月季花藥培養(yǎng)zzm

課題2月季的花藥培養(yǎng)花中皇后月季又稱(chēng)“月月紅”，自然花期5至11月，開(kāi)花連續(xù)不斷，通常扦插就可以成活。

知識(shí)回顧單倍體育種的過(guò)程？花藥離體培養(yǎng)（N）單倍體植株（N）秋水仙素處理，使染色體翻倍植株（2N）特點(diǎn)：1明顯縮短育種年限2后代植株都為純合子。正常植株（2N）花的結(jié)構(gòu)花托花萼花瓣雄蕊花藥花絲雌蕊柱頭花柱子房花絲花藥：囊狀結(jié)構(gòu)，內(nèi)有很多花粉（一）被子植物的花粉發(fā)育1雄蕊一、基礎(chǔ)知識(shí)2花粉的概念:由花粉母細(xì)胞經(jīng)過(guò)減數(shù)分裂形成的單倍體的生殖細(xì)胞.被子植物花粉的發(fā)育過(guò)程小孢子母細(xì)胞減數(shù)分裂4個(gè)小孢子(小孢子四分體時(shí)期)小孢子(單核居中期)小孢子(單核靠邊期)小孢子生殖細(xì)胞核+花粉管細(xì)胞核有絲分裂（花粉粒的雙核期）生殖細(xì)胞將再進(jìn)行一次有絲分裂，形成兩個(gè)精子注意：①二核花粉粒：成熟的花粉粒中，只含花粉管細(xì)胞核和生殖細(xì)胞核。（精子在花粉管中形成）4個(gè)小孢子減數(shù)分裂有絲分裂4個(gè)花粉管細(xì)胞核4個(gè)生殖細(xì)胞核有絲分裂8個(gè)精子1花粉母細(xì)胞③②三核花粉粒：有些植物的花粉，在成熟前，生殖細(xì)胞進(jìn)行一次有絲分裂，形成兩個(gè)精子，這樣的花粉在成熟時(shí)，含有一個(gè)花粉管細(xì)胞核和兩個(gè)精子。例題1：兩個(gè)精子和花粉管細(xì)胞核的基因型相同？2NNNN1、關(guān)于被子植物花粉發(fā)育的說(shuō)法，不正確的是（）A、花粉粒是在花藥中的花粉囊里形成的B、被子植物精子的形成是直接減數(shù)分裂的結(jié)果C、被子植物的花粉的發(fā)育要經(jīng)歷四分體時(shí)期、單核期、雙核期等階段D、花粉粒在發(fā)育過(guò)程中，核先位于細(xì)胞一側(cè)，再移到細(xì)胞中央BD注：花粉母細(xì)胞經(jīng)減數(shù)分裂形成4個(gè)單核花粉粒，每個(gè)花粉粒的細(xì)胞核進(jìn)行一次有絲分裂形成1個(gè)花粉管細(xì)胞核和1個(gè)生殖細(xì)胞核，每個(gè)生殖細(xì)胞核再進(jìn)行一次有絲分裂生成2個(gè)精子。小孢子母細(xì)胞（2n）小孢子時(shí)期（n）四分體時(shí)期（n）雙核期4個(gè)生殖細(xì)胞核（n）4個(gè)花粉管細(xì)胞核（n）4個(gè)生殖細(xì)胞（n）4個(gè)營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞（n）4×2個(gè)精子(n)有絲分裂減數(shù)分裂單核期（n）有絲分裂練習(xí)：①寫(xiě)出花粉的發(fā)育過(guò)程的發(fā)育過(guò)程（學(xué)生板書(shū)）②假如一種生物體細(xì)胞有２０條染色那么它的小孢子母細(xì)胞、小孢子、花粉管細(xì)胞核、生殖細(xì)胞核各有多少條染色體？如果小孢子母細(xì)胞的基因型為AａBｂ（兩對(duì)基因位于兩對(duì)同源染色體上）那么小孢子、花粉管細(xì)胞核和生殖細(xì)胞核的基因型是什么？答案：小孢子母細(xì)胞→４個(gè)小孢子→單核居中期→單核靠邊期→花粉粒答案：２０、１０、１０、１０，AB或Aｂ或ａB或ａｂ。無(wú)論哪一種，來(lái)源于同一個(gè)小孢子的花粉管和生殖核的基因一定相同（二）產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑①②移栽花藥中的花粉胚狀體脫分化愈傷組織花藥中的花粉脫分化分化叢芽再分化叢芽誘導(dǎo)生根原因：培養(yǎng)基中的激素種類(lèi)及濃度配比體細(xì)胞胚（胚狀體）：

在組織培養(yǎng)過(guò)程中，某些體細(xì)胞在形態(tài)上轉(zhuǎn)變?yōu)榕c合子發(fā)育成的胚非常相似的結(jié)構(gòu)，發(fā)育過(guò)程亦與合子胚類(lèi)似，被稱(chēng)為體細(xì)胞胚（胚狀體）。1.為什么胚狀體和愈傷組織到叢芽分別稱(chēng)為分化和再分化？思考2.花粉植株弱小，高度不育，是否就沒(méi)有利用價(jià)值？用于單倍體育種技術(shù)，可明顯縮短育種周期，培育純合新品種。

胚狀體就像種子，有胚芽、胚軸、胚根等結(jié)構(gòu)。胚狀體到叢芽就是由原始的分化狀態(tài)繼續(xù)生長(zhǎng)和分化完成的。而愈傷組織形成叢芽的過(guò)程是從脫分化狀態(tài)進(jìn)入再分化形成叢芽的過(guò)程。人工種子又稱(chēng)人造種子、合成種子或無(wú)性種子，就是將組織培養(yǎng)所產(chǎn)生的體細(xì)胞胚、不定芽、頂芽、腋芽或小鱗莖等繁殖體，包裹在能提供營(yíng)養(yǎng)的膠囊（人造胚乳）里，再在外面包上一層具有保護(hù)功能和防止機(jī)械損傷的外膜（人造種皮），造成一種類(lèi)似種子的結(jié)構(gòu)，能在一定的條件下萌發(fā)生長(zhǎng)，形成完整植株。部分花藥通過(guò)胚狀體途徑形成小植株煙草花藥培養(yǎng)胚狀體發(fā)育途徑愈傷組織轉(zhuǎn)接種到再生培養(yǎng)基愈傷組織分化形成再生植株水稻花藥培養(yǎng)愈傷組織發(fā)育途徑部分花藥產(chǎn)生愈傷組織接種在平板上的水稻花藥1、材料的選擇2、培養(yǎng)基的組成（MS培養(yǎng)基+不同比例的激素）3、親本植株的生長(zhǎng)條件、材料的低溫預(yù)處理以及接種密度等對(duì)誘導(dǎo)成功率都有一定影響三、影響花藥培養(yǎng)的因素（三）影響花藥培養(yǎng)的因素1.材料的選擇（1）花藥：初花期（2）花粉：?jiǎn)魏似冢?）花蕾：完全未開(kāi)放的花蕾2、培養(yǎng)基的組成花藥培養(yǎng)所采用的培養(yǎng)基各成分中植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的水平和配比起決定作用。⑴誘導(dǎo)愈傷組織或胚狀體產(chǎn)生的培養(yǎng)基：廣泛使用2，4-D、IAA和KT；⑵誘導(dǎo)分化的培養(yǎng)基常除去2，4-D而以IBA或BA等代之。3、其他因素：材料的低溫處理、接種密度、培養(yǎng)的環(huán)境條件等對(duì)誘導(dǎo)的成功率都有一定的影響。實(shí)驗(yàn)操作一、材側(cè)料的選香取二、材震料的消睡毒三、接棒種和培注養(yǎng)（一）牛材料選牛取2、通稿過(guò)鏡檢來(lái)確定是鴨否處于適超宜的發(fā)育鑼期。方法：醋酸洋紅極法(將染各色體染掃成紅色昆)焙花青虎-鉻礬蠅法(花粉細(xì)框胞核染成品藍(lán)黑色)。1、從花藥看：月季絡(luò)的初花這期從花粉看吹：?jiǎn)魏似趶幕ɡ倏矗和耆牢撮_(kāi)放性的花藥（鞭載玻片城上）→拉1%的紀(jì)醋酸洋嗎紅1滴搬→用鑷煩柄將花杠藥搗碎矩，蓋上請(qǐng)蓋玻片綁→鏡檢逐（花粉葵粒的細(xì)頓胞核被杏染成紅盼色）花藥（靜在卡諾甩氏固定南液中處閥理20財(cái)min并）→取差出，置陸于載玻爸片上→焙花青莖－鉻礬底溶液染公色→蓋上蓋虎玻片→鏡石檢（花粉督粒的細(xì)胞遵核被染成動(dòng)藍(lán)黑色）月季花藥右培養(yǎng)時(shí)的誤花粉粒最碎好是（繪）A、四分菌體時(shí)期嗎B恒、二核或績(jī)?nèi)嘶ㄟx粉粒C、單核話(huà)期C（二）材阻料的消毒5、無(wú)菌蒼水沖洗3革～5次花藥的褲外面有茂花萼、薪花瓣保敢護(hù)，通繳常處于僑無(wú)菌狀受態(tài)1、花舍蕾用體積分?jǐn)?shù)詞為70%朽的酒精浸泡30秒2、無(wú)局菌水清厚洗3、無(wú)某菌吸水傾紙吸干誤花蕾表雖面的水機(jī)分4、放求入質(zhì)量分悼數(shù)為0烤.1%厚的氯化醉汞溶液中2～4分鐘負(fù)（質(zhì)量分禾數(shù)為1感%的次氯酸訪(fǎng)鈣溶液或飽和逝漂白粉麻溶液）為什么花罰瓣松動(dòng)會(huì)約給材料的設(shè)消毒帶來(lái)氏困難？答：花瓣向松動(dòng)后，急微生物就箏可能侵入說(shuō)到花藥，逝給材料的海消毒帶來(lái)貌困難。為什么花罪瓣松動(dòng)會(huì)黑給材料的忍消毒帶來(lái)匠困難？討論：（三）接縫種和培養(yǎng)1滅情菌后花潔蕾，要遠(yuǎn)在下除去誼萼片和余花瓣，恭并立即婆將花藥腎接種到飼培養(yǎng)基肢上。3通常陽(yáng)每瓶接種膏花藥，溫度控倍制在左右，。幼小剝植株形劍成后才。2在娃剝離花妙藥時(shí)，返要盡量（否則接種輛后，容易獨(dú)從受傷部昂位產(chǎn)生二粗倍體的愈煤傷組織），同時(shí)鬼還要徹底，因?yàn)榕c恩花絲相渴連的花寺藥不利冰于愈傷勾組織或誰(shuí)胚狀體鳴的形成。一般經(jīng)過(guò)燭20-3竄0天培養(yǎng)嚼后，會(huì)發(fā)牙現(xiàn)花藥開(kāi)斧裂，長(zhǎng)出愈傷組瓶織或釋吵放出胚與狀體。將愈傷購(gòu)組織及時(shí)雅轉(zhuǎn)移到分碗化培養(yǎng)基程上，以便動(dòng)進(jìn)一步分縫化出再生撕植株。4枝進(jìn)一步章鑒定和雖篩選：常常會(huì)鐘出現(xiàn)染榜色體倍化性的變貝化無(wú)菌條件不損傷花老藥去除花絲7-1順0個(gè)25℃不需要光射照需要光照主要原掛因是花粉管核制和生殖核解融合造成的植物組織旋培養(yǎng)技術(shù)撿與花藥培乎養(yǎng)技術(shù)的督比較1離體替培養(yǎng)的外譯植體為體細(xì)胞。2有絲柔分裂的過(guò)盛程，染色體數(shù)虧量不變。1花瞞粉是生殖細(xì)綢胞，得到的單倍體植四株，弱小慕且高度棋不育。2秋水厘仙素處墾理，染犁色體加睡倍，恢秩復(fù)正常由的染色繭體數(shù)，成為純種。課題成果裁評(píng)價(jià)一選欄材是否濁恰當(dāng)二無(wú)傳菌技術(shù)帝是否過(guò)督關(guān)三接憐種是否號(hào)成功人工種子搶?zhuān)号郀铙w拌/頂芽絮/不頂勉芽等+人軌工種皮+玻人工胚乳課外知識(shí)基礎(chǔ)知陷識(shí)實(shí)驗(yàn)操作被子植物閑的花粉發(fā)性育花粉雙核期其他因貢素接種密織度小孢子四分候體時(shí)期影響因舟素花粉發(fā)無(wú)育經(jīng)歷舞的時(shí)期花粉囊單核期親本植凈株的生臺(tái)長(zhǎng)條件材料低崖溫預(yù)處姿理月季的花俯藥培養(yǎng)材料與葡培養(yǎng)基材料的滅選取產(chǎn)生途徑結(jié)果分美析與評(píng)懷價(jià)消毒花粉培養(yǎng)條件接種和儉培養(yǎng)課堂小結(jié)練習(xí)：小專(zhuān)麥高桿（沫D）對(duì)矮明桿（d）巷為顯性，付抗銹?。▍^(qū)T）對(duì)不云抗銹?。ㄓ鋞）為顯景性，現(xiàn)有鄰高桿抗銹鎖病和矮桿送不抗病的旦兩種純合叫體，要獲腔得矮桿抗簽銹病的良耗種，可用聚雜交育種晃和單倍體隸育種法，痰步驟如下答：高桿抗灰銹?。ǔ蔇DT濤T）×矮稈不抗努銹?。╠d仙tt）F1：的基因型罪和表現(xiàn)型a各種配裙子的種牧類(lèi)a↓符合要搏求的單三倍體的洗基因型良種的竭基因型今表現(xiàn)型單倍體育臟種方法的法主要優(yōu)點(diǎn)襪是。1可以銳明顯縮短測(cè)育種年限磨2后代毯為純合子↓P：DdTt欣，高稈抗瘡銹病DT，滿(mǎn)Dt,際dT,擋d儉tddTT歷矮稈銹病雜交育種花藥離些體培養(yǎng)DT，見(jiàn)Dt,遞dT,殘d吹t↓秋水仙故素處理反饋練習(xí)恨：（1）一個(gè)勉小孢子繳母細(xì)胞壤經(jīng)減數(shù)痛分裂產(chǎn)蝴生4個(gè)小孢子姨，由一個(gè)止小孢子到慶形成兩個(gè)狐精子，其傷間經(jīng)過(guò)的片分裂次數(shù)患及分裂方喝式為()A．一、卷有絲分桿裂B．二、減蕩數(shù)分裂C．二、鍛有絲分澤裂D．三、姐有絲分倒裂（2）基因型歇為AaB氏b的一個(gè)小孫孢子母細(xì)概胞經(jīng)分裂擁形成的一仍個(gè)花粉粒仇中的一個(gè)暖花粉管細(xì)眾胞核和兩灘個(gè)精子，蘋(píng)其基因型產(chǎn)分別是()A．AB、Ab、Ab譜B．AB、AB、ABC．AB、aB、aB硬D．a(chǎn)B、ab、abCB（09·睡廣州綜合鬧測(cè)試）下件圖是月季厭花藥離體綢培養(yǎng)產(chǎn)生孫花粉植株眾的兩種途節(jié)徑，請(qǐng)據(jù)緊圖回答有論關(guān)問(wèn)題：1）選用掠的材料合窩適與否是墨成功誘導(dǎo)梅出花粉植蜘株的重要因脆素，一興般來(lái)說(shuō)墻選用期的花葉粉可提閱高成功率。走選擇花嘗粉時(shí)，通一般要盡通過(guò)來(lái)確定花叮粉是否處客于合適的救發(fā)育期，粉這時(shí)需要對(duì)花粉羽的細(xì)胞足核進(jìn)行談染色，慘常用的狹染色劑屠是。單核鏡檢（顯櫻微鏡觀(guān)察箱）醋酸洋木紅(08年據(jù)海南高考耗)某二倍吃體植物是職雜合體，塔圖為其花俘藥中未成蹤蝶熟花粉在壯適宜的培疼養(yǎng)基上培墾養(yǎng)產(chǎn)生完潤(rùn)整植株的拳過(guò)程。據(jù)嶺圖回答：（1）圖中①進(jìn)表示的是必該花粉培災(zāi)養(yǎng)過(guò)程中斗的____表___過(guò)程，②盤(pán)表示的是立____餐__過(guò)程屋，X代表的是罩____激___，陷③表示的帳是___柏___過(guò)程，攀④表示各的是誘滋導(dǎo)__匯___止_過(guò)程。（2）圖中敘從愈傷角組織形隙成完整宵植株的希途徑有豎兩條，虹具體通哪過(guò)那一設(shè)條途徑稈主要取礦決于培爸養(yǎng)基成得分中_耍___兆___原___的種類(lèi)何及其濃鳳度配比僵，最后頸獲得的扯來(lái)源于柱為成熟敵花粉的共完整植渾株都稱(chēng)逝為_(kāi)___蜻_(dá)___民____或__植株（甲擔(dān)）。未成嘆熟花粉經(jīng)起培養(yǎng)能形幻玉成完整植躺株，說(shuō)明豎為成熟花真粉具有_驚____拒____葉____噸___。脫分化再分化胚狀體分化生根激素單倍體細(xì)胞全能林性謝謝謝謝觀(guān)