4種化風(fēng)丹對(duì)sd大鼠空間記憶能力的影響

4種化風(fēng)丹對(duì)sd大鼠空間記憶能力的影響

化風(fēng)丹是國(guó)務(wù)院最保護(hù)的四大藥物之一。它是由15種貴重的中藥組成的，如香茶、天麻、硬蠶、蝎子、雄黃、朱沙等。主要治療風(fēng)粘液閉阻（頭痛、耳鳴、腦動(dòng)脈、四肢癱瘓、腦萎縮）、癲癇、中風(fēng)癱瘓、面部癱瘓等。它是世界上最長(zhǎng)的治療腦損傷的中醫(yī)藥?；L(fēng)丹中含礦物藥朱砂和雄黃,是其治療腦部疾病產(chǎn)生藥理作用的重要成分。然而,朱砂、雄黃各自的主要成分HgS、α-As4S4是國(guó)際公認(rèn)毒物汞、砷元素的化合物,其安全性問(wèn)題深受國(guó)內(nèi)外關(guān)注。由化風(fēng)丹主治病癥可知,神經(jīng)系統(tǒng)是其發(fā)揮藥效的重要靶器官,對(duì)于這方面的研究,目前少有相關(guān)報(bào)道。本研究從長(zhǎng)期用藥角度,給予大鼠喂食臨床等效劑量萬(wàn)勝化風(fēng)丹、廖元和堂化風(fēng)丹和去朱砂化風(fēng)丹60天,觀察其與HgCl2、NaAsO2對(duì)大鼠空間記憶能力影響的異同。Morris水迷宮(MWM)是英國(guó)心理學(xué)家Morris于20世紀(jì)80年代初設(shè)計(jì)的,用于研究實(shí)驗(yàn)室大鼠空間學(xué)習(xí)與記憶能力以及評(píng)價(jià)神經(jīng)遞質(zhì)系統(tǒng)、藥物作用之間的關(guān)系的裝置,在當(dāng)代神經(jīng)科學(xué)研究中占據(jù)十分重要的位置。目前,有相當(dāng)多的試驗(yàn)者利用水迷宮來(lái)評(píng)價(jià)動(dòng)物的學(xué)習(xí)與記憶能力,最常用的評(píng)價(jià)指標(biāo)是定位航行實(shí)驗(yàn)的“逃避潛伏期”。另外,我們采用每天第1次訓(xùn)練的成績(jī)作為評(píng)價(jià)指標(biāo),這樣反映出的是大鼠對(duì)前一天的記憶力。1材料和方法1.1動(dòng)物及實(shí)驗(yàn)環(huán)境健康清潔級(jí)SD大鼠,雄性,160~200g,清潔級(jí),購(gòu)自重慶滕鑫比爾實(shí)驗(yàn)動(dòng)物銷售有限公司,動(dòng)物許可證號(hào)SCXK(渝)2007-0005。大鼠在實(shí)驗(yàn)環(huán)境中適應(yīng)性常規(guī)喂養(yǎng)3d,保證大鼠每天充足的飼料和飲水,光照12h。篩選出達(dá)到學(xué)習(xí)標(biāo)準(zhǔn)的大鼠30只,將其隨機(jī)分為5組(n=6)為萬(wàn)勝化風(fēng)丹組(萬(wàn)勝組)、廖元和堂化風(fēng)丹組(廖元和堂組)、HgCl2組、NaAsO2組和對(duì)照組。1.2萬(wàn)勝化風(fēng)丹及hcgl2廖元和堂化風(fēng)丹購(gòu)自貴州廖元和堂藥業(yè)公司,批號(hào)120315;萬(wàn)勝化風(fēng)丹購(gòu)自貴陽(yáng)萬(wàn)勝藥業(yè)有限責(zé)任公司,批號(hào)120307;HgCl2購(gòu)自貴州省萬(wàn)山特區(qū)礦產(chǎn)公司,批號(hào)1110003;NaAsO2購(gòu)自山東西亞化學(xué)工業(yè)有限公司,批號(hào)20130301。1.3移動(dòng)圖像采集系統(tǒng)Morris水迷宮由不銹鋼水池(圓柱狀)、可移動(dòng)平臺(tái)和圖像自動(dòng)采集、處理系統(tǒng)等組成。水池直徑150cm,高70cm;平臺(tái)直徑15cm,高40cm;水池四個(gè)象限有不同符號(hào)的導(dǎo)航標(biāo)識(shí)。1.4下一種動(dòng)物的時(shí)間定位航行實(shí)驗(yàn)是通過(guò)大鼠在水中尋找平臺(tái)的逃避潛伏期來(lái)檢測(cè)大鼠學(xué)習(xí)能力的,方法如下:(1)將大鼠頭朝池壁放入水中,放入位置取第二象限起始位置。記錄動(dòng)物找到水下平臺(tái)的時(shí)間(s),即逃逸潛伏期。在前幾次訓(xùn)練中,如果這個(gè)時(shí)間超過(guò)90s,則引導(dǎo)動(dòng)物到平臺(tái),在平臺(tái)上停留30s。(2)將大鼠移開,放在150W的白熾燈下5min,放回籠內(nèi)。1只動(dòng)物每天訓(xùn)練2次,上午、下午各1次,連續(xù)訓(xùn)練5d,并記錄訓(xùn)練成績(jī)。1.5統(tǒng)計(jì)分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以(ue0af±s)表示,應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件中單因素方差分析進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,α=0.05水平檢驗(yàn)。2結(jié)果2.1一般情況下各給藥組大鼠每日食量、飲水量以及排便均未發(fā)現(xiàn)異常,毛色柔順有光澤,體重穩(wěn)定上升,各給藥組無(wú)顯著性差異,實(shí)驗(yàn)過(guò)程中無(wú)死亡。2.2各組用藥前后比較用藥前大鼠潛伏期在第1天至第4天無(wú)明顯變化,訓(xùn)練第5天各組潛伏期顯著下降;用藥后訓(xùn)練第1~5天各組潛伏期呈明顯的下降趨勢(shì),且萬(wàn)勝化風(fēng)丹組、廖元和堂化風(fēng)丹組、NaAsO2組以及正常組在第2~5天與用藥前比較均具有顯著性差異(P<0.05)(見表2~5),HgCl2組僅在第4天與用藥前比較有顯著性差異(P<0.05)(見表4);與正常組比較,用藥前各組在第1~5天均無(wú)顯著差異,用藥后HgCl2組在第2~5天均有顯著性差異(P<0.05)(見表2~5),萬(wàn)勝化風(fēng)丹組、廖元和堂化風(fēng)丹組和NaAsO2僅在第4天差異顯著(P<0.05)(見表4);與HgCl2組比較,用藥前各組在第1~5天均無(wú)顯著差異,用藥后萬(wàn)勝化風(fēng)丹組、廖元和堂化風(fēng)丹組和NaAsO2組在第2~5天均差異顯著(P<0.05)(見表2~5)。3空間記憶的穩(wěn)定性用藥前,各組大鼠每天訓(xùn)練的潛伏期無(wú)顯著差異,即各組大鼠在用藥前的空間記憶能力相當(dāng),表明篩選方式是正確且成功的,這為后期實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行奠定了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。3.1遠(yuǎn)期記憶能力與用藥前訓(xùn)練成績(jī)比較,用藥后各組大鼠的潛伏期均有明顯的下降趨勢(shì),表明大鼠在喂養(yǎng)60天后,經(jīng)過(guò)1天的適應(yīng)性訓(xùn)練,對(duì)給藥前的訓(xùn)練結(jié)果具備一定程度的遠(yuǎn)期記憶能力。而HgCl2組大鼠的這一能力與其他組比較并不顯著,從這一角度來(lái)看,HgCl2的長(zhǎng)期應(yīng)用減弱了大鼠的空間記憶能力。3.2對(duì)大鼠空間記憶能力的影響用藥后,正常組大鼠每天訓(xùn)練的潛伏期呈顯著下降趨勢(shì),萬(wàn)勝組、廖元和堂組和NaAsO2組與正常組的趨勢(shì)相同,且無(wú)顯著性差異,表明兩種化風(fēng)丹和NaAsO2對(duì)大鼠空間記憶能力無(wú)明顯影響。而HgCl2組在第2~5天的潛伏期均顯著高于正常組及其他給藥組,