血脂和血漿脂蛋白檢驗(yàn)課件

教學(xué)目的和要求熟悉血漿脂蛋白、載脂蛋白分類及特征熟悉脂代謝有關(guān)酶類與特殊蛋白質(zhì)熟悉脂蛋白代謝掌握LDL受體途徑掌握脂蛋白代謝紊亂掌握脂蛋白和脂質(zhì)主要測(cè)定方法原理了解高脂蛋白血癥的預(yù)防和治療原則教學(xué)目的和要求熟悉血漿脂蛋白、載脂蛋白分類及特征1重點(diǎn)血漿脂蛋白結(jié)構(gòu)與受體脂蛋白代謝紊亂脂蛋白和脂質(zhì)測(cè)定主要方法難點(diǎn)脂蛋白代謝受體途經(jīng)脂蛋白代謝紊亂機(jī)制難點(diǎn)脂蛋白代謝受體途經(jīng)脂蛋白代謝紊亂機(jī)制重點(diǎn)2概述

血漿脂類簡(jiǎn)稱血脂，包括：

游離膽固醇（freecholesterol，F(xiàn)C）膽固醇酯（cholesterolester，CE）磷脂（phospholipid，PL）甘油三酯（triglyceride/triacylglycerolTG）糖酯(glycolipids,GL)游離脂肪酸（freefattyacid，F(xiàn)FA）血漿中最多的脂質(zhì)有膽固醇（總膽固醇totalcholesterol，TC）、PL和TG。血漿脂質(zhì)總量為4.0-7.0g/L概述血漿脂類簡(jiǎn)稱血脂，包括：3第一節(jié)血漿脂蛋白

一、血漿脂蛋白的分類二、血漿脂蛋白的組成和特征第一節(jié)血漿脂蛋白4一、血漿脂蛋白的分類(一)超速離心法←乳糜微粒(chylomicron，CM)←極低密度脂蛋白(verylowdensitylipoprotein，VLDL)←低密度脂蛋白(lowdensitylipoprotein，LDL)←高密度脂蛋白(highdensitylipoprotein，HDL)※中間密度脂蛋白(intermediatedensitylipoprotein,IDL)一、血漿脂蛋白的分類(一)超速離心法←乳糜微粒(chylo5（二）電泳法根據(jù)血漿脂蛋白表面電荷量大小不同，在電場(chǎng)中，其遷移速率也不同，分為：☆乳糜微粒☆β-脂蛋白☆前β-脂蛋白☆α-脂蛋白（二）電泳法根據(jù)血漿脂蛋白表面電荷量大小不同，在電場(chǎng)中，其遷6超速離心法與電泳法分離血漿脂蛋白的相應(yīng)關(guān)系

超速離心法與電泳法分離血漿脂蛋白的相應(yīng)關(guān)系7二、血漿脂蛋白的組成和特征

二、血漿脂蛋白的組成和特征8血漿脂蛋白結(jié)構(gòu)

脂蛋白一般以不溶于水的TG和CE為核心，表面覆蓋有少量蛋白質(zhì)和極性的PL、FFA，從而使脂蛋白顆粒能穩(wěn)定地分散在血漿中。血漿脂蛋白結(jié)構(gòu)9第二節(jié)載脂蛋白

脂蛋白中的蛋白部分稱為載脂蛋白(apolipoprotein，apoprotein，Apo)。載脂蛋白在脂蛋白代謝中的生理功能：（1）構(gòu)成并穩(wěn)定脂蛋白的結(jié)構(gòu)。（2）修飾并影響與脂蛋白代謝有關(guān)的酶的活性。（3）作為脂蛋白受體的配體，參與脂蛋白與細(xì)胞表面脂蛋白受體的結(jié)合及其代謝過(guò)程。第二節(jié)載脂蛋白

脂蛋白中的蛋白部分稱為載脂蛋白(apo10第三節(jié)脂蛋白受體Brown和Goldstein于1974年研究家族性高膽固醇血癥(familialhypercholesterolemia，F(xiàn)H)患者代謝缺陷時(shí)，在成纖維細(xì)胞膜上發(fā)現(xiàn)了LDL受體(LDLreceptor，LDLR)的存在。以后相繼發(fā)現(xiàn)有VLDL受體和清道夫受體等。第三節(jié)脂蛋白受體Brown和Goldstein于197411一、低密度脂蛋白受體受體結(jié)構(gòu)

由836個(gè)氨基酸殘基組成36面體結(jié)構(gòu)蛋白，分子量約115kD，由五種不同的區(qū)域構(gòu)成。一、低密度脂蛋白受體受體結(jié)構(gòu)由836個(gè)氨基酸殘基組成36面12LDL受體基因結(jié)構(gòu)及功能

1．人LDL受體基因長(zhǎng)度45kD，由18個(gè)外顯子和17個(gè)內(nèi)含子組成。2．受體親和性含ApoB100的脂蛋白可與LDL受體以高親和力結(jié)合。3.LDL受體廣泛分布于肝、動(dòng)脈壁平滑肌細(xì)胞、腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。LDL受體基因結(jié)構(gòu)及功能1．人LDL受體基因長(zhǎng)度45kD，13若胞內(nèi)游離膽固醇濃度升高，則：①抑制HMGCoA還原酶，以減少自身的膽固醇合成；②抑制LDL受體基因的表達(dá)，減少LDL受體的合成，從而減少LDL的攝??；③激活內(nèi)質(zhì)網(wǎng)ACAT，使游離膽固醇在胞質(zhì)內(nèi)酯化成膽固醇酯貯存，以供細(xì)胞的需要；LDL受體途徑：LDL或其他含ApoB100、E的脂蛋白如VLDL、β-VLDL均可與LDL受體結(jié)合，內(nèi)吞入細(xì)胞使其獲得脂類，主要是膽固醇，這種代謝過(guò)程稱為L(zhǎng)DL受體途徑。該途徑依賴于LDL受體介導(dǎo)的細(xì)胞膜吞飲作用完成。

若胞內(nèi)游離膽固醇濃度升高，則：LDL受體途徑：LDL或其他14二、極低密度脂蛋白受體

▲結(jié)構(gòu)與LDL受體類似。

▲僅對(duì)含ApoE的脂蛋白VLDL、VLDL殘粒有高親和性結(jié)合，對(duì)LDL為顯著的低親和性。▲在肝內(nèi)幾乎未發(fā)現(xiàn)，廣泛分布在代謝活躍的心肌，骨骼肌、脂肪組織等細(xì)胞.▲VLDL受體不受細(xì)胞內(nèi)膽固醇負(fù)反饋抑制二、極低密度脂蛋白受體▲結(jié)構(gòu)與LDL受體類似。15三、清道夫受體

SR-A類清道夫受體,SR是一個(gè)大家族，按分子結(jié)構(gòu)分為六大類:SR-A、-B、-C、-D、-E、-F。

SR-A類清道夫受體(SR-A）有6個(gè)結(jié)構(gòu)功能區(qū)組成。該受體的I、Ⅱ型均由六個(gè)區(qū)域部分組成，包括:

三、清道夫受體SR-A類清道夫受體,SR16清道夫受體配體譜廣泛，有：乙?；蜓趸疞DL。多聚次黃嘌呤核昔酸，多聚鳥(niǎo)嘌呤核苷酸。多糖如硫酸右旋糖酐、細(xì)菌脂多糖(內(nèi)毒素)。某些磷脂，如絲氨酸磷脂(卵磷脂不是配體)。配體譜的共同特點(diǎn)均為多陰離子化合物。清道夫受體配體

清道夫受體功能

可能有以下方面：

使細(xì)胞泡沫化，促進(jìn)粥樣斑抉的形成。

清除細(xì)胞外液修飾LDL，有防御功能。

具有清除血管過(guò)多脂質(zhì)和病菌毒素等功能。清道夫受體配體譜廣泛，有：清道夫受體配體清道夫受體功能17四、膽固醇酯轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白

膽固醇酯轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（CETP）屬于脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（lipidtransferprotein，LTP），是由肝、小腸、腎上腺、脾、脂肪組織及巨噬細(xì)胞合成的一種疏水性糖蛋白，介導(dǎo)脂蛋白中各種中性脂質(zhì)的轉(zhuǎn)移和交換。cDNA編碼的CETP含476氨基酸殘基，分子量為53kD；成熟CETP含4個(gè)天冬酰N-糖鏈，分子量為74kD。

四、膽固醇酯轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白膽固醇酯轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（CETP）屬于脂質(zhì)轉(zhuǎn)18CETP對(duì)膽固醇的逆轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程CETP對(duì)膽固醇的逆轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程19第四節(jié)脂蛋白代謝

一、血漿脂蛋白代謝密切相關(guān)的酶類

參與脂質(zhì)代謝的酶有：脂蛋白脂肪酶（lipoproteinlipase，LPL）肝脂酶（hepatictriglyceridelipase，HTGL）LCAT等。第四節(jié)脂蛋白代謝一、血漿脂蛋白代謝密切相關(guān)的酶類201．LPLLPL是脂肪細(xì)胞、心肌細(xì)胞、骨骼肌細(xì)胞、乳腺細(xì)胞以及巨噬細(xì)胞等實(shí)質(zhì)細(xì)胞合成和分泌的一種糖蛋白，分子量為60kD。ApoCⅡ?yàn)槠浔匦璧妮o因子。作用是分解脂蛋白核心成分的甘油三酯，并促使脂蛋白之間轉(zhuǎn)移膽固醇、磷脂及載脂蛋白?；钚訪PL以同源二聚體形式存在，通過(guò)靜電引力與毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞表面的多聚糖結(jié)合，肝素可以使此結(jié)合形式的LPL釋放入血，并提高其活性。1．LPLLPL是脂肪細(xì)胞、心肌細(xì)胞、骨骼肌細(xì)胞、乳腺細(xì)胞以212．HTGLHTGL亦稱為肝性LPL（hepaticLPL）其特點(diǎn)：①HTGL活性不需要ApoCⅡ作為激活劑；②SDS可抑制HTGL活性，而不受高鹽濃度及魚(yú)精蛋白的抑制；③主要作用于小顆粒脂蛋白如VLDL殘粒、CM殘粒及HDL，調(diào)節(jié)膽固醇從周圍組織轉(zhuǎn)運(yùn)到肝，使肝內(nèi)的VLDL轉(zhuǎn)化為L(zhǎng)DL。

2．HTGLHTGL亦稱為肝性LPL（hepaticLPL223．LCATLCAT由416個(gè)氨基酸殘基組成，分子量為6.3kD，屬于糖蛋白。LCAT由肝臟合成釋放入血液，以游離或與脂蛋白結(jié)合的形式存在。作用是將HDL中的卵磷脂的C2位不飽和脂肪酸轉(zhuǎn)移給游離膽固醇，生成溶血卵磷脂和膽固醇酯，使HDL變成成熟的HDL球狀顆粒。3．LCATLCAT由416個(gè)氨基酸殘基組成，分子量為6.323二、脂蛋白代謝外源性代謝途徑：飲食攝入的膽固醇和TG在小腸中合成CM及其代謝過(guò)程。內(nèi)源性代謝途徑：包括①由肝臟合成VLDL，VLDL轉(zhuǎn)變?yōu)镮DL和LDL，LDL被肝臟或其它器官代謝的過(guò)程。②HDL的代謝過(guò)程二、脂蛋白代謝外源性代謝途徑：飲食攝入的膽固醇和TG在小腸241．CM代謝

1．CM代謝252.VLDL、IDL、LDL代謝2.VLDL、IDL、LDL代謝263．HDL代謝3．HDL代謝27第五節(jié)脂蛋白代謝紊亂一、高脂蛋白血癥二、低脂蛋白血癥三、脂蛋白代謝紊亂與動(dòng)脈粥樣硬化第五節(jié)脂蛋白代謝紊亂一、高脂蛋白血癥28一、高脂蛋白血癥

高脂血癥（hyperlipidemia）是指血漿中膽固醇和/或TG水平升高。由于血脂在血中以脂蛋白形式運(yùn)輸，因而實(shí)際上高脂血癥就是高脂蛋白血癥（hyperlipoproteinemia，HLP）。一、高脂蛋白血癥29（一）高脂蛋白血癥的分型

（一）高脂蛋白血癥的分型30（二）原發(fā)性高脂蛋白血癥1．家族性多基因性高膽固醇血癥2．家族性高膽固醇血癥3．家族性異常β-脂蛋白血癥4．家族性乳糜微粒血癥5．家族性高甘油三酯血癥6．其他家族性高脂血癥（二）原發(fā)性高脂蛋白血癥1．家族性多基因性高膽固醇血癥31三）繼發(fā)性脂蛋白血癥1．糖尿病2．甲狀腺功能減退3．腎臟疾患4．肥胖癥5．酗酒6．藥物三）繼發(fā)性脂蛋白血癥1．糖尿病32（四）高HDL血癥血漿HDL-膽固醇（HDL-C）含量超過(guò)2.6mmol/L，定義為高HDL血癥。CETP及HTGL活性降低是引起高HDL血癥的主要原因。若CETP缺陷，HDL內(nèi)的CE蓄積，使HDL增多；若HTGL活性降低，HDL被肝細(xì)胞攝取減少并使HDL2→HDL3轉(zhuǎn)換過(guò)程減慢而停留在血液中，并使其濃度增加，出現(xiàn)高HDL血癥。

（四）高HDL血癥血漿HDL-膽固醇（HDL-C）含量超過(guò)233高HDL血癥分為原發(fā)性和繼發(fā)性兩類原發(fā)性高HDL血癥的病因有：①CETP缺損；②HTGL活性降低；③其他。繼發(fā)性高HDL血癥病因有：①運(yùn)動(dòng)失調(diào)；③飲酒過(guò)量；④原發(fā)性膽汁性肝硬化；⑤治療高脂血癥的藥物引起；⑥其他。高HDL血癥分為原發(fā)性和繼發(fā)性兩類34二、低脂蛋白血癥（一）低脂蛋白血癥的診斷血清TC在3.3mmol/L以下，或TG在0.45mmol/L以下，或LDL-C在2.1mmol/L以下者，屬于低脂蛋白血癥。TC和TG同時(shí)降低者多見(jiàn)，脂蛋白中多見(jiàn)HDL、LDL和VLDL降低。（二）病因原發(fā)性低脂蛋白血癥的原因有ApoAⅠ缺乏或變異、LCAT缺乏癥、無(wú)α-脂蛋白血癥（Tangier?。?、無(wú)β-脂蛋白血癥、低β-脂蛋白血癥等。二、低脂蛋白血癥（一）低脂蛋白血癥的診斷35三種無(wú)（低）脂蛋白血癥的主要特點(diǎn)三種無(wú)（低）脂蛋白血癥的主要特點(diǎn)36三、動(dòng)脈粥樣硬化

(一)

、動(dòng)脈粥樣硬化概述

(二)、引起AS的脂蛋白

(三)、HDL的抗AS功能

(四)、代謝綜合征

三、動(dòng)脈粥樣硬化(一)、動(dòng)脈粥樣硬化概述(二)、引起37AS是指動(dòng)脈內(nèi)膜的脂質(zhì)、血液成分的沉積，平滑肌細(xì)胞及膠原纖維增生，伴有壞死及鈣化等不同程度病變的一類慢性進(jìn)行性病理過(guò)程。AS主要損傷動(dòng)脈內(nèi)壁膜凡能增加動(dòng)脈壁膽固醇內(nèi)流和沉積的脂蛋白如LDL、β-VLDL、oxLDL等，是致AS的因素；(一)、動(dòng)脈粥樣硬化概述AS是指動(dòng)脈內(nèi)膜的脂質(zhì)、血液成分的沉積，平滑肌細(xì)胞及膠原纖38損傷動(dòng)脈壁的內(nèi)膜，嚴(yán)重時(shí)累及中膜是AS主要病理特征。常易受累及的是主動(dòng)脈、頸動(dòng)脈、冠狀動(dòng)脈、腦動(dòng)脈、腎動(dòng)脈及周圍動(dòng)脈等。

病理特征

腦梗塞心肌梗死、心絞痛腎動(dòng)脈硬化癥阻塞性動(dòng)脈硬化癥腦出血主動(dòng)脈瘤損傷動(dòng)脈壁的內(nèi)膜，嚴(yán)重時(shí)累及中膜是AS主要病理特征。常易受累39CM和VLDL經(jīng)LPL水解生成CM殘粒與IDL，并轉(zhuǎn)變成富含膽固醇酯和ApoE的顆粒沉積于血管壁。Ⅲ型高脂血癥出現(xiàn)β-VLDL，因?yàn)楦闻K的殘粒(ApoE)受體結(jié)合率降低，血中滯留的脂蛋白轉(zhuǎn)變成β-VLDL，經(jīng)清道夫受體介導(dǎo)攝取進(jìn)入巨噬細(xì)胞引起AS的增強(qiáng)作用。(二)、引起AS的脂蛋白脂蛋白殘粒CM和VLDL經(jīng)LPL水解生成CM殘粒與IDL，并轉(zhuǎn)變成富40變性LDL

LDL的蛋白組分經(jīng)化學(xué)修飾，立體構(gòu)像發(fā)生改變，生物學(xué)活性也有相應(yīng)的變化，這種經(jīng)化學(xué)修飾的LDL稱為變性LDL或修飾,目前發(fā)現(xiàn)的變性LDL包括:

乙酰LDL、氧化LDL、糖化LDL

其中乙酰LDL中的ApoB100賴氨酸殘基被乙酰化產(chǎn)生修飾LDL，激活巨噬細(xì)胞，使巨噬細(xì)胞攝取乙酰L