腸桿菌科-志賀氏菌屬（微生物檢驗(yàn)技術(shù)課件）

志賀菌屬細(xì)菌鑒定1掌握志賀菌屬細(xì)菌主要的生物學(xué)性狀23學(xué)習(xí)目標(biāo)熟悉志賀菌屬細(xì)菌臨床意義掌握志賀菌屬細(xì)菌微生物學(xué)檢驗(yàn)志賀菌屬概述志賀菌屬是主要的腸道致病菌之一，是引起人類細(xì)菌性痢疾的病原體。在伯杰手冊（1984）中將志賀菌分為4個(gè)血清群：A群為痢疾志賀菌，B群為福氏志賀菌，C群為鮑氏志賀菌，D群為宋內(nèi)志賀菌。一、生物學(xué)性狀：形態(tài)與染色G-

短桿菌，無鞭毛，無莢膜，有

菌毛，不形成芽胞。志賀菌屬細(xì)菌鑒定福氏志賀菌純培養(yǎng)鏡下染色形態(tài)志賀菌屬細(xì)菌鑒定2.培養(yǎng)特性兼性厭氧，營養(yǎng)要求不高，因不發(fā)酵乳糖，在腸道選擇性培養(yǎng)基上形成無色菌落（宋內(nèi)志賀菌遲緩發(fā)酵）。福氏志賀菌在SS平板上及中國藍(lán)平板上的無色菌落3.生化反應(yīng)氧化酶陰性，不分解乳糖（宋內(nèi)遲緩分解），分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，A群不分解甘露醇、D群β-半乳糖苷酶+、鳥氨酸脫羧酶試驗(yàn)陽性。

B．宋內(nèi)志賀菌C.對照KA--

KIA斜面底層產(chǎn)氣

H2S志賀菌屬細(xì)菌鑒定MIU-+-

3.生化反應(yīng)葡乳甘IMRVPC苯丙U硝賴鳥氨對+-+++----+-+-志賀菌屬細(xì)菌鑒定IMViC＋＋－－O抗原是分類的依據(jù)，O抗原分為群特異性抗原和型特異性抗原。志賀菌分為4個(gè)血清群，44個(gè)血清型。5.抵抗力：較弱，對酸敏感。4.抗原結(jié)構(gòu)只有O、K抗原，無H抗原。志賀菌屬細(xì)菌鑒定（一）致病物質(zhì)——普通菌毛，黏附于腸粘膜上皮細(xì)胞，引起炎癥反應(yīng)定植因子內(nèi)毒素外毒素（Vero毒素）毒素

二、臨床意義

志賀菌屬細(xì)菌鑒定腸毒素性神經(jīng)毒性細(xì)胞毒性（二）所致疾病細(xì)菌性痢疾急、慢性菌痢中毒性菌痢帶菌者三、微生物學(xué)檢驗(yàn)志賀菌屬細(xì)菌鑒定（一）檢驗(yàn)程序（二）檢驗(yàn)方法1.分離培養(yǎng)：SS平板和中國藍(lán)平板。志賀菌屬細(xì)菌鑒定SS平板：無色菌落；中國蘭：無色菌落2.鑒定：G-桿菌無芽胞、氧化酶陰性（1）初步鑒定：用KIA和MIU。將在KIA上出現(xiàn)KA--，MIU上出現(xiàn)-+/--，進(jìn)一步鑒定到屬和種（生化、血清學(xué)試驗(yàn)）。志賀菌屬細(xì)菌鑒定KA--

KIA斜面底層產(chǎn)氣

H2SMIU-+/--

（2）最終鑒定：全面生化反應(yīng)和血清學(xué)試驗(yàn)。2.鑒定：A群：甘露醇-;D群β-半乳糖苷酶+，鳥氨酸+。志賀菌屬細(xì)菌鑒定志賀菌屬細(xì)菌鑒定血清學(xué)試驗(yàn)生理鹽水對照-志賀多價(jià)血清+宋內(nèi)血清+

3.鑒別試驗(yàn)：（1）志賀菌屬與大腸埃希菌的鑒別，志賀菌屬與大腸埃希菌之間的DNA相關(guān)性很高，尤其是與EIEC在生化特征上難以鑒別，在血清學(xué)上有交叉反應(yīng)。下述特性有助于鑒定志賀菌種：①無動力，賴氨酸陰性；②發(fā)酵糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣（福氏志賀菌6型、鮑氏志賀菌13和14型、痢疾志賀菌3型除外）；

③醋酸鈉-、葡萄糖銨-、粘質(zhì)酸鹽-。志賀菌屬細(xì)菌鑒定（2）與類志賀鄰單胞菌鑒別：可用動力和氧化酶試驗(yàn)加以鑒別，志賀菌屬均為陰性，而類志賀鄰單胞菌為陽性。

（3）與傷寒沙門菌鑒別：傷寒沙門菌在KIA培養(yǎng)基上的表現(xiàn)與志賀菌相似，鑒別點(diǎn)是傷寒沙門菌硫化氫和動力陽性，能與沙門菌屬因子血清（OA-F、O9、Vi）凝集而不與志賀菌屬因子血清凝集。志賀菌屬細(xì)菌鑒定（4）血清學(xué)鑒定：凡生化反應(yīng)符合志賀菌屬者均需作血清學(xué)鑒定，可先用志賀菌屬4種多價(jià)血清作玻片凝集試驗(yàn)，凝集者再進(jìn)一步作定型鑒定。我國現(xiàn)有的定群及定型診斷血清包括痢疾志賀菌1型和2型血清，福氏志賀菌(1～6型)血清，鮑特志賀菌(1～6型)和宋內(nèi)志賀菌血清。

在國內(nèi)各地報(bào)告的志賀菌屬感染以（B群）福氏志賀菌為多見，約占總數(shù)的70％以上，其次為（D群）宋內(nèi)志賀菌及A群2型。在B群中又以1b、2a及3型居多。志賀菌屬細(xì)菌鑒定志賀菌屬細(xì)菌鑒定依據(jù)在腸道選擇平板上為不發(fā)酵乳糖的無色菌落（宋內(nèi)志賀菌培養(yǎng)48~72小時(shí)為有色菌落，遲緩發(fā)酵乳糖）G-桿菌、無芽胞、散在排列K