人教版2017年高中生物第1部分專題2課題1微生物的實驗室培養(yǎng)(選修一)課件

第1部分專題2課題1理解教材新知把握熱點考向應(yīng)用創(chuàng)新演練知識點一知識點二考向一考向二1.培養(yǎng)基中含有水、無機(jī)鹽、碳源、氮源和

生長因子等營養(yǎng)物質(zhì)。2．實驗室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、干

熱滅菌和高壓蒸汽滅菌等。3．固體培養(yǎng)基的配制過程為：計算―→稱量―→溶化―→滅菌―→倒平板。4．平板劃線法和稀釋涂布平板法是微生物接種的常用方法。5．消毒的目的是殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的微生物，滅菌則是殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括孢子和芽孢。

[自讀教材·夯基礎(chǔ)]1．培養(yǎng)基(1)概念：人們按照微生物對

的不同需求，配制出的供其

的營養(yǎng)物質(zhì)。營養(yǎng)物質(zhì)生長繁殖液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基菌落(3)營養(yǎng)成分：水、無機(jī)鹽、

、

，此外還要滿足微生物生長對

、特殊營養(yǎng)物質(zhì)及

的要求。2．無菌技術(shù)(1)目的：防止

污染。(2)方法——消毒和滅菌。碳源氮源pH氧氣外來雜菌消毒滅菌概念使用較為

的物理或化學(xué)方法殺死物體

或

的部分微生物(不包括

)使用

的理化因素殺死物體內(nèi)外

的微生物(包括

和

)常用方法

消毒法、

消毒法、

消毒法、紫外線消毒法灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌適用對象操作空間、液體、雙手等接種環(huán)、接種針、玻璃器皿、培養(yǎng)基等溫和表面內(nèi)部芽孢和孢子煮沸巴氏化學(xué)藥劑強(qiáng)烈所有芽孢孢子1．下面是察氏培養(yǎng)基(培養(yǎng)霉菌所用)的主要成分，請根據(jù)下述培養(yǎng)基，回答下列問題：蔗糖NaNO3K2HPO4KClMgSO4·7H2OFeSO4瓊脂水定容至1000mL20g3g1g1g0.5g0.01g20g(1)該培養(yǎng)基根據(jù)物理性質(zhì)劃分應(yīng)是什么培養(yǎng)基？為什么？(2)該培養(yǎng)基包含微生物生長和繁殖所需要的幾類營養(yǎng)物質(zhì)？分別是什么？(3)蔗糖提供的是哪類營養(yǎng)物質(zhì)？NaNO3提供的是哪類營養(yǎng)物質(zhì)？(4)在提供上述幾種主要營養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上，培養(yǎng)基還需要滿足微生物所需要的哪些條件？

提示：(1)固體培養(yǎng)基。因為該培養(yǎng)基加入了凝固劑瓊脂。(2)4種成分。分別是碳源、氮源、無機(jī)鹽和水。(3)蔗糖提供的是碳源。NaNO3提供的是氮源和無機(jī)鹽。(4)滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的需要。2．探討培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實驗者的雙手、空氣和牛奶所采用的滅菌或消毒方法。提示：分別為高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌、灼燒滅菌、化學(xué)消毒、紫外線滅菌、巴氏消毒法。

[跟隨名師·解疑難]1．培養(yǎng)基的成分營養(yǎng)物質(zhì)定義作用主要來源碳源凡能提供所需碳元素的物質(zhì)構(gòu)成生物體的細(xì)胞物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物，有些是異養(yǎng)生物的能源物質(zhì)無機(jī)化合物：CO2、NaHCO3等；有機(jī)化合物：糖類、脂肪酸、花生粉餅、石油等氮源凡能提供所需氮元素的物質(zhì)合成蛋白質(zhì)、核酸以及含氮的代謝產(chǎn)物無機(jī)化合物：N2、NH3、銨鹽、硝酸鹽等；有機(jī)化合物：尿素、牛肉膏、蛋白胨等營養(yǎng)物質(zhì)定義作用主要來源生長因子生長必不可少的微量有機(jī)物酶和核酸的組成成分維生素、氨基酸、堿基等水在生物體內(nèi)含量很高不僅是優(yōu)良的溶劑而且可維持生物大分子結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定外界攝入無機(jī)鹽為微生物提供除碳、氮以外的各種重要元素，包括大量元素細(xì)胞內(nèi)的組成成分，生理調(diào)節(jié)物質(zhì)，某些化能自養(yǎng)菌的能源，酶的激活劑無機(jī)化合物2.培養(yǎng)基的種類(1)按物理性質(zhì)分：名稱特征功能固體培養(yǎng)基外觀呈固體狀態(tài)的培養(yǎng)基主要用于微生物的分離、鑒定液體培養(yǎng)基呈液體狀態(tài)的培養(yǎng)基主要用于工業(yè)生產(chǎn)(2)按培養(yǎng)基功能分：①選擇培養(yǎng)基：允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，如無氮培養(yǎng)基可選擇培養(yǎng)固氮微生物。②鑒別培養(yǎng)基：微生物或其代謝產(chǎn)物與培養(yǎng)基某些物質(zhì)發(fā)生特定的顏色反應(yīng)，以鑒別不同微生物。

[自讀教材·夯基礎(chǔ)]1．制備固體培養(yǎng)基計算：依據(jù)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基

比例，計算各成分的用量

：牛肉膏比較黏稠，可用稱量紙稱取，牛肉膏和蛋白胨都易吸潮，稱取的動作要迅速，稱后及時蓋上瓶蓋配方稱量

：牛肉膏和稱量紙＋水取出稱量紙―→加蛋白胨和氯化鈉―→加瓊脂(注意：不斷用玻璃棒攪拌，防止瓊脂糊底而導(dǎo)致燒杯破裂)―→補(bǔ)加蒸餾水至100mL

滅菌

：待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時，在

附近

倒平板溶化干熱滅菌倒平板酒精燈火焰2．純化大腸桿菌(1)方法：①

：通過接種環(huán)在

固體培養(yǎng)基表面

的操作，將聚集的菌種逐步

到培養(yǎng)基的表面。②

：將菌液進(jìn)行一系列的

，然后將不同

的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。(2)鑒定：將接種后的培養(yǎng)基和一個

的培養(yǎng)基都放入

恒溫箱中，培養(yǎng)12h和24h后，分別記錄觀察。平板劃線法瓊脂連續(xù)劃線稀釋分散稀釋涂布平板法梯度稀釋稀釋度未接種37℃(3)菌種保存：臨時保藏法甘油管藏法適用對象

使用的菌種

保存的菌種培養(yǎng)基類型固體斜面培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基溫度

方法菌落長成后于冰箱中保存，每3～6個月將菌種從舊的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到新鮮培養(yǎng)基上將培養(yǎng)的菌液與等體積滅菌后的

混合均勻后于冷凍箱內(nèi)保存缺點菌種易被

或

頻繁長期4℃－20℃污染產(chǎn)生變異甘油1．培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50℃左右時，才能用來倒平板，你用什么辦法來估計培養(yǎng)基的溫度？提示：可以用手觸摸，感覺上以剛不燙手為準(zhǔn)。2．在用平板劃線法接種大腸桿菌時，第一次劃線前、每次劃線前及劃線操作結(jié)束后，都要灼燒接種環(huán)，請分析其目的分別是什么。提示：第一次灼燒每次劃線前灼燒劃線結(jié)束灼燒目的避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的微生物，使每次劃線的微生物來自上次劃線末端殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者3．在純化大腸桿菌操作中，如何驗證培養(yǎng)基滅菌是否徹底？提示：將接種后的培養(yǎng)基和一個未接種的培養(yǎng)基，都放在37℃恒溫箱中培養(yǎng)，觀察并記錄結(jié)果。

[跟隨名師·解疑難]1．微生物培養(yǎng)中有關(guān)實驗操作的注意事項(1)倒平板操作：①培養(yǎng)基滅菌后，需冷卻至50℃左右時才能倒平板，原因是瓊脂在44℃以下凝固。②培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，不要完全打開。③整個操作過程要在酒精燈火焰旁進(jìn)行，避免雜菌污染。④平板冷凝后要倒置的原因：防止皿蓋上的冷凝水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。