實(shí)驗(yàn)二 血涂片制備 白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)課件

涂片技術(shù)是制備血液樣品最常用的技術(shù)。將血液樣品制成單層細(xì)胞的涂片標(biāo)本，染色后可對血液中各種細(xì)胞形態(tài)進(jìn)行形態(tài)觀察、細(xì)胞計(jì)數(shù)、細(xì)胞大小測量等工作。涂片技術(shù)是制備血液樣品最常用的技術(shù)。將血液1血涂片制備推片載玻片血液一張滿意的血涂片應(yīng)厚薄均勻頭體尾鮮明涂片干燥后用鉛筆在血涂片的頭部寫上姓名和編號李四B123血涂片制備推片載玻片血液一張滿意的血涂片應(yīng)厚薄均勻涂片干燥后2方法與步驟推片：擠出第二滴血置于載玻片的右側(cè)方法與步驟推片：擠出第二滴血置于載玻片的右側(cè)3再取另一張邊緣光滑的雙凹片，斜置于血滴的前緣，先向后稍移動(dòng)輕輕觸及血滴，使血液沿玻片端展開成線狀。再取另一張邊緣光滑的雙凹片，斜置于血滴的前緣，先向后稍移動(dòng)輕4實(shí)驗(yàn)二血涂片制備白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)課件530~45°兩玻片的角度以30-45°為宜，輕輕將雙凹片向前勻速推進(jìn)，即涂成血液薄膜。30~45°兩玻片的角度以30-45°為宜，輕輕將雙凹片向前6血涂片血涂片7不良血涂片實(shí)驗(yàn)二血涂片制備白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)課件8實(shí)驗(yàn)用品器材:醫(yī)用一次性采血針、酒精棉球、經(jīng)脫脂洗凈的載玻片、雙凹片（推片）。試劑:Wright’s（瑞氏）染液：Wright’s色素粉末0.1g，溶于60ml甲醇。實(shí)驗(yàn)用品器材:醫(yī)用一次性采血針、酒精棉球、經(jīng)脫脂洗凈的載9瑞氏染色原理

瑞氏粉是由伊紅和美藍(lán)混合后組成的一種中性鹽染料。伊紅是一種酸性染料，為伊紅鈉鹽，其有色部分為陰離子；美藍(lán)是一種堿性染料，為氯化美藍(lán)，有色基團(tuán)為陽離子。如以M+代表美藍(lán)，以E-代表伊紅。將適量的ME溶解在甲醇中，即成為瑞氏染液。瑞氏染色原理瑞氏粉是由伊紅和美藍(lán)混合后組成的一種中性10

甲醇的作用可使ME溶解，解離為M+和E－，這兩種有色離子可以選擇性地吸附血細(xì)胞內(nèi)的不同成分而著色。各種細(xì)胞及細(xì)胞的各種成分由于其化學(xué)性質(zhì)不同，對各種染料的親和力也不一樣，因此，在血片上可以見到不同的著色。細(xì)胞中堿性物質(zhì)與酸性染料伊紅結(jié)合染成紅色；細(xì)胞中的酸性物質(zhì)可與染液中的堿性染料美藍(lán)結(jié)合染成藍(lán)色；當(dāng)細(xì)胞含酸、堿性物質(zhì)各半時(shí)，它們既與酸性染料作用，又與堿性染料作用，染成淡紫紅色。

瑞氏染色原理甲醇的作用可使ME溶解，解離為M+和E－，這11血涂片染色勿沖洗再加瑞氏染色Ⅱ液5-8滴后將Ⅰ液和Ⅱ液充分混勻靜置10分鐘直接流水沖洗3-5分鐘（切勿先倒掉染液）涂片經(jīng)水洗干燥后用油鏡分類計(jì)數(shù)100個(gè)白細(xì)胞李四123涂片干燥后加瑞氏染色Ⅰ液5-8滴覆蓋整個(gè)血膜1分鐘血涂片染色勿沖洗再加瑞氏染色Ⅱ液5-8滴后將Ⅰ液和Ⅱ液充分混12染色濃染：待涂片在空氣中完全干燥后，滴加數(shù)滴Wright’s染液蓋滿血膜為止，染色3～5min。淡染：然后滴加等量緩沖液，使其與染液均勻混合，靜置10～15min。用流水沖去染液，吸水紙吸干，鏡檢。染色濃染：待涂片在空氣中完全干燥后，滴加數(shù)滴Wright’s13血涂片的觀察低倍鏡觀察1.染色情況(滿意、偏酸、偏堿）2.細(xì)胞分布情況油鏡下分類計(jì)數(shù)：體尾交界處。油鏡分類時(shí)應(yīng)按一定走向，不要重復(fù)計(jì)數(shù)。（共計(jì)數(shù)100個(gè)白細(xì)胞）李四123血涂片的觀察低倍鏡觀察李四12314體尾交界處理想?yún)^(qū)域

細(xì)胞重疊

細(xì)胞太稀理想?yún)^(qū)域體尾交界處理想?yún)^(qū)域細(xì)胞重疊15各類成熟白細(xì)胞的形態(tài)學(xué)：

中性粒細(xì)胞（Ne）：在瑞氏染色血涂片上呈圓形，直徑10～13μm，胞漿染粉紅色，核形一葉（桿狀核）至五葉不等，以三葉者多見，染成深紫紅色，胞漿中有許多細(xì)小均勻紫紅色顆粒。各類成熟白細(xì)胞的形態(tài)學(xué)：中性粒細(xì)胞（Ne）：在瑞氏染色血涂16嗜酸性粒細(xì)胞（Eo）：較中性粒細(xì)胞稍大，胞核多為兩葉，呈眼鏡、八字形，核染色質(zhì)粗糙染深紫紅色，胞漿內(nèi)充滿粗大均勻的嗜酸性顆粒，瑞氏染色時(shí)呈桔紅色，有折光性。嗜酸性粒細(xì)胞（Eo）：較中性粒細(xì)胞稍大，胞核多為兩葉，呈眼鏡17嗜堿性粒細(xì)胞（Ba）：胞漿中含有大小不等的嗜堿性顆粒，瑞氏染色時(shí)呈蘭黑色。于光學(xué)顯微鏡下常見胞漿中有小空泡，乃因嗜堿性顆粒易溶于水或因功能活動(dòng)而脫顆粒所致；核呈淡紫紅色?？床磺?，呈桿狀或分葉狀。嗜堿性粒細(xì)胞（Ba）：胞漿中含有大小不等的嗜堿性顆粒，瑞氏染18淋巴細(xì)胞（Ly）：胞體呈圓形，直徑介于6～15μm之間，在成人血涂片中以小淋巴細(xì)胞為多見，直徑6～9μm，核大呈深紫色致密而濃染，胞漿量極少；大淋巴細(xì)胞胞漿量較多，呈清澈的淡藍(lán)色，可見少量嗜苯胺藍(lán)顆粒，胞核圓或橢圓，常偏向細(xì)胞一側(cè)，染色較深。淋巴細(xì)胞（Ly）：胞體呈圓形，直徑介于6～15μm之間，在成19單核細(xì)胞（Mo）：在瑞氏染色涂片上為12～20μm，胞體圓形、橢圓形或不規(guī)則形；核形多種多樣，最重要的特點(diǎn)是染色質(zhì)較細(xì)致疏松，呈絲網(wǎng)狀或條縷狀，著色較淡胞漿較多，淡蘭色，含大量細(xì)小塵土樣顆粒。單核細(xì)胞（Mo）：在瑞氏染色涂片上為12～20μm，胞體圓形20中性粒細(xì)胞嗜酸性粒細(xì)胞淋巴細(xì)胞嗜堿性粒細(xì)胞（右）單核細(xì)胞血小板中性粒細(xì)胞嗜酸性粒細(xì)胞淋巴細(xì)胞嗜堿性粒細(xì)胞（右）單核細(xì)胞血小21使用時(shí)，直接刪除本頁！精品課件，你值得擁有！精品課件，你值得擁有！使用時(shí)，直接刪除本頁！精品課件，你值