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廢水菌落總數(shù)測定結(jié)果不確定度評(píng)估實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備1.1設(shè)備:恒溫培養(yǎng)箱、無菌吸管10ml(具0.1ml刻度)、微量移液器、無菌錐形瓶、無菌培養(yǎng)皿培養(yǎng)基及試劑:平板計(jì)數(shù)瓊脂、無菌生理鹽水因濃縮蘋果清汁中一般菌落不容易生長,故用廢水作為樣品檢測。檢測依據(jù)及步驟2.1依據(jù):GB4789.2—2010《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)菌落總數(shù)測定》2.2步驟:定量吸取廢水,制備成15份均勻的檢測樣品,每份樣品做兩個(gè)平行樣。檢樣—10倍系列稀釋/選擇2?3個(gè)適宜稀釋度的樣品勻液,用移液器各取1ml分別加入無菌培養(yǎng)皿內(nèi)每皿中加入15ml?20ml平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基,混勻36±1°C培養(yǎng)48±2h計(jì)數(shù)報(bào)告不確定度來源分析檢測步驟主要包括樣品的吸取、稀釋(移液器)、培養(yǎng)、計(jì)數(shù)、及結(jié)果修約等,由于結(jié)果發(fā)散性較大的特點(diǎn),在本次實(shí)驗(yàn)中,我們只對(duì)樣品吸取、重復(fù)測定結(jié)果的不確定度進(jìn)行量化分析。3.1樣品吸取過程中使用刻度吸管體積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度u(V)rel3.1.1吸管體積校準(zhǔn)引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度u(V)在吸取樣品的過程中均使用經(jīng)檢定合格的10ml刻度吸管,其允許誤差為土0.05ml,故10ml吸管體積校準(zhǔn)引起的不確定度按矩形分布(心7?。椋簎(V)= =0.029ml則樣品吸取過程中使用刻度吸管體積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度u(V)0.029u(V)= = =0.0029ml■ V103.2重復(fù)測定結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)不確定度菌落總數(shù)測定結(jié)果不確定度評(píng)定編號(hào)測定結(jié)果取lg值殘差平方和X1X2lgX1lgX2lgX1110010003.04143.00003.020700.000862150012003.17613.07923.127640.004703150017003.17613.23043.203270.001484180016003.25533.20413.229700.001315110014003.04143.14613.093760.00548690010002.95423.00002.977120.001057160016003.20413.20413.204120.000008120014003.07923.14613.112650.002249120010003.07923.00003.039590.0031310170016003.23043.20413.217280.0003511130012003.11393.07923.096560.0006012140013003.14613.11393.130040.0005213170018003.23043.25533.242860.0003114120015003.07923.17613.127640.0047015100012003.00003.07923.039590.00313求和0.029853.2.1對(duì)測定結(jié)果X「X2分別取對(duì)數(shù),得到lg人和lgX23.2.2每一個(gè)樣品的殘差(在重復(fù)性條件下得出n個(gè)觀測結(jié)果X與n次獨(dú)立觀測結(jié)果的算術(shù)k平均值X的差)平方和:f(gx—igx)ii=1式中:lgX.—每一個(gè)樣品測定結(jié)果的對(duì)數(shù)值;i
lgX—每一個(gè)樣品測定結(jié)果對(duì)數(shù)的平均值。3.2.3根據(jù)《JJF—1999測量不確定度評(píng)定》中4.3,計(jì)算15個(gè)樣品的合并標(biāo)準(zhǔn)偏差:=uGg=uGgX)式中:m—測定樣品總個(gè)數(shù),本次實(shí)驗(yàn)共15個(gè);n—對(duì)每個(gè)樣品的獨(dú)立測定次數(shù),本次實(shí)驗(yàn)每個(gè)樣品平行測定兩次。將殘差平方和、m、n的值代入上式得15個(gè)樣品的合并標(biāo)準(zhǔn)偏差:uGgX)uGgX)=S(lgX)==0.04461每個(gè)樣品測定兩次,則兩次重復(fù)測定平均值的標(biāo)準(zhǔn)不確定度為u俵L£n式中:n—重復(fù)測定次數(shù)ulgX)_ulgX)_0.04461==0.03154合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度U(X)=\;u u(gX)_*0.00292+0.031542_0.0317rel擴(kuò)展不確定度U根據(jù)置信區(qū)間p=95%,自由度v=14,由t分布表得k~2.13,則擴(kuò)展不確定度為:U=2.13X0.0317=0.0675以區(qū)間形式表示15組樣品所有結(jié)果的lg平均值為:lgX=3.1242,所以該樣品菌落總數(shù)的lg值為3.1242±0
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