探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化

關于探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化第1頁，講稿共30頁，2023年5月2日，星期三基礎回扣1、酵母菌酵母菌是單細胞真核生物。生長周期短，增殖速度快，還可以用酵母菌作為實驗材料研究（探究酵母菌的呼吸方式，判斷細胞的死活探究膜的透性）第2頁，講稿共30頁，2023年5月2日，星期三2、種群數(shù)量的變化

種群數(shù)量的變化包括增長、波動、穩(wěn)定、下降等“S”型曲線有一個K值，即環(huán)境容納量。

種群數(shù)量的增長也受到許多環(huán)境因素（如溫度、培養(yǎng)液的pH、培養(yǎng)液的養(yǎng)分種類和濃度、代謝產(chǎn)物等）的影響。第3頁，講稿共30頁，2023年5月2日，星期三探究過程1．提出問題：2．作出假設：3．設計實驗：4．進行實驗：5．分析結果和表達交流：6．得出結論：培養(yǎng)液中酵母菌種群的數(shù)量是怎樣隨時間變化的？酵母菌在開始一段時間呈“J”型增長，隨著時間的推移，由于資源和空間有限，呈“S”型增長。連續(xù)培養(yǎng)5天，每天用顯微鏡和血球計數(shù)板計數(shù)出酵母菌種群密度各小組匯報實驗結果，結合前4天的結果，畫出酵母種群增長的曲線圖并進行分析。酵母菌在開始一段時間呈“J”型增長，但隨著時間的推移，由于資源和空間有限，將呈“S”型增長，并最終將全部死亡。第4頁，講稿共30頁，2023年5月2日，星期三3．設計實驗：①將10mL無菌馬鈴薯培養(yǎng)液或肉湯培養(yǎng)液加入試管中；②將酵母菌接種入試管中的培養(yǎng)液中混合均勻；③將試管在28℃條件下連續(xù)培養(yǎng)5d；④每天取樣計數(shù)酵母菌數(shù)量；⑤分析結果，得出結論。是否設置對照組和多組重復實驗？如何取樣計數(shù)？記錄表怎樣設計？計數(shù)時有哪些注意事項？第5頁，講稿共30頁，2023年5月2日，星期三計數(shù)室計數(shù)室（中間大方格）的長和寬各為1mm，深度為0.1mm，其體積為______mm3，合_________mL。1mm0.11×10-4血球計數(shù)板:一種專門計數(shù)較大單細胞微生物的儀器第6頁，講稿共30頁，2023年5月2日，星期三計數(shù)室計數(shù)室分為25中格（雙線邊）每一中格又分為16小格計數(shù)室是由___________個小格組成25×16=400第7頁，講稿共30頁，2023年5月2日，星期三如何計數(shù)？五點取樣法樣方法每mL培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)量==A(平均每個中格酵母細胞數(shù))×25×104×稀釋倍數(shù)A1A2A5A3A4第8頁，講稿共30頁，2023年5月2日，星期三第1天第9頁，講稿共30頁，2023年5月2日，星期三第4

天第6天第10頁，講稿共30頁，2023年5月2日，星期三第7

天死亡第11頁，講稿共30頁，2023年5月2日，星期三酵母菌數(shù)量變化記錄表第12頁，講稿共30頁，2023年5月2日，星期三計數(shù)時有哪些注意事項？①從試管中吸出培養(yǎng)液進行計數(shù)之前，要將試管輕輕震蕩幾次；如果酵母菌濃度過大，應先稀釋。②對于壓在中格界線上的酵母菌，一般只取相鄰兩邊及夾角計數(shù)；③對于已經(jīng)出芽的酵母菌，芽體達到母細胞大小一半時，即可作為兩個菌體計算；已死亡的酵母菌不計數(shù)※。④每個樣品一般計數(shù)三次，取其平均值。第13頁，講稿共30頁，2023年5月2日，星期三培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化第14頁，講稿共30頁，2023年5月2日，星期三第15頁，講稿共30頁，2023年5月2日，星期三死亡第16頁，講稿共30頁，2023年5月2日，星期三在計數(shù)前，還應有哪些步驟？需注意些什么？培養(yǎng)液配制滅菌接種培養(yǎng)無菌操作培養(yǎng)條件第17頁，講稿共30頁，2023年5月2日，星期三試管編號培養(yǎng)液/mL無菌水/mL酵母菌母液/mL溫度（℃）A10—0.128B10—0.15C—100.128

針對“培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的動態(tài)變化”，有人提出了新的問題，某同學按下表完成了有關實驗。第18頁，講稿共30頁，2023年5月2日，星期三溫度、營養(yǎng)物質對酵母菌生長的影響第19頁，講稿共30頁，2023年5月2日，星期三試管編號培養(yǎng)液/mL無菌水/mL酵母菌母液/mL溫度（℃）A10—0.128B10—0.15C—100.128第20頁，講稿共30頁，2023年5月2日，星期三以計數(shù)酵母菌為例

(1)用血球計數(shù)板計數(shù)酵母菌懸液的酵母菌個數(shù).

(2)樣品稀釋的目的是便于酵母菌懸液的計數(shù),以每小方格內(nèi)含有4-5個酵母細胞為宜,一般稀釋10倍即可.

(3)將血球計數(shù)板用擦鏡紙擦凈,在中央的計數(shù)室上加蓋專用的厚玻片.

(4)將稀釋后的酵母菌懸液,用吸管吸取一滴置于蓋玻片的邊緣,使菌液緩緩滲入,多余的菌液用吸水紙吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球計數(shù)室內(nèi).

血球計數(shù)板的使用第21頁，講稿共30頁，2023年5月2日，星期三第22頁，講稿共30頁，2023年5月2日，星期三(5)計數(shù)時,如果使用16格×25格規(guī)格的計數(shù)室,要按對角線位,取左上,右上,左下,右下4個中格(即100個小格)的酵母菌數(shù).如果規(guī)格為25格×16格的計數(shù)板,除了取其4個對角方位外,還需再數(shù)中央的一個中格(即80個小方格)的酵母菌數(shù).

(6)當遇到位于大格線上的酵母菌,一般只計數(shù)大方格的上方和左方線上的酵母細胞(7)對每個樣品計數(shù)三次,取其平均值,按下列公式計算每1ml菌液中所含的酵母菌個數(shù).第23頁，講稿共30頁，2023年5月2日，星期三3.計算公式

(1)16格×25格的血球計數(shù)板計算公式:

酵母細胞數(shù)/ml=100小格內(nèi)酵母細胞個數(shù)/100×400×104×稀釋倍數(shù)

(2)25格x16格的血球計數(shù)板計算公式:

酵母細胞數(shù)/ml=80小格內(nèi)酵母細胞個數(shù)/80×400×104×稀釋倍數(shù)

第24頁，講稿共30頁，2023年5月2日，星期三怎樣進行酵母菌的計數(shù)？

對一支試管中的培養(yǎng)液(可定為10ml)中的酵母菌逐個計數(shù)是非常困難的，可以采用抽樣檢測的方法：先將蓋玻片放在計數(shù)室上，用吸管吸取培養(yǎng)液，滴于蓋玻片邊緣，讓培養(yǎng)液自行滲入，多余培養(yǎng)液用濾紙吸去，稍待片刻，待酵母菌細胞全部沉降到計數(shù)室底部，將計數(shù)板放在載物臺的中央，計數(shù)一個小方格內(nèi)的酵母菌數(shù)量，再以此為根據(jù)，估算計算中的酵母菌總數(shù)，蓋玻片下，培養(yǎng)液厚度為0.1mm，可算出10ml培養(yǎng)液中酵母菌總數(shù)的公式：2.5×104x(x為小方格內(nèi)酵母菌數(shù))

第25頁，講稿共30頁，2023年5月2日，星期三從試管中吸出培養(yǎng)液進行計數(shù)之前，建議你將試管輕輕振蕩幾次。這是為什么？本探究需要設置對照嗎？如果需要請討論對照組應怎樣設計和操作；如果不需要，請說明理由。需要做重復實驗嗎？

目的是使培養(yǎng)液中的酵母菌均勻分布，以保證估算的準確性，減少誤差。

不需要，本實驗旨在探究培養(yǎng)液中酵母菌在一定條件下的種群數(shù)量變化，只要分組實驗，獲得平均數(shù)值即可。

不用重復，只要分組實驗獲得平均值即可。第26頁，講稿共30頁，2023年5月2日，星期三5、怎樣記錄結果？記錄表怎樣設計？如果一個小方格內(nèi)酵母菌過多，難以計數(shù)，應采取怎樣的措施？第1天第2天第3天第4天第5天第6天第7天第1組第2組第3組------第n組平均值

搖勻試管取1mL酵母菌培養(yǎng)液稀釋n倍后，再用血球計數(shù)板計數(shù)，所得數(shù)值乘以n×2.5×104，即為10mL酵母菌液中酵母菌個數(shù)。只計數(shù)相鄰兩邊及其頂角的酵母菌數(shù)。7對于壓在小方格界線上的酵母菌，應當怎樣計數(shù)？第27頁，講稿共30頁，2023年5月2日，星期三

設計實驗：A組為實驗組，裝培養(yǎng)液10mL，酵母菌母液0.1mL,環(huán)境溫度28℃。B組裝培養(yǎng)液10mL，酵母菌母液0.1mL,環(huán)境溫度5℃，與A組形成溫度條件對照。C組不裝培養(yǎng)液，只裝無菌水10mL,酵母菌母液0.1mL,環(huán)境溫度28℃，與A組形成營養(yǎng)條件對照。第28頁，講稿共30頁，2023年5月2日，星期三

計數(shù)計數(shù)：首先取樣，每天取樣時間大體一致，并要遵守無菌操作規(guī)范。每次取樣前要試管振蕩搖勻，正確地使用1mL刻度吸管將lmL酵母菌培養(yǎng)液移入1支干凈的試管里，然后用滴管吸取1滴培養(yǎng)液滴在已蓋在血