食品微生物檢測質(zhì)量控制

食品微生物檢測質(zhì)量控制第一頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二文件依據(jù)1、ISO/IEC17025:2005(GB/T27025-2008)

檢測和校準實驗室能力的通用要求2、實驗室資質(zhì)認定評審準則3、GB/T27405實驗室質(zhì)量控制規(guī)范-食品微生物檢驗4、GB4789.1-2010食品安全國家標準食品微生物學檢驗5、衛(wèi)監(jiān)督發(fā)〔2010〕29號附件2《食品檢驗工作規(guī)范》6、相關(guān)標準、規(guī)范、管理規(guī)定第二頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二管理要求GB/T27405實驗室資質(zhì)認定評審準則4.1組織4.1組織4.2管理體系4.2管理體系4.3文件控制

4.3文件控制4.4質(zhì)量及技術(shù)記錄

4.9記錄4.5服務(wù)客戶4.6投訴處理4.7申訴和投訴4.7不符合工作控制4.8糾正措施、預防措施及改進4.8糾正措施4.9預防措施4.10內(nèi)部審核4.10內(nèi)部審核4.11管理評審4.11管理評審4.12持續(xù)改進

第三頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二技術(shù)要求GB/T27405實驗室資質(zhì)認定評審準則5.1人員

5.1人員5.2設(shè)施和環(huán)境條件

5.2設(shè)施和環(huán)境條件5.3設(shè)備

5.4設(shè)備和標準物質(zhì)5.4試劑和培養(yǎng)基

4.5服務(wù)和供應(yīng)品的采購5.5標準物質(zhì)和標準培養(yǎng)物

5.5量值溯源在實驗室中,儀器設(shè)備和消耗性材料的采購、樣品和儀器設(shè)備的運輸、儀器設(shè)備的校準提供、標準物質(zhì)和參考物質(zhì)的提供、培訓提供屬支持服務(wù)工作。第四頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二過程控制要求GB/T27405資質(zhì)認定評審準則6.1合同評審4.6合同評審6.2分包4.4檢測和/或校準分包6.3檢測方法的確認和驗證

5.3檢測和校準方法6.4測量不確定度6.5取樣5.6抽樣和樣品處置6.6樣品處置和確認

5.6抽樣和樣品處置6.7污染廢物的處理

5.2設(shè)施和環(huán)境條件6.8檢測報告

5.8結(jié)果報告第五頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二1、合同評審記錄：檢驗申請表、委托書，與客戶進行討論的有關(guān)記錄。2、所有分包方的注冊資料，及其符合性證明。3、服務(wù)和供應(yīng)品采購的符合性檢查活動記錄。4、供應(yīng)商評價的記錄和合格供應(yīng)商名錄。5、投訴及其調(diào)查、糾正措施記錄。6、審核發(fā)現(xiàn)及糾正措施、跟蹤驗證及有效性評價記錄。7、質(zhì)量監(jiān)督記錄。8、預防措施記錄。常用的質(zhì)量記錄與技術(shù)記錄第六頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二

9、管理評審發(fā)現(xiàn)及糾正措施、跟蹤驗證記錄。10、人員授權(quán)、能力、教育、專業(yè)資格、培訓、技能和經(jīng)驗記錄。11、環(huán)境條件的監(jiān)測、控制記錄。12、方法確認結(jié)果記錄。13、對檢測具有重要影響的設(shè)備及其軟件的記錄，包括檢定、校準、維護、保養(yǎng)、維修記錄。14、客戶對抽樣有偏離、添加或刪節(jié)的要求記錄及采樣記錄。常用的質(zhì)量記錄與技術(shù)記錄第七頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二15、樣品接收記錄（樣品有關(guān)傳遞信息、狀態(tài)等）。16、檢驗結(jié)果和報告。17、原始工作記錄，儀器打印出的結(jié)果，試驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計記錄。18、試驗計劃，包括指令性工作計劃。19、內(nèi)部質(zhì)量控制計劃及其實施記錄。20、能力驗證或?qū)嶒炇议g的比對計劃及實施記錄。

21、差錯或事故記錄及應(yīng)對措施。常用的質(zhì)量記錄與技術(shù)記錄第八頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二體系文件質(zhì)量手冊、程序文件、作業(yè)指導書、記錄表格寫你所做的，做你所寫的，記你所做的第九頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二體系文件質(zhì)量手冊是規(guī)定實驗室管理體系的文件。要求能覆蓋認可準則相關(guān)內(nèi)容。第十頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二體系文件程序文件、作業(yè)指導書目的（為什么做）？做什么？由誰做？何時、何地、如何做？應(yīng)使用什么材料、設(shè)備、文件？如何對活動進行控制和記錄？

第十一頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二文件控制

目的：防止誤用無效和/或作廢的文件。哪些是應(yīng)該控制的文件？

1、實驗室內(nèi)部制訂的文件：質(zhì)量手冊、檢測和/或校準計劃、程序文件、作業(yè)指導書、記錄、表格。

2、外部文件：法律、法規(guī)、規(guī)章、標準、規(guī)范、檢測和/或校準方法、圖樣、軟件、參考數(shù)據(jù)手冊。第十二頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二文件控制問題：1、放置于設(shè)備旁的操作規(guī)程

2、張貼于墻上的管理制度

3、原始記錄及檢驗報告

4、體系文件有修改，但持有人手上文件未及時更新

第十三頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二食品微生物實驗室

技術(shù)要求及過程要求GB/T27405技術(shù)要求及過程要求實際上也是GB/T27025-2008（等同ISO/IEC17025：2005）技術(shù)要素，構(gòu)成了實驗室內(nèi)部質(zhì)量控制要素，由實驗室根據(jù)自身的實際情況制定并實施的，它包括對環(huán)境設(shè)施、培養(yǎng)基、試劑、儀器、方法（實驗步驟）和實驗人員的監(jiān)控。室內(nèi)質(zhì)量控制是產(chǎn)生精確和可靠結(jié)果的基礎(chǔ)和核心。第十四頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二微生物實驗室現(xiàn)場審核查什么？如何查？實驗室認可準則在微生物檢測實驗室中的應(yīng)用說明CL09.doc

核查內(nèi)容：影響實驗室獲得可靠檢測結(jié)果各要素。

第十五頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二

微生物實驗室現(xiàn)場審核主要內(nèi)容（一）人員（二）方法（三）培養(yǎng)基、試劑的控制。（四）儀器的控制。（五）環(huán)境的控制。（六）樣品的管理（七）標準培養(yǎng)物的保存與使用。（八）檢測結(jié)果的質(zhì)量保證。（九）相關(guān)記錄。第十六頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二人員培訓及能力確認專業(yè)知識消毒知識生物安全操作知識質(zhì)量控制相關(guān)知識微生物常規(guī)儀器設(shè)備應(yīng)用、清潔、維護的培訓通過內(nèi)部質(zhì)量控制、能力驗證、室間質(zhì)控考核、使用標準菌株加標檢測等客觀評估人員的能力。在使用一種非經(jīng)常使用方法或技術(shù)時，在檢測前確認微生物檢測人員的操作技能是非常有必要的。培訓應(yīng)有計劃并有評估。第十七頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二人員實驗室人員是否熟悉生物檢測安全操作知識和消毒知識？實驗室是否對在培人員實施有效監(jiān)督？實驗室是否對新員工進行檢測技能的培訓？培訓是否有計劃并且對培訓效果進行評估？（食品檢驗工作規(guī)范）實驗室是否對新員工的檢測技能進行確認？第十八頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二人員常見問題1、不知道如何對人員進行有效監(jiān)督

監(jiān)督記錄表.doc應(yīng)安排對人的監(jiān)督，重點是新上崗人員、易出問題的檢驗人員，監(jiān)督員應(yīng)考慮被監(jiān)督人是誰？應(yīng)該監(jiān)督的項目、方法。2、培訓沒有計劃性，沒有進行培訓效果評估。3、未對新員工的檢測技能進行確認。4、壓力容器操作人員無特殊壓力容器操作上崗證。5、微生物上崗操作考核未考專業(yè)知識及生物安全操作知識。6、不能提供人員參加安全培訓的證明材料。第十九頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二方法

GB4789.1-2010規(guī)定：應(yīng)選擇現(xiàn)行有效的國家標準方法。食品微生物檢驗方法標準中對同一檢驗項目有兩個及兩個以上定性檢驗方法時，應(yīng)以常規(guī)培養(yǎng)方法為基準方法。食品微生物檢驗方法標準中對同一檢驗項目有兩個及兩個以上定量檢驗方法時，應(yīng)以平板計數(shù)法為基準方法。第二十頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二方法實驗室在采用新的方法進行檢測前，是否對方法進行驗證并保留驗證記錄？實驗室是否有文件化的程序，規(guī)范實驗室自制方法的制定并保留相關(guān)記錄？第二十一頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二方法常見問題：標準更新不及時,作廢標準未及時從工作場所撤出。用篩選法代替?zhèn)鹘y(tǒng)方法進行病原菌檢測方法更新前未對方法進行驗證，或是方法驗證內(nèi)容過于簡單，未進行能力確認。

第二十二頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二環(huán)境環(huán)境要求區(qū)域分隔,避免交叉污染標識溫度、濕度、噪聲、照度、潔凈度的控制。樣品檢驗的環(huán)境要求：潔凈實驗室或超凈工作臺，潔凈室在使用前及使用后應(yīng)進行消毒,并定期監(jiān)測消毒效果。病原微生物分離鑒定：生物安全二級實驗室，應(yīng)符合GB19489的規(guī)定。生物安全實驗室，容易發(fā)生污染的檢測區(qū)域，證明已采取了清潔措施。第二十三頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二環(huán)境問題在潔凈實驗室緩沖間內(nèi)設(shè)洗手池培養(yǎng)間與潔凈室連通潔凈室內(nèi)放置生物安全柜在超凈工作臺內(nèi)在風機開啟情況下進行霉菌計數(shù)，或是進行病原微生物操作。未對紫外線燈進行監(jiān)測及評價。感染性廢棄物與生活垃圾混放。第二十四頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二環(huán)境如何標識？人員控制標識、潔凈區(qū)域標識、生物危害標識、污染警示標識如何監(jiān)測？潔凈室：潔凈度監(jiān)測（沉降菌、浮游菌、懸浮粒子。生物安全實驗室：生物安全柜做潔凈度、風速、泄漏等監(jiān)測。

第二十五頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二環(huán)境應(yīng)制定合理的環(huán)境監(jiān)測程序（參見GB/T27405-2008附錄D?醫(yī)藥工業(yè)潔凈室(區(qū))懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的測試方法GB/T16292～16294-1996），設(shè)定不同工作區(qū)域可接受的背景菌落總數(shù)，有文件化的程序處理菌落數(shù)超標情況。如果實驗室有使用紫外線燈,應(yīng)有定期監(jiān)測記錄及結(jié)果評價記錄。對環(huán)境監(jiān)測結(jié)果進行數(shù)據(jù)分析，對環(huán)境質(zhì)量進行評價。第二十六頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二環(huán)境潔凈室監(jiān)測記錄無檢測依據(jù)、評價依據(jù)及結(jié)果評價，方法有曝皿5分鐘、15分鐘。第二十七頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二設(shè)備

設(shè)備必須滿足檢驗標準的要求檢定、校準、維護、保養(yǎng)、確認標識：檢定、校準合格標識、污染警示標識監(jiān)控記錄及使用記錄：對檢測結(jié)果有影響的設(shè)備的監(jiān)控、正確滅菌與否的監(jiān)控。

實驗室應(yīng)對重要的檢驗設(shè)備（特別是自動化檢驗儀器）進行核查。第二十八頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二設(shè)備名稱要求推薦頻率參考玻璃溫度計完全可追溯性重新核查單點（如零點）核查每五年一次每年一次工作溫度計在零點和工作范圍內(nèi)用參考溫度計核查每年一次天平完全可追溯性校準每年一次校準法碼完全可追溯性校準每五年一次溫控設(shè)備（培養(yǎng)箱、水浴箱）確定溫度的穩(wěn)定性和均勻性監(jiān)測溫度初次使用前，此后每兩年一次和每次維修后每個工作日一次或每次使用前干熱滅菌箱確定溫度的穩(wěn)定性和均勻性監(jiān)測溫度初次使用前，此后每兩年一次和每次維修后每個工作日一次或每次使用前高壓滅菌器確定運轉(zhuǎn)的特性監(jiān)測溫度和時間初次使用前，此后每兩年一次和每次維修后每次使用時生物安全柜確定性能微生物監(jiān)測氣流監(jiān)測初次使用前，此后每年一次和每次維修后每兩周一次每次使用前無菌室和潔凈室空氣和表面微生物污染每兩周一次第二十九頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二設(shè)備期間核查：僅針對設(shè)備的穩(wěn)定性不好，及惡劣條件下使用的設(shè)備，核查后應(yīng)進行評價。應(yīng)對設(shè)備的檢測結(jié)果進行確認，確認設(shè)備是否符合檢測工作需要?？稍跈z定周期表里增加使用要求、檢定結(jié)果、結(jié)果確認等欄目。修正因子的應(yīng)用去污染要求。設(shè)備的維護維修應(yīng)在設(shè)備的使用記錄上體現(xiàn)。

第三十頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二設(shè)備問題：設(shè)備檢定、校準后未進行結(jié)果確認，期間核查后未進行評價設(shè)備檢定、校準產(chǎn)生的修正因子未能正確應(yīng)用?？赡苁芪廴镜脑O(shè)備未貼污染警示標識。天平使用記錄上稱量的小數(shù)點位與天平精度不一致，或與標準方法要求的稱樣量不一致。自動化微生物鑒定設(shè)備的核查未做或不充分。第三十一頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二實驗用品檢驗用品儲存環(huán)境應(yīng)保持干燥和清潔標識適宜的消毒方法并記錄：消毒與滅菌的方式、方法、時間、效果等。第三十二頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二實驗用品問題：滅菌物品無滅菌時間及有效期標識，甚至無標識。第三十三頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二廢棄物的處置廢棄樣品的處理制度（程序）及記錄。廢棄物的處置要注意生物安全。檢出致病菌的樣品要經(jīng)過無害化處理。第三十四頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二樣品

樣品運送：樣品運輸過程中要儲存在2℃—8℃，而且要防止外部污染。所有樣品24h內(nèi)送達實驗室。特殊情況下（必須長途運輸），時間可延長到48h，前提是樣品檢測時不能超過其保質(zhì)期。第三十五頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二樣品樣品在送達實驗室立即分析或24h內(nèi)分析，分析前應(yīng)在包裝標簽說明的保存溫度下進行保存。如果標簽說明未提到保存溫度，采用8℃±1℃。冷凍樣品應(yīng)在45℃以下不超過15min或在2℃～5℃不超過18h解凍，若不能及時檢驗，應(yīng)放于－15℃左右保存。非冷凍而易腐的樣品應(yīng)盡可能及時檢驗，若不能及時檢驗，應(yīng)置2℃～5℃冰箱保存，在24h內(nèi)檢驗。第三十六頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二樣品樣品接收：核查抽樣者記錄的樣品信息；如果可能，檢查樣品的外觀性狀是否有腐敗變質(zhì)。檢查樣品包裝有否損壞；樣品制備實驗室操作人員要注意避免各階段樣品間的交叉污染和環(huán)境污染。如果分析過程出現(xiàn)了不可接受的偏差而終止分析，就要重新取樣。第三十七頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二檢測過程做好培養(yǎng)基質(zhì)量控制，定期帶標準菌株檢測。生化試驗注意事項（1）用API20E或VITEK-GNI+或其它腸桿菌科生化鑒定試劑盒，按照生產(chǎn)商提供的使用說明進行。（2）進行生化試驗時應(yīng)是用新鮮培養(yǎng)物（24h）。（3）菌液的稀釋應(yīng)注意無菌操作，濁度應(yīng)達到使用說明的要求。第三十八頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二標準培養(yǎng)物應(yīng)有程序管理。標準培養(yǎng)物用于驗收培養(yǎng)基、驗證方法、評估人員能力、校驗設(shè)備、評估實驗操作。來源：CMCC、ATCC，菌種收藏機構(gòu)標準菌株。標準菌株的商業(yè)派生菌株僅可用作工作菌株。

第三十九頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二標準培養(yǎng)物實驗室是否保存有滿足試驗需要的標準菌種或參照標本？標準菌種或標本是否是從認可的菌種或標本收集途徑獲得？實驗室是否建立和保存其所有菌種、標本的收集、貯藏、保存、確認試驗的記錄？實驗室是否有文件化的程序管理參照菌種（從原始菌種到日常工作用菌）？第四十頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二標準培養(yǎng)物參照菌種是否定期轉(zhuǎn)種傳代，并做確認試驗，包括實驗室中所需要的關(guān)鍵診斷指標？實驗室是否加以記錄并予以保存？每一支參照菌種是否都應(yīng)以適當?shù)臉撕?、標記或其它標識方式來表示其名稱、標準號、接種日期和所傳代數(shù)？其管理記錄中還應(yīng)包括（但不限于）以下內(nèi)容：從原始菌種傳代到工作用菌種的代數(shù)；菌種生長的培養(yǎng)基及孵育條件；菌種生存條件。第四十一頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二標準培養(yǎng)物實驗室應(yīng)保存能滿足實驗需要的標準或參考菌株，在購入和傳代保藏過程中，應(yīng)進行驗證試驗，并進行文件化管理。標準菌株：至少定義到屬或種水平的菌株，有明確的來源。標準儲備菌株：標準菌株經(jīng)過一代轉(zhuǎn)接后獲得的同種菌株。工作菌株：由標準儲備菌株轉(zhuǎn)接后獲得的同種菌株。第四十二頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二標準培養(yǎng)物一旦標準菌株被解凍，最好不要重新冷凍和再次使用。所有標準培養(yǎng)物從儲備菌株傳代培養(yǎng)次數(shù)不得超過5次。除非標準方法中要求并規(guī)定，或?qū)嶒炇夷芴峁┪募C據(jù)證明其相關(guān)特性沒有發(fā)生變化。標準菌株如已老化、退化或變異、污染，經(jīng)確認試驗不符合的或該菌株已無使用需要的，應(yīng)及時銷毀。第四十三頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二標準培養(yǎng)物問題：不能提供來源證明。不能提供對標準菌株傳代及確認記錄，或是傳代記錄信息不全。不能提供標準菌株管理程序。第四十四頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二標準培養(yǎng)物

凍干菌種

轉(zhuǎn)種活化，同時作生物學性狀的鑒定-80℃冰箱保存的培養(yǎng)物

轉(zhuǎn)種活化用于微生物質(zhì)控的新鮮培養(yǎng)物第四十五頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二標準培養(yǎng)物菌種活化常用培養(yǎng)基普通細菌：營養(yǎng)肉湯NB

胰蛋白胨大豆肉湯TSB

腦心浸液培養(yǎng)基BHI

胰酪胨大豆酵母浸膏肉湯TSB-YE真菌：真菌培養(yǎng)基乳酸菌：MRS肉湯嗜鹽性弧菌：含3%NaCl的TSB第四十六頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二標準培養(yǎng)物凍干菌株的開啟一、安瓶管開封

1．用浸過75％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管。

2．用火焰將安瓿管頂端適度加熱。

3．滴無菌水至加熱的安瓿管頂端使玻璃開裂。

4．用挫刀或鑷子敲下已開裂的安瓿管的頂端。第四十七頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二標準培養(yǎng)物二、菌株恢復培養(yǎng)

1．用無菌吸管，吸取0.3～0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基，滴人安瓿管內(nèi)，輕輕振蕩，使凍于菌體溶解呈懸浮狀。

2．取0.1～0.2ml菌體懸浮液，移植于適宜的瓊脂斜面／平板培養(yǎng)基上，剩余的菌液，注入適宜的液體培養(yǎng)基內(nèi)，然后在建議的溫度下培養(yǎng)。

第四十八頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二菌種名稱斜面/平板培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基培養(yǎng)溫度沙門氏菌BHABHI36℃±1℃阪琦腸桿菌BHABHI36℃±1℃單核細胞增生性李斯特菌BHABHI36℃±1℃金黃色葡萄球菌BHABHI36℃±1℃大腸桿菌O157BHABHI36℃±1℃大腸桿菌BHABHI36℃±1℃藤黃微球菌營養(yǎng)瓊脂營養(yǎng)肉湯36℃±1℃副溶血性弧菌含3%NaCl的BHA含3%NaCl的BHI36℃±1℃創(chuàng)傷弧菌含3%NaCl的BHA含3%NaCl的BHI36℃±1℃空腸彎曲菌哥倫比亞血平板布氏肉湯42℃±1℃第四十九頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二菌株保存菌株保存：對于每個陽性樣品，都應(yīng)盡可能地保存檢出的食源性致病菌分離株，用于進一步的藥敏試驗和分型研究。應(yīng)對從食品、環(huán)境或人體分離、純化、鑒定的原始分離菌株（野生菌株）進行系統(tǒng)、完整的菌株信息記錄，包括分離時間、來源，表型及分子鑒定的主要特征等。第五十頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二菌種的保存

包括質(zhì)控菌株及分離已經(jīng)鑒定的菌株（1）在相應(yīng)的斜面或平板培養(yǎng)基上經(jīng)2次純化，保存于相應(yīng)的液體培養(yǎng)基與甘油體積比為1：1的菌種保存管中，置于-80℃保存。（2）冷凍干燥保存。第五十一頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二服務(wù)與供應(yīng)品實驗室是否建立和保持有效的適合試驗范圍的培養(yǎng)基（試劑）質(zhì)量控制程序？該程序包括對培養(yǎng)基（試劑）進行評估的方式和儲存的規(guī)定、接受/拒收的標準等？對自備的和商業(yè)提供的培養(yǎng)基（試劑）都需要評估？根據(jù)培養(yǎng)基（試劑）的性質(zhì)和實驗類型，對培養(yǎng)基（試劑）的可用性進行評估？關(guān)鍵培養(yǎng)基的評估，是否采取了技術(shù)性驗收？第五十二頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二服務(wù)與供應(yīng)品食品檢驗工作規(guī)范第十五條：食品檢驗機構(gòu)應(yīng)當對影響檢驗結(jié)果的標準物質(zhì)、試劑和消耗材料等供應(yīng)品進行驗收和記錄，并定期對供應(yīng)商進行評價，列出合格供應(yīng)商名單。第五十三頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二培養(yǎng)基的質(zhì)量控制培養(yǎng)基（試劑）質(zhì)量控制程序關(guān)鍵培養(yǎng)基的技術(shù)性驗收記錄培養(yǎng)基的配制記錄。培養(yǎng)基的可用性評估記錄。第五十四頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二培養(yǎng)基質(zhì)量控制質(zhì)控菌株的選擇生化性狀典型的強陽性質(zhì)控菌株生長相對較弱的陽性質(zhì)控菌株不具備目標菌典型反應(yīng)特性的質(zhì)控菌株生長被抑制的陰性質(zhì)控菌株第五十五頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二培養(yǎng)基質(zhì)量控制培養(yǎng)基的制備及質(zhì)量控制應(yīng)有對試劑進行檢查、接收（拒收）和貯存的程序。對檢驗結(jié)果有重要影響的關(guān)鍵試劑應(yīng)進行適用性驗證。試劑的管理控制應(yīng)包括全部相關(guān)試劑、質(zhì)控材料以及校準品的批號、實驗室接收日期以及這些材料投入使用的日期。確定和驗證已制備的培養(yǎng)基在適的的貯存條件下的保存期限。第五十六頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二培養(yǎng)基質(zhì)量控制問題：使用過了保質(zhì)期的培養(yǎng)基已配制的培養(yǎng)基上未標識保質(zhì)期。培養(yǎng)基的驗收記錄沒有驗收依據(jù)，未記錄試驗觀察現(xiàn)象。已配制的培養(yǎng)基無標識。第五十七頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二培養(yǎng)基質(zhì)量控制培養(yǎng)基質(zhì)量控制依據(jù)

ISO11133:2003Part1SN/T1538.1-2005：實驗室培養(yǎng)基制備質(zhì)量保證通則

SN/T1538.2-2007：培養(yǎng)基性能測試實用指南

WS/T232-2002：商業(yè)性微生物培養(yǎng)基質(zhì)量檢驗規(guī)程第五十八頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二培養(yǎng)基質(zhì)量控制培養(yǎng)基的配制稱量準確：嚴格按標簽上的稱量數(shù)稱取，注意單雙料的變化配制用水：電阻率在25℃≥300000Ω·cm

重金屬（鎘、鉻、銅、鎳、鉛等）＜0.05mg/L

重金屬總量＜10mg/L

溶解充分：加水時避免干粉掛壁粘底，避免燒糊分裝合理：分裝量不宜超過容器容積2/3，傾注平皿（90mm）每皿15mL-20mL

滅菌方式：根據(jù)培養(yǎng)基成分的不同，選擇適宜的滅菌方式，常用高壓、煮沸、過濾第五十九頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二培養(yǎng)基質(zhì)量控制理化指標的質(zhì)量控制色澤：因品種而異，但同一品種批間差異不宜過大。水分含量：干粉培養(yǎng)基應(yīng)控制在＜5%。澄清度：除個別特殊品種含有不溶成分外，應(yīng)澄清，無絮狀物，無沉淀。

pH值：指滅菌后冷卻至25℃時的測定值，允許偏差±0.2。凝膠強度:固體培養(yǎng)基的凝膠強度。第六十頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二培養(yǎng)基質(zhì)量控制微生物學指標的質(zhì)量控制常用質(zhì)控方法及應(yīng)用靈敏度測定法——基礎(chǔ)型培養(yǎng)基混合增菌培養(yǎng)法——選擇性增菌培養(yǎng)基回收率測定法——選擇性分離培養(yǎng)基生化鑒定方法——鑒別培養(yǎng)基第六十一頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二培養(yǎng)基質(zhì)量控制（1）靈敏度測定法例：腦心浸液肉湯培養(yǎng)基質(zhì)控菌株——營養(yǎng)苛求菌乙型溶血性鏈球菌短小芽孢桿菌測定方法制備108菌懸液，10倍梯度稀釋至10-8。選取適宜的3~4個連續(xù)稀釋度，接種1mL于9mL待檢測培養(yǎng)基中，每個稀釋度接種3管，35℃~37℃培養(yǎng)3d。接種管2/3生長的最高稀釋度即為該培養(yǎng)基的靈敏度。第六十二頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二培養(yǎng)基質(zhì)量控制（2）混合增菌培養(yǎng)法例：SC肉湯質(zhì)控菌株：鼠傷寒沙門氏菌、大腸埃希氏菌實驗方法（1）將沙門氏菌和大腸埃希氏菌的新鮮肉湯培養(yǎng)物按照1:99進行混合。（2）接種于SC肉湯中，36±1℃培養(yǎng)18h-24h。（3）將培養(yǎng)物適當稀釋，取稀釋液0.1mL涂布麥康凱瓊脂。結(jié)果：平板上應(yīng)90%以上為沙門氏菌，而大腸埃希氏菌應(yīng)<10%。第六十三頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二培養(yǎng)基質(zhì)量控制（3）回收率測定法（RecoveryRate）可從菌落數(shù)量上判斷分離培養(yǎng)基對目標菌的選擇效果，以及對非目標菌的抑制性目標菌的回收率要求在70%以上,并具有典型菌落特征非目標菌全部抑制或部分抑制第六十四頁，共七十四頁，編輯于2023年，星期二培養(yǎng)基質(zhì)量控制（3）回收率測定法（RecoveryRate）例：XLD培養(yǎng)基質(zhì)控菌株名稱 菌號 菌落特征 糞鏈球菌 32221 抑制 金黃色葡萄球菌26003 抑制 大腸埃希氏菌 44104