分段書寫5 discussion中文與生長板及髁突軟骨細(xì)胞比較

aggrecanCTSCTS與其他兩種儀比較與其他軟骨或分析結(jié)果比3d9108/L[101]，本實驗中顱底軟骨細(xì)胞的潛4維持在穩(wěn)定水平，而I型膠原mRNA表達(dá)水平從第2始上升HiSeqTM2000系統(tǒng)是一種高通量系統(tǒng)，與Roche454組儀和ABLife的SOLiD系統(tǒng)同為第二代技術(shù)。簡單的流動槽上樣和觸摸屏用戶界面使操Roche454組儀是基于焦磷酸原理的高通量組系統(tǒng)，單次運行產(chǎn)生的的缺點為相同堿基的連續(xù)摻入產(chǎn)生誤差，且試劑價格相對較高[122]。SOLiD系統(tǒng)的基本原理8DNA探針與模板配對連接，發(fā)出不同的熒光信號，從而外由于SOLiD系統(tǒng)采用的不是PCR反應(yīng)進(jìn)行DNA合成與因此對于高GC含量的樣本與比表達(dá)和轉(zhuǎn)錄組的重要實驗且由于使用高通量技術(shù)可以實現(xiàn)對不同組織mRNA在檢測成本方面，高通量的價格目前還大大高于技術(shù)，且技術(shù)已經(jīng)發(fā)展了技術(shù)還會占據(jù)主導(dǎo)優(yōu)勢，但隨著第三代技術(shù)的發(fā)展，的成本會大大降低，屆時高通量會成為主流的實驗技術(shù)。（>1000miR-99b-5p、miR-411-5p、miR-181b-5p、miR-140-5p、miR-434-3pmiR-410-3p，它們的倍miR-410-3p、miR-181b-5pmiR-411-5p。,,,,miR-199a*[64]、miR-221[57]、miR-222[132]、miR-365[68]和miR-455[65]。其中，miR-140-5p和的表達(dá)在加力組與實驗組無顯著差異（99Table9ConfirmedmiRNAsrelatedtomiRNApreviousFoldPGradus等[12]miR-125bFGF/ERK/Snail1信號通路抑制軟骨細(xì)胞增殖。他Col2a1DicerCol2a1-Cre:Dicer1fl/flCol2a1AggrecanCol2a1Snail1DicerSnail1FGF信號途徑的效應(yīng)分子，Snail1AggrecanII型膠原（Col2a1）的轉(zhuǎn)錄。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，miR-125bSnail1miR-125bmiR-30a/cDicer1，Snail1AggrecanCol2a1表達(dá)受阻，miR-125bFGF/ERK/Snail1信號通路抑制軟骨細(xì)CTS的反應(yīng)。達(dá)量最高[12,16]。miRNA-140的位于編碼蛋白質(zhì)的內(nèi)含子內(nèi)，其宿主為Wwp2（3泛素蛋白連接酶在小的8號和人類16號的小臂上均有發(fā)現(xiàn)[7]。2010年Miaki等人首次了敲除mi-140的究他們發(fā)現(xiàn)敲除mi-140會造成輕侏（關(guān)節(jié)軟骨糖蛋白缺失以及纖維化現(xiàn)象[18。隨后另一組研究人員也對mi-140進(jìn)行了敲除研究他們發(fā)現(xiàn)mi-140敲除鼠體型etingere向分化加速，導(dǎo)致增殖層軟骨細(xì)胞減少，但軟骨細(xì)胞本身的增殖基本沒有受影響[7]。2013apaioannou2mi-14028l72-e:Lin8ac:Mi140小mi-14028a[81]miRNAmi-140可能通過多種機制促進(jìn)軟骨細(xì)胞肥大。對其靶的最早的研究在206年，am等發(fā)現(xiàn)mi-140H4Ru2的抑制作用，最終促進(jìn)軟骨細(xì)胞肥大[6]r敲除小鼠軟骨內(nèi)H4的表達(dá)并沒有顯著提高[1]H在肥大化軟骨細(xì)胞區(qū)域的表達(dá)與mi-140在軟骨細(xì)胞中的表達(dá)并不一致，這為mi-144的調(diào)控關(guān)系增加了一些疑惑ais等通過生物信息學(xué)分析結(jié)合miRNA分析認(rèn)為3是mi140可能的靶[7]但ag等的研究結(jié)果與之他們通過構(gòu)建mi-140阻細(xì)胞進(jìn)行3報告熒光素酶報告分析發(fā)現(xiàn)mi-140阻遏細(xì)胞中3mi-140[7]3并不是mi-140的靶。Naamua認(rèn)為mi-140促進(jìn)軟骨細(xì)胞肥大的可能機ep的表達(dá)。敲除mi-140eppBMPmi-140BMP信號通路被抑制，抑制ep表達(dá)則可以逆轉(zhuǎn)這一現(xiàn)象，即敲除mi-140可靶p高表達(dá)、進(jìn)而抑BMP信號通路，從而加速軟骨細(xì)胞的肥大[73]miR-140YangWnt誘導(dǎo)的非軟miRNAmiR-140Sp1的直接靶向作用維持軟骨細(xì)胞增殖[71]。Sp1的3’-UTR處具有兩個miR-140結(jié)合位點，有Sp1的上調(diào)作用會導(dǎo)致細(xì)胞阻遏，并且是p15INK4b、p21Waf1/Clip的直接轉(zhuǎn)錄因子[77]。但這與miR-140miR-140的小鼠表現(xiàn)為軟骨細(xì)胞肥大向分化加速，miR-140Miyaki等的研究表明hBMSCs經(jīng)TGF-β3誘導(dǎo)軟骨向分化時，miR-140IL-1βmiRNA-140表達(dá)可以下調(diào)IL-1β并且誘導(dǎo)聚蛋白多糖酶-5（Adisintegrinandmetalloproteinasewiththrombospondinmotifs-5，ADAMTS-5）的表達(dá)，ADAMTS-5是一種聚蛋白多糖水解酶，能直[127]Adamts-5miR-140miR-140在骨關(guān)節(jié)軟骨代謝中的一個靶，由于miR-140的缺失造成Adamts-5高量表達(dá)而造成關(guān)節(jié)炎癥狀[128]。Liang等通過生物信息學(xué)分析和熒光素酶報告分析發(fā)現(xiàn)基質(zhì)金屬蛋白酶-13（Matrix13MMP-13表達(dá)上升，MMP-13是骨關(guān)節(jié)炎發(fā)病機理中關(guān)鍵的因子，可以降解膠原和聚蛋白多糖，促使本實驗中miR-140-5pCTS的反應(yīng)。與其他軟骨或分析結(jié)果比Dunn等對關(guān)節(jié)軟骨表面、中間及這三個不同的區(qū)域的miRNA表達(dá)差異進(jìn)行表層受力區(qū)表達(dá)下調(diào)，miRNA-126，145，335在體外培養(yǎng)時較完整軟骨內(nèi)表達(dá)下調(diào)[132]，本DunnmiR-140Dunn等的研究結(jié)果相Guan等采用三維膠原支架立體培養(yǎng)雞軟骨細(xì)胞，并施以1Hz、5%的拉力，通過分析，miR-365miRNAIhhHDAC442d，miRNA