旋光度的測(cè)定有機(jī)化學(xué)與藥物化學(xué)教研室

一、試驗(yàn)?zāi)繕?biāo)

1.掌握旋光儀使用方法。2．了解手性化合物旋光性及其測(cè)定原理、方法和意義。旋光度的測(cè)定有機(jī)化學(xué)與藥物化學(xué)教研室第1頁(yè)

二、試驗(yàn)原理

1.定義：旋光性:手性化合物使平面偏振光偏振面旋轉(zhuǎn)性質(zhì)。旋光物質(zhì)：含有旋光性物質(zhì)稱(chēng)為旋光物質(zhì)，或稱(chēng)為光學(xué)活性物質(zhì)。旋光度(α)：偏振面被旋轉(zhuǎn)角度

右旋體和左旋體：若手性化合物能使偏振面右旋(順時(shí)針)稱(chēng)為右旋體，用(+)表示；而其對(duì)映體必使偏振面左旋(逆時(shí)針)相等角度，稱(chēng)為左旋體，用(一)表示。

旋光度的測(cè)定有機(jī)化學(xué)與藥物化學(xué)教研室第2頁(yè)

比旋光度：手性化合物旋光度與溶液濃度、溶劑、測(cè)定溫度、光源波長(zhǎng)、測(cè)定管長(zhǎng)度相關(guān)。所以旋光儀測(cè)定旋光度α并非特征物理常數(shù)，同一化合物測(cè)得旋光度就有不一樣值。所以為了比較不一樣物質(zhì)旋光性能，通慣用比旋光度來(lái)表示物質(zhì)旋光性，比旋光度是物質(zhì)特有物理常數(shù)。旋光度的測(cè)定有機(jī)化學(xué)與藥物化學(xué)教研室第3頁(yè)旋光度的測(cè)定有機(jī)化學(xué)與藥物化學(xué)教研室第4頁(yè)2.測(cè)定方法：

手性化合物旋光度可用旋光儀來(lái)測(cè)定。試驗(yàn)室慣用目測(cè)或自動(dòng)旋光儀。旋光度測(cè)定能夠用來(lái)判斷手性化合物純度及其含量測(cè)定旋光度的測(cè)定有機(jī)化學(xué)與藥物化學(xué)教研室第5頁(yè)3.目測(cè)旋光儀

(1)基本結(jié)構(gòu)旋光度的測(cè)定有機(jī)化學(xué)與藥物化學(xué)教研室第6頁(yè)(2)基本原理

從鈉光源發(fā)出光，經(jīng)過(guò)一個(gè)固定Nikol棱鏡——起偏鏡變成平面偏振光。平面偏振光經(jīng)過(guò)裝有旋光物質(zhì)盛液管時(shí)，偏振光振動(dòng)平面會(huì)向左或向右旋轉(zhuǎn)一定角度。只有將檢偏棱鏡向左或向右旋轉(zhuǎn)一樣角度才能使偏振光經(jīng)過(guò)抵達(dá)目鏡。向左或向右旋轉(zhuǎn)角度能夠從旋光儀刻度盤(pán)上讀出，即為該物質(zhì)旋光度。旋光度的測(cè)定有機(jī)化學(xué)與藥物化學(xué)教研室第7頁(yè)(3)外形

旋光度的測(cè)定有機(jī)化學(xué)與藥物化學(xué)教研室第8頁(yè)(4)測(cè)定從目鏡中可觀(guān)察到幾個(gè)情況：

(1)中間明亮，兩旁較暗。(2)中間較暗，兩旁較明亮。(3)視場(chǎng)內(nèi)明暗相等均一視場(chǎng)。旋光度的測(cè)定有機(jī)化學(xué)與藥物化學(xué)教研室第9頁(yè)

測(cè)定時(shí)，旋轉(zhuǎn)手輪，調(diào)整檢偏鏡刻度盤(pán)，應(yīng)調(diào)整視場(chǎng)成明暗相等單一視場(chǎng)，讀取刻度盤(pán)上所表示刻度值。旋光度的測(cè)定有機(jī)化學(xué)與藥物化學(xué)教研室第10頁(yè)讀數(shù)（同游標(biāo)卡尺）：旋光度的測(cè)定有機(jī)化學(xué)與藥物化學(xué)教研室第11頁(yè)刻度盤(pán)分兩個(gè)半圓分別標(biāo)出0一180°，固定游標(biāo)分為20等分。讀數(shù)時(shí)，先讀游標(biāo)0落在刻度盤(pán)上位置(整數(shù)值)，再用游標(biāo)尺刻度盤(pán)畫(huà)線(xiàn)重合方法，讀出游標(biāo)尺上數(shù)值(可讀出兩位小數(shù)).旋光度的測(cè)定有機(jī)化學(xué)與藥物化學(xué)教研室第12頁(yè)三、試驗(yàn)步驟

1．待測(cè)溶液配制

用天平準(zhǔn)確稱(chēng)取10．0～10．5g葡萄糖和果糖樣品，在100mL容量瓶中配成溶液，溶液若不透明澄清，用濾紙過(guò)濾。

旋光度的測(cè)定有機(jī)化學(xué)與藥物化學(xué)教研室第13頁(yè)

2．裝待測(cè)液

洗凈測(cè)定管后，用少許待測(cè)液潤(rùn)洗2—3次，注入待測(cè)液，并使管口液面呈凸面。將護(hù)片玻璃沿管口邊緣平推蓋好(以免使管內(nèi)留存氣泡)，裝上橡皮填圈，擰緊螺帽至不漏水(太緊會(huì)使玻片產(chǎn)生應(yīng)力，影響測(cè)量)。用軟布擦凈測(cè)定管，備用

(如有氣泡，應(yīng)趕至管頸突出處）。旋光度的測(cè)定有機(jī)化學(xué)與藥物化學(xué)教研室第14頁(yè)3．旋光儀零點(diǎn)校正

旋光儀接通電源，鈉光燈發(fā)光穩(wěn)定后(約5min)，將裝滿(mǎn)蒸餾水測(cè)定管放人旋光儀中，校正目鏡焦距，使視野清楚。旋轉(zhuǎn)手輪，調(diào)整檢偏