霍亂及其診斷與治療課件整理-003

亂及其珍斷與療《霍亂防治手冊(2019年第六版)》亂及其珍斷與療1病原學(xué)弧菌與霍亂弧菌生物分類:弧菌科→鹽弧菌屬發(fā)光桿菌屬弧菌屬→霍亂弧菌副溶血弧菌河弧菌擬態(tài)弧菌麥?zhǔn)匣【衾够【茉寤【ツ崴够【鷦?chuàng)傷弧菌海魚弧菌鯊魚弧菌辛辛那提弧菌病原學(xué)2可在人群中引起霍亂暴發(fā)、大流行群霍亂弧菌→古典生物型埃爾托生物型s群霍亂弧菌(二)、形態(tài)與染色形態(tài):短小稍彎曲的桿狀或圓桿狀菌無芽胞、無莢膜菌體兩端稍平或鈍圓長1.5~20m、寬0.3-0.4m菌體單端有一長達(dá)菌體4~5倍鞭毛,為其極為活潑運(yùn)動(dòng)提供動(dòng)力○139電鏡下見菌體外周包繞一層較薄的莢膜染色:革蘭氏染色陰性(三)、基因組霍亂弧菌有兩個(gè)環(huán)狀染色體染色體Ⅰ:大部分霍亂弧菌生存所需基因位于此染色體Ⅱ可在人群中引起霍亂暴發(fā)、大流行3∞群和∞139群霍亂弧菌產(chǎn)毒株具有霍亂毒素基因和攜帶毒素基因的溶原性噬菌體CTXφ基因簇不同血清群霍亂弧菌的基因組差異較大(四)、培養(yǎng)特性普通培養(yǎng)基上生長良好兼性厭氧生長溫度16°~42°C。37°C培養(yǎng)適宜鈉離子刺激生長,但8%氯化鈉環(huán)境中不能生長可繁殖pH為6-9.2,7.2-7.4適宜。pl8.2-8.6(有用9.2)選擇性或增菌培養(yǎng)基可抑制其細(xì)菌生長,用于霍亂弧菌的初分離霍亂弧菌在堿性培養(yǎng)基中培養(yǎng)最初數(shù)小時(shí)生長速度可超過大腸桿菌,O1群2-3小時(shí)在培養(yǎng)液表面形成菌膜;一般6-8小時(shí)取液體上層生長物作霍亂弧菌分離用選擇性培養(yǎng)基可提高霍亂弧菌檢出率,包括強(qiáng)選擇性的分離培養(yǎng)基:硫代硫酸鹽檸檬酸鹽膽鹽蔗糖瓊脂慶大霉素瓊脂4號瓊脂∞群和∞139群霍亂弧菌產(chǎn)毒株具有霍亂毒素基因和攜帶毒素基4弱選擇性分離培養(yǎng)基:堿性瓊脂堿性膽鹽瓊脂五)、生化特性糖發(fā)酵發(fā)酵、產(chǎn)酸不產(chǎn)氣葡萄糖麥芽糖甘露糖蔗糖半乳糖果糖糊精可溶性淀粉遲緩發(fā)酵乳糖不發(fā)酵阿拉伯糖衛(wèi)茅醇水楊素木膠糖側(cè)金盞花醇肌醇弱選擇性分離培養(yǎng)基:堿性瓊脂5凝集鑒定源于糞便標(biāo)本可疑霍亂弧菌菌落可直接用○群/○3群診斷血清或單抗行凝集鑒定無血清或單抗時(shí),下列生化試驗(yàn)前四項(xiàng)有輔助篩選作用生化試驗(yàn)氧化酶試驗(yàn):可區(qū)分腸桿菌科細(xì)菌粘絲試驗(yàn):有助于區(qū)分非弧菌(如氣單胞菌屬細(xì)菌)克氏雙糖鐵和三糖鐵瓊脂:可用于排除假單胞菌屬及部分腸杄菌科細(xì)菌賴氨酸鐵瓊脂:有于篩選氣單胞菌屬和不產(chǎn)生賴氨酸脫羧酶的其它弧菌弧菌抑制劑◎/129敏感試驗(yàn):O1群90%以上敏感(大部分○13具抗性)V-P試驗(yàn):大多數(shù)埃爾托型陽性;古典型少數(shù)例外均陰性:○3多陽性凝集鑒定6(六)抗原構(gòu)造與血清分型○抗原:菌體表面脂多糖抗原血清群:依○抗原不同,已將霍亂弧菌鑒定出210余個(gè)血清群O群、O3群及其非○1群/非○139群H抗原:霍亂弧菌的鞭毛抗原所有霍亂弧菌的鞭毛抗原均相同A、B、C抗原因子:○群霍亂弧菌菌體抗原的不同成分其中:A為群特異性、B、C為型特異性抗原○i群血清型:小川型一含A抗原因子、B抗原因子及少量C因子成分稻葉型一含A因子、C因子彥島型一含A因子、B因子、C因子;為中間型廠bT基因表達(dá)正常表現(xiàn)為小川型;當(dāng)bT基因變異或其產(chǎn)物功能低下時(shí)表現(xiàn)為稻葉血清型(七)毒力因子與致病性毒力因子:霍亂毒素CT:致瀉毒素中最強(qiáng)烈的A-B亞單位型蛋白毒素。27.2kDa的A亞單位有毒素的生物活性部分A1多肽和連接A1與B亞單位的A2多肽組成(六)抗原構(gòu)造與血清分型76kDa負(fù)責(zé)毒素與宿主細(xì)胞膜表面受體(GMl神經(jīng)節(jié)苷脂)結(jié)合的B亞單位,介導(dǎo)CT-A亞單位進(jìn)入細(xì)胞編碼CT毒素的基因:霍亂弧菌中,溶原性噬菌體CTX中基因組的一部分cAB基因CTX中能以霍亂菌毛TCP為受體感染具有TCP的非產(chǎn)毒霍亂弧菌攜帶cAB基因水平轉(zhuǎn)移,使非產(chǎn)毒株轉(zhuǎn)變?yōu)楫a(chǎn)毒株霍亂腸毒素的檢測:生物學(xué)檢查法免疫學(xué)測毒法分子生物學(xué)檢測定居因子:重要的是TCP,屬于Ⅳ型菌毛,主要亞單位為TcpATCP直徑3-7m、長5-10μm存在于菌體周身表面可聚成東ACP(輔助定居因子血凝素脂多糖外膜蛋白其它菌毛其它毒素:溶血素/溶細(xì)胞素RⅨX外毒素s熱定等等6kDa負(fù)責(zé)毒素與宿主細(xì)胞膜表面受體(GMl神8(八)、耐藥性我國監(jiān)測資料:○群(埃爾托型菌株):敏感率95%以上氨芐西頭孢曲松、諾氟沙星、氯霉素、多西環(huán)阿奇霉素、呋喃妥因、慶大霉素阿米卡星耐藥率升近30%萘啶酮酸、四環(huán)素、復(fù)方新諾明○139群:存在多重耐藥性,)50%菌株對氯霉素、卡那霉素、萘啶酮枝、四環(huán)素、氨芐西林、復(fù)方新諾明耐藥大部分對鏈霉素、紅霉素、多粘菌素B耐藥或中度耐藥(九)、表型變異環(huán)境、宿主、培養(yǎng)條件、抗生素等多種選擇性壓力作用下產(chǎn)生形態(tài)變異:人工培養(yǎng)基上保存稍久成直桿狀失去動(dòng)力S-R變異:菌落的光滑型向粗糙型變異,用粗糙型血清做玻片凝集試驗(yàn)檢是否粗糙型(八)、耐藥性9皺褶型菌落培養(yǎng)傳代菌株常見,不同于粗糙型粗糙型與皺褶型菌落由于分泌更多胞外多糖生物膜形成増強(qiáng),對氯化水、滲透壓、氧化應(yīng)激等有更強(qiáng)抵抗力型:菌株細(xì)胞壁缺損可岀現(xiàn)L型,菌落呈油煎蛋樣。L型培養(yǎng)基才能檢岀活的非可培養(yǎng)狀態(tài)(VBNC):是霍亂弧菌在外環(huán)境水體中長期存活的非常重要的方式菌體表現(xiàn)為收縮變形,胞壁、胞膜結(jié)構(gòu)變化顯著;胞質(zhì)密度增大蛋白質(zhì)、核糖體、DNA組成變化。條件適宜時(shí)可再次回到可培養(yǎng)狀態(tài)但ⅤBNC狀態(tài)下的細(xì)菌仍保持胞完整,有低水平的呼吸作用及代謝活性存在一些基因表達(dá),無正常生長狀態(tài)下的細(xì)胞分裂溶血性變異:○1群的埃爾托型存在穩(wěn)定的溶血株穩(wěn)定的不溶血株培養(yǎng)傳代時(shí)可發(fā)生轉(zhuǎn)換,可存在溶血與不溶血的混合型(十)、環(huán)境生存、存活力與抵抗力環(huán)境生存:霍亂弧菌是沿海河口微生物生態(tài)系統(tǒng)中重要組成部分,非○群與非○3群菌株更易在環(huán)境水體中分離到。非流行區(qū)及遠(yuǎn)離霍亂病人污染的地區(qū),環(huán)境水體中分離到的○l群一般不產(chǎn)生CT毒素皺褶型菌落培養(yǎng)傳代菌株常見,不同于粗糙型10霍亂及其診斷與治療課件整理_00311霍亂及其診斷與治療課件整理_00312霍亂及其診斷與治療課件整理_00313霍亂及其診斷與治療課件整理_00314霍亂及其診斷與治療課件整理_00315霍亂及其診斷與治療課件整理_00316霍亂及其診斷與治療課件整理_00317霍亂及其診斷與治療課件整理_00318霍亂及其診斷與治療課件整理_00319霍亂及其診斷與治療課件整理_00320霍亂及其診斷與治療課件整理_00321霍亂及其診斷與治療課件整理_00322霍亂及其診斷與治療課件整理_00323霍亂及其診斷與治療課件整理_00324霍亂及其診斷與治療課件整理_00325霍亂及其診斷與治療課件整理_00326霍亂及其診斷與治療課件整理_00327霍亂及其診斷與治療課件整理_00328霍亂及其診斷與治療課件整理