蟾蜍坐骨神經(jīng)干

蟾蜍坐骨神經(jīng)干第1頁/共21頁神經(jīng)干動作電位電生理綜合實驗

第2頁/共21頁實驗目的

測定蛙坐骨神經(jīng)的動作電位傳導速度

學習蛙類離體坐骨神經(jīng)干的單相、雙相動作電位的記錄方法及與強度的關系。

判別、分析神經(jīng)干動作電位的基本波形、測量其幅值以及時程。學會制作坐骨神經(jīng)標本的方法第3頁/共21頁實驗原理（一）

將蛙的神經(jīng)標本放在任氏液中，其興奮性在幾個小時內(nèi)可保持不變。若給神經(jīng)一次適宜刺激，可在神經(jīng)上產(chǎn)生一個動作電位。生理學實驗中常利用蛙的坐骨神經(jīng)標本來觀察神經(jīng)興奮性的規(guī)律。蛙坐骨神經(jīng)標本制作第4頁/共21頁實驗原理（二）

本實驗將兩個引導電極置于正常完整的神經(jīng)干表面，當神經(jīng)干的一端興奮之后，興奮波會先后通過兩個引導電極，可記錄到兩個相反方向的電位偏轉(zhuǎn)波形，稱為雙相動作電位。如果兩個引導電極之間的神經(jīng)組織有損傷，興奮波只能通過一個引導電極，不能傳導至第二個引導電極，則只能記錄到一個方向的電位偏轉(zhuǎn)波形，稱為單向動作電位。蛙坐骨神經(jīng)雙相、單相動作電位與強度法則第5頁/共21頁第6頁/共21頁實驗原理（三）

動作電位在神經(jīng)干上傳導具有一定的速度蟾蜍的坐骨神經(jīng)是混合神經(jīng)，由許多粗細不等的有髓和無髓神經(jīng)纖維構(gòu)成，其中以Aɑ類纖維為主，傳導速度約為35—40m/s。

神經(jīng)沖動的傳導速度（v）是指動作電位在單位時間（t）內(nèi)傳導的距離（s）神經(jīng)動作電位傳導速度的測定

第7頁/共21頁儀器與器械（一）普通剪刀、手術剪、組織剪、眼科鑷金屬探針、蛙板、蛙釘玻璃分針瓷碗、細線、培養(yǎng)皿、滴管第8頁/共21頁實驗方法與步驟1.破壞腦、脊髓

（雙毀髓）

枕骨大孔第9頁/共21頁2.剪除軀干上部、皮膚及內(nèi)臟坐骨神經(jīng)第10頁/共21頁坐骨神經(jīng)的走行第11頁/共21頁3.剝皮

剝完皮膚后，將標本放在盛有任氏液的培養(yǎng)皿中。

4.洗干凈雙手及使用過的全部手術器械。5.分離兩腿6.游離坐骨神經(jīng)標本第12頁/共21頁注意事項1.破壞腦脊髓要徹底，防止蟾酥射入操作者眼中或污染實驗標本。2.操作時避免壓擠、損傷和用力牽拉標本，不可用金屬器械觸碰神經(jīng)干。

3.操作過程中，應給神經(jīng)和肌肉滴加任氏液，防止表面干燥，以免影響標本的興奮性。

4.標本制成后須放在任氏液中浸泡數(shù)分鐘,使標本興奮性穩(wěn)定,再開始實驗效果會較好。第13頁/共21頁儀器與器械（二）

計算機生物信號采集處理系統(tǒng)RM6240神經(jīng)標本屏蔽盒第14頁/共21頁實驗方法與步驟1.坐骨神經(jīng)標本的制備2.儀器及標本的連結(jié)坐骨神經(jīng)干放置于神經(jīng)標本屏蔽盒內(nèi)神經(jīng)標本屏蔽盒與RM6240系統(tǒng)連接刺激電極引導電極s+s_r1r1’r2r2’接地電極第15頁/共21頁（1）引導雙相神經(jīng)動作電位3.啟動BL410系統(tǒng)，進入系統(tǒng)軟件，點擊“實驗項目”菜單，選擇“神經(jīng)肌肉生理實驗”。點擊“神經(jīng)干動作電位的引導”，引導出一個雙相動作電位。第16頁/共21頁

②仔細觀察雙相動作電位的波形。讀出最大刺激時雙相動作電位上下相的振幅和整個動作電位持續(xù)時間數(shù)值。①自動調(diào)節(jié)刺激強度，觀察動作電位波形的變化。讀出波寬為某一數(shù)值時的閾刺激和最大刺激。（2）觀察和測定雙相動作電位第17頁/共21頁⑶測定神經(jīng)沖動傳導速度①分別測量兩個動作電位起始點之間的時間差（t），為神經(jīng)沖動從第一對引導電極傳導到第二對引導電極所需要的時間。②測量神經(jīng)屏蔽盒內(nèi)兩對電極之間的距離（s）即為神經(jīng)干的長度。（2㎝）③按公式v=s/t(m/s）計算神經(jīng)沖動傳導的速度。第18頁/共21頁用鑷子將兩個引導電極r1,r1’之間的神經(jīng)夾傷，記錄單相動作電位。⑷觀察和測定單相動作電位第19頁/共21頁注意事項制備標本時，神經(jīng)干應盡可能分離長一些，上自脊柱附近的主干，下至踝關節(jié)附近。分離過程中勿損傷神經(jīng)組織，以免影響其興奮性。將神經(jīng)干搭在引導電極上時，神經(jīng)干不能與標本盒壁相接觸，盡量將其拉成水平線，不要下垂或斜向放置。3.刺激強度在開始時不要過強，先由弱強度開始，逐步加大強度，以免剌激傷