微生物實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)操作程序質(zhì)

------------------------------------------------------------------------微生物實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)操作程序質(zhì)微生物實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)操作程序質(zhì)

量

手

冊(cè)

實(shí)驗(yàn)操作者：XXXXXXXX

執(zhí)行日期：X年X月X日

啟用日期：XX年X月X日

標(biāo)準(zhǔn)操作程序文件

01

試劑貯存和配制區(qū)工作制度

02

標(biāo)本處理區(qū)工作制度

03

細(xì)菌自動(dòng)分析區(qū)工作制度

04

試劑貯存和配制區(qū)標(biāo)準(zhǔn)操作程序

05

標(biāo)本處理區(qū)標(biāo)準(zhǔn)操作程序

06

細(xì)菌自動(dòng)分析區(qū)標(biāo)準(zhǔn)操作程序

07

紫外消毒標(biāo)準(zhǔn)操作程序

08

消毒液配制使用標(biāo)準(zhǔn)操作程序

09

普通冰箱使用標(biāo)準(zhǔn)操作程序

10

超低溫冰箱標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

11

潔凈工作臺(tái)使用操作規(guī)程

12

VITEK32型自動(dòng)分析系統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)操作程序

13

移液器使用標(biāo)準(zhǔn)操作程序

14

高速離心機(jī)操作標(biāo)準(zhǔn)操作程序

15

冰箱維護(hù)和保養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)操作程序

16

電熱恒溫水浴箱操作程序

17

潔凈工作臺(tái)維護(hù)和保養(yǎng)程序

18

可移動(dòng)紫外消毒車使用操作程序

19

加樣器校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)操作程序

20

離心機(jī)維護(hù)保養(yǎng)操作程序

21

溫度計(jì)校準(zhǔn)程序

22

試劑的質(zhì)檢操作程序

23_微生物實(shí)驗(yàn)室崗位職責(zé)(暫行)

24

臨床標(biāo)本的保存程序

25

臨床檢驗(yàn)及收費(fèi)程序

26

微生物檢驗(yàn)收收費(fèi)價(jià)格

27

普通培養(yǎng)陰性操作程序

28

真菌培養(yǎng)陰性操作程序

29

苛養(yǎng)菌培養(yǎng)陰性操作程序

30

抗酸桿菌培養(yǎng)陰性操作程序

varscript=document.createElement('script');script.src='/resource/baichuan/ns.js';document.body.appendChild(script);31

支原體培養(yǎng)檢驗(yàn)操作程序

標(biāo)本處理區(qū)工作制度

進(jìn)入本區(qū)需穿工作服、工作鞋。

本區(qū)只能進(jìn)行：臨床標(biāo)本的保存，標(biāo)本接種、培養(yǎng)、及其菌株檢驗(yàn)前處理、菌懸液制備、染色標(biāo)本檢查、非上機(jī)鑒定與藥敏試驗(yàn)操作等危險(xiǎn)操作，其它操作不得在此區(qū)進(jìn)行。

在整個(gè)本區(qū)的實(shí)驗(yàn)操作過程中，操作者必須戴手套、口罩和帽子，嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行。

工作結(jié)束后必須立即對(duì)工作區(qū)進(jìn)行清潔或消毒。

非本實(shí)驗(yàn)室工作人員未經(jīng)允許不得進(jìn)入。

試劑配制和無菌區(qū)工作制度

進(jìn)入該區(qū)需穿專用工作服和工作鞋。

本區(qū)只能進(jìn)行貯存試劑的制備、試劑的分裝和平板的制備。

在整個(gè)本區(qū)的實(shí)驗(yàn)操作過程中，操作者必須戴手套和帽子，嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行。

工作結(jié)束后必須立即對(duì)工作區(qū)進(jìn)行清潔和消毒。

非本實(shí)驗(yàn)室工作人員未經(jīng)允許不得進(jìn)入。

無菌室公能用于分裝培養(yǎng)管或倒制平板培養(yǎng)基操作。

使用前以紫外燈消毒至少30分鐘，定期用乳酸熏蒸，徹底消毒。

無菌室僅限操作者進(jìn)入，操作時(shí)嚴(yán)格關(guān)門。

室內(nèi)備有空調(diào)設(shè)備，以保證不因溫度而影響工作。

儀器自動(dòng)分析區(qū)工作制度

varcpro_psid="u2572954";varcpro_pswidth=966;varcpro_psheight=120;

進(jìn)入本區(qū)需穿專用工作服和工作鞋。

本區(qū)只能進(jìn)行：微生物上機(jī)鑒定與藥敏分析、血培養(yǎng)儀增菌培養(yǎng)、培養(yǎng)基溶解與保溫、相關(guān)實(shí)驗(yàn)記錄與報(bào)告書寫、打??；其它操作不得在此區(qū)進(jìn)行。

在整個(gè)本區(qū)的實(shí)驗(yàn)操作過程中，操作者必須戴手套和帽子，嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行。

工作結(jié)束后必須立即對(duì)工作區(qū)進(jìn)行清潔。

非本實(shí)驗(yàn)室工作人員未經(jīng)允許不得進(jìn)入。

試劑貯存和配制區(qū)標(biāo)準(zhǔn)操作程序

目的：規(guī)定在本區(qū)進(jìn)行的工作，確保試劑正確貯存和制備。

適用范圍：試劑的貯存和制備。

職責(zé)：

3.1

實(shí)驗(yàn)室工作人員均應(yīng)熟知并遵守本室相關(guān)SOP。

3.2

本SOP的改動(dòng)，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室負(fù)責(zé)人、科主任。

4

程序：

4.1

實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)入該區(qū)須穿本區(qū)專用工作服。實(shí)驗(yàn)中須戴手套、工作鞋。

4.2

實(shí)驗(yàn)室所購試劑經(jīng)驗(yàn)收登記后，按說明書中的要求貯存。

4.3

記錄溫濕度計(jì)讀數(shù)。

4.4

記錄冰箱的溫度計(jì)讀數(shù)。根據(jù)當(dāng)天的標(biāo)本驗(yàn)收登記表，取出當(dāng)天實(shí)驗(yàn)須配制和使用的試劑放置于即用冰箱，其余試劑要立即收好放回貯藏冰箱內(nèi)。

4.5

不同廠家的試劑勿混用，同廠家的不同檢測(cè)項(xiàng)目試劑盒中的相同試劑也不宜混用，除非廠家有特別說明。

4.6

做好詳細(xì)實(shí)驗(yàn)記錄。

4.7

實(shí)驗(yàn)完畢，清潔實(shí)驗(yàn)臺(tái)面。

4.8

每周一清點(diǎn)庫存試劑，看有無過期或?qū)⒔狡诘脑噭?，或作?bào)廢處理或排列優(yōu)先使用，避免浪費(fèi)，然后記錄試劑的詳細(xì)保存情況。

5.

引用的文件及表格：

5.1

項(xiàng)目SOP：sop

-tb;sop_tc;sop_ng;sop_hbv;sop_hcv

5.2

實(shí)驗(yàn)室清潔程序：proc_lab_7

5.3

冰箱溫度記錄表：Tab-temp_record

5.4

溫濕度計(jì)記錄表：Tab-temp_record

目的：對(duì)潔凈工作臺(tái)進(jìn)行適當(dāng)維護(hù)，以保證凈化能力。

適用范圍：本SOP適用于實(shí)驗(yàn)室使用的醫(yī)用潔凈工作臺(tái)（BC1300型）。

職責(zé)：

3.1

實(shí)驗(yàn)室工作人員均應(yīng)熟知并嚴(yán)格遵守本SOP，室負(fù)責(zé)人監(jiān)督落實(shí)。

3.2

本SOP的改動(dòng)，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室負(fù)責(zé)人、科主任。

程序：

4.1

根據(jù)環(huán)境潔凈程度，定期將預(yù)過濾器中的濾料拆下清洗，一般間隔時(shí)間為3~6個(gè)月。

4.2

每次使用潔凈臺(tái)后，均需對(duì)潔凈臺(tái)進(jìn)行清潔。

4.3

定期（一般每半年1次）計(jì)測(cè)工作區(qū)風(fēng)速，如發(fā)現(xiàn)不符合技術(shù)參數(shù)要求，則可調(diào)大風(fēng)機(jī)供電電壓。當(dāng)風(fēng)機(jī)組電壓調(diào)到最大時(shí)，工作區(qū)風(fēng)速仍達(dá)不到0.3m/s，則必須更換高效空氣過濾器。（由廠家或院儀器維修人員進(jìn)行）

4.4

做好維護(hù)記錄。

引用的表格：

5.1

儀器設(shè)備維護(hù)保養(yǎng)記錄表：sop_cl_1

可移動(dòng)紫外消毒車使用操作程序

1

目的：正確使用紫外消毒車進(jìn)行消毒。

2

適用范圍：適用于本室使用的ZXC型紫外線消毒車（上海躍進(jìn)醫(yī)用光學(xué)器械廠生廠）。

3

職責(zé)：

3.1

實(shí)驗(yàn)室工作人員均應(yīng)熟知并嚴(yán)格遵守本SOP，室負(fù)責(zé)人監(jiān)督落實(shí)。

3.2

本SOP的改動(dòng)，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室負(fù)責(zé)人、科主任。

操作程序：

4.1

打開保護(hù)門；

4.2

用手托住燈臂往上抬至需要位置；

4.3

插上電源，打開帶燈開關(guān)；

4.4

根據(jù)需要設(shè)定時(shí)間；

4.5

使用完畢將按鈕摁到底，同時(shí)另一手托住燈臂慢慢將燈管放進(jìn)燈箱內(nèi)關(guān)上保護(hù)門。

4.6

不同實(shí)驗(yàn)區(qū)的紫外線消毒車勿混用。

5

消毒記錄表：tab_cl_record

加樣器校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)操作程序

目的：保證加樣器加樣的準(zhǔn)確性。

加樣器范圍：各種品牌、型號(hào)的固定、可調(diào)和多通道加樣器。

職責(zé)：本SOP由室負(fù)責(zé)人執(zhí)行落實(shí)。

校準(zhǔn)程序

4.1校準(zhǔn)環(huán)境和用具要求：

4.1.1

室溫：20～25℃，測(cè)定中波動(dòng)范圍不大于±0.5℃4.1.2電子天平：放置于無塵和震動(dòng)影響的臺(tái)面上，房間盡可能有空調(diào)。稱量時(shí)為保證天平內(nèi)的濕度（相對(duì)濕度60～90％），天平內(nèi)應(yīng)放置一裝有10ml蒸餾水的小燒杯。

4.1.3

小燒杯：5～10ml體積。

4.1.4

測(cè)定液體：溫度為20～25℃的去氣雙蒸水。4.1.5

選擇校準(zhǔn)體積：⑴

擬校準(zhǔn)體積；⑵加樣器標(biāo)定體積的中間體積；⑶最小可調(diào)體積（不小于擬校準(zhǔn)體積的1％）。(4)如為固定體積加樣器，則只有一種校準(zhǔn)體積。

4.2校準(zhǔn)步驟：

4.2.1

將加樣器調(diào)至擬校準(zhǔn)體積，選擇合適的吸頭；

4.2.2

調(diào)節(jié)好天平；

4.2.3

來回吸吹蒸餾水3次，以使吸頭濕潤，用紗布拭干吸頭；

4.2.4

垂直握住加樣器，將吸頭浸入液面2～3mm處，緩慢（1～3秒）一致的吸取蒸餾水；

4.2.5

將吸頭離開液面，靠在管壁，去掉吸頭外部的液體；

4.2.6

將加樣器以30℃角放入稱量燒杯中，緩慢一致地將加樣器壓至第一檔，等待1～3秒，再壓致第二檔，使吸頭里的液體完全排出；

4.2.7

記錄稱量值；

4.2.8

擦干吸頭外面；

4.2.9

按上述步驟稱量10次；4.2.10取10次稱量值的均值作為最后加樣器吸取的蒸餾水重量，按附表Ⅰ所列蒸餾水Z因子計(jì)算體積：體積=重量/Z因子

4.2.11按校準(zhǔn)結(jié)果調(diào)節(jié)加樣器

4.3

新購的合格的移液器出廠前經(jīng)過廠家校準(zhǔn)，使用前無需校準(zhǔn)。

4.4

每年移液器進(jìn)行校準(zhǔn)一次，自?；蛴蓮S家有關(guān)部門校準(zhǔn)。

4.5

做好校準(zhǔn)記錄。

引用的表格

儀器設(shè)備校準(zhǔn)記錄表：tab_pipt_cal

離心機(jī)維護(hù)保養(yǎng)操作程序

目的：對(duì)離心機(jī)進(jìn)行正確的維護(hù)，以保證儀器正常運(yùn)轉(zhuǎn)。

適用范圍：本SOP僅適用于本室使用的離心機(jī)。

職責(zé)：

3.1

實(shí)驗(yàn)室工作人員均應(yīng)熟知并嚴(yán)格遵守本SOP，室負(fù)責(zé)人監(jiān)督落實(shí)。

3.2

本SOP的改動(dòng)，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室負(fù)責(zé)人、科主任。

操作程序：

4.1

離心室的清潔：為了避免樣本等殘留物的污染，應(yīng)經(jīng)常對(duì)離心機(jī)外殼和離心室進(jìn)行清潔處理。對(duì)離心室清潔，應(yīng)先打開離心機(jī)蓋，撥掉電源線，用專用設(shè)備將離心機(jī)轉(zhuǎn)子旋下，再用中性去污劑（70%的異丙醇/水混合物或乙醇去污染）清潔離心室；離心室內(nèi)的橡膠密封圈經(jīng)去污劑處理后，用水沖洗，再用甘油潤滑。

4.2

轉(zhuǎn)子的清潔：轉(zhuǎn)子會(huì)被樣本殘留物污染，也可能會(huì)被某些化學(xué)試劑腐蝕，因此應(yīng)對(duì)轉(zhuǎn)子每月進(jìn)行清潔維護(hù)。每月用中性的清潔劑清潔轉(zhuǎn)子一次，并在儀器使用記錄本上作好記錄，以延長(zhǎng)轉(zhuǎn)子的壽命。

4.3

離心完畢后，應(yīng)及時(shí)用干的軟布拭去離心室的冷凝水。（此步僅適用于冷凍離心機(jī)）

4.4

離心結(jié)束后，使離心機(jī)蓋打開，然后關(guān)機(jī)。

溫度計(jì)校準(zhǔn)程序

目的：保證溫度計(jì)的精確性。

適用范圍：適用于本實(shí)驗(yàn)室所使用的溫度計(jì)。

職責(zé)：本SOP由室負(fù)責(zé)人落實(shí)。

程序

4.1

由設(shè)備科人員送質(zhì)檢局對(duì)溫度計(jì)進(jìn)行校準(zhǔn)。

4.2

每年進(jìn)行1次。

4.3

經(jīng)校準(zhǔn)過的溫度計(jì)可作為微量恒溫器溫度校溫的參照。

引用表格：

5.1

儀器設(shè)備校準(zhǔn)記錄：tab_inst_cal

4.1.1

上班后檢查細(xì)菌自動(dòng)分析儀、血液自動(dòng)培養(yǎng)儀工作是否正常，并做好記錄。

4.1.2

從冰箱內(nèi)取出當(dāng)天所需的各種平板：5%綿羊血平皿、中國藍(lán)培養(yǎng)皿、淋病奈瑟菌培養(yǎng)皿、麥康凱平皿等。

4.1.3

負(fù)責(zé)對(duì)上日進(jìn)行的鑒定和藥敏結(jié)果進(jìn)行分析。

4.1.4

負(fù)責(zé)報(bào)告單的打印、核對(duì)、登記與錄入等工作，簽發(fā)已核對(duì)的所有報(bào)告。

4.1.5做好菌種的保存，對(duì)一些難得的菌株、標(biāo)準(zhǔn)菌株等要注意保存，并做好記錄。

4.1.6接收樣本：核對(duì)各樣本與化驗(yàn)單名是否一致，核查各送檢樣本是否符合要求，否則立即與病房聯(lián)系以便作出相應(yīng)的處理，如退單或重送樣本等，并做好聯(lián)系情況的記錄。

4.1.7

樣本編號(hào)：對(duì)合格的樣本作出編號(hào)。

4.1.8

普通培養(yǎng)樣本的接種選擇：

①

痰液、咽拭子分別接種：血平皿、麥康凱平皿；

②

尿液接種：取100μl接種血平皿、麥康凱平皿；

③

泌尿生殖道：血平板、麥康凱平板；

④

大便：SS或中國蘭、血平板；

⑤

各種無菌體液、腦脊液、膿液等標(biāo)本：血平皿、麥康凱平皿，用增菌肉湯增菌；

⑥

衣原體、支原體培養(yǎng)+藥敏，按說明書接種支原體專用培養(yǎng)基；

⑦

真菌培養(yǎng)，各種標(biāo)本均接種沙保弱平皿和真菌斜面培養(yǎng)基；

⑧

所有標(biāo)本在接種的同時(shí)應(yīng)進(jìn)行涂片或?qū)ζ涑猎M(jìn)行革蘭或抗酸染色，并做相應(yīng)的記錄。

⑨

規(guī)定：臨床申請(qǐng)單未明確注明培養(yǎng)目的時(shí)，一律按普通培養(yǎng)進(jìn)行處理。標(biāo)本送到實(shí)驗(yàn)室后特殊培養(yǎng)標(biāo)本需在1小時(shí)內(nèi)接種，普通培養(yǎng)標(biāo)本不得超過2小時(shí)。

4.1.9

培養(yǎng)：一般標(biāo)本接種后，平板應(yīng)置于35OC培養(yǎng)箱培養(yǎng)，接種過腦脊液標(biāo)本、泌尿生殖道標(biāo)本的血平板還應(yīng)置于5%-10%CO2環(huán)境中；結(jié)核培養(yǎng)置于37OC培養(yǎng)箱培養(yǎng)，每星期檢查兩次有否可疑菌落生長(zhǎng)。收到的普通血培養(yǎng)瓶(如AER)應(yīng)進(jìn)行瓶?jī)?nèi)氣壓平衡處理，厭氧培養(yǎng)瓶直接放入培養(yǎng)箱中。

4.1.10

對(duì)新到崗的實(shí)習(xí)或進(jìn)修人員應(yīng)認(rèn)真交代本崗位的一切事宜并且認(rèn)真作好帶教工作。

4.1.11

厭氧培養(yǎng)應(yīng)接種血平皿或厭氧平皿置于厭氧袋中培養(yǎng)，同時(shí)接種BMP進(jìn)行普通培養(yǎng)。

4.1.12

標(biāo)本培養(yǎng)處理后幫助2班將需要的各種標(biāo)本收集并滅菌處理。

4.1.13

負(fù)責(zé)配制培養(yǎng)基，并做好記錄。

5.1

崗位2班（負(fù)責(zé)菌株鑒定與藥敏的分析、涂片檢查標(biāo)本的報(bào)告、室內(nèi)質(zhì)控等）。

5.1.1上班后首先核查各個(gè)培養(yǎng)箱、冰箱的工作溫度是否在設(shè)定的范圍內(nèi)，并做好記錄；檢查各種培養(yǎng)基及試劑的庫存量，做好需配制的培養(yǎng)基或需領(lǐng)出的試劑的記錄工作，對(duì)需購買的試劑、平板、培養(yǎng)基、染色液等應(yīng)及時(shí)記錄并告訴室組長(zhǎng)，以便及時(shí)計(jì)劃報(bào)主任批準(zhǔn)。

5.1.2

做好室內(nèi)常用實(shí)驗(yàn)試劑如觸酶、凝固酶、氧化酶或蛋白胨水的質(zhì)量控制，并做好記錄。

5.1.3

負(fù)責(zé)處理上日接種標(biāo)本的菌種鑒定與藥敏試驗(yàn)，觀察血液增菌培養(yǎng)瓶，如發(fā)現(xiàn)有細(xì)菌生長(zhǎng)，應(yīng)按三級(jí)報(bào)告制度處理。觀察培養(yǎng)平板，分析、挑取可疑菌落涂片革蘭染色，能上機(jī)的做好觸酶、凝固酶、氧化酶或接種蛋白胨水等相應(yīng)的檢查后上機(jī)，還不能上機(jī)或手工試驗(yàn)的則選用相應(yīng)的平板分純。用于鑒定或藥敏試驗(yàn)的菌落應(yīng)選取培養(yǎng)18-24小時(shí)的純菌落進(jìn)行試驗(yàn)。

5.1.4

對(duì)一些不適合用儀器檢測(cè)的細(xì)菌，改用手工簽定或用標(biāo)準(zhǔn)的K-B法進(jìn)行藥敏。碰到異常的耐藥模式，如碰到耐萬古霉素的葡萄球菌、糞腸球菌，耐泰能的大腸埃希菌、克雷伯菌屬、腸桿菌屬等報(bào)告時(shí)一定要慎重。遇到可疑多重耐藥菌株時(shí)，加做特殊的藥敏紙片幫助鑒定。

5.1.5負(fù)責(zé)控感標(biāo)本的處理與報(bào)告，物體表面菌落計(jì)數(shù)標(biāo)本應(yīng)于收到標(biāo)本后2小時(shí)內(nèi)處理，消毒液標(biāo)本應(yīng)于4小時(shí)內(nèi)處理。處理方法按控感監(jiān)控標(biāo)本處理與報(bào)告進(jìn)行。

5.1.6涂片染色：

①

抗酸染色嚴(yán)格按照操作規(guī)程，胸腹水、尿液、腦脊液等標(biāo)本應(yīng)在5000轉(zhuǎn)/分高速離心10分鐘后，取沉淀涂厚片，自然干燥后固定，按要求染色后鏡檢。

②

G-雙球菌涂片，應(yīng)用滾動(dòng)式涂片法從波片一端涂向另一端，反復(fù)幾次，火焰固定后進(jìn)行革蘭氏染色。

③

腦脊液隱球菌涂片，應(yīng)快速離心后倒去上清液，沉淀涂片、加相應(yīng)的優(yōu)質(zhì)墨汁混勻后鏡檢。

5.1.7

對(duì)新到崗的實(shí)習(xí)或進(jìn)修人員應(yīng)認(rèn)真交代本崗位的一切事宜并且認(rèn)真作好帶教工作。

6

注：崗位職責(zé)分開是相對(duì)的，同事間需要互相協(xié)作，互相幫助，共同完成當(dāng)天的工作。如遇到三個(gè)人上班，則其中一個(gè)做好室內(nèi)日常記錄的檢查完善和控制感染標(biāo)本的處理工作。如遇一個(gè)人上班，則擔(dān)負(fù)1崗位班、2崗位班的所有工作。

普通培養(yǎng)陰性操作程序

1、仔細(xì)查對(duì)標(biāo)本標(biāo)簽與檢驗(yàn)單是否正確，標(biāo)本質(zhì)量是否合格，若收檢標(biāo)本與檢驗(yàn)單查對(duì)正確，標(biāo)本質(zhì)量合格則進(jìn)行接收檢驗(yàn)，否則查找原因并在有關(guān)記錄本上記錄。

2、標(biāo)本處理、檢驗(yàn)與結(jié)果報(bào)告：

1)拭子、分泌物標(biāo)本

標(biāo)本涂于普通血平板、麥康凱平板成原始線，再以無菌接種環(huán)畫線分離后置35℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第24、48小時(shí)觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至72小時(shí)未見可疑菌落，則報(bào)告未培養(yǎng)出普通致病細(xì)菌。

2)尿液標(biāo)本

取5ml尿液,3000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘，取離心沉淀物，接種環(huán)取樣涂于普通血平板、麥康凱平板成原始線，再以無菌接種環(huán)畫線分離后置35℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第24、48小時(shí)觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至72小時(shí)未見可疑菌落，則報(bào)告未培養(yǎng)出普通致病細(xì)菌。

3)引流液

標(biāo)本3000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘，取離心沉淀物，接種環(huán)取樣涂于普通血平板、麥康凱平板成原始線，再以無菌接種環(huán)畫線分離后置35℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第24、48小時(shí)觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至72小時(shí)未見可疑菌落，則報(bào)告未培養(yǎng)出普通致病細(xì)菌。

4)痰液或咽拭子標(biāo)本

無菌接種環(huán)可疑處采樣涂于普通血平板、麥康凱平板成原始線，再以無菌接種環(huán)畫線分離后置35℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第24、48小時(shí)觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至72小時(shí)未見可疑菌落，則報(bào)告未培養(yǎng)出普通致病細(xì)菌。

5)糞便或肛拭子等腸道標(biāo)本

以無菌接種環(huán)桃取可疑處標(biāo)本涂于普通血平板、麥康凱平板成原始線，再以無菌接種環(huán)畫線分離后置35℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第24、48小時(shí)觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至72小時(shí)未見可疑菌落，則報(bào)告未培養(yǎng)出普通致病細(xì)菌。

6)留置針頭、小導(dǎo)管等標(biāo)本

標(biāo)本置無菌管中，加入增菌液2ml，35℃溫箱培養(yǎng)48小時(shí)觀察培養(yǎng)液有無混濁，采樣涂于普通血平板、麥康凱平板成原始線，再以無菌接種環(huán)畫線分離后置35℃培養(yǎng)第24、48小時(shí)觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至72小時(shí)未見可疑菌落，則報(bào)告未培養(yǎng)出普通致病細(xì)菌。

真菌培養(yǎng)陰性操作程序

1、仔細(xì)查對(duì)標(biāo)本標(biāo)簽與檢驗(yàn)單是否正確，標(biāo)本質(zhì)量是否合格，若收檢標(biāo)本與檢驗(yàn)單查對(duì)正確，標(biāo)本質(zhì)量合格則進(jìn)行接收檢驗(yàn)，否則查找原因并在有關(guān)記錄本上記錄。

2、標(biāo)本處理、檢驗(yàn)與結(jié)果報(bào)告：

1)拭子、分泌物標(biāo)本

標(biāo)本涂于TTC-沙保羅平板成原始線，再以無菌接種環(huán)畫線分離后置25℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第24、48、72小時(shí)觀察平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第4天未見可疑菌落，則報(bào)告未培養(yǎng)出真菌。

2)尿液標(biāo)本

取5ml尿液,3000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘，取離心沉淀物，接種環(huán)取樣涂于TTC-沙保羅平板成原始線，再以無菌接種環(huán)畫線分離后置25℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第24、48、72小時(shí)觀察平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第4天未見可疑菌落，則報(bào)告未培養(yǎng)出真菌。

3)引流液

標(biāo)本3000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘，取離心沉淀物，接種環(huán)取樣涂于TTC-沙保羅平板成原始線，再以無菌接種環(huán)畫線分離后置25℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第24、48、72小時(shí)觀察平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第4天未見可疑菌落，則報(bào)告未培養(yǎng)出真菌。

4)痰液或咽拭子標(biāo)本

無菌接種環(huán)可疑處采樣涂于TTC-沙保羅平板成原始線，再以無菌接種環(huán)畫線分離后置25℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第24、48、72小時(shí)觀察平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第4天未見可疑菌落，則報(bào)告未培養(yǎng)出真菌。

5)糞便或肛拭子等腸道標(biāo)本

以無菌接種環(huán)桃取可疑處標(biāo)本涂于TTC-沙保羅平板成原始線，再以無菌接種環(huán)畫線分離后置25℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第24、48、72小時(shí)觀察平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第4天未見可疑菌落，則報(bào)告未培養(yǎng)出真菌。

6)留置針頭、小導(dǎo)管等標(biāo)本

標(biāo)本置無菌管中，加入增菌液2ml，35℃溫箱培養(yǎng)48小時(shí)觀察培養(yǎng)液有無混濁，采樣涂于TTC-沙保羅平板成原始線，再以無菌接種環(huán)畫線分離后置25℃培養(yǎng)第24、48、72小時(shí)觀察平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第4天未見可疑菌落，則報(bào)告未培養(yǎng)出真菌。

苛養(yǎng)菌培養(yǎng)陰性操作程序

1、仔細(xì)查對(duì)標(biāo)本標(biāo)簽與檢驗(yàn)單是否正確，標(biāo)本質(zhì)量是否合格，若收檢標(biāo)本與檢驗(yàn)單查對(duì)正確，標(biāo)本質(zhì)量合格則進(jìn)行接收檢驗(yàn)，否則查找原因并在有關(guān)記錄本上記錄。

2、標(biāo)本處理、檢驗(yàn)與結(jié)果報(bào)告：

1)拭子、分泌物標(biāo)本

標(biāo)本涂于普通血瓊脂平板、巧克力(含V、X因子)平板成原始線，再以無菌接種環(huán)畫線分離后置C02缸，35℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第24、48、72小時(shí)觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第5天未見可疑菌落，則報(bào)告未培養(yǎng)出奈瑟氏菌、嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌。

2)尿液標(biāo)本

取5ml尿液,3000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘，取離心沉淀物，接種環(huán)取樣涂于普通血平板、巧克力(含V、X因子)平板成原始線，再畫線分離后置C02缸，35℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第24、48、72小時(shí)觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第5天未見可疑菌落，則報(bào)告未培養(yǎng)出奈瑟氏菌、嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌。

3)引流液

標(biāo)本3000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘，取離心沉淀物，接種環(huán)取樣畫線分離接種普通血平板、巧克力(含V、X因子)平板，置C02缸，35℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第24、48、72小時(shí)觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第5天未見可疑菌落，則報(bào)告未培養(yǎng)出奈瑟氏菌、嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌。

4)痰液或咽拭子標(biāo)本

無菌接種環(huán)可疑處采樣涂于普通血平板、巧克力(含V、X因子)平板原始線，再畫線分離后置C02缸，

35℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第24、48、72小時(shí)觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第5天未見可疑菌落，則報(bào)告未培養(yǎng)出肺炎球菌、嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌。

5)糞便或肛拭子等腸道標(biāo)本

以無菌接種環(huán)桃取可疑處標(biāo)本涂于血平板、布氏血平板成原始線，再分離畫線后置于C02缸，放入35℃溫箱培養(yǎng)。另取約1g標(biāo)本接種堿性蛋白胨水中，35℃培養(yǎng)第24、48、72小時(shí)觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第5天未見可疑菌落，則報(bào)告未培養(yǎng)出弧菌、螺桿菌等細(xì)菌。

6)留置針頭、小導(dǎo)管等標(biāo)本

標(biāo)本置無菌管中，加入增菌液2ml，35℃溫箱培養(yǎng)48小時(shí)觀察培養(yǎng)液有無混濁，采樣轉(zhuǎn)種血平板、巧克力(含V、X因子)平板成原始線，再畫線分離后置于C02缸，35℃培養(yǎng)第24、48、72小時(shí)觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第5天未見可疑菌落，則報(bào)告未培養(yǎng)出奈瑟氏菌、嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌。

抗酸培養(yǎng)陰性操作程序

1、仔細(xì)查對(duì)標(biāo)本標(biāo)簽與檢驗(yàn)單是否正確，標(biāo)本質(zhì)量是否合格，若收檢標(biāo)本與檢驗(yàn)單查對(duì)正確，標(biāo)本質(zhì)量合格則進(jìn)行接收檢驗(yàn)，否則查找原因并在有關(guān)記錄本上記錄。

2、標(biāo)本處理、檢驗(yàn)與結(jié)果報(bào)告：

液性引流標(biāo)本(如腹水、尿液、CSF等)直接離心留沉淀物，雜菌污染標(biāo)本(如大便、痰等)取樣置無菌管，加入1N

NaOH1ml作用30分鐘，再加入1N

HCl1ml