冠狀病毒科醫(yī)學(xué)宣教專家講座

冠狀病毒科（Coronaviridae）冠狀病毒科醫(yī)學(xué)宣教專家講座第1頁冠狀病毒基本特征刺突糖蛋白（SpikeProtein），是受體結(jié)合位點、溶細胞作用和主要抗原位點小包膜糖蛋白（EnvelopeProtein），較小，與包膜結(jié)合蛋白膜糖蛋白（MembraneProtein），負責營養(yǎng)物質(zhì)跨膜運輸、新生病毒出芽釋放與病毒外包膜形成非節(jié)段單鏈（＋）RNA，長27-31kd，是RNA病毒中最長RNA核酸鏈，本身能夠發(fā)揮翻譯模板作用，RNA和RNA之間重組率非常高，重組后，RNA序列發(fā)生了改變，由此核酸編碼氨基酸序列也變了，氨基酸組成蛋白質(zhì)隨之發(fā)生改變，使其抗原性發(fā)生了改變。冠狀病毒科醫(yī)學(xué)宣教專家講座第2頁雙擊添加標題文字雞傳染性支氣管炎病毒豬傳染性胃腸炎病毒豬流行性腹瀉病毒豬血凝性腦脊髓型病毒小鼠肝炎病毒火雞藍冠病病毒犬冠狀病毒其它冠狀病毒伯爾尼病毒不理達病毒冠狀病毒科冠狀病毒屬隆病毒屬冠狀病毒科醫(yī)學(xué)宣教專家講座第3頁雞傳染性支氣管炎病毒（Infectiousbronchitis，IB）能夠引發(fā)雞產(chǎn)生急性、高度接觸傳染性呼吸道疾病，表現(xiàn)為：咳嗽、噴嚏、呼吸困難和氣管羅音。雛雞表現(xiàn)流漿液性鼻涕，產(chǎn)蛋雞出現(xiàn)產(chǎn)蛋下降和蛋質(zhì)量變差，腎病變型腎腫大，有尿酸鹽沉積。增殖臨床癥狀危害有25個以上血清型，如M41、T株等。有引發(fā)呼吸道病，有引發(fā)腎病綜合癥。不一樣血清型之間沒有或僅有部分交互免疫力。報道較多有呼吸型、腎型、生殖道型、變異型：491、793B病毒能在9-11日齡雞胚上生長、繁殖，并能引發(fā)一系列特征性經(jīng)典改變：如“蜷曲胚，僵化胚，侏儒胚”出現(xiàn)。能在氣管環(huán)組織中培養(yǎng)，造成纖毛運動停頓。在雞胚屢次傳代后，可以在雞胚肝、肺、腎細胞培養(yǎng)物中生長，產(chǎn)生細胞病變及噬斑。冠狀病毒科醫(yī)學(xué)宣教專家講座第4頁雞傳染性支氣管炎病毒（Infectiousbronchitis，IB）本病僅發(fā)生于雞，其他家禽均不感染。各種年紀雞都可發(fā)病，但雛雞最為嚴重，死亡率也高，普通以40日齡以內(nèi)雞多發(fā)。有母源抗體雛雞有一定抵抗力（約4周）。傳染源傳輸方式感染動物以呼吸道為主，也可以經(jīng)消化道如飼料、飲水及喂養(yǎng)用具等傳播。種蛋傳輸亦有可能（但還沒有得到證實）。本病一年四季均能發(fā)生，但以冬春季節(jié)多發(fā)。本病一旦感染雞群，即快速傳播，很快涉及全群，48小時內(nèi)含有接觸史易感雞都發(fā)病。病雞及帶毒雞為傳染源。病雞康復(fù)后可帶毒49天，在35天內(nèi)含有傳染性。呼吸道排毒達2周，糞便可達數(shù)月，病毒還存在于感染雞精液、急性期病雞所產(chǎn)雞蛋。冠狀病毒科醫(yī)學(xué)宣教專家講座第5頁呼吸型生殖道型變異株腎型主要病變是氣管、支氣管、鼻腔和竇內(nèi)有漿液性、卡他性和干酪樣滲出物，氣管環(huán)充血出血。氣囊可能混濁或含有黃色干酪樣滲出物。在大支氣管周圍可見到小灶性肺炎。卵巢有水泡樣囊腫，輸卵管造成永久性損壞，產(chǎn)蛋雞卵泡變形甚至破裂，輸卵管變形。腎腫大出血，腎小管充滿尿酸鹽結(jié)晶外形呈白線網(wǎng)狀或呈斑駁狀俗稱“花斑腎”或“檳榔腎”，腎小管和輸尿管因尿酸鹽沉積而擴張。嚴重病例，白色尿酸鹽沉積可見于其它組織器官表面如在心包和腹腔臟器表面均可見白色尿酸鹽從容。胸深肌組織蒼白，呈膠凍樣水腫，胴體外觀濕潤，卵巢、輸卵管粘膜充血，氣管環(huán)充血、出血。冠狀病毒科醫(yī)學(xué)宣教專家講座第6頁疫苗免疫2886、W93H120H52預(yù)防IBM型，多采取H120：毒力較低，適合用于雛雞首次免疫。H52：毒力較高，免疫原性較強，適合用于3周齡以上雞初次免疫和加強免疫。2886和W93屬于傳統(tǒng)M株系列

。預(yù)防變異型毒株，即793B血清型：多采取491或FNO-E。接種預(yù)防FNO-E491冠狀病毒科醫(yī)學(xué)宣教專家講座第7頁豬傳染性胃腸炎

(TransmissibleGastroenteritisofswine,TGE)血清型到當前為止，世界各地所分離TGEV毒株均屬同一個血清型。在抗原上與豬呼吸道冠狀病毒（PRCV）、貓傳染性腹膜炎病毒和犬冠狀病毒有一定相關(guān)性，尤其是與PRCV核苷酸和氨基酸序列有96％同源性，并已證實PCRV是由TGEV突變而來。危害豬傳染性胃腸炎是由豬傳染性胃腸炎病毒（TGEV）引發(fā)豬一個高度接觸腸道傳染病。各種年紀豬都可感染，但2周齡以下仔豬死亡率很高。較大或成年豬幾乎沒有死亡。冠狀病毒科醫(yī)學(xué)宣教專家講座第8頁分布潛伏期培養(yǎng)特征傳染源季節(jié)性抵抗力豬是唯一易感動物，病豬和帶毒豬是主要傳染源，犬等動物可參加本病傳輸。在嚴寒季節(jié)多發(fā)，尤其是12月至第二年4月發(fā)病多在空腸、十二指腸及腸系膜淋巴結(jié)中含量最高，隨糞便排出，污染環(huán)境。潛伏期很短，普通為15～18h，有為2～3d?？稍谪i腎、甲狀腺、唾液腺、睪丸細胞中增殖，但引發(fā)病變能力因毒株而異。IBRS、ST、PK15細胞系是試驗室中慣用病毒增殖細胞系。TGEV其它特征病毒對陽光敏感，糞便樣品中病毒在陽光下6小時即能滅活，置陰暗處7天仍有感染力。病毒對胰蛋白酶不敏感和在豬膽汁中相當穩(wěn)定。慣用消毒藥為0.03%福爾馬林，1%來蘇爾，輕易將其殺死。冠狀病毒科醫(yī)學(xué)宣教專家講座第9頁致病機制及病理改變TGEV經(jīng)鼻腔或口腔抵達胃，能抵抗低pH值和蛋白水解酶作用而抵達小腸，與高度敏感小腸上皮細胞接觸，大量細胞受到感染，其功效快速改變或破壞。小腸內(nèi)酶活性顯著降低，擾亂了消化及細胞營養(yǎng)物質(zhì)和電解質(zhì)運輸，未被消化乳糖存在于腸內(nèi)，使?jié)B透壓顯著增高，造成液體滯留，甚至從機體組織中吸收液體，引發(fā)病豬失水、代謝性酸中毒，故發(fā)生腹瀉和脫水。冠狀病毒科醫(yī)學(xué)宣教專家講座第10頁疫苗防治共翻譯糖基化是S糖蛋白取得和保持抗原性所必需，由此可見，使S基因完整表示，并正常糖基化而折疊成其天然構(gòu)象是保持TGE基因工程疫苗免疫效力關(guān)鍵技術(shù)之一，所以用真核表示體系表示S基因，更有望于研制成功TGE基因工程疫苗。阻斷病毒入侵門戶及其在小腸細胞中定居，從而有效保護機體免受攻擊，應(yīng)該是TGE基因工程疫苗研究方向和豬場凈化該病主要路徑。基因工程苗

滅活苗免疫妊娠母豬往往不能刺激機體產(chǎn)生有效乳汁免疫，故臨床上往往和弱毒苗一起使用，才能夠產(chǎn)生很好保護效果。我國現(xiàn)在普遍使用是TGE與PED二聯(lián)滅活疫苗。弱毒疫苗最近沒得到深入研究，還是局限于美國TGE-Vac株、匈牙利CKP株和日本TO-163株等。滅活苗、弱毒活疫苗人工感染強毒或乳汁免疫懷孕母豬接種強毒，存在散播強毒風險，已經(jīng)極少使用。乳汁抗體包含IgG、IgA、IgM，TgA抗體主要是分泌型抗體，僅有腸管受刺激時產(chǎn)生，泌乳期間滴度較高，連續(xù)時間較長，是乳汁免疫主體。冠狀病毒科醫(yī)學(xué)宣教專家講座第11頁豬流行性腹瀉(Porcineepidemicdiarrhea,PED)基本特征是豬一個腸道傳染病，臨床上以排水樣糞便、嘔吐、脫水為特征。僅發(fā)生于豬，各種年紀豬都能感染發(fā)病。哺乳仔豬、架子豬或肥育豬發(fā)病率很高，尤其哺乳仔豬受害是嚴重，母豬發(fā)病率變動很大，約15%~90%。

冠狀病毒科醫(yī)學(xué)宣教專家講座第12頁細胞培養(yǎng)特征VeroMA104CPKIB-RS-2CPK1988年，Hofmann等首次在培養(yǎng)基中含胰酶Vero細胞上成功繁殖了PEDV，并認為胰酶對PEDV纖突糖蛋白切割作用增強了病毒對Vero細胞感染力，此方法在后續(xù)PEDV分離、細胞培養(yǎng)和疫苗研究中被廣泛應(yīng)用。今后，各國研究者對PEDV細胞培養(yǎng)進行了深入研究，相繼在仔豬膀胱、腎臟原代細胞和KSEK6、IB-RS-2、MA104、CPK、ESK傳代細胞系上成功培養(yǎng)了PEDV。冠狀病毒科醫(yī)學(xué)宣教專家講座第13頁疫苗預(yù)防活苗三聯(lián)活疫苗二聯(lián)活苗、滅活苗

RNA疫苗冠狀病毒科醫(yī)學(xué)宣教專家講座第14頁豬血凝性腦脊髓炎病毒（仔豬嘔吐、消耗病病毒）幼豬一個急性、高度傳染性病毒病嘔吐、進行性消瘦、中樞神經(jīng)系統(tǒng)功效障礙，死亡率高小鼠肝炎病毒肝炎、腦炎正常情況下隱性感染，應(yīng)激條件下成為致死性疾病火雞藍冠病病毒（火雞冠狀病毒性腸炎病毒，火雞傳染性腸炎病毒，泥淖病毒）精神沉郁、體重減輕、體溫下降、排泡沫狀或水樣糞便犬冠狀病毒引