臨床微生物室SOP

./WORD文檔可編輯臨床微生物室標(biāo)準(zhǔn)操作程序SOP臨床微生物室標(biāo)準(zhǔn)操作程序〔SOP目錄檢驗(yàn)科生物安全防范管理制度、紫外線消毒制度1微生物實(shí)驗(yàn)室安全工作制度、病原微生物保存制度2微生物實(shí)驗(yàn)室安全工作制度、病原微生物保存制度2微生物實(shí)驗(yàn)室消毒隔離措施制度、微生物實(shí)驗(yàn)室標(biāo)本采集運(yùn)輸制度3微生物實(shí)驗(yàn)廢棄物處理制度、尖銳器具安全使用制度3微生物實(shí)驗(yàn)室消毒隔離措施制度、微生物實(shí)驗(yàn)室標(biāo)本采集運(yùn)輸制度3微生物實(shí)驗(yàn)廢棄物處理制度、尖銳器具安全使用制度3工作人員保護(hù)制度、臨床微生物實(shí)驗(yàn)室消毒防護(hù)制度4微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理制度5微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理制度6室間質(zhì)量控制管理程序7室內(nèi)質(zhì)量控制管理程序8試劑制配質(zhì)檢操作程序11標(biāo)本采集標(biāo)準(zhǔn)操作程序14血液及骨髓標(biāo)本的采集標(biāo)準(zhǔn)操作程序18呼吸道標(biāo)本留取標(biāo)準(zhǔn)操作程序19尿液標(biāo)本留取標(biāo)準(zhǔn)操作程序20膿及創(chuàng)傷感染標(biāo)本留取標(biāo)準(zhǔn)操作程序21生殖道分泌物標(biāo)本采集標(biāo)準(zhǔn)操作程序22糞便標(biāo)本采集標(biāo)準(zhǔn)操作程序23穿刺液標(biāo)本留取標(biāo)準(zhǔn)操作程序24腦脊液、膽汁標(biāo)本采集標(biāo)準(zhǔn)操作程序25組織標(biāo)本的采集標(biāo)準(zhǔn)操作程序26靜脈導(dǎo)管標(biāo)本采集標(biāo)準(zhǔn)操作程序27眼耳及乳突分泌物標(biāo)本采集標(biāo)準(zhǔn)操作程序28樣本接收、核對、接種、培養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)操作程序29菌株的純化、鑒定、藥敏流程標(biāo)準(zhǔn)操作程序30苛養(yǎng)菌培養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)操作程序31常見標(biāo)本培養(yǎng)結(jié)果解釋標(biāo)準(zhǔn)操作程序32微生物鑒定及藥物敏感試驗(yàn)分析系統(tǒng)操作規(guī)程34KB法藥敏試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作程序42ESBL檢測標(biāo)準(zhǔn)操作程序43β-內(nèi)酰胺酶檢測標(biāo)準(zhǔn)操作程序44耐甲氧西林葡萄球菌紙片擴(kuò)散法篩選試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程45MRSA紙片擴(kuò)散法篩選試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程46革蘭染色標(biāo)準(zhǔn)操作程序47抗酸染色標(biāo)準(zhǔn)操作程序48解脲/人型支原體培養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)操作程序49沙眼衣原體抗原檢測標(biāo)準(zhǔn)操作程序50康泰真菌鑒定藥敏標(biāo)準(zhǔn)操作程序51觸酶試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作程序52氧化酶試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作程序53芽管試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作程序54臨床微生物實(shí)驗(yàn)室安全標(biāo)準(zhǔn)操作程序55微生物室試劑管理制度56微生物室試劑管理制度57分級報(bào)告程序57XX省XX市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科微生物實(shí)驗(yàn)室版本號：2.0文件標(biāo)題：檢驗(yàn)科生物安全防范管理制度文件狀態(tài)：受控文件編號：WSW-SOP-2.0修改日期：2013年1月30日文件種類：程序文件生效日期：2013年6月30日編制者：王騰勇批準(zhǔn)者：賀愛民審核者：賀愛民發(fā)放號：檢驗(yàn)科生物安全防范管理制度一、檢驗(yàn)科在醫(yī)院感染管理工作中應(yīng)履行的職責(zé)：負(fù)責(zé)醫(yī)院感染常規(guī)微生物監(jiān)測。開展醫(yī)院感染病原微生物的培養(yǎng)、分離鑒定、藥敏試驗(yàn)及特殊病原體的耐藥性監(jiān)測,定期總結(jié)、分析,向有關(guān)部門反饋,并向全院公布。發(fā)生醫(yī)院感染流行或爆發(fā)時(shí),承擔(dān)相關(guān)檢測工作。負(fù)責(zé)集中所有檢驗(yàn)后標(biāo)本、培養(yǎng)出的菌株、一次性用品用后的消毒處理。做好檢驗(yàn)科、輸血科實(shí)驗(yàn)室臺面、地面、空氣消毒。防止病人在檢驗(yàn)科交叉感染。二、檢驗(yàn)科在生物安全防范管理工作中應(yīng)達(dá)到以下要求：細(xì)菌室工作人員須穿工作服,戴工作帽,必要時(shí)穿隔離衣、戴口罩、手套。使用合格的一次性檢驗(yàn)用品,用后進(jìn)行無害化處理。格執(zhí)行無菌技術(shù)操作規(guī)程,靜脈采血須一人一針一墊一帶；微量采血應(yīng)做到一人一針一管一片；對病人操作前盡量保持手的清潔。無菌物品如棉簽、棉球、紗布及其容器應(yīng)在有效期內(nèi)使用,開啟后使用時(shí)間不得超過24小時(shí)。使用后的廢棄物品,應(yīng)及時(shí)進(jìn)行無害化處理,不得隨意丟棄。各種器具〔鉗子、消毒罐應(yīng)及時(shí)消毒、清洗；各種廢棄標(biāo)本應(yīng)分類處理〔焚燒、入污水池、消毒或滅菌。消毒后發(fā)放。檢驗(yàn)人員結(jié)束操作后應(yīng)及時(shí)洗手,有必要時(shí)用消毒浸泡。保持室內(nèi)清潔衛(wèi)生。每天對空氣、各種物體表面及地面進(jìn)行常規(guī)消毒。在進(jìn)行各種檢驗(yàn)時(shí),應(yīng)避免污染,在進(jìn)行特殊傳染病檢驗(yàn)后,應(yīng)及時(shí)進(jìn)行消毒,遇有場地、工作服或體表污染時(shí),應(yīng)立即處理,防止擴(kuò)散,并視污染情況向上級報(bào)告。菌種、毒種按《病原微生物實(shí)驗(yàn)室安全管理?xiàng)l例》進(jìn)行管理。10.在操作有氣溶膠可能的標(biāo)本應(yīng)配置生物安全柜及其它防護(hù)設(shè)置,如紫外線XX省XX市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科微生物實(shí)驗(yàn)室版本號：2.0文件標(biāo)題：實(shí)驗(yàn)室安全管理制度文件狀態(tài)：受控文件編號：WSW-SOP-2.0修改日期：2013年1月30日文件種類：程序文件生效日期：2013年6月30日編制者：王騰勇批準(zhǔn)者：賀愛民審核者：賀愛民發(fā)放號：實(shí)驗(yàn)室安全管理制度[目的]保障個人安全,防止交叉感染。[適用范圍]臨床微生物實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)人員[該SOP變動程序]本標(biāo)準(zhǔn)操作程序的改動,可由任一使用本SOP的工作人員提出,并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：專業(yè)主管、科主任。[主要內(nèi)容]加強(qiáng)學(xué)習(xí),嚴(yán)格執(zhí)行安全制度,定期檢查。進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室要穿工作服,工作服要放在指定的地點(diǎn),并經(jīng)常洗滌；生活用品不能帶入實(shí)驗(yàn)室。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不能高聲談笑,不準(zhǔn)吸煙、飲食,不要用手指觸摸頭、面等部位以免造成污染。如傳染物污染手部,要立即用1%〔g/dl84高效消毒劑〔或500mg/L含氯消毒劑溶液浸泡,再用肥皂水和流水沖洗干凈。如傳染物污染桌面或地面應(yīng)立即用1%〔g/dl84高效消毒劑溶液〔或500mg/L含氯消毒劑溶液覆蓋其上,經(jīng)30分鐘方可抹去,如工作服被病原微生物污染,應(yīng)立即脫下,進(jìn)行高壓滅菌處理。實(shí)驗(yàn)室每天用紫外線進(jìn)行消毒空氣,作好記錄,并定期檢測；接種環(huán)〔針使用后應(yīng)立即在火焰燈上燒灼滅菌；沾有活菌的玻片、試管等玻璃制品應(yīng)立即放在鋼精鍋內(nèi)統(tǒng)一高壓滅菌；檢測剩余的標(biāo)本及接觸過微生物的平板、鑒定板〔條等塑料制品均用黃色塑料袋裝好,置黃色桶內(nèi),統(tǒng)一滅菌處理。各種電器設(shè)備,要有專人保管,并做好有關(guān)的記錄；易燃物品乙醇應(yīng)妥善保管,遠(yuǎn)離火源,若出現(xiàn)著火情況,應(yīng)立即用濕布將其覆蓋。易燃、易爆、劇毒化學(xué)物品要有專人保管,并有使用記錄；分離出甲類或乙類傳染病菌株,應(yīng)及時(shí)上報(bào)院感科,未經(jīng)上級同意不得帶出實(shí)驗(yàn)室,并由專人處理。工作結(jié)束后,用500mg/L含氯消毒劑溶液消毒工作臺面；工作人員雙手應(yīng)用肥皂、流水清洗三遍以上,關(guān)好窗戶、檢查好電源后,方可離開實(shí)驗(yàn)室。臨床微生物實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)人員應(yīng)定期健康體檢及必要的預(yù)防接種,以增強(qiáng)自身抵抗力。XX省XX市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科微生物實(shí)驗(yàn)室版本號：2.0文件標(biāo)題：微生物實(shí)驗(yàn)室試劑的管理制度文件狀態(tài)：受控文件編號：WSW-SOP-2.0修改日期：2013年1月30日文件種類：程序文件生效日期：2013年6月30日編制者：王騰勇批準(zhǔn)者：賀愛民審核者：賀愛民發(fā)放號：微生物實(shí)驗(yàn)室試劑管理制度1、目的規(guī)范微生物實(shí)驗(yàn)室試劑的管理程序,保證試驗(yàn)質(zhì)量。2、適用范圍微生物實(shí)驗(yàn)室的所有試劑。3、職責(zé)3.1檢驗(yàn)科主任負(fù)責(zé)審批微生物實(shí)驗(yàn)室試劑的申請.3.2微生物實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)對試劑評估、申購、驗(yàn)收等管理工作。3.3檢測人員負(fù)責(zé)試劑試驗(yàn)相關(guān)SOP的編寫。3.4檢測人員負(fù)責(zé)試劑的使用、質(zhì)量控制工作。4、程序4.1試劑4.1.1試劑的評估、申購、驗(yàn)收用于檢測標(biāo)本的試劑必須堅(jiān)持高質(zhì)量、高安全性的標(biāo)準(zhǔn),由實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人評估、訂購。每批試劑到貨后由實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人或其指定人員驗(yàn)收。驗(yàn)收內(nèi)容包括：試劑的數(shù)量、外觀、有效期及運(yùn)送條件。記錄驗(yàn)收結(jié)果,并在試劑外包裝上標(biāo)明接收時(shí)間及接收人員簽名,保存質(zhì)量保證書。有損壞或降解的試劑應(yīng)拒收。4.1.2試劑檔案訂購試劑應(yīng)建立試劑檔案,以監(jiān)控試劑供應(yīng)狀況,保證實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行。試劑檔案內(nèi)容包括：試劑名稱、批號、數(shù)量、生產(chǎn)商、接收日期、失效日期、儲存條件、試劑說明書、相關(guān)質(zhì)控文件及接收人員簽字等。4.1.3試劑標(biāo)識所有試劑須有標(biāo)識,并張貼于試劑醒目處。標(biāo)識內(nèi)容包括：試劑名稱、量、濃度、或滴度、儲存條件、配制日期、失效日期〔如果開瓶改變試劑有效期,必須重新登記。4.1.4試劑儲存所有試劑應(yīng)按產(chǎn)商要求儲存以防損壞、降解、污染。低溫保存的試劑須放置于冰箱內(nèi)。冰箱應(yīng)每天記錄溫度以監(jiān)控存放條件是否符合要求。注意安全存放,危害品應(yīng)分開放置,并有明顯標(biāo)識。4.1.5試劑使用使用前,工作人員應(yīng)確認(rèn)：試劑處于有效期內(nèi)、質(zhì)控合格、標(biāo)識明確、儲存條件正確、存放合理。出現(xiàn)與上述情況不符時(shí),應(yīng)立即通知實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人,并暫停使用。使用抗血清時(shí)應(yīng)注意效價(jià)、透明度與色澤,如有渾濁或沉淀表示已污染,應(yīng)立即停用。取用試劑應(yīng)按有效期先后取用,標(biāo)明開瓶日期、有效期、開瓶人簽名。當(dāng)試劑存放量接近警戒線時(shí),應(yīng)及時(shí)通知負(fù)責(zé)人訂購下一批試劑。4.1.6試劑質(zhì)量控制參見《室內(nèi)質(zhì)量控制管理程序》。4.2培養(yǎng)基4.2.1成品培養(yǎng)基4.2.1.1由實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)評估、訂購。4.2.1.2要求生產(chǎn)商提供培養(yǎng)基質(zhì)控資料,包括培養(yǎng)基名稱、成分、有效期、保存條件及無菌試驗(yàn)、生長試驗(yàn)、生化試驗(yàn)的合格證明等,質(zhì)控材料至少保留2年。4.2.1.3驗(yàn)收時(shí)應(yīng)注意培養(yǎng)基是否有標(biāo)識<包括培養(yǎng)基名稱、批號、生產(chǎn)日期、失效日期>,包裝是否完整,培養(yǎng)基是否破損、污染,外觀是否良好〔良好培養(yǎng)基應(yīng)該是表面平滑,水分,顏色、厚度適宜,無污染等。不符合要求時(shí)應(yīng)拒收。4.2.1.4驗(yàn)收后應(yīng)記錄培養(yǎng)基總數(shù)、批號、生產(chǎn)日期、失效日期及接收人員簽名。4.2.2自制培養(yǎng)基4.2.2.1應(yīng)嚴(yán)格遵守SOP配制,由勤雜人員高壓滅菌。高壓滅菌時(shí)須貼指示帶監(jiān)測滅菌效果。4.2.3培養(yǎng)基保存 4.2.3.1常規(guī)2-8℃保存4.2.3.2不常用的培養(yǎng)基應(yīng)用塑料袋包好儲存,避免脫水致某些指示劑或抑制劑濃度相對增加,而使病原菌不能生長或生長不良。4.2.4培養(yǎng)基質(zhì)量控制參見《室內(nèi)質(zhì)量控制管理程序》。4.3試劑警戒線微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)設(shè)置試劑警戒線,以防出現(xiàn)試劑短缺而導(dǎo)致試驗(yàn)無法完成。4.3.1設(shè)置試劑警戒線應(yīng)當(dāng)考慮到：試劑供貨周期的長短；試劑有效期長短；質(zhì)控試驗(yàn)需要的時(shí)間〔要保證新進(jìn)試劑一旦失控時(shí),實(shí)驗(yàn)室仍有足夠試劑保證試驗(yàn)的正常進(jìn)行。4.3.2每月月底清點(diǎn)試劑,清除過期試劑,預(yù)購下月需要使用的試劑。藥敏紙片：常見葡萄球菌藥敏紙片定為?！林Ъ埰瑫r(shí)預(yù)定下一批；常見腸桿菌科藥敏紙片定?！良埰瑫r(shí)預(yù)定下一批。鑒定卡：GNI+：定為?！梁袝r(shí)預(yù)定下一批；GPI：定為?！梁袝r(shí)預(yù)定下一批；GNS：定為?！梁袝r(shí)預(yù)定下一批；GPS：定為?！梁袝r(shí)預(yù)定下一批……血培養(yǎng)瓶：定為?！料鋾r(shí)預(yù)定下一批。培養(yǎng)基：每周準(zhǔn)備好下一周培養(yǎng)基的用量,保證實(shí)驗(yàn)室正常進(jìn)行。常規(guī)微量生化管：定為?！梁袝r(shí)預(yù)定下一批。XX省XX市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科微生物實(shí)驗(yàn)室版本號：2.0文件標(biāo)題：紫外線消毒制度文件狀態(tài)：受控文件編號：WSW-SOP-2.0修改日期：2013年1月30日文件種類：程序文件生效日期：2013年6月30日編制者：王騰勇批準(zhǔn)者：賀愛民審核者：賀愛民發(fā)放號：紫外線消毒制度微生物實(shí)驗(yàn)室每天工作結(jié)束后需對環(huán)境進(jìn)進(jìn)行紫外線消毒40分鐘以上,并做好記錄。紫外線燈管記錄使用時(shí)間,使用超過1000小時(shí)以上更換紫外線燈管,并記錄時(shí)間。紫外線燈管每月用無水酒精擦拭；每半年由院感科對紫外線燈管進(jìn)行紫外線強(qiáng)度〔消毒效果測試,并標(biāo)明測試。XX省XX市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科微生物實(shí)驗(yàn)室版本號：2.0文件標(biāo)題：微生物實(shí)驗(yàn)室安全工作制度文件狀態(tài)：受控文件編號：WSW-SOP-2.0修改日期：2013年1月30日文件種類：程序文件生效日期：2013年6月30日編制者：王騰勇批準(zhǔn)者：賀愛民審核者：賀愛民發(fā)放號：微生物實(shí)驗(yàn)室安全工作制度1.每日工作前用紫外線照射實(shí)驗(yàn)室40分鐘以上。

2.入室前應(yīng)穿工作服,并做好實(shí)驗(yàn)前的各項(xiàng)準(zhǔn)備工作。

3.實(shí)驗(yàn)室內(nèi)應(yīng)保持肅靜,不準(zhǔn)吸煙、吃東西及用手觸摸面部。盡量減少室內(nèi)活動,以免引起風(fēng)動,無關(guān)人員禁入。

4.非必要物品禁止帶入實(shí)驗(yàn)室,必要資料和書籍帶入后,應(yīng)遠(yuǎn)離操作臺。

5.做好標(biāo)本的登記、編號及試驗(yàn)記錄。未發(fā)出報(bào)告前,請勿丟棄標(biāo)本。

6.標(biāo)本處理及各項(xiàng)試驗(yàn)應(yīng)在操作間進(jìn)行,接種環(huán)用完后應(yīng)立即火焰滅菌,沾菌吸管、玻片等用后應(yīng)浸泡在消毒液內(nèi)。

7.實(shí)驗(yàn)時(shí)手部污染,應(yīng)立即用過氧乙酸消毒或浸于3%來蘇兒溶液中5-10分,再用肥皂洗手并沖洗干凈；如誤入口內(nèi),應(yīng)立即吐出,并用1:1000高錳酸鉀溶液或3%雙氧水漱口,根據(jù)實(shí)際情況服用有關(guān)藥物。

8.實(shí)驗(yàn)過程中,如污染了實(shí)驗(yàn)臺或地面,應(yīng)用3%來蘇兒覆蓋其上半小時(shí),然后清洗；如污染工作服,應(yīng)立即脫下,高壓滅菌。

9.若出現(xiàn)著火情況,應(yīng)沉著處理,切勿慌張,立即關(guān)閉電閘,積極滅火。易燃物品〔如酒精、二甲苯、乙醚和丙酮等必須遠(yuǎn)離火源,妥善保存。

10.工作結(jié)束時(shí)檢查電器、酒精燈等是否關(guān)閉,觀察記錄培養(yǎng)箱、冰箱溫度及工作情況,用浸有消毒液的抹布將操作臺擦拭干凈,并將試劑、用具等放回原處,清理臺面,未污染的廢棄物扔進(jìn)污物桶,有菌廢棄物應(yīng)送高壓滅菌后處理。

11.離室前工作人員應(yīng)將雙手用消毒液消毒,并用肥皂和清水洗凈。

12.愛護(hù)儀器設(shè)備,經(jīng)常清潔,注意防塵和防潮。

XX省XX市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科微生物實(shí)驗(yàn)室版本號：2.0文件標(biāo)題：病原微生物保存制度文件狀態(tài)：受控文件編號：WSW-SOP-2.0修改日期：2013年1月30日文件種類：程序文件生效日期：2013年6月30日編制者：王騰勇批準(zhǔn)者：賀愛民審核者：賀愛民發(fā)放號：病原微生物保存制度據(jù)《病原微生物安全條例》要求實(shí)驗(yàn)室不能保存高致性病原微生物菌〔毒種。一般藥敏實(shí)驗(yàn)用的標(biāo)準(zhǔn)菌ATCC25922、ATCC25923和ATCC27853,菌種保管應(yīng)有專人負(fù)責(zé),保存于冰箱中,確保菌種安全。保管人員變動時(shí),必須嚴(yán)格交接手續(xù)。菌種應(yīng)有嚴(yán)格的登記,包括形態(tài),分離日期,鑒定日期,簽發(fā)者,主要鑒定性能〔包括形態(tài)、染色、抗原結(jié)構(gòu)、動物致病力等,并注明使用、轉(zhuǎn)移、銷毀情況及原因。各種菌種應(yīng)按規(guī)定時(shí)間接種,一般在接種三次后作一次全面的鑒定,注意菌種有無污染及變異,如發(fā)現(xiàn)變異時(shí),應(yīng)及時(shí)更換。5.菌種保存范圍及向外單位轉(zhuǎn)移,應(yīng)按國家衛(wèi)生部規(guī)定執(zhí)行。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后的標(biāo)本、菌株等感染物必須消毒滅菌處理。并做好記錄。XX省XX市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科微生物實(shí)驗(yàn)室版本號：2.0文件標(biāo)題：微生物實(shí)驗(yàn)室消毒隔離措施制度文件狀態(tài)：受控文件編號：WSW-SOP-2.0修改日期：2013年1月30日文件種類：程序文件生效日期：2013年6月30日編制者：王騰勇批準(zhǔn)者：賀愛民審核者：賀愛民發(fā)放號：微生物實(shí)驗(yàn)室消毒隔離措施制度1.每天工作前用消毒液消毒工作臺,上班前、下班后開紫外燈〔40分鐘進(jìn)行空氣消毒。

2.非必要品禁止帶入實(shí)驗(yàn)室,必要資料和書籍帶入后,應(yīng)遠(yuǎn)離操作臺。

3.使用后的載玻片、蓋片、平皿、試管等用1000g/L含氯消毒劑浸泡消毒液浸泡,經(jīng)煮沸后清洗或丟棄。

4.試驗(yàn)后的血液標(biāo)本用消毒液浸泡后煮沸消毒,所有用于試驗(yàn)的反應(yīng)板、吸頭等用1000g/L含氯消毒劑浸泡消毒液浸泡〔至少24小時(shí)以上后清洗或丟棄。

5.所有微生物培養(yǎng)物〔細(xì)菌、支原體、真菌等培養(yǎng)物,不管標(biāo)本陽性或陰性均用1000g/L含氯消毒劑浸泡消毒液浸泡后,經(jīng)煮沸消毒,才能清洗或丟棄。

6.取材、最好采用一次性工具,不能采用一次性工具者,每次取材前均應(yīng)徹底消毒。

7.用于浸泡各種器械如刮菌刀、持物鉗、鑷子等的消毒液要定期更換。

8.不慎發(fā)生臨床標(biāo)本或培養(yǎng)物污染工作臺,不要立即用水沖洗,應(yīng)先用紙巾、布等敷料加上消毒液500g/L含氯消毒劑浸泡消毒30分鐘以上,然后再清洗。如污染工作服,應(yīng)立即脫下,高壓滅菌。

9.實(shí)驗(yàn)時(shí)手部污染,應(yīng)立即用肥皂洗手并沖洗干凈,再外用消毒藥水,如誤入口內(nèi),應(yīng)立即吐出,并用1:1000高錳酸鉀溶液或3%雙氧水漱口,必要時(shí)根據(jù)實(shí)際情況服用有關(guān)藥物。XX省XX市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科微生物實(shí)驗(yàn)室版本號：2.0文件標(biāo)題：微生物實(shí)驗(yàn)室標(biāo)本采集運(yùn)輸制度文件狀態(tài)：受控文件編號：WSW-SOP-2.0修改日期：2013年1月30日文件種類：程序文件生效日期：2013年6月30日編制者：王騰勇批準(zhǔn)者：賀愛民審核者：賀愛民發(fā)放號：微生物實(shí)驗(yàn)室標(biāo)本采集運(yùn)輸制度病原微生物的培養(yǎng)必須到微生物實(shí)驗(yàn)室領(lǐng)取無菌器皿、血培養(yǎng)增菌液瓶等留取標(biāo)本。病原微生物的培養(yǎng)標(biāo)本必須在2小時(shí)內(nèi)由輸送中心送檢并立即按種。特殊標(biāo)本〔如腦脊液、前列腺液、白帶等應(yīng)立即送檢并接種。實(shí)驗(yàn)室標(biāo)本姓名、編號或者標(biāo)本采集不符合要求時(shí)要退回重留標(biāo)本。XX省XX市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科微生物實(shí)驗(yàn)室版本號：2.0文件標(biāo)題：微生物實(shí)驗(yàn)廢棄物處理制度文件狀態(tài)：受控文件編號：WSW-SOP-2.0修改日期：2013年1月30日文件種類：程序文件生效日期：2013年6月30日編制者：王騰勇批準(zhǔn)者：賀愛民審核者：賀愛民發(fā)放號：微生物實(shí)驗(yàn)廢棄物處理制度微生物實(shí)驗(yàn)室的標(biāo)本、玻片等大多有病原微生物必須進(jìn)行滅菌處理后丟棄。微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)過的平板、菌株等必須滅毒〔高壓后才可廢棄。XX省XX市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科微生物實(shí)驗(yàn)室版本號：2.0文件標(biāo)題：尖銳器具安全使用制度文件狀態(tài)：受控文件編號：WSW-SOP-2.0修改日期：2013年1月30日文件種類：程序文件生效日期：2013年6月30日編制者：王騰勇批準(zhǔn)者：賀愛民審核者：賀愛民發(fā)放號：尖銳器具安全使用制度除特殊情況下,禁止在實(shí)驗(yàn)室使用針、注射器及其它利器,盡可能使用塑料器材代替玻璃器材。盡可能應(yīng)用一次性注射器,用過的針頭,禁止折彎、剪斷、重新蓋帽、從注射器取下,禁止用手直接操作,用過的針頭必須直接放入防穿透的容器盒中。非一次性的利器放入厚壁容器中并運(yùn)送特定區(qū)域消毒,最好高壓消毒。盡可能使用無針注射器和其它安全裝置。禁止用手處理破損的玻璃器具,裝有污染的針、利器及破損玻璃的容器在丟棄前必須滅菌。XX省XX市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科微生物實(shí)驗(yàn)室版本號：2.0文件標(biāo)題：工作人員保護(hù)制度文件狀態(tài)：受控文件編號：WSW-SOP-2.0修改日期：2013年1月30日文件種類：程序文件生效日期：2013年6月30日編制者：王騰勇批準(zhǔn)者：賀愛民審核者：賀愛民發(fā)放號：工作人員保護(hù)制度工作人員須穿工作服,戴工作帽,必要時(shí)穿隔離衣、戴口罩、手套。工作人員在工作過程中發(fā)生皮膚破損、化學(xué)試劑燒傷皮膚、眼睛或者病原微生物的感染等必須有做相應(yīng)的處理,上報(bào)醫(yī)務(wù)科,并做記錄。XX省XX市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科微生物實(shí)驗(yàn)室版本號：2.0文件標(biāo)題：臨床微生物實(shí)驗(yàn)室消毒防護(hù)制度文件狀態(tài)：受控文件編號：WSW-SOP-2.0修改日期：2013年1月30日文件種類：程序文件生效日期：2013年6月30日編制者：王騰勇批準(zhǔn)者：賀愛民審核者：賀愛民發(fā)放號：臨床微生物實(shí)驗(yàn)室消毒防護(hù)制度加強(qiáng)學(xué)習(xí),嚴(yán)格執(zhí)行生物安全制度,定期檢查。進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室要穿工作服,工作服要放在指定的地點(diǎn),并經(jīng)常洗滌；生活用品不能帶入實(shí)驗(yàn)室。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不能高聲談笑,不準(zhǔn)吸煙、飲食,不要用手指觸摸頭、面等部位以免造成污染。如傳染物污染手部,要立即用500g/L含氯消毒劑浸泡,再用肥皂水和流水沖洗干凈。感染物污染桌面或地面應(yīng)立即用500g/L含氯消毒劑消毒劑溶液覆蓋其上,經(jīng)30分鐘方可抹去,如工作服被病原微生物污染,應(yīng)立即脫下,進(jìn)行高壓滅菌處理。實(shí)驗(yàn)室每天用紫外線進(jìn)行消毒空氣,作好記錄,并定期檢測；接種環(huán)〔針使用后應(yīng)立即在火焰燈上燒灼滅菌；沾有活菌的玻片、試管等玻璃制品應(yīng)立即消毒滅菌；檢測剩余的標(biāo)本及接觸過微生物的平板、鑒定板〔條等塑料制品均用塑料袋裝好,置黃色桶內(nèi),統(tǒng)一滅菌處理。培養(yǎng)過的平板、菌株或有感染性標(biāo)本必須滅毒〔高壓后才可廢棄。儀器、電器設(shè)備,要有專人保管,并做好有關(guān)的記錄；易燃物品乙醇應(yīng)妥善保管,遠(yuǎn)離火源,若出現(xiàn)著火情況,應(yīng)立即用濕布將其覆蓋。易燃、易爆、劇毒化學(xué)物品要有專人保管。分離出甲類或乙類傳染病菌株,應(yīng)及時(shí)上報(bào)院感科,未經(jīng)上級同意不得帶出實(shí)驗(yàn)室,并由專人處理。10.工作結(jié)束后,用500g/L含氯消毒劑溶液消毒工作臺面；工作人員雙手應(yīng)用肥皂、流水清洗三遍以上,關(guān)好窗戶、檢查好電源后,方可離開實(shí)驗(yàn)室。11.臨床微生物實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)人員應(yīng)定期健康體檢及必要的預(yù)防接種,以增強(qiáng)自身抵抗力。XX省XX市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科微生物實(shí)驗(yàn)室版本號：2.0文件標(biāo)題：微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理制度文件狀態(tài)：受控文件編號：WSW-SOP-2.0修改日期：2013年1月30日文件種類：程序文件生效日期：2013年6月30日編制者：王騰勇批準(zhǔn)者：賀愛民審核者：賀愛民發(fā)放號：微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理制度目的規(guī)范質(zhì)量管理程序,保證檢驗(yàn)的質(zhì)量。范圍適用于微生物實(shí)驗(yàn)室的各個檢驗(yàn)項(xiàng)目。職責(zé)3.1微生物實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)制定微生物檢驗(yàn)質(zhì)量管理程序,并監(jiān)督質(zhì)量管理程序的實(shí)施。3.2檢驗(yàn)人員執(zhí)行質(zhì)量管理程序。4、程序4.1質(zhì)量管理內(nèi)容包括人員、操作規(guī)程、申請單、報(bào)告和記錄、標(biāo)本、儀器、培養(yǎng)基、試劑、檢驗(yàn)方法、質(zhì)量控制等。4.2人員包括學(xué)歷、職稱等要求,員工的培訓(xùn)和工作能力評估。4.3操作規(guī)程4.3.1規(guī)定檢驗(yàn)申請、標(biāo)本采集開始到發(fā)出檢測結(jié)果報(bào)告為止的全過程的操作規(guī)程和管理程序。4.3.2培訓(xùn)員工熟悉和掌握操作規(guī)程的管理程序。4.4申請單申請單應(yīng)包含：病人信息、申請醫(yī)生姓名或工號、申請科室、申請項(xiàng)目、標(biāo)本種類、標(biāo)本采集和接收時(shí)間,必要時(shí)應(yīng)標(biāo)明臨床診斷、采樣部位、抗菌藥物的應(yīng)用情況、預(yù)期微生物的種類等。參見《微生物檢測項(xiàng)目申請程序》。4.5記錄和報(bào)告4.5.1記錄檢驗(yàn)全過程必要的信息,如標(biāo)本接收、細(xì)菌鑒定流程表、檢驗(yàn)結(jié)果審核等。參見《記錄管理程序》。4.5.2結(jié)果報(bào)告應(yīng)包括檢驗(yàn)結(jié)果、結(jié)果解釋等。參見《結(jié)果報(bào)告程序》。4.6對標(biāo)本質(zhì)量進(jìn)行評估。參見《標(biāo)本接收、標(biāo)識程序》、《樣本拒收程序》。4.7儀器質(zhì)量管理4.7.1儀器在安裝時(shí)及常規(guī)使用中應(yīng)滿足檢驗(yàn)所需的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),并具有達(dá)標(biāo)的證明文件。4.7.2每件儀器具有唯一性標(biāo)識。4.7.3要求保留每件儀器影響檢驗(yàn)性能的相關(guān)記錄。4.7.4要求制定儀器的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。經(jīng)培訓(xùn)考核通過并經(jīng)實(shí)驗(yàn)室授權(quán)的工作人員方可操作儀器。操作者應(yīng)可以方便取閱儀器標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程以及儀器維護(hù)信息。4.7.5按制造商的要求檢測并記錄儀器的運(yùn)行情況,定期進(jìn)行校準(zhǔn)。4.7.6要求制定定期維護(hù)、保養(yǎng)的計(jì)劃,維持儀器的安全工作狀態(tài)。4.7.7一旦發(fā)現(xiàn)儀器故障,應(yīng)停止使用,清楚標(biāo)記后妥善存放至其被修復(fù)。在儀器投入使用、修理或退役之前對其去污染。4.7.8如果儀器脫離實(shí)驗(yàn)室未被直接控制,或已被修理、維護(hù)過,該儀器在實(shí)驗(yàn)室重新使用之前,應(yīng)經(jīng)校準(zhǔn)、驗(yàn)證或檢測表明其達(dá)到規(guī)定的可接受標(biāo)準(zhǔn)后方可再使用。詳情參見《儀器管理程序》。4.8試劑的質(zhì)量管理4.8.1嚴(yán)格監(jiān)督自配培養(yǎng)基的質(zhì)量并做好記錄。4.8.2商品化培養(yǎng)基應(yīng)嚴(yán)格驗(yàn)收,并保存質(zhì)控合格證明文件。4.8.3所有試劑〔包括染液和抗血清應(yīng)有標(biāo)簽,用陰、陽對照質(zhì)控,合理保存,在有效期內(nèi)使用并做好記錄。參見《試劑管理程序》。4.9樣本的質(zhì)量控制,參見《樣本采集、運(yùn)送程序》。4.10檢驗(yàn)過程的質(zhì)量控制4.10.1細(xì)菌分離和鑒定根據(jù)檢驗(yàn)?zāi)康倪x擇培養(yǎng)基,選擇病原菌進(jìn)行鑒定。4.10.2藥物敏感試驗(yàn)根據(jù)分離菌種的生物學(xué)特性和感染部位,選擇恰當(dāng)?shù)乃幬镞M(jìn)行藥物敏感性試驗(yàn)〔參見《室內(nèi)質(zhì)量控制管理程序》。XX省XX市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科微生物實(shí)驗(yàn)室版本號：2.0文件標(biāo)題：室間質(zhì)量控制管理程序文件狀態(tài)：受控文件編號：WSW-SOP-2.0修改日期：2013年1月30日文件種類：程序文件生效日期：2013年6月30日編制者：王騰勇批準(zhǔn)者：賀愛民審核者：賀愛民發(fā)放號：室間質(zhì)量控制管理程序1.目的 規(guī)范室間質(zhì)量控制管理程序,確保檢驗(yàn)質(zhì)量。2.適用范圍省臨床檢驗(yàn)中心組織的微生物室間質(zhì)控。職責(zé)微生物檢驗(yàn)人員均須熟知并遵守本程序。4．程序4.1微生物室所開設(shè)的檢測項(xiàng)目應(yīng)參加實(shí)驗(yàn)室間比對計(jì)劃。實(shí)驗(yàn)室間比對計(jì)劃的項(xiàng)目,應(yīng)至少每6個月進(jìn)行一次性能評估,方法包括：與參考實(shí)驗(yàn)室或其他實(shí)驗(yàn)室分割標(biāo)本檢測；與本實(shí)驗(yàn)室建立的方法分割標(biāo)本檢測；分析純物質(zhì)、地方數(shù)據(jù)庫或臨床證實(shí)資料；其他適宜的和規(guī)定的方法。4.2質(zhì)控標(biāo)本的接收和驗(yàn)收收到質(zhì)控物后由相關(guān)人員登記、簽字,根據(jù)質(zhì)控標(biāo)本的有關(guān)說明對質(zhì)控物的數(shù)量、批號、包裝進(jìn)行驗(yàn)收并將質(zhì)控標(biāo)本按要求保存。4.3室間質(zhì)控樣本必須按實(shí)驗(yàn)室常規(guī)工作進(jìn)行,由進(jìn)行常規(guī)工作的檢驗(yàn)人員測試,必須使用實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)檢測方法和試劑,不得特殊對待。檢測結(jié)果須在截止日期前上報(bào)。4.4室間質(zhì)控的檢測結(jié)果和反饋結(jié)果均記錄于室間質(zhì)控記錄表,根據(jù)反饋結(jié)果分析室間質(zhì)控的狀態(tài),如有不合格結(jié)果應(yīng)先向負(fù)責(zé)人和主任報(bào)告,然后查找原因,撰寫錯誤評估報(bào)告,制定糾正措施并培訓(xùn)員工,避免常規(guī)工作和質(zhì)控再次發(fā)生同樣錯誤。4.5結(jié)果上報(bào)截止日期之前嚴(yán)禁與其他實(shí)驗(yàn)室交流室間質(zhì)控的檢測結(jié)果。4.6結(jié)果上報(bào)截止日期之前嚴(yán)禁將質(zhì)控標(biāo)本送至其他單位代做。XX省XX市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科微生物實(shí)驗(yàn)室版本號：2.0文件標(biāo)題：室內(nèi)質(zhì)量控制管理程序文件狀態(tài)：受控文件編號：WSW-SOP-2.0修改日期：2013年1月30日文件種類：程序文件生效日期：2013年6月30日編制者：王騰勇批準(zhǔn)者：賀愛民審核者：賀愛民發(fā)放號：室內(nèi)質(zhì)量控制管理程序目的規(guī)范微生物實(shí)驗(yàn)室管理程序,確保臨床報(bào)告的質(zhì)量。適用范圍微生物實(shí)驗(yàn)室的所有檢驗(yàn)項(xiàng)目。職責(zé)實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)人員均須熟知并遵守本程序。程序4.1分析前質(zhì)量管理4.1.1檢驗(yàn)申請單臨床醫(yī)生應(yīng)按照〈〈微生物檢測項(xiàng)目申請程序〉〉申請臨床微生物檢測?？陬^申請追加樣本檢驗(yàn)項(xiàng)目,必須在樣本有效期內(nèi)申請,并補(bǔ)正式的檢驗(yàn)申請單。4.1.2生成微生物檢驗(yàn)標(biāo)本標(biāo)簽護(hù)士應(yīng)在核對醫(yī)囑、病人信息和檢驗(yàn)申請信息后,按照〈〈微生物標(biāo)本檢驗(yàn)標(biāo)簽程序〉〉生成申請單和微生物檢驗(yàn)項(xiàng)目標(biāo)簽,并將微生物檢驗(yàn)項(xiàng)目標(biāo)簽正確張貼于標(biāo)本容器上。4.1.3樣本的采集手冊實(shí)驗(yàn)室應(yīng)制定樣本采集手冊,指導(dǎo)正確采集和處理樣本。4.1.4樣本采集和運(yùn)輸樣本采集人員應(yīng)按照〈〈采集前病人識別程序〉〉確認(rèn)病人,按照〈〈標(biāo)本采集、運(yùn)送程序〉〉采集樣本,并在規(guī)定的時(shí)間和溫度范圍內(nèi),使用指定的運(yùn)輸培養(yǎng)基,安全運(yùn)送到微生物室。4.1.5樣本的接收樣本接收人員應(yīng)嚴(yán)格按照〈〈標(biāo)本接收、標(biāo)識程序〉〉、〈〈標(biāo)本拒收程序〉〉對樣本接收或拒收,并記錄。4.1.6微生物檢驗(yàn)標(biāo)本信息輸入微生物實(shí)驗(yàn)室接種崗位檢驗(yàn)人員嚴(yán)格按照〈〈微生物標(biāo)本檢驗(yàn)信息輸入程序〉〉錄入、核對病人信息和標(biāo)本信息等資料。4.1.7樣本儲存微生物實(shí)驗(yàn)室接種崗位檢驗(yàn)人員按照〈〈微生物標(biāo)本檢驗(yàn)前儲存程序〉〉正確儲存未能及時(shí)處理的標(biāo)本。已經(jīng)檢驗(yàn)的樣本應(yīng)在保證其性能穩(wěn)定的條件下,將樣本以適當(dāng)?shù)姆绞奖Ａ舻揭?guī)定時(shí)間內(nèi),以便能在出具結(jié)果報(bào)告后可以復(fù)查,或做補(bǔ)充檢驗(yàn)。4.2分析中質(zhì)量管理4.2.1試劑的質(zhì)量控制4.2.1.1所有試劑用于檢測標(biāo)本前,必須做質(zhì)控以評估質(zhì)量并記錄質(zhì)控結(jié)果,只有質(zhì)控合格才可使用。下列試劑每進(jìn)一批新批號或貨號要求用陰性、陽性標(biāo)準(zhǔn)菌株評估其質(zhì)量〔表2-1。觸酶、氧化酶、凝固酶、β-內(nèi)酰胺酶、Optochin；VITEK-32細(xì)菌鑒定系統(tǒng)使用的每一種鑒定卡及相關(guān)試劑；表2-1常用試驗(yàn)試劑質(zhì)量控制試劑陽性對照陰性對照監(jiān)測頻率氧化酶銅綠假單胞菌ATCC27853大腸埃希菌ATCC25922每次新配制時(shí)及使用中每個工作日觸酶金黃色葡萄球菌ATCC25923A群鏈球菌ATCC19615每次新配制時(shí)及使用中每個工作日靛基質(zhì)大腸埃希菌ATCC25922肺炎克雷伯菌ATCC138831%蛋白胨水及靛基質(zhì)試劑：每次新配制時(shí)及使用中每個工作日直接用于檢測病人標(biāo)本有內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)的抗原試驗(yàn)如：金黃色葡萄球菌乳膠凝集試劑〔每天或每次做質(zhì)控；抗血清〔至少每半年用陰、陽性質(zhì)控菌株做質(zhì)控；革蘭染液〔每周一次用陰、陽性質(zhì)控片做質(zhì)控；抗酸染液〔每次使用要求用陰、陽性質(zhì)控片做質(zhì)控；自制試劑〔每配制一批新試劑做質(zhì)控；4.2.1.2平行試驗(yàn)新批號試劑使用前須用老試劑或參考材料平行試驗(yàn)。4.2.1.3無廠商特別說明時(shí),不同批號的試劑不可混用。4.2.1.4缺陷或失效試劑只能用于培訓(xùn)員工業(yè)務(wù)能力,否則報(bào)廢處理。培訓(xùn)試劑應(yīng)明顯標(biāo)記"僅供培訓(xùn)使用",并與檢驗(yàn)試劑分開放置。4.2.2培養(yǎng)基的質(zhì)量控制4.2.2.1購買的有質(zhì)量保證標(biāo)準(zhǔn)的培養(yǎng)基實(shí)驗(yàn)室應(yīng)保存制造商所遵循的質(zhì)量保證標(biāo)準(zhǔn),以及每批號產(chǎn)品完成無菌試驗(yàn)、生長試驗(yàn)、生化試驗(yàn)及質(zhì)量控制性能的合格證明等文件；無質(zhì)量保證標(biāo)準(zhǔn)的培養(yǎng)基,每批號和〔或每次購買的產(chǎn)品應(yīng)檢測相應(yīng)的性能,包括生長試驗(yàn)或與舊批號平行試驗(yàn)、生長抑制試驗(yàn)〔適用時(shí)、生化試驗(yàn)〔適用時(shí)等。每個批號和〔或每次購買時(shí),應(yīng)進(jìn)行外觀檢查并記錄。4.2.2.2自制培養(yǎng)基每批號產(chǎn)品應(yīng)檢測相應(yīng)的性能,包括無菌試驗(yàn)、生長試驗(yàn)或與舊批號平行試驗(yàn)、生長抑制試驗(yàn)〔適用時(shí)、生化試驗(yàn)〔適用時(shí)等。4.2.2.3外觀檢查合格培養(yǎng)基的標(biāo)準(zhǔn)：完整、瓊脂附于平板底部,血平板應(yīng)不透明、沒有溶血情況,平板顏色好、濕潤,無干裂、無污染、無渾濁或沉淀、無凍傷、無過熱現(xiàn)象,瓊脂厚度至少3mm。如發(fā)現(xiàn)與上述情況不符的培養(yǎng)基,應(yīng)不予使用。4.2.2.4無菌試驗(yàn)抽檢培養(yǎng)基數(shù)量：100塊以內(nèi),隨機(jī)抽檢5%；100塊以上可隨機(jī)取10塊平皿或10支試管培養(yǎng)基進(jìn)行無菌試驗(yàn)。35`C培養(yǎng)24小時(shí)后觀察是否有細(xì)菌生長,無細(xì)菌生長為合格。4.2.2.5生長試驗(yàn)及生化反應(yīng)試驗(yàn)質(zhì)控菌株〔表2-2,2-335`C培養(yǎng)24小時(shí),用無菌生理鹽水配置0.5麥?zhǔn)蠁挝坏募?xì)菌懸液。無菌生理鹽水1：100稀釋,每塊平板接種10ul〔濃度相當(dāng)于10~3-10~4CFU/平板。培養(yǎng)24-48小時(shí)。符合生長、生化試驗(yàn)質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)者方可使用。失控者必須記錄失控情況并有相應(yīng)的糾正措施。表2-2生化試驗(yàn)用培養(yǎng)基的質(zhì)控培養(yǎng)基質(zhì)控菌株鑒定標(biāo)準(zhǔn)克氏雙糖鐵培養(yǎng)基大腸埃希菌ATCC49247+/+奇異變形桿菌ATCC49005-/+,H2S+福氏志賀菌質(zhì)控菌株-/+銅綠假單胞菌ATCC27853-/-1%蛋白胨水〔靛基質(zhì)用大腸埃希菌ATCC25922+肺炎克雷伯菌ATCC13883-科瑪嘉念珠菌顯色平板光滑念珠菌ATCC90030紫色、光滑白念珠菌ATCC90028綠色熱帶念珠菌ATCC981083藍(lán)灰色克柔念珠菌質(zhì)控菌株粉紅色、表面毛糙…….表2-3培養(yǎng)基的生長試驗(yàn)質(zhì)控培養(yǎng)基質(zhì)控菌株鑒定標(biāo)準(zhǔn)巧克力平板流感嗜血桿菌ATCC49247生長情況好血平板金黃色葡萄球菌ATCC25923中度到大量生長A群鏈球菌ATCC19615生長,β溶血肺炎鏈球菌ATCC49619生長,α溶血大腸埃希菌ATCC25922生長中國藍(lán)培養(yǎng)基大腸埃希菌ATCC25922生長,藍(lán)色菌落奇異變形桿菌ATCC49005部分抑制鼠傷寒沙門菌ATCC14028無色菌落糞腸球菌ATCC29212不生長SS培養(yǎng)基大腸埃希菌ATCC25922部分或全部抑制福氏志賀菌質(zhì)控菌株生長,無色菌落鼠傷寒沙門菌ATCC14028生長,有黑色中心……XX省XX市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科微生物實(shí)驗(yàn)室版本號：2.0文件標(biāo)題：血培養(yǎng)分級報(bào)告制度文件狀態(tài)：受控文件編號：WSW-SOP-2.0修改日期：2013年1月30日文件種類：程序文件生效日期：2013年6月30日編制者：王騰勇批準(zhǔn)者：賀愛民審核者：賀愛民發(fā)放號：血培養(yǎng)分級報(bào)告制度1.目的規(guī)范分級報(bào)告程序,及時(shí)、分級地向臨床報(bào)告結(jié)果。2.范圍血液、骨髓標(biāo)本。3.職責(zé)由微生物實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)人員進(jìn)行分級報(bào)告。4.程序4.1一級報(bào)告陽性報(bào)警血培養(yǎng)瓶應(yīng)進(jìn)行涂片革蘭染色,將涂片結(jié)果電話〔或其他方式通知臨床。4.2二級報(bào)告報(bào)告直接藥敏試驗(yàn)結(jié)果。4.3三級報(bào)告報(bào)告細(xì)菌種屬、藥敏實(shí)驗(yàn)、結(jié)果評價(jià)和建議。XX省XX市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科微生物實(shí)驗(yàn)室版本號：2.0文件標(biāo)題：標(biāo)本處理標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件狀態(tài)：受控文件編號：WSW-SOP-2.0修改日期：2013年1月30日文件種類：程序文件生效日期：2013年6月30日編制者：王騰勇批準(zhǔn)者：賀愛民審核者：賀愛民發(fā)放號：標(biāo)本處理標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程目的規(guī)范標(biāo)本處理標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程,范圍臨床微生物標(biāo)本職責(zé)微生物檢驗(yàn)人員嚴(yán)格執(zhí)行本程序程序4.1血液標(biāo)本接收標(biāo)本后,立即對標(biāo)本進(jìn)行編號、登記。門診病人要同時(shí)登記住址、聯(lián)系電話等信息。將血培養(yǎng)瓶置于全自動血培養(yǎng)儀中培養(yǎng)。4.2痰標(biāo)本4.2.1接收編號、登記后的痰標(biāo)本,加入痰消化劑或無菌生理鹽水處理。4.2.2用無菌棉簽挑取標(biāo)本分別涂布于血瓊脂平板、巧克力瓊脂平板、中國藍(lán)平板的第一區(qū),然后用接種環(huán)劃第二、第三區(qū)...。4.23同時(shí)做痰涂片鏡檢4.3咽拭子標(biāo)本涂布于血瓊脂平板、巧克力瓊脂平板、麥康凱平板的第一區(qū),然后用接種環(huán)劃第二、第三區(qū)...。4.4腦脊液、胸腹水等穿刺液床邊抽取體液標(biāo)本1～2ml注入多功能體液培養(yǎng)瓶或需氧血培養(yǎng)瓶,即送實(shí)驗(yàn)室。接收標(biāo)本后,立即對標(biāo)本進(jìn)行編號、登記,置孵育箱培養(yǎng)。腦脊液標(biāo)本需涂片檢查。4.5糞便或肛拭標(biāo)本接收標(biāo)本后,立即對標(biāo)本進(jìn)行編號、登記,取糞便膿血部位標(biāo)本根據(jù)檢驗(yàn)申請單要求選擇平板,立即接種。4.6尿標(biāo)本接收標(biāo)本后,立即對標(biāo)本進(jìn)行編號、登記,將尿標(biāo)本混勻,用10μl定量接種環(huán)立即接種血瓊脂平板、中國藍(lán)平板,分離細(xì)菌和菌落計(jì)數(shù)。參考文獻(xiàn)1周庭銀編著,臨床微生物學(xué)診斷與圖解〔第二版.上海科學(xué)技術(shù)出版社,20072葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程.第3版.XX：東南大學(xué)出版社,2006XX省XX市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科微生物實(shí)驗(yàn)室版本號：2.0文件標(biāo)題：標(biāo)本接種標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件狀態(tài)：受控文件編號：WSW-SOP-2.0修改日期：2013年1月30日文件種類：程序文件生效日期：2013年6月30日編制者：王騰勇批準(zhǔn)者：賀愛民審核者：賀愛民發(fā)放號：標(biāo)本接種標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程目的規(guī)范標(biāo)本接種標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程,確保檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可靠。范圍微生物室所有標(biāo)本的接種。職責(zé)微生物檢驗(yàn)人員嚴(yán)格執(zhí)行本程序。程序4.1分區(qū)劃線法此法多用于糞便等含菌量較多的標(biāo)本。用接種環(huán)先將標(biāo)本涂布在平板第一區(qū)并作數(shù)次劃線,再在二、三……區(qū)依次用接種環(huán)劃線。每劃一個區(qū)域,應(yīng)將接種環(huán)燒灼一次,待冷卻后再劃下一區(qū)域。每一區(qū)域的劃線應(yīng)接觸上一區(qū)域的接種線2～3次,使菌量逐漸減少,以形成單個菌落。4.2傾注平板法本法用于尿液等標(biāo)本的細(xì)菌計(jì)數(shù)。將滅菌生理鹽水適量稀釋〔通常作10－1～10－5稀釋的標(biāo)本1ml,置于滅菌平皿內(nèi),注入已熔化并冷卻至50℃左右的培養(yǎng)基15ml,混勻,待冷卻后,倒置。4.3斜面接種法此法主要用于鑒定或保存菌種,或觀察細(xì)菌的某些生化特性和動力。用左手握住菌種管和斜面培養(yǎng)管底部,右手持接種針〔環(huán)。用右手小指與手掌、小指與無名指分別拔出兩管的棉塞,將管口通過火焰滅菌。用接種針〔環(huán)伸入菌種管內(nèi)挑取移種之菌落。伸入斜面培養(yǎng)管內(nèi),先從斜面底部到頂端拖一條接種線,再自下而上地蜿蜒劃線,或直接自下而上地蜿蜒劃線。將接種針垂直插入半固體培養(yǎng)基的中央,穿刺至培養(yǎng)基底部,然后沿原穿刺線退出接種針。4.4穿刺培養(yǎng)法此法用于保存菌種,觀察動力及某些生化反應(yīng)。以接種針挑取細(xì)菌培養(yǎng)物,插入半固體培養(yǎng)基的中央,穿刺至培養(yǎng)基底部,然后沿原穿刺線退出接種針。4.5液體培養(yǎng)基接種法用滅菌接種環(huán)挑取菌落或標(biāo)本。在試管內(nèi)壁與液面交界處輕輕研磨,使細(xì)菌混勻在液體培養(yǎng)基中參考文獻(xiàn)1周庭銀編著,臨床微生物學(xué)診斷與圖解〔第二版.上?？茖W(xué)技術(shù)出版社,20072葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程.第3版.XX：東南大學(xué)出版社,2006XX省XX市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科微生物實(shí)驗(yàn)室版本號：2.0文件標(biāo)題：穿刺液標(biāo)本細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件狀態(tài)：受控文件編號：WSW-SOP-2.0修改日期：2013年1月30日文件種類：程序文件生效日期：2013年6月30日編制者：王騰勇批準(zhǔn)者：賀愛民審核者：賀愛民發(fā)放號：穿刺液標(biāo)本細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程目的規(guī)范穿刺液標(biāo)本細(xì)菌學(xué)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程,確保檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可靠。適用范圍穿刺液標(biāo)本培養(yǎng)。標(biāo)本3.1標(biāo)本類型胸水、腹水、心包液、關(guān)節(jié)液、鞘膜液等。3.2標(biāo)本采集采用無菌方法采集體內(nèi)可疑感染部位的液體約2ml,注入無菌試管,或抽取穿刺液1～2ml注入多功能體液培養(yǎng)瓶,或抽取穿刺液2～5ml注入血培養(yǎng)瓶,混勻,立即送檢。如懷疑厭氧菌感染,應(yīng)做床邊接種或接種運(yùn)送培養(yǎng)基。3.3標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn)3.3.1標(biāo)本標(biāo)識與化驗(yàn)申請單不符。3.3.2標(biāo)本不是無菌留取,容器不符合要求。3.4標(biāo)本保存采集標(biāo)本后立即送到實(shí)驗(yàn)室,不能及時(shí)送檢可置室溫,放置時(shí)間不應(yīng)超過2h。試劑、儀器4.1革蘭染液、氧化酶試劑、3%觸酶、血瓊脂平板、巧克力平板、麥康凱平板、相關(guān)生化試劑等。4.2全自動血培養(yǎng)系統(tǒng)、多功能體液培養(yǎng)瓶、VITEK鑒定系統(tǒng)。革蘭陰性菌鑒定卡<GNI+>、革蘭陰性細(xì)菌藥敏卡<GNS>、革蘭陽性菌鑒定卡<GPI>、革蘭陽性細(xì)菌藥敏卡<GPS>、真菌鑒定卡<YBC>、藥敏紙片、ATB板條等,有效期及儲存條件參見試劑說明書。4.3接種針、接種環(huán)、電熱灼燒器、顯微鏡、孵育箱、CO2培養(yǎng)箱等。細(xì)菌鑒定和藥敏質(zhì)控參見質(zhì)量管理。檢驗(yàn)步驟接收標(biāo)本后,立即對標(biāo)本進(jìn)行編號、登記。6.1涂片檢查膿性標(biāo)本直接涂片。漿液性標(biāo)本先離心〔3000r／min,15min,取沉淀物涂片作革蘭染色,觀察有無細(xì)菌,以及細(xì)菌的形態(tài)。6.2分離培養(yǎng)

6.2.1一般細(xì)菌培養(yǎng)接種血瓊脂平板、巧克力瓊脂平板和麥康凱瓊脂平板〔或EMB及中國藍(lán)瓊脂平板,5％～10％CO2條件下,35℃培養(yǎng)18～24h,根據(jù)菌落及染色形態(tài)特點(diǎn),作出初步判斷。6.2.2增菌-分離培養(yǎng)法將多功能體液培養(yǎng)瓶顛倒混勻使液體覆蓋整個固體面,然后置35℃孵育箱培養(yǎng)〔固體面在上,液體在下。次日觀察固體表面菌苔生長及瓶中液體是否混濁。如發(fā)現(xiàn)有菌生長,立即涂片鏡檢、生化鑒定和藥敏試驗(yàn)。此法可提高陽性檢出率。

6.2.3厭氧菌培養(yǎng)床邊接種或從厭氧運(yùn)送培養(yǎng)基轉(zhuǎn)種后,立即置厭氧環(huán)境中,35℃培養(yǎng)24～48h；挑取可疑菌落作耐氧試驗(yàn),確定為厭氧菌。

6.2.4結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)：參見《結(jié)核分枝桿菌檢驗(yàn)操作規(guī)程》。操作流程穿刺液〔胸水、腹水、心包液、關(guān)節(jié)液等穿刺液〔胸水、腹水、心包液、關(guān)節(jié)液等厭氧培養(yǎng)多功能體液培養(yǎng)瓶厭氧培養(yǎng)多功能體液培養(yǎng)瓶或血培養(yǎng)瓶離心離心厭氧血瓊脂平板35℃厭氧環(huán)境培養(yǎng)24～48h厭氧血瓊脂平板35℃厭氧環(huán)境培養(yǎng)24～48h有菌生長沉淀物涂片、染色培養(yǎng)2日或5日無細(xì)菌生長可發(fā)出報(bào)告有菌生長沉淀物涂片、染色培養(yǎng)2日或5日無細(xì)菌生長可發(fā)出報(bào)告涂片、染色涂片、染色耐氧試驗(yàn)?zāi)脱踉囼?yàn)儀器或手工細(xì)菌儀器或手工細(xì)菌鑒定及藥敏試驗(yàn)厭氧血平板生長厭氧血平板生長發(fā)出報(bào)告發(fā)出報(bào)告結(jié)果報(bào)告培養(yǎng)48h無細(xì)菌生長,報(bào)告"培養(yǎng)2日無細(xì)菌生長"。查見細(xì)菌,報(bào)告菌名和藥敏結(jié)果。注意事項(xiàng)9.1標(biāo)本的采集一定要嚴(yán)格履行無菌操作技術(shù),避免污染。9.2加入抗凝劑的標(biāo)本〔如胸腹水采集后要與抗凝劑充分混勻并及時(shí)送檢。9.3體液均需做厭氧培養(yǎng),故輸送過程嚴(yán)格厭氧環(huán)境。臨床意義各個部位穿刺液〔胸水、腹水、心包液、關(guān)節(jié)液及鞘膜液等的細(xì)菌學(xué)檢查對于確定該部位是否有細(xì)菌感染具有重要的診斷價(jià)值。正常穿刺液是無菌的,若從患者穿刺液中查見致病菌或條件致病菌則提示該部位有細(xì)菌感染。胸腔感染的病原菌以結(jié)核分枝桿菌多見,其次是金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌、大腸埃希菌和銅綠假單胞菌等；腹腔感染的病原菌以腸道細(xì)菌如大腸埃希菌、糞腸球菌,以及結(jié)核分枝桿菌多見；心包炎和關(guān)節(jié)腔液以金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌、大腸埃希菌和銅綠假單胞菌等多見。危急值報(bào)告涂片發(fā)現(xiàn)細(xì)菌或培養(yǎng)陽性均需要及時(shí)向臨床報(bào)告結(jié)果。參考文獻(xiàn)1CNAS-GL23《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則在臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域的應(yīng)用指南》,20082周庭銀編著.臨床微生物學(xué)診斷與圖解.第二版.上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社,20073葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜主編.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程.第3版.XX:東南大學(xué)出版社,20064MurrayPR.ManualofClinicalMicrobilogy.9thed.Washington:ASMPress,20075ISO15189:2007《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室-質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則》,2007XX省XX市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科微生物實(shí)驗(yàn)室版本號：2.0文件標(biāo)題：糞便標(biāo)本細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件狀態(tài)：受控文件編號：WSW-SOP-2.0修改日期：2013年1月30日文件種類：程序文件生效日期：2013年6月30日編制者：王騰勇批準(zhǔn)者：賀愛民審核者：賀愛民發(fā)放號：糞便標(biāo)本細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程目的規(guī)范糞便標(biāo)本細(xì)菌學(xué)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程,確保檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可靠。適用范圍糞便培養(yǎng)。標(biāo)本3.1標(biāo)本類型糞便,直腸拭子。3.2標(biāo)本采集3.2.1自然排便采集自然排便后,挑取其膿血、黏液部分2～3g,液體糞便取絮狀物2～3ml,盛于滅菌容器內(nèi),或置于保存液〔運(yùn)送培養(yǎng)基、增菌培養(yǎng)基中送檢。

3.2.2直腸拭子如不易獲得糞便時(shí),或排便困難患者及嬰兒,可用直腸拭子采取,即以無菌棉拭用保存液或生理鹽水濕潤后,插入肛門內(nèi)4～5cm<幼兒2～3cm>輕輕轉(zhuǎn)動取出,插入卡-布〔Cary-Blair運(yùn)送培養(yǎng)基內(nèi)或無菌容器內(nèi)送檢。3.2.3糞便標(biāo)本應(yīng)該立即送檢,室溫保存不能超過2h,如不能及時(shí)送檢可以放入磷酸鹽甘油〔PH7.0或轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基,但不能超過24h。培養(yǎng)艱難梭菌的標(biāo)本保存于-20℃以下。培養(yǎng)沙門菌和志賀菌的標(biāo)本應(yīng)放置磷酸鹽甘油溶液中保存。保存彎曲桿菌和弧菌的標(biāo)本,需加CaCl2<100mg/L>試劑。3.3標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn)3.3.1糞便標(biāo)本放置時(shí)間超過2h。3.3.2送檢的糞便標(biāo)本混有尿液。3.3.3直腸拭子未置于運(yùn)送培養(yǎng)基中。試劑、儀器4.1革蘭染液、氧化酶試劑、麥康凱平板、SS平板、TCBS平板及相關(guān)生化試劑等。4.2VITEK鑒定系統(tǒng)、革蘭陰性菌鑒定卡<GNI+>、革蘭陰性細(xì)菌藥敏卡<GNS>、革蘭陽性菌鑒定卡<GPI>、革蘭陽性細(xì)菌藥敏卡<GPS>、真菌鑒定卡<YBC>、藥敏紙片、ATB板條等,有效期及儲存條件參見試劑說明書。4.3接種針、接種環(huán)、電熱灼燒器、顯微鏡、孵育箱、CO2培養(yǎng)箱等。4.4診斷血清。細(xì)菌鑒定和藥敏質(zhì)控參見質(zhì)量管理。檢驗(yàn)步驟接收標(biāo)本后,立即對標(biāo)本進(jìn)行編號、登記。6.1涂片檢查糞便標(biāo)本因各種正常菌群含量甚多,僅以染色性和形態(tài)無法分辨是否為病原菌。因此,糞便標(biāo)本一般不作涂片檢查。只有懷疑霍亂弧菌及菌群失調(diào)所致腹瀉時(shí),才作直接涂片檢查〔觀察動力和菌群比例。6.2培養(yǎng)

6.2.1沙門-志賀菌培養(yǎng)參見《沙門菌屬檢驗(yàn)操作規(guī)程》、《志賀菌屬檢驗(yàn)操作規(guī)程》。6.2.2致病性大腸埃希菌培養(yǎng)參見《致病性大腸埃希菌檢驗(yàn)操作規(guī)程》?；魜y弧菌培養(yǎng)參見《霍亂弧菌檢驗(yàn)操作規(guī)程》。6.2.4副溶血弧菌培養(yǎng)參見《副溶血弧菌檢驗(yàn)操作規(guī)程》。6.2.5小腸結(jié)腸炎耶爾森菌培養(yǎng)參見《耶爾森菌屬檢驗(yàn)操作規(guī)程》。6.2.6空腸彎曲菌培養(yǎng)參見《彎曲菌屬檢驗(yàn)操作規(guī)程》。6.2.7金黃色葡萄球菌培養(yǎng)參見《葡萄球菌屬檢驗(yàn)操作規(guī)程》。6.2.8艱難梭菌培養(yǎng)取液狀糞便立即接種于環(huán)絲氨酸頭孢西丁果糖瓊脂〔簡稱CCFA平板上,并將糞便作102～106稀釋后定量接種。35℃厭氧環(huán)境下培養(yǎng)48h后,選擇粗糙型黃色菌落,移種于葡萄糖庖肉培養(yǎng)基作毒素測定；同時(shí)制涂片,懸滴檢查動力、革蘭染色及生化鑒定。

6.2.9真菌培養(yǎng)參見《結(jié)核分枝桿菌檢驗(yàn)操作規(guī)程》。6.2.10氣單胞菌和鄰單胞菌的培養(yǎng)參見《氣單胞菌屬檢驗(yàn)操作規(guī)程》和《鄰單胞菌屬檢驗(yàn)操作規(guī)程》。6.2.11結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)：參見《結(jié)核分枝桿菌檢驗(yàn)操作規(guī)程》。操作流程糞糞便或肛拭需氧培養(yǎng)根據(jù)臨床要求需氧培養(yǎng)根據(jù)臨床要求分離致病性大腸埃希菌O157SS、XLD或HE平板分離致病性大腸埃希菌O157SS、XLD或HE平板35℃培養(yǎng)18～24h麥康凱平板分離彎曲菌分離弧菌TCBS平板TCBS平板Campy-BA平板35℃Campy-BA平板35℃微需氧培養(yǎng)48h山梨醇麥康凱平板觀察菌落特征及涂片、染色觀察菌落特征及涂片、染色血清學(xué)鑒定儀器或手工細(xì)菌鑒定及藥敏試驗(yàn)發(fā)出報(bào)告雙糖鐵或三糖鐵試驗(yàn)觀察菌落特征及涂片、染色血清學(xué)鑒定儀器或手工細(xì)菌鑒定及藥敏試驗(yàn)發(fā)出報(bào)告雙糖鐵或三糖鐵試驗(yàn)觀察菌落特征觀察菌落特征及涂片、染色血清學(xué)鑒定發(fā)出報(bào)告儀器或手工細(xì)菌鑒定及藥敏試驗(yàn)發(fā)出報(bào)告儀器或手工細(xì)菌鑒定及藥敏試驗(yàn)血清學(xué)鑒定發(fā)出報(bào)告儀器或手工細(xì)菌鑒定及藥敏試驗(yàn)發(fā)出報(bào)告儀器或手工細(xì)菌鑒定及藥敏試驗(yàn)結(jié)果報(bào)告查出腸道致病菌,報(bào)告其菌名和藥敏結(jié)果。

注意事項(xiàng)9.1空腸彎曲菌是微需氧菌,初次分離時(shí)需5%～10%CO2和85%氮。9.2痢疾患者要采集大量膿血標(biāo)本另行培養(yǎng)。9.3糞便標(biāo)本有很多雜菌,但不能由此認(rèn)為糞便標(biāo)本的采集就無需注意雜菌污染,為防止污染必須注意標(biāo)本的采集方法。臨床意義正常情況下腸道中有多種細(xì)菌寄生,包括大量的厭氧菌、腸球菌、大腸埃希菌、腸桿菌、變形桿菌、糞產(chǎn)堿桿菌等。引起感染性腹瀉的病原微生物有：①細(xì)菌性：產(chǎn)毒素型腹瀉,包括霍亂弧菌、腸毒素型大腸埃希菌等；侵襲型腹瀉,包括志賀菌、腸致病型大腸埃希菌和腸侵襲型大腸埃希菌等；食物中毒,包括沙門菌、金黃色葡萄球菌、副溶血性弧菌、蠟樣芽胞桿菌和肉毒梭菌等；偽膜性腸炎,包括艱難梭菌或金黃色葡萄球菌；慢性腹瀉,可能由結(jié)核桿菌引起。②真菌性：念珠菌、毛霉菌等。③病毒性：輪狀病毒等。危急值報(bào)告培養(yǎng)出霍亂弧菌、傷寒沙門菌、O157等及時(shí)按傳染病報(bào)告,同時(shí)送CDC復(fù)核。參考文獻(xiàn)1CNAS-GL23《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則在臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域的應(yīng)用指南》,20082周庭銀編著.臨床微生物學(xué)診斷與圖解.第二版.上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社,20073葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜主編.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程.第3版.XX:東南大學(xué)出版社,20064MurrayPR.ManualofClinicalMicrobilogy.9thed.Washington:ASMPress,20075ISO15189:2007《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室-質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則》,2007XX省XX市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科微生物實(shí)驗(yàn)室版本號：2.0文件標(biāo)題：呼吸系統(tǒng)標(biāo)本細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件狀態(tài)：受控文件編號：WSW-SOP-2.0修改日期：2013年1月30日文件種類：程序文件生效日期：2013年6月30日編制者：王騰勇批準(zhǔn)者：賀愛民審核者：賀愛民發(fā)放號：呼吸系統(tǒng)標(biāo)本細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程目的規(guī)范呼吸道標(biāo)本細(xì)菌學(xué)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程,確保檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可靠。適用范圍呼吸道標(biāo)本培養(yǎng)和涂片檢查。標(biāo)本3.1標(biāo)本類型痰、咽拭、支氣管肺泡灌洗吸出液、支氣管沖洗液或刷子、肺穿刺等。3.2標(biāo)本采集3.2.1采集時(shí)間以晨痰為好；支氣管擴(kuò)張癥患者,清晨起床后進(jìn)行體位引流,可采集大量痰標(biāo)本。

自然咳痰法在留取痰之前,用清水反復(fù)漱口,應(yīng)從氣管深部咳出痰,吐入無菌容器內(nèi)。

3.2.3氣管鏡下采集法在病灶附近用導(dǎo)管吸或用支氣管刷直接取得標(biāo)本。

3.2.4氣管穿刺法在環(huán)甲膜下穿刺抽取痰液,收集標(biāo)本,適用于厭氧菌培養(yǎng)。3.2.5棉拭采集法用無菌棉拭子輕輕擦拭患者鼻咽部黏膜,留取標(biāo)本,置無菌試管內(nèi)送檢。3.3標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn)3.3.1申請單姓名、科別、床號與標(biāo)本的標(biāo)簽不符。3.3.2痰標(biāo)本呈水樣或唾液樣。3.3.2痰涂片白細(xì)胞<10／低倍視野,上皮細(xì)胞>25／低倍視野。3.3.4標(biāo)本容器溢漏,無瓶蓋。3.3.5痰標(biāo)本留取放置時(shí)間太長,超過2h。3.3.6未用指定的無菌容器留痰作細(xì)菌培養(yǎng)。3.4標(biāo)本保存采集標(biāo)本后立即送到實(shí)驗(yàn)室,放置時(shí)間不應(yīng)超過2h。試劑、儀器4.1革蘭染液、氧化酶試劑、3%觸酶、血瓊脂平板、巧克力平板、麥康凱平板、相關(guān)生化試劑等。4.2VITEK鑒定系統(tǒng)。革蘭陰性菌鑒定卡<GNI+>、革蘭陰性細(xì)菌藥敏卡<GNS>、革蘭陽性菌鑒定卡<GPI>、革蘭陽性細(xì)菌藥敏卡<GPS>、真菌鑒定卡<YBC>、藥敏紙片、ATB板條等,有效期及儲存條件參見試劑說明書。4.3接種針、接種環(huán)、電熱灼燒器、顯微鏡、孵育箱、CO2培養(yǎng)箱等。細(xì)菌鑒定和藥敏質(zhì)控參見質(zhì)量管理。檢驗(yàn)步驟接收標(biāo)本后,立即對標(biāo)本進(jìn)行編號、登記。6.1肉眼觀察包括顏色、黏度、有無血絲或膿。6.2涂片檢查可以確定標(biāo)本是否適合做細(xì)菌培養(yǎng),直接涂片鏡檢,依據(jù)低倍鏡下觀察白細(xì)胞和上皮細(xì)胞數(shù)目多少來評定,見下表5-30。并可初步判定是否有病原菌存在。表5-30痰標(biāo)本鏡下分類分級白細(xì)胞〔個上皮細(xì)胞〔個A>25<10B>25<25C<10>25注：A、B兩種情況的痰標(biāo)本適合做培養(yǎng),C不合格,應(yīng)重新留標(biāo)本。

6.2.1一般細(xì)菌涂片挑取膿性或血性痰液制成薄而均勻的涂片,革蘭染色后鏡檢。6.2.2結(jié)核分枝桿菌涂片參見《結(jié)核分枝桿菌檢驗(yàn)操作規(guī)程》。6.2.3放線菌及諾卡菌涂片將痰液用生理鹽水洗滌數(shù)次,如含血液,則加水溶解紅細(xì)胞,然后挑取黃色顆?；虿煌该鞯闹唿c(diǎn),置載玻片上,覆以蓋玻片,輕輕擠壓,置高倍鏡下觀察其結(jié)構(gòu),如見中央為交織的菌絲,末端呈放線狀排列,則揭去蓋玻片,干燥后作革蘭及萋-尼染色鏡檢。如查見中間部分的菌絲為革蘭陽性,而四周放射的末端為革蘭陰性,萋-尼染色為非抗酸性者,可報(bào)告為"找到革蘭陽性桿菌疑似放線菌"。萋-尼染色弱陽性則報(bào)告革蘭陽性桿菌疑似諾卡菌。

6.3分離培養(yǎng)6.3.1培養(yǎng)標(biāo)本的選擇應(yīng)選擇黏液膿痰作涂片,排除不合格標(biāo)本。6.3.2痰標(biāo)本培養(yǎng)前處理用無菌鹽水將痰洗滌或加入等量的1%胰酶溶液,使痰液均質(zhì)化后備用。6.3.3接種處理后痰液接種于血瓊脂平板、巧克力瓊脂平板和麥康凱〔或EMB、中國藍(lán)瓊脂平板,置5％～10％CO2環(huán)境中,35℃培養(yǎng)18～24h。根據(jù)菌落及形態(tài)特點(diǎn),作出初步判斷,然后按各類細(xì)菌特征進(jìn)行生化鑒定,并同時(shí)作藥物敏感試驗(yàn)。6.3.5結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)：參見《結(jié)核分枝桿菌檢驗(yàn)操作規(guī)程》。操作流程發(fā)出報(bào)告儀器或手工細(xì)菌鑒定及藥敏試驗(yàn)觀察菌落特征及涂片、染色消化液或生理鹽水處理痰或咽拭發(fā)出報(bào)告儀器或手工細(xì)菌鑒定及藥敏試驗(yàn)觀察菌落特征及涂片、染色消化液或生理鹽水處理痰或咽拭肉眼觀察涂片染色肉眼觀察涂片染色血瓊脂平板、巧克力平板、麥康凱平板血瓊脂平板、巧克力平板、麥康凱平板5%~10%CO235℃培養(yǎng)18～24h結(jié)果報(bào)告8.1報(bào)告的各細(xì)菌種可注明各自所占比例情況,可分為純培養(yǎng),大量,中等量,少量。8.2未檢出致病菌時(shí)應(yīng)報(bào)告"正常菌群"。注意事項(xiàng)9.1痰標(biāo)本一般不可采用肉湯或高選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行增菌培養(yǎng)。9.2草綠色鏈球菌為口腔和鼻咽部的正常菌群,其毒力很低,但由拔牙等原因造成的局部損傷中侵入血流,可引起亞急性細(xì)菌性心內(nèi)膜炎等感染,故從血液中分離出草綠色鏈球菌有臨床意義。9.3咳痰標(biāo)本不做厭氧菌培養(yǎng)。臨床意義上呼吸道標(biāo)本培養(yǎng)生長的細(xì)菌是否與疾病有關(guān),需各方面綜合分析,排除常居菌后,才可作出正確的判斷。下呼吸道的痰液應(yīng)是無細(xì)菌的,而經(jīng)口腔咳出的痰帶有多種上呼吸道的正常寄生菌〔如草綠色鏈球菌。若從患者痰標(biāo)本中查見致病菌或條件致病菌,提示可能有呼吸道細(xì)菌感染。肺炎鏈球菌是肺炎最常見的致病菌。兒童細(xì)菌性肺炎多為流感嗜血桿菌所致。醫(yī)院獲得性肺炎的常見病原菌是革蘭陰性桿菌,主要有肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌、沙雷菌屬和腸桿菌屬細(xì)菌等。肺結(jié)核由結(jié)核分枝桿菌引起的。嗜肺軍團(tuán)菌引起軍團(tuán)菌病,肺部厭氧感染大多是脆弱類桿菌及梭桿菌屬的細(xì)菌等。疑典型形態(tài)細(xì)菌所致肺部感染時(shí),常先做痰液和支氣管分泌物涂片、染色鏡檢〔如肺部結(jié)核痰液涂片、抗酸染色,鏡檢找抗酸染色陽性結(jié)核分枝桿菌,有助于細(xì)菌培養(yǎng)檢查。危急值報(bào)告如查出抗酸桿菌陽性,則應(yīng)及時(shí)向臨床報(bào)告并作報(bào)傳染病報(bào)告。參考文獻(xiàn)1CNAS-GL23《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則在臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域的應(yīng)用指南》,20082周庭銀編著.臨床微生物學(xué)診斷與圖解.第二版.上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社,20073葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜主編.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程.第3版.XX:東南大學(xué)出版社,20064MurrayPR.ManualofClinicalMicrobilogy.9thed.Washington:ASMPress,20075ISO15189:2007《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室-質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則》,2007XX省XX市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科微生物實(shí)驗(yàn)室版本號：2.0文件標(biāo)題：腦脊液標(biāo)本細(xì)菌學(xué)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件狀態(tài)：受控文件編號：WSW-SOP-2.0修改日期：2013年1月30日文件種類：程序文件生效日期：2013年6月30日編制者：王騰勇批準(zhǔn)者：賀愛民審核者：賀愛民發(fā)放號：腦脊液標(biāo)本細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程目的規(guī)范腦脊液標(biāo)本細(xì)菌學(xué)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程,確保檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可靠。適用范圍腦脊液培養(yǎng)。標(biāo)本3.1標(biāo)本類型腦脊液。3.2標(biāo)本采集由臨床醫(yī)師以無菌要求做腰椎穿刺,抽取腦脊液2～3ml,盛于無菌容器中送檢。腦膜炎奈瑟菌離體后能產(chǎn)生自溶酶,迅速自溶,肺炎鏈球菌及流感嗜血桿菌離體后也易死亡。因此,腦脊液無論涂片或培養(yǎng),必須于采集后立即送檢。3.3標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn)3.3.1標(biāo)本標(biāo)識與化驗(yàn)申請單不符。3.3.2標(biāo)本未用無菌試管留取。3.4標(biāo)本保存采集標(biāo)本后立即送到實(shí)驗(yàn)室,不能及時(shí)送檢可置室溫,放置時(shí)間不應(yīng)超過2h,切勿放冰箱,否則影響檢出率。試劑、儀器4.1革蘭染液、氧化酶試劑、3%觸酶、血瓊脂平板、巧克力平板、麥康凱平板、相關(guān)生化試劑等。4.2VITEK鑒定系統(tǒng)。革蘭陰性菌鑒定卡<GNI+>、革蘭陰性細(xì)菌藥敏卡<GNS>、革蘭陽性菌鑒定卡<GPI>、革蘭陽性細(xì)菌藥敏卡<GPS>、藥敏紙片、ATB板條等,有效期及儲存條件參見試劑說明書。4.3接種針、接種環(huán)、電熱灼燒器、顯微鏡、孵育箱、CO2培養(yǎng)箱等。細(xì)菌鑒定和藥敏質(zhì)控參見質(zhì)量管理。檢驗(yàn)步驟接收標(biāo)本后,立即對標(biāo)本進(jìn)行編號、登記。6.1涂片檢查

6.1.1一般細(xì)菌涂片檢查外觀混濁或膿樣腦脊液可直接涂片,無色、透明的腦脊液,應(yīng)3000r／minl10～15min離心后取沉淀物涂片、革蘭染色、鏡檢。根據(jù)染色及形態(tài)特征,?？沙醪教崾炯?xì)菌的種類。。6.1.2結(jié)核分枝桿菌涂片檢查參見《結(jié)核分枝桿菌檢驗(yàn)操作規(guī)程》。6.1.3新生隱球菌涂片檢查取腦脊液的離心沉淀物作墨汁負(fù)染色,或取腦脊液的離心沉淀物接種于沙氏培養(yǎng)基上,置于35℃培養(yǎng)2～5日,根據(jù)菌落特性,涂片染色鏡檢作出報(bào)告。必要時(shí)可作生化反應(yīng)進(jìn)一步鑒定。

6.2分離培養(yǎng)6.2.1用接種環(huán)挑取混濁腦脊液或經(jīng)離心沉淀的沉淀物,分別接種于血瓊脂平板、巧克力瓊脂平板和麥康凱平板,置于5%~10%CO2環(huán)境中35℃培養(yǎng)18～24h,觀察細(xì)菌生長情況,根據(jù)菌落特點(diǎn)、形態(tài)與染色及生化反應(yīng)鑒定細(xì)菌,并作藥敏試驗(yàn)。6.2.2結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)：參見《結(jié)核分枝桿菌檢驗(yàn)操作規(guī)程》。操作流程腦脊液腦脊液離心觀察菌落特征及涂片、染色血瓊脂平板、巧克力平板、麥康凱平板5%CO235℃離心觀察菌落特征及涂片、染色血瓊脂平板、巧克力平板、麥康凱平板5%CO235℃培養(yǎng)18-24h發(fā)出報(bào)告儀器或手工細(xì)菌鑒定及藥敏試驗(yàn)沉淀物涂片、染色沉淀物涂片、染色結(jié)果報(bào)告無論是涂片還是培養(yǎng),一旦檢測到陽性細(xì)菌應(yīng)立即電話或書面通知臨床醫(yī)師。查見細(xì)菌,報(bào)告菌名和藥敏結(jié)果。經(jīng)培養(yǎng)48h,仍無細(xì)菌生長者,報(bào)告"培養(yǎng)2日無細(xì)菌生長"。注意事項(xiàng)9.1抽取的腦脊液分置于無菌試管中,迅速送至實(shí)驗(yàn)室,病毒、霉菌、分支桿菌培養(yǎng)樣本置4℃保存待送。9.2流感嗜血桿菌容易在外界環(huán)境中死亡,腦膜炎奈瑟菌對寒冷和干燥均很敏感,在體外容易自溶,故不論是涂片鏡檢還是進(jìn)行培養(yǎng)均應(yīng)及時(shí)送檢。臨床意義正常人的腦脊液是無菌的,檢出細(xì)菌提示細(xì)菌性〔急性化膿性或結(jié)核性等腦膜炎?；撔阅X膜炎最多見腦膜炎奈瑟菌,肺炎鏈球菌居第二位。3個月至5歲兒童細(xì)菌性腦膜炎的主要致病菌是流感嗜血桿菌,新生兒腦膜炎多由大腸埃希菌、B群溶血性鏈球菌和腦膜敗血黃桿菌引起的,特別是早產(chǎn)嬰兒。結(jié)核分枝桿菌引起結(jié)核性腦膜炎。85%腦膿腫患者腦脊液培養(yǎng)可檢出厭氧菌,有時(shí)可為厭氧菌和需氧菌混合感染。危急值報(bào)告直接涂片找到細(xì)菌或培養(yǎng)陽性均作危急值報(bào)告。若檢測出腦膜炎奈瑟菌則應(yīng)做傳染病報(bào)告。參考文獻(xiàn)1CNAS-GL23《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則在臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域的應(yīng)用指南》,20082周庭銀編著.臨床微生物學(xué)診斷與圖解.第二版.上海:上海科學(xué)技術(shù)出版社,20073葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜主編.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程.第3版.XX:東南大學(xué)出版社,20064MurrayPR.ManualofClinicalMicrobilogy.9thed.Washington:ASMPress,20075ISO15189:2007《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室-質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則》,2007XX省XX市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科微生物實(shí)驗(yàn)室版本號：2.0文件標(biāo)題：尿液標(biāo)本細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件狀態(tài)：受控文件編號：WSW-SOP-2.0修改日期：2013年1月30日文件種類：程序文件生效日期：2013年6月30日編制者：王騰勇批準(zhǔn)者：賀愛民審核者：賀愛民發(fā)放號：尿液標(biāo)本細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程目的規(guī)范尿液標(biāo)本細(xì)菌學(xué)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程,確保檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可靠。適用范圍尿液。標(biāo)本3.1標(biāo)本類型尿液。3.2標(biāo)本采集3.2.1中段尿標(biāo)本采集法

3.2.1.1女性先以肥皂水清洗外陰部,再以無菌水沖洗,用無菌紗布擦拭,以手指將陰唇分開排尿,棄去前段尿,留取中段尿5～7ml于無菌試管內(nèi)。3.2.1.2男性翻轉(zhuǎn)包皮,用肥皂水清洗尿道口,用清水沖洗,留取中段尿。3.2.1.3兒童、嬰兒先以無菌生理鹽水棉球洗凈其外陰部或外生殖器,將無菌試管或瓶口對準(zhǔn)尿道口,以膠布固定于皮膚上,待尿排出后送檢。3.2.2兩側(cè)腎盂尿由?？漆t(yī)生采集,左右側(cè)標(biāo)本必須標(biāo)明,避免混淆而誤診。3.2.3膀胱穿刺此法用于厭氧菌培養(yǎng)。恥骨上皮膚經(jīng)碘酒消毒后,再以75％乙醇擦拭,用無菌注射器作膀胱穿刺,吸取尿液后排去注射器內(nèi)的空氣,針頭插于無菌橡皮塞上送檢。3.2.4尿標(biāo)本采集應(yīng)及時(shí)送檢,2h內(nèi)進(jìn)行接種。3.3標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn)3.3.1申請單項(xiàng)目與標(biāo)本不符。3.3.2尿標(biāo)本不是用無菌容器留取。3.3.3送標(biāo)本的時(shí)間在采集標(biāo)本后超過2h。3.4標(biāo)本保存采集標(biāo)本后立即送到實(shí)驗(yàn)室,不能及時(shí)送檢可置冰箱。試劑、儀器4.1革蘭染液、氧化酶試劑、3%觸酶、血瓊脂平板、巧克力平板、麥康凱平板、相關(guān)生化試劑等。4.2VITEK鑒定系統(tǒng)。革蘭陰性菌鑒定卡<GNI+>、革蘭陰性細(xì)菌藥敏卡<GNS>、革蘭陽性菌鑒定卡<GPI>、革蘭陽性細(xì)菌藥敏卡<GPS>、真菌鑒定卡<YBC>、藥敏紙片、ATB板條等,有效期及儲存條件參見試劑說明書。4.3接種針、接種環(huán)、電熱灼燒器、顯微鏡、孵育箱、CO2培養(yǎng)箱等。細(xì)菌鑒定和藥敏質(zhì)控參見質(zhì)量管理。檢驗(yàn)步驟接收標(biāo)本后,立即對標(biāo)本進(jìn)行編號、登記。6.1涂片檢查6.1.1一般細(xì)菌涂片以無菌操作吸取尿液5～10ml,3000r／min離心沉淀15min,取沉淀物作涂片及革蘭染色,鏡檢,可提示有無細(xì)菌及細(xì)菌種類。6.1.2真菌涂片取尿液沉淀物放于清潔玻片上,覆以蓋玻片,略加壓力,制成涂片,用高倍鏡檢查。如發(fā)現(xiàn)發(fā)亮的芽生孢子和假菌絲,就可報(bào)告"找到酵母樣細(xì)胞,形似念珠菌"。

6.1.3結(jié)核分枝桿菌參見《結(jié)核分枝桿菌檢驗(yàn)操作規(guī)程》。6.2一般細(xì)菌培養(yǎng)取中段尿,用定量接種環(huán)取尿液10ul接種于血瓊脂平板和麥康凱〔或EMB營養(yǎng)瓊脂平板上,5%~10%CO2,35℃培養(yǎng)18～24h,觀察有無菌落生長,并進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)。平板生長菌落數(shù)乘以100即每毫升尿液的菌落數(shù)。根據(jù)菌落特征和涂片、染色結(jié)果,選擇相應(yīng)的方法作進(jìn)一步鑒定。6.3特殊菌培養(yǎng)

6.3.1淋病奈瑟菌培養(yǎng)選用淋球菌瓊脂平板等,放入5%~10%CO2環(huán)境中培養(yǎng)。

6.3.2厭氧菌培養(yǎng)必須用膀胱穿刺尿進(jìn)行培養(yǎng),接種厭氧瓊脂平板,并在厭氧環(huán)境培養(yǎng)。6.3.3結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)參見《結(jié)核分枝桿菌檢驗(yàn)操作規(guī)程》。操作流程尿液尿液結(jié)核桿菌培養(yǎng)定量培養(yǎng)一般細(xì)菌涂片、染色、鏡檢淋球菌培養(yǎng)結(jié)核桿菌培養(yǎng)定量培養(yǎng)一般細(xì)菌涂片、染色、鏡檢淋球菌培養(yǎng)菌落計(jì)數(shù)羅氏培養(yǎng)基35℃培養(yǎng)4～8周GC瓊脂平板5%~10%羅氏培養(yǎng)基35℃培養(yǎng)4～8周GC瓊脂平板5%~10%CO235℃培養(yǎng)18-24h血瓊脂和麥康凱平板35℃培養(yǎng)18-24h觀察有無可疑菌落生長觀察有無可疑菌落生長觀察菌落特征及涂片、染色觀察菌落特征及涂片、染色發(fā)出報(bào)告手工或儀器細(xì)菌鑒定及藥敏發(fā)出報(bào)告手工或儀器細(xì)菌鑒定及藥敏發(fā)出報(bào)告發(fā)出報(bào)告結(jié)果報(bào)告8.1尿液細(xì)菌培養(yǎng)檢查必須報(bào)告細(xì)菌的種屬、菌落計(jì)數(shù)及藥敏結(jié)果。8.2陽性結(jié)果報(bào)告8.2.1無明確意義的陽性結(jié)果報(bào)告——純培養(yǎng)：革蘭X性X菌生長,菌落數(shù)XXCFU/ml；混合菌生長：革蘭X性X菌生長,菌落數(shù)XXCFU/ml,注明是混合菌。8.2.2有意義的陽性結(jié)果報(bào)告：報(bào)告細(xì)菌種名、藥敏結(jié)果及菌落數(shù)。8.3陰性結(jié)果報(bào)告：培養(yǎng)48h無菌落生長,即為陰性。8.4若尿液培養(yǎng)同時(shí)有≥3種細(xì)菌生長時(shí),可視為污染標(biāo)本,建議重留送檢。注意事項(xiàng)9.1尿液標(biāo)本不可置肉湯中進(jìn)行增菌培養(yǎng)。9.2中段尿標(biāo)本不可做厭氧菌培養(yǎng)。9.3收集尿液過程中,請勿將手伸入容器中,且避免尿液勿溢出容器,以免污染〔以無菌導(dǎo)管技術(shù)收集尿液的方法已被淘汰。臨床意義尿液的細(xì)菌學(xué)檢查〔中段尿培養(yǎng)加計(jì)數(shù)對于泌尿道感染的診斷有重要價(jià)值。正常尿液是無菌的,而外尿道有正常菌群寄生,標(biāo)本的采集必須無菌操作。另外,細(xì)菌培養(yǎng)必須結(jié)合菌落計(jì)數(shù)辨別是否為病原菌。有致病菌或條件致病菌生長,菌落計(jì)數(shù)>105CFU/ml,提示感染〔膀胱炎、腎盂腎炎、腎或膀胱結(jié)核等。常見病原菌主要有大腸埃希菌、葡萄球菌、腸球菌等。危急值報(bào)告如查出抗酸桿菌陽性,則應(yīng)及時(shí)向臨床報(bào)告并報(bào)作傳染病報(bào)告。參考文獻(xiàn)1CNAS-GL23《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則在臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域的應(yīng)用指南》,20082周庭銀編著.臨床微生物學(xué)診斷與圖解.第二版.上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社,20073葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜主編.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程.第3版.XX:東南大學(xué)出版社,20064MurrayPR.ManualofClinicalMicrobilogy.9thed.Washington:ASMPress,20075ISO15189:2007《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室-質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則》,2007XX省XX市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科微生物實(shí)驗(yàn)室版本號：2.0文件標(biāo)題：膿及傷口標(biāo)本細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件狀態(tài)：受控文件編號：WSW-SOP-2.0修改日期：2013年1月30日文件種類：程序文件生效日期：2013年6月30日編制者：王騰勇批準(zhǔn)者：賀愛民審核者：賀愛民發(fā)放號：膿及傷口標(biāo)本細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程目的規(guī)范膿及傷口標(biāo)本細(xì)菌學(xué)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程,確保檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可靠。適用范圍膿液培養(yǎng)或涂片檢查。標(biāo)本3.1標(biāo)本類型膿液。3.2標(biāo)本采集3.2.1開放性膿腫和膿性分泌物用無菌鹽水或75%酒精擦去表面滲出物,用拭子深入潰瘍深處采集兩支拭子,一支為涂片檢查用,一支作培養(yǎng)用。

3.2.2大面積燒傷的創(chuàng)面分泌物用滅菌棉拭取多部位創(chuàng)面