后,只需蒸發(fā)出有機(jī)溶劑,就可以獲得純凈的了。但是,用于萃取的有機(jī)溶劑必須,,否則會(huì)影響芳香油的質(zhì)量。3、玫瑰精油的提取玫瑰精油是制作的主要成分,能使人產(chǎn)生愉悅感。由于玫瑰精油化學(xué)性質(zhì),難溶于,易溶于,能隨一同蒸餾,通常采用法中的法。提取玫瑰精油的實(shí)驗(yàn)流程、、、、、。思考:在提取過(guò)程中,如何對(duì)乳濁液的處理和玫瑰液的回收?4、橘皮精油的提取從橘皮中提取的,主要成分為,具有很高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。橘皮精油主要儲(chǔ)藏在部分,由于橘皮精油的有效成分在用水蒸氣蒸餾時(shí)會(huì)發(fā)生部分水解,使用水中蒸餾法又會(huì)產(chǎn)生原料焦糊的問(wèn)題,所以一般采用法。具體的流程是、、、、、、。實(shí)驗(yàn)案例案例一

玫瑰精油的提取5月上、中旬是玫瑰的盛開(kāi)期,最好是選用當(dāng)天采摘的鮮玫瑰花。將花瓣用清水沖洗,去掉上面的灰塵等雜質(zhì),瀝干水分。由于玫瑰精油化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,從玫瑰花中提取玫瑰精油可采取水中蒸餾法。本實(shí)驗(yàn)的具體操作步驟如下。1.稱取50g玫瑰花瓣,放入500mL的圓底燒瓶中,加入200mL蒸餾水。按教科書(shū)圖6-2所示安裝蒸餾裝置。蒸餾裝置包括:鐵架臺(tái)兩個(gè)、酒精燈、石棉網(wǎng)、蒸餾瓶、橡膠塞、蒸餾頭、溫度計(jì)、直型冷凝管、接液管、錐形瓶,以及連接進(jìn)水口和出水口的橡皮管。所有儀器必須事先干燥,保證無(wú)水。整套蒸餾裝置可分為左、中、右三部分,其中左邊的部分通過(guò)加熱進(jìn)行蒸餾,中部將蒸餾物冷凝,右邊的部分用來(lái)接收。安裝儀器一般都按照自下而上、從左到右的順序。拆卸儀器的順序與安裝時(shí)相反。具體安裝順序和方法如下。(1)固定熱源──酒精燈。(2)固定蒸餾瓶,使其離熱源的距離如教科書(shū)中圖6-2所示,并且保持蒸餾瓶軸心與鐵架臺(tái)的水平面垂直。(3)安裝蒸餾頭,使蒸餾頭的橫截面與鐵架臺(tái)平行。(4)連接冷凝管。保證上端出水口向上,通過(guò)橡皮管與水池相連;下端進(jìn)水口向下,通過(guò)橡皮管與水龍頭相連。(5)連接接液管(或稱尾接管)。(6)將接收瓶瓶口對(duì)準(zhǔn)尾接管的出口。常壓蒸餾一般用錐形瓶而不用燒杯作接受器,接收瓶應(yīng)在實(shí)驗(yàn)前稱重,并做好記錄。(7)將溫度計(jì)固定在蒸餾頭上,使溫度計(jì)水銀球的上限與蒸餾頭側(cè)管的下限處在同一水平線上。2.蒸餾裝置安裝完畢后,可以在蒸餾瓶中加幾粒沸石,防止液體過(guò)度沸騰。打開(kāi)水龍頭,緩緩?fù)ㄈ肜渌?,然后開(kāi)始加熱。加熱時(shí)可以觀察到,蒸餾瓶中的液體逐漸沸騰,蒸氣逐漸上升,溫度計(jì)讀數(shù)也略有上升。當(dāng)蒸氣的頂端達(dá)到溫度計(jì)水銀球部位時(shí),溫度計(jì)讀數(shù)急劇上升。在整個(gè)蒸餾過(guò)程中,應(yīng)保證溫度計(jì)的水銀球上常有因冷凝作用而形成的液滴??刂普麴s的時(shí)間和速度,通常以每秒1~2滴為宜。蒸餾完畢,應(yīng)先撤出熱源,然后停止通水,最后拆卸蒸餾裝置,拆卸的順序與安裝時(shí)相反。3.收集錐形瓶中的乳白色的乳濁液,向錐形瓶中加入質(zhì)量濃度為0.1g/mL的氯化鈉溶液,使乳化液分層。然后將其倒入分液漏斗中,用分液漏斗將油層和水層完全分開(kāi)。打開(kāi)頂塞,再將活塞緩緩旋開(kāi),放出下層的玫瑰精油,用接收瓶收集。向接收瓶中加入無(wú)水硫酸鈉,吸去油層中含有的水分,放置過(guò)夜。為了更好地將油、水兩層液體分離,操作時(shí)應(yīng)注意正確使用分液漏斗。分液漏斗的使用方法如下。(1)首先把活塞擦干,為活塞均勻涂上一層潤(rùn)滑脂,注意切勿將潤(rùn)滑脂涂得太厚或使?jié)櫥M(jìn)入活塞孔中,以免污染萃取液。(2)塞好活塞后,把活塞旋轉(zhuǎn)幾圈,使?jié)櫥植季鶆颉2⒂盟畽z查分液漏斗的頂塞與活塞處是否滲漏,確認(rèn)不漏水后再使用。(3)將分液漏斗放置在大小合適的、并已固定在鐵架臺(tái)上的鐵圈中,關(guān)好活塞。將待分離的液體從上部開(kāi)口處倒入漏斗中,塞緊頂塞,注意頂塞不能涂潤(rùn)滑脂。(4)取下分液漏斗,用右手手掌頂住漏斗頂塞并握住漏斗頸,左手握住漏斗活塞處,大拇指壓緊活塞,將分液漏斗略傾斜,前后振蕩(開(kāi)始振蕩時(shí)要慢)。(5)振蕩后,使漏斗口仍保持原傾斜狀態(tài),左手仍握在漏斗活塞處,下部管口指向無(wú)人處,用拇指和食指旋開(kāi)活塞,使其釋放出漏斗內(nèi)的蒸氣或產(chǎn)生的氣體,以使內(nèi)外壓力平衡,這一步操作也稱做“放氣”。(6)重復(fù)上述操作,直至分液漏斗中只放出很少的氣體時(shí)為止。再將分液漏斗劇烈振蕩2~3min,然后將漏斗放回鐵圈中,待液體靜置分層。案例二

橘皮精油的提取課前準(zhǔn)備在實(shí)驗(yàn)前一天,教師需要準(zhǔn)備新鮮的、沒(méi)有霉?fàn)€的橘皮,用量可根據(jù)實(shí)驗(yàn)人數(shù)來(lái)決定。用清水沖洗橘皮,去掉灰塵等雜質(zhì),瀝干水分后,將橘皮攤放在干燥通風(fēng)處。將晾干的橘皮浸泡在pH大于12、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為7%~8%的石灰水中,時(shí)間為16~24h,中間翻動(dòng)2~3次。浸泡好的橘皮呈黃色、無(wú)白芯、稍硬、脆而不斷、具有彈性。這樣的橘皮在壓榨時(shí)不易打滑,橘油的噴射力強(qiáng);壓榨后的殘?jiān)暑w粒狀,殘?jiān)械暮康?,黏稠度不太高,過(guò)濾時(shí)比較順利,不易堵塞篩孔。提取橘皮精油的具體步驟如下。1.將浸泡后的橘皮,用流動(dòng)的水漂洗,洗凈后撈起、瀝干。切記一定要將橘皮徹底沖洗干凈。然后將橘皮粉碎至3mm大小,放入家用榨汁機(jī)或手動(dòng)壓榨機(jī)中粉碎。粉碎時(shí)加入與橘皮同質(zhì)量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.25%的小蘇打和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的硫酸鈉溶液,并調(diào)節(jié)pH為7~8。2.在榨出的油水混合液中加入明礬,使之沉淀并變澄清,然后用布袋過(guò)濾,除去糊狀殘?jiān)?。再將得到的混合物,?000r/min~8000r/min的轉(zhuǎn)速進(jìn)行高速離心。在正常情況下,離心后獲得的香精油將是澄清透明的。3.分離出的香精油往往帶有少量水分和蠟質(zhì)等雜質(zhì),為了進(jìn)一步除去雜質(zhì),可以將分離的產(chǎn)品放在5℃~10℃的冰箱中,靜置5~7d,讓雜質(zhì)與水下沉。然后用吸管吸出上層澄清的油層,再通過(guò)墊有濾紙或石棉紙的漏斗進(jìn)行減壓抽濾,得到黃色油狀的橘皮精油。課題成果評(píng)價(jià)(一)是否提取出了植物精油觀察學(xué)生提取出的玫瑰精油或橘皮精油,從顏色、氣味等方面來(lái)評(píng)價(jià)所提取的精油的純度和質(zhì)量。從玫瑰花提取的芳香油是淺黃色至黃色的液體,并帶有甜韻的玫瑰香;從橘皮提取的橘皮精油無(wú)色透明,具有誘人的橘香味。本課題只是對(duì)兩種精油進(jìn)行了初步的提取,其中仍然含有大量的雜質(zhì)。(二)出油率的計(jì)算根據(jù)教科書(shū)提供的公式計(jì)算出油率。如果出油率高,說(shuō)明實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)合理;如果出油率低,教師可以幫助學(xué)生從實(shí)驗(yàn)方法的選擇、實(shí)驗(yàn)過(guò)程的操作等各方面分析原因,改進(jìn)后再作嘗試。答案和提示練習(xí)1.答:植物芳香油一般都是由2~3種芳香油混合調(diào)配而成的,其中的基底油常取自植物的種子或果實(shí),比如胡桃油、甜杏油?;子团c其他芳香油調(diào)配在一起,能夠加強(qiáng)功效。從玫瑰花中提取出的玫瑰油稱為“液體黃金”,是世界香料工業(yè)不可取代的原料,多用于制造高級(jí)香水等化妝品。提取出的玫瑰油不含有任何添加劑或化學(xué)原料,是純天然的護(hù)膚品,具有極好的抗衰老和止癢作用,能夠促進(jìn)細(xì)胞再生、防止肌膚老化、平撫肌膚細(xì)紋,還具有使人放松、愉悅心情的功效。杏仁油富含礦物質(zhì)和維生素,是一種質(zhì)地輕柔、高滲透性的保濕劑。熏衣草精油取自熏衣草花,具有怡神、助睡眠、舒緩壓力的作用,此外它還具有降壓、止痛、促進(jìn)細(xì)胞再生的功能,可以用于治療燙傷和蚊蟲(chóng)叮咬、預(yù)防和改善脫發(fā)。檸檬精油取自檸檬果皮,具有消除緊張、焦慮、振奮精神的作用,可用于治療神經(jīng)衰弱、關(guān)節(jié)炎,還具有促進(jìn)血液循環(huán)、殺菌止痛、平衡油脂分泌、舒緩肌膚老化、滋養(yǎng)頭發(fā)的功效。茶樹(shù)精油具有新鮮、強(qiáng)烈的藥草香味,能改善毛孔阻塞,凈化肌膚,抗感染,對(duì)治療青春痘有奇效。它也能消除疲勞、緩解壓力。天竺葵精油能收斂皮膚,平衡、調(diào)理、潤(rùn)滑中干性皮膚和敏感性皮膚,改善橘皮樣表皮,還有助于恢復(fù)精力,平緩心情。茉莉精油能防止肌膚老化,對(duì)中干性皮膚和敏感性皮膚具有良好的保濕和滋潤(rùn)作用,尤其對(duì)女性的妊娠紋和內(nèi)分泌有獨(dú)特的改善效果。橙花精油具有清新的水果香味,不但能使人鎮(zhèn)靜,還能防止中干性肌膚的老化現(xiàn)象發(fā)生,給肌膚賦予青春活力,促進(jìn)皮膚再生。2.建議:教師可以組織學(xué)生進(jìn)行一次社會(huì)調(diào)查,并要求學(xué)生寫(xiě)出詳細(xì)的調(diào)查報(bào)告。課題2胡蘿卜素的提取【導(dǎo)學(xué)誘思】1.胡蘿卜素是,化學(xué)性質(zhì)比較,不溶于水,微溶于,易溶于等有機(jī)溶劑。根據(jù)雙鍵的數(shù)目可以將胡蘿卜素劃分為α、β、γ三類。是其中最主要的組成成分。與β-胡蘿卜素化學(xué)結(jié)構(gòu)類似的胡蘿卜素約有100多種,它們大多存在于蔬菜中。等蔬菜是提取天然β-胡蘿卜素的原料。工業(yè)生產(chǎn)上,提取天然β-胡蘿卜素的方法主要有三種,一是從中提取,二是從中獲得,三是利用生產(chǎn)。本課題所提供的方法只能提取胡蘿卜素的,若要獲得β-胡蘿卜素,還需要進(jìn)一步的。2.提取胡蘿卜素的實(shí)驗(yàn)流程有、、、、、。思考:影響萃取的因素有哪些?實(shí)驗(yàn)案例提取胡蘿卜素的主要步驟如下。1.選取500g新鮮的胡蘿卜,用清水洗凈,瀝干、切碎,然后在40℃的烘箱中烘干,時(shí)間約需2h,將干燥后的胡蘿卜進(jìn)一步粉碎過(guò)篩。注意胡蘿卜的粉碎一定要徹底。2.將樣品放入500mL圓底燒瓶中,加入200mL石油醚混勻,按教科書(shū)中圖6-7所示安裝萃取回流裝置,萃取30min,然后過(guò)濾萃取液,除去固體物質(zhì)。3.按教科書(shū)中圖6-2所示安裝蒸餾裝置,對(duì)萃取的樣品進(jìn)行濃縮。具體的操作步驟及注意事項(xiàng)見(jiàn)本專題課題1的案例1。4.收集接受器中的樣品,觀察樣品的顏色和氣味,并通過(guò)紙層析進(jìn)行鑒定。層析時(shí)注意選擇干凈的濾紙,為了防止操作時(shí)對(duì)濾紙的污染,應(yīng)盡量避免用手直接接觸濾紙,可以帶手套進(jìn)行操作。點(diǎn)樣時(shí)應(yīng)注意點(diǎn)樣斑點(diǎn)不能太大(直徑應(yīng)小于0.5cm),如果用吹風(fēng)機(jī)吹干,溫度不宜過(guò)高,否則斑點(diǎn)會(huì)變黃。將點(diǎn)好樣的濾紙卷成筒狀,卷紙時(shí)注意濾紙的兩邊不能相互接觸,以免因毛細(xì)管現(xiàn)象導(dǎo)致溶劑沿濾紙兩邊的移動(dòng)加快,溶劑前沿不齊,影響結(jié)果。課題成果評(píng)價(jià)(一)確定提取胡蘿卜素的最佳方案在進(jìn)行本實(shí)驗(yàn)時(shí),教師可以將學(xué)生分組,每組可以采用不同的有機(jī)溶劑和時(shí)間進(jìn)行萃取,比較各組的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,確定提取胡蘿卜素的最佳方案。(二)是否出現(xiàn)對(duì)應(yīng)的層析帶如果萃取樣品中出現(xiàn)了和標(biāo)準(zhǔn)樣品一樣的層析帶,說(shuō)明提取胡蘿卜素的實(shí)驗(yàn)成功。由于提取物中含有雜質(zhì),萃取樣品的顏色可能比標(biāo)準(zhǔn)樣品的顏色淺,我們也可以通過(guò)顏色的比較,初步確定提取的胡蘿卜素的量。答案和提示(一)[資料一]萃取劑的選擇討論題1.乙醇和丙酮能夠用于胡蘿卜素的萃取嗎?為什么?答:胡蘿卜素可溶于乙醇和丙酮,但它們是水溶性有機(jī)溶劑,因萃取中能與水混溶而影響萃取效果,所以不用它們作萃取劑。2.在石油醚、醋酸乙酯、乙醚、苯和四氯化碳這幾種有機(jī)溶劑中,哪種最適宜用來(lái)提取胡蘿卜素?答:在這五種有機(jī)溶劑中,石油醚的沸點(diǎn)最高,在加熱萃取時(shí)不易揮發(fā),所以石油醚最適宜用作萃取劑。(二)練習(xí)1.答:列表分析如下。提取方法實(shí)驗(yàn)原理方法步驟適用范圍水蒸氣蒸餾利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的芳香油攜帶出來(lái)1.水蒸氣蒸餾2.分離油層3.除水過(guò)濾適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發(fā)性強(qiáng)的芳香油壓榨法通過(guò)機(jī)械加壓,壓榨出果皮中的芳香油1.石灰水浸泡、漂洗2.壓榨、過(guò)濾、靜置3.再次過(guò)濾適用于柑橘、檸檬等易焦糊原料的提取有機(jī)溶劑萃取

使芳香油溶解在有機(jī)溶劑中,蒸發(fā)溶劑后就可獲得芳香油1.粉碎、干燥2.萃取、過(guò)濾3.濃縮適用范圍廣,要求原料的顆粒要盡可能細(xì)小,能充分浸泡在有機(jī)溶液中參考答案專題一傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用課題1果酒和果醋的制作1.(1)酵母菌兼性厭氧型有氧時(shí)C6H12O6+6H2O+6O2→6CO2+12H2O+能量,無(wú)氧時(shí)C6H12O6→2C2H5OH+2CO2+能量,酒精(2)附著于葡萄品皮上的野生型酵母菌20℃酸性(3)酒精度色素深紅(4)缺氧酸性2.(1)醋酸菌需氧型(2)醋酸乙醇乙醛C2H5OH+O2→CH3COOH+H2O3.(1)體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精(2)1/3(3)18~25℃1012天(4)30—35℃7—8天通氣口4.(1)重鉻酸鉀(2)酸性灰綠色5.沖洗榨汁酒精發(fā)酵醋酸發(fā)酵課題2腐乳的制作1.(1).肽氨基酸甘油脂肪酸(2).青霉酵母曲霉毛霉毛霉真菌土壤水果蔬菜谷物(3).無(wú)菌毛霉污染2.毛霉加鹽腌制加鹵湯裝瓶3.(1)15--18℃毛霉孢子(2)增加鹽量鋪厚一些成形抑制其它微生物不足以抑制微生物的生長(zhǎng),可導(dǎo)致豆腐腐敗變質(zhì)影響腐乳的口味(3)12%抑制腐乳成熟時(shí)間延長(zhǎng)不足以抑制微生物的生長(zhǎng),導(dǎo)致豆腐腐敗防腐殺菌(4)通過(guò)酒精燈的火焰課題3制作泡菜并檢測(cè)亞硝酸鹽含量1.異氧厭氧型無(wú)氧空氣土壤植物體表面腸道乳酸鏈球菌乳酸桿菌乳酸桿菌2.白色粉末水添加劑0.3-0.53適宜溫度PH一定的微生物3.鹽水配制封壇(1)4:1煮沸冷卻

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