化妝品生物技術(shù)課件

05十月2023化妝品生物技術(shù)26七月2023化妝品生物技術(shù)1

論文來(lái)源

國(guó)立臺(tái)灣海洋大學(xué)

食品科學(xué)系碩士學(xué)位論文雷公草的萃取物在化妝品的應(yīng)用

研究生：葉文騰撰TheApplicationofCentellaAsiaticaExtractinCosmetic論文來(lái)源2

目錄一、研究摘要二、關(guān)於雷公草三、實(shí)驗(yàn)方法四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果五、研究討論(互動(dòng)式)目錄一、研3一、研究摘要研究目的：探討利用雷公草中五圜三萜類化合物Pentacyclic

riterpene如：積雪草酸苷(asiaticoside)、積雪草酸(asiaticacid)、羥基積雪草酸苷(madecassoside)、羥基積雪草酸(madecassicacid)等應(yīng)用在抗老化及防止皮膚皺紋等化妝品的有效性研究。

1.探討雷公草有效成分之萃取方法。

2.探討雷公草酒精萃取物對(duì)纖維母細(xì)胞增生及促進(jìn)膠原蛋白產(chǎn)生之影響。

3.測(cè)試?yán)坠菥凭腿∥飳?duì)所製備之水凝膠精華露對(duì)皮膚彈性、保溼度、安定性、pH值及美白之影響。

一、研究摘要研究目的：探討利用雷公草中五圜三萜類化合物Pen4

二、關(guān)於雷公草二、關(guān)於雷公草5雷公草(Centellaasiatica)

主要化學(xué)組成是屬於α-香樹(shù)精-熊果酸類化合物，五環(huán)三萜類化合物，主要成份為：積雪草酸苷(asiaticoside)、積雪草酸(asiaticacid)、羥基積雪草酸苷(madecassoside)、羥基積雪草酸(madecassic

acid)。檢測(cè)方法：HPLC

(繖形花科)為多年生的葡萄性草本植物，梵文是brahmi，意為良知或智慧，在印度稱為石榴花；因?yàn)槟茉鰪?qiáng)記憶、思考敏銳，所以命名為brahmi。它有兩個(gè)拉丁學(xué)名Centellaasiatica及Hydrocotyle

asiatica指的都是同一種植物，全草可供藥用。常見(jiàn)俗名：積雪草、老公根、月亮草、銅錢草、蜆殼草、含殼草、美人扇、止血草、雷公根....(邱和張，1986;鄭等，1966)。雷公草(Centellaasiatica)主要化學(xué)組成6雷公草(Centellaasiatica)生長(zhǎng)環(huán)境主要生長(zhǎng)於熱帶、亞熱帶及沼澤溼地。如馬達(dá)加斯加、亞洲、歐洲東部和南部非洲。(Naliniet.,1992)臺(tái)灣田園路邊、原野、低海拔山區(qū)也很常見(jiàn)。應(yīng)用範(fàn)圍：醫(yī)藥、化妝品、農(nóng)業(yè)。

a.雷公草首先在印度被使用，他曾記載於印度傳統(tǒng)科學(xué)醫(yī)書Ayurvedic中，並廣泛用作神經(jīng)方面的處方，包括促進(jìn)放鬆、提升學(xué)習(xí)、記憶力以及皮膚傷口治療上皆有顯著效果。

b.積雪草始載於《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為中品，目前已載於中國(guó)藥典。在中國(guó)長(zhǎng)久以來(lái)即以增進(jìn)腦力及療傷而聞名。它本身帶有苦味、辛辣及甜味，對(duì)身體具有清涼鎮(zhèn)定效果。

雷公草(Centellaasiatica)生長(zhǎng)環(huán)境7雷公草(Centellaasiatica)c.在馬來(lái)西亞及斯里蘭卡等國(guó)家有人以雷公草餵食母牛，發(fā)現(xiàn)可增加牛奶的產(chǎn)量。(TennekoonandJeevathayaparan，1992)d.在歐洲，這種植物利用滴定萃取純化方式製成片狀、粉狀或乳膏狀，稱為Madecassol。e.積雪草酸苷(asiaticoside)能刺激培養(yǎng)中的纖維母細(xì)胞增生，促

進(jìn)皮膚中膠原蛋白的合成、上皮細(xì)胞的再生、總蛋白質(zhì)的增生

，使皮膚傷口加快癒合，增強(qiáng)皮膚的伸張彈性。且羥基積雪草酸苷(madecassoside)、羥基積雪草酸(madecassicacid)具有抗皮膚發(fā)炎的效果。(BoiteauandBatsimamanga，1950;NakajimaandAkiyoshi，1972)

雷公草(Centellaasiatica)c.在馬8雷公草(Centellaasiatica)

f.臺(tái)灣民間以雷公草全草入藥，藥性苦及寒，具有解毒、消暑、治高血壓、腹痛及小兒疾病等效用。新鮮莖葉搗汁或煮水，調(diào)紅糖(黑糖)服用，可治腸胃發(fā)炎，新鮮莖葉搗爛，可敷治疔瘡紅腫及蛇蟲(chóng)咬傷。

雷公草(Centellaasiatica)f.臺(tái)灣9

三、實(shí)驗(yàn)方法

三、實(shí)驗(yàn)方法101.探討雷公草有效成分之萃取方法。取至花蓮秀林國(guó)中校園內(nèi)、花蓮市中草藥房、基隆海洋大學(xué)曬乾研磨成粉狀a.20ml甲醇(v/v:9/1水)b.甲醇c.乙醇d.氰化烷取1g重，溶於四種溶劑中，室溫下攪拌5小時(shí)過(guò)濾將濾液用抽器減壓濃縮乾燥約得0.15g取萃取物100mg、溶於10ml溶劑中，再以0.45?m濾紙過(guò)濾，HPLC檢測(cè)1.探討雷公草有效成分之萃取方法。取至花蓮秀林國(guó)中校園內(nèi)、112-1.探討雷公草酒精萃取物對(duì)纖維母細(xì)胞增生及促進(jìn)

膠原蛋白產(chǎn)生之影響。

老鼠胚胎纖維母細(xì)胞NIH3T3加入6mlDMEM完全培養(yǎng)液5%-CO2，37°C，培養(yǎng)3~4天取出10ul的培養(yǎng)液加入5個(gè)5cc含MDEM完全培養(yǎng)液瓶中再分別加入雷公草之酒精萃取物(0.0、12.5、25.0、50.0及100.0ug)經(jīng)過(guò)24、48、72小時(shí)培養(yǎng)後….觀察各瓶中纖維母細(xì)胞增生情形下一頁(yè)2-1.探討雷公草酒精萃取物對(duì)纖維母細(xì)胞增生及促進(jìn)

12將培養(yǎng)瓶中的上層液去除，加入1.5ml的胰蛋白酵素後，搖晃培養(yǎng)瓶，使附著在瓶底細(xì)胞都被浸潤(rùn)。放入5%-CO2之37°C培養(yǎng)箱中，3~5分鐘取出培養(yǎng)瓶離心5min，去除上層胰蛋白酵素，拍散沉澱的細(xì)胞，加入1ml的完全培養(yǎng)液於離心瓶中取出5uL之懸浮液及5uLTrypanblue細(xì)胞染色劑，將之滴在計(jì)數(shù)器的光滑面計(jì)算中央正方形內(nèi)未被染色的活細(xì)胞數(shù)目放入5%-CO2之37°C培養(yǎng)箱中，3~5分鐘取出5uL之懸132-2.探討雷公草酒精萃取物對(duì)纖維母細(xì)胞增生及促進(jìn)

膠原蛋白產(chǎn)生之影響。從5瓶纖維母細(xì)胞培養(yǎng)液中分別取出0.0、12.5、25.0、50.0ul加至1.5ml微量離心試管中以0.5M醋酸稀釋至100ul，並分別加入1ml反應(yīng)試劑A，(Sircoldyereagent)，30分鐘後離心10分鐘，去除上層液再分別加入1ml反應(yīng)試劑B(Alkalireagent)震盪混合均勻以540nm測(cè)其吸光值，與標(biāo)準(zhǔn)濃度膠原蛋白樣品在540nm之(吸光值/含量)檢量線比較，求出各檢品的膠原蛋白濃度。2-2.探討雷公草酒精萃取物對(duì)纖維母細(xì)胞增生及促進(jìn)

143.測(cè)試?yán)坠菥凭腿∥飳?duì)所製備之水凝膠精華露

對(duì)皮膚彈性、保溼度、安定性、pH值及美白之影響。依標(biāo)準(zhǔn)配方及標(biāo)準(zhǔn)製程，製造水凝膠精華露基本Base分別製成含有0.0、0.3、0.5%雷公草萃取物的水凝膠精華露安定性測(cè)試皮膚測(cè)試50°C3個(gè)月4°C3個(gè)月50°C-4°C3個(gè)月超音波震盪5分鐘or離心測(cè)試30分鐘觀察有無(wú)相分離1.樣品塗抹量：0.2g2.塗抹點(diǎn)：手臂3.檢測(cè)時(shí)室溫條件：23°C;RH60-65%4.測(cè)試者樣品數(shù)：2組共12人，各取六點(diǎn)檢測(cè)皮膚彈性吸允法CutomerSEM575四星期保溼度皮膚電容量SkinAnalyzerSHP880~120分鐘pH值皮膚刺激度皮膚分析儀0~120分鐘美白皮膚黑色素值MexamterMX16四星期3.測(cè)試?yán)坠菥凭腿∥飳?duì)所製備之水凝膠精華露

對(duì)皮膚15

四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果一、不同產(chǎn)地的雷公草，皆含有四種常用成分，其相對(duì)含量會(huì)因產(chǎn)地不同而有差異，也可能與採(cǎi)摘時(shí)葉與莖的多寡及成長(zhǎng)時(shí)日曬時(shí)間有關(guān)。(圖十一)二、溶劑的極性會(huì)影響四種常用成分的萃取，以甲醇/水(v/v：9/1)為萃取溶劑的效果最好，氰甲烷則無(wú)法有效萃取出四種常用成分。(圖十二)三、從質(zhì)譜圖顯示：羥基積雪草酸苷(madecassoside)及積雪草酸苷(asiaticoside)會(huì)因?yàn)樗舛謩e轉(zhuǎn)化為羥基積雪草酸(madecassic

acid)及積雪草酸(asiaticacid)。四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果一、不同產(chǎn)地16四、雷公草酒精萃取物能夠刺激纖維母細(xì)胞之增生與膠原蛋白的合成。(圖十三、十四、十六)五、所製備雷公草酒精萃取物之水凝膠精華露之安定性佳。(表三)六、雷公草酒精萃取物能夠使自製之水凝膠精華露對(duì)於皮膚的保濕效果、彈躍性及美白度有增強(qiáng)的效果。(圖十七、十八)