仔豬副傷寒活疫苗課件

仔豬副傷寒活疫苗(c500株)生產(chǎn)操作細(xì)則令本品系使用免疫原性良好的豬霍亂沙門氏菌弱毒株,接種適宜培養(yǎng)基培養(yǎng),收獲培養(yǎng)物加入適當(dāng)穩(wěn)定劑,經(jīng)真空冷凍干燥制成。本品用于預(yù)防仔豬副傷寒活疫苗1、菌種1.1疫苗生產(chǎn)用菌種為豬霍亂沙門氏菌C500弱毒株,原種購于中國獸藥檢查所,經(jīng)擴(kuò)繁后由質(zhì)檢部鑒定、保管供應(yīng)1.2菌種標(biāo)準(zhǔn)1.2.1C500弱毒株應(yīng)符合以下標(biāo)準(zhǔn)1.2.1.1形態(tài)和生化特性本菌為革蘭氏陰性小桿菌,生化特性應(yīng)符合細(xì)菌分類學(xué)中本菌的特性。1.2.1.2培養(yǎng)特性在普通瓊脂平板上,37℃C培養(yǎng)18-22小時(shí),菌落為圓形、邊緣整齊、突起、半透明、略濕潤的光滑型?！?.2.1.3血清學(xué)特性普通瓊脂新鮮培養(yǎng)物用玻片凝集檢查法,對(duì)沙門氏菌屬○7因子血清出現(xiàn)凝集反應(yīng)。1.2.1.4特異性在含1%的醋酸鉈的普通肉湯中呈均勻渾濁生長,用新鮮普通瓊脂培養(yǎng)物與1500%吖啶黃溶液做玻片凝集試驗(yàn)應(yīng)不出現(xiàn)凝集反應(yīng)冷1.2.1.5安全性用pH74-76的普通肉湯或蛋白胨水,將培養(yǎng)24-48小時(shí)的普通瓊脂斜面培養(yǎng)物洗下并作活菌計(jì)數(shù),注射下列動(dòng)物應(yīng)符合標(biāo)準(zhǔn)。冷小白鼠18-22g(30-35日齡)的小白鼠10只,各皮下注射0.2ml,含活菌數(shù)1億,觀察21日,至少應(yīng)存活9只。冷家兔體重1.52.0kg的家兔5只,各皮下注射1ml,含活菌數(shù)100億,觀察21日應(yīng)存活。仔豬用體重15kg以上的健康易感斷奶仔豬4頭,各靜脈注射1ml,含活菌數(shù)30億,觀察1個(gè)月應(yīng)存活。÷1.3凍干菌種2-8°℃保存期為10年2、疫苗制造及半成品檢驗(yàn)÷2.1生產(chǎn)用菌種的制備2.1.1一級(jí)種子繁殖和鑒定凍干種子用普通肉湯稀釋或經(jīng)普通肉湯后,接種普通瓊脂平板,37°℃培養(yǎng)18-20小時(shí),觀察菌落形態(tài),菌落為圓形、邊緣整齊、突起、半透明、略濕潤的光滑型令選取中等偏大的菌落5-10個(gè),混合后接種于普通瓊脂斜面若干只,37°C培養(yǎng)24小時(shí),經(jīng)純粹檢驗(yàn)合格,并用0.2%吖啶黃溶液做玻片凝集試驗(yàn)應(yīng)合格,作為一級(jí)種子。在28℃C保存期不超過1個(gè)月,在此期間可以移植1-2次,在培養(yǎng)基上繼代不超過5代2.1.2二級(jí)種子繁殖取一級(jí)種子接種于普通瓊脂或普通肉湯,37°C培養(yǎng)24小時(shí),經(jīng)純粹檢驗(yàn)合格后,即可作為生產(chǎn)種子,在2-8°C保存期不超過2日。2.2制苗用培養(yǎng)基制備÷2.2.1材料牛肉要求應(yīng)采購新鮮的精牛肉,3-5歲,