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文檔簡介
成績批閱人日期臺州學院醫(yī)學院實驗報告班級:學號:姓名:實驗課程:機能學實驗實驗項目:消化道圓滑肌的生理特點和藥物的影響實驗分室:實驗日期2015年6月3日主要內容(參照)一、實驗目的二、實驗原理
三、實驗儀器與資料四、實驗內容、方法與步驟
五、實驗數(shù)據辦理六、實驗結果與解析一、實驗目的1、學習離體腸段圓滑肌的實驗方法。、認識腸段圓滑肌的生理特點。、觀察某些藥物對離體圓滑肌的作用二、實驗原理哺乳動物消化管圓滑肌與肌肉組織共有的特點,如愉悅性、傳導性和縮短性等。但消化管圓滑肌又有其特點,即愉悅性較低,縮短緩慢,富饒伸展性,擁有緊張性、自動節(jié)律性,對化學、溫度和機械牽張刺激較敏感等。這些特點可保持消化管內必然壓力,保持胃腸等必然的形態(tài)和地址,適合于消化管內容物的理化變化,在體內受中樞神經系統(tǒng)和體液因素的調治。將離體組織器官置于摸擬體內環(huán)境的溶液中,可在一準時間內保持其功能。本實驗以臺式液作灌溉液,在體外觀察及記錄哺乳動物離體腸段的一般生理特點。三、實驗儀器與資料兔、恒溫圓滑肌槽、支架、燒杯、20ml注射器、張力傳感器、生物機能實驗系統(tǒng)、溫度計、臺式液、腎上腺素(1:10000)、乙酰膽堿(1:10000)、阿托品針劑(1支)。四、實驗內容、方法與步驟1、安裝麥氏浴槽恒溫圓滑肌浴槽可用來記錄消化道圓滑肌的縮短活動,分為外槽和內槽,內槽用來浸浴實驗標本,外槽內有恒溫自來水流動以加熱內槽中的臺氏液,使其溫度保持在37℃左右。小腸標本一端固定在內槽底部的鐵鉤上,另一端連至肌肉張力換能器的懸臂上。換能器與生物信號采集辦理系統(tǒng)通道相連并輸入計算機。內槽中的臺氏液以剛能淹沒腸管為宜。內槽底部還有通空氣和排液的共同張口,經過此張口可排液和供給標本所需氧氣。、制備離體兔腸段取禁食24h的健康家兔,一手提后肢使頭部自然下垂,另一手用木槌猛擊兔后邊延髓部,致其昏迷后馬上剖開腹腔,找到胃幽門與十二指腸交界處。在十二指腸初步端扎一線,取出十二指腸、空腸、放入冷臺式液內。先用20ml注射器沖洗內容物,沖洗干凈后剪成若干約1.5cm長的小腸段(每一實驗小組一段)在其兩端結扎,一端做一短線環(huán)固定在通氣的浴皿內,另一端扎線與張力傳感器相連,此線不宜過長且必定豎直。將腸段完好浸浴在調好溫度的圓滑肌槽中。3、開啟生物機能實驗系統(tǒng),接通與張力傳感器相連的通道。固定管并調治扎線與張力傳感器,使腸段運動自如又能牽動傳感器(注意:扎線不可以貼壁或過緊過松)。調治增益與掃描速度,使腸段的運動曲線清楚地顯示在顯示器上并記錄腸段活動曲線。4、實驗觀察(1)記錄腸段正常運動曲線,觀察基線水平、縮短幅度、節(jié)律及波形特點。用新鮮恢復正常(注意作好標記,下同)。
37℃臺式液沖洗,待(2)加腎上腺素在內槽臺氏液中加入
1~2滴腎上腺素(
1:10000),觀察并記錄曲線變化。曲線變化后馬上更換新的38℃的臺氏液。(3)加乙酰膽堿在內槽臺氏液中加入1~2滴乙酰膽堿(1:10000),觀察并記錄曲線變化。依上法沖洗。4)在內槽臺氏液中加入2~4滴阿托品(1:10000),2min后再加1~2滴乙酰膽堿(1:10000),記錄并觀察曲線變化,與項目(3)進行比較。依上法沖洗。(5)環(huán)境pH的影響
加入
HCL3~4滴,觀察圓滑肌縮短活動的改變。在其基礎上再滴
3~4滴
NaOH觀察腸圓滑肌的反應。標記,沖洗。(6)溫度的影響將內槽換成25℃臺式液,同時關閉恒溫加熱裝置,使內槽臺氏液溫度逐漸降至
25℃,并記錄曲線變化,同時觀察腸段緊張度變化。五、實驗數(shù)據辦理六、實驗結果與解析正常小腸:正常情況下,離體小腸圓滑肌在臺氏液中可以自由緩慢縮短,但其節(jié)律性不規(guī)則。α,β受體激動藥,加腎上腺素:在浴槽中加入腎上腺素后,可見離體腸管活動減弱,描計曲線出現(xiàn)縮短頻率變慢,幅度減小以及基線下移。因為腸肌細胞膜上存在α于β受體,前者又分為控制性受體和愉悅性受體,腎上腺素作用于控制性受體,引起腸肌膜上一種特異性受體活化,使鉀離子外流增加,細胞膜發(fā)生超極化,腸肌愉悅性降低,肌張力下降,同時腎上腺素還作用于β受體,它的激活引起腸肌細胞膜上的cAMP合成增加,激活了腸肌膜及肌漿網上鈣離子泵活動,使肌漿中鈣離子濃度降低使肌張力下降。Β受體激活后促使鉀離子及鈣離子外流增加,加速膜的超極化,促使了肌張力的減低。擬膽堿藥的影響:在浴槽中加入乙酰膽堿后可見離體腸管活動增強,描計曲線出現(xiàn)縮短頻率變快,幅度增加。出現(xiàn)上述現(xiàn)象是因為消化道圓滑肌產生動作電位的離子基礎與鈣離子的內流有關,乙酰膽堿可與肌膜上的M受體結合,使得兩類通道開放:一類為電位敏感性鈣離子專用通道,另一類為特異性受體活化鈣離子專用通道。前一類對Ach敏感,小劑量Ach即引起開放;后一類對Ach相對不敏感,只有大劑量才會引起開放。這兩類通道開放都使得肌漿中鈣離子增高,進而激活肌纖蛋白—肌凝蛋白—ATP系統(tǒng),使圓滑肌縮短,肌張力增加??鼓憠A藥的影響:當加入抗膽堿藥阿托品后,現(xiàn)象消失。因為阿托品為M受體阻斷藥,作用體系為擬膽堿藥的拮抗效應。pH的影響:在浴槽中加入鹽酸溶液后,離體腸管活動減弱,描計曲線出現(xiàn)縮短幅度降低,頻率變慢。這是由于細胞外氫離子高升,鈣離子通道的活性碰到控制,使得鈣離子內流減少。氫離子高升能攪亂肌肉的代謝和肌絲滑行的生化過程,氫離子能與鈣離子競爭鈣調蛋白的結合位點而使肌球蛋白ATP酶活性降低,使肌原纖維對鈣離子的敏感性和鈣離子從肌質網的釋放量減少。再加入NaOH后腸管活動出現(xiàn)相反的情況,及腸管活動增強,這是因為NaOH可以中和氫離子,改變細胞外液的PH值,PH過高過低,縮短幅度及張力都會降低,最適PH時縮短收效最好。溫度的影響:將圓滑肌置于25℃臺氏液可以看出小腸縮短明顯減弱,因為圓滑肌縮短需要酶催化,而溫度在必然范圍內下降時鈉鉀泵及離子通道的酶的催化活性也會降低,這就可以影響鈉鉀鈣等離子的轉運,既而影響去極化和復極化的速度,進而動作電位的產生速率和幅度就會下降,所以圓滑肌的縮短程度會減弱。消化道圓滑肌的一般生理特點:1、消化道圓滑肌的電愉悅性較骨骼肌為低。圓滑肌縮短的暗藏期,縮短期和舒張期所占的時間也比骨骼肌的長得多,而且變異很大。2、消化道圓滑肌在離體后,臵入適合的環(huán)境內,還可以進行優(yōu)異的節(jié)律性運動,但其縮短很緩慢,節(jié)律性遠不如心肌那樣規(guī)則。3、消化道圓滑肌常保持在一種略微的連續(xù)縮短狀態(tài),即擁有必然的緊張性。4、消化道圓滑肌能適應實質的需要而作很大的伸展。5、消化道圓滑肌對電刺激較不敏感,但對于牽張、溫度和化學刺激則特別敏感,略微的刺激??梢饛娏业乜s短。注意事項:1、恒溫儀中需加滿水,爾后打開電源,禁止無水加熱,水銀溫度計應防備與硬物碰撞。2、實驗過程中,必定保持標本的供氧,供氧速度已出現(xiàn)一個個小氣泡為宜,充氣過猛會以致標本較大幅度的搖動。3、每次加要錢,必定先準備好更換用的37~38℃臺氏液。4、效
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