《動物細胞工程》

衡東二中生物組制作：張先華動物細胞工程第一輪復習課件1整理課件1.動物細胞培養(yǎng)2.核移植技術3.動物細胞融合4.單克隆抗體高考考點解讀2整理課件例1.動物細胞體外培養(yǎng)時，通常要在培養(yǎng)基中補充一定濃度的某些物質。以下圖是血清對正常細胞和癌細胞培養(yǎng)影響的實驗結果。由此獲得的不正確結論是A.正常細胞與癌細胞的增殖速率相同B.有無血清對正常細胞培養(yǎng)的影響不同C.培養(yǎng)基中補充血清有助于正常細胞的培養(yǎng)D.培養(yǎng)基中是否補充血清對癌細胞的培養(yǎng)影響不大3整理課件考點一：動物細胞培養(yǎng)1.概念：從動物有機體中取出相關的組織，將它分散成

，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細胞生長和增殖。2.動物細胞培養(yǎng)的條件：①無菌、無毒的環(huán)境(無菌處理：)②營養(yǎng)〔加等〕③溫度和pH〔36.5、7.2—7.4〕④氣體環(huán)境〔〕單個細胞抗生素動物血清O2和CO24整理課件3.過程取動物組織塊胰蛋白酶或膠原蛋白酶剪碎單個細胞配制細胞懸浮液細胞貼壁原代培養(yǎng)分瓶培養(yǎng)傳代培養(yǎng)10~50代細胞細胞核型發(fā)生變化有癌變特點獲得不死性接觸抑制5整理課件4.動物細胞培養(yǎng)技術的應用：⑴生產有價值的蛋白質制品〔如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體〕⑵培養(yǎng)基因工程的受體細胞⑶檢測有毒物質⑷用于生理、病理、藥理等研究6整理課件5.植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)的比較比較工程原理培養(yǎng)基性質培養(yǎng)基特有成分培養(yǎng)結果培養(yǎng)目的植物組織培養(yǎng)細胞的全能性固體培養(yǎng)基蔗糖、植物激素植物體快速繁殖培育無病毒植株等動物細胞培養(yǎng)細胞增殖液體培養(yǎng)基葡萄糖、動物血清細胞群體獲得細胞或細胞產物等相同點：①無菌無毒條件②合成培養(yǎng)基③適宜的溫度和PH7整理課件考點二：動物體細胞核移植

技術和克隆動物1、動物核移植的概念：動物核移植是將動物的一個細胞的細胞核，移如入一個已經去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育為動物個體?！部寺游铩?、動物核移植的類型：體細胞核移植〔難度高〕受體細胞：胚胎細胞核移植MⅡ期的卵母細胞8整理課件3、動物核移植的過程：高產奶牛（供體）從屠宰場收集牛卵巢，采集卵母細胞，在體外培養(yǎng)到減數第二次分裂中期MⅡ期卵母細胞用物理或化學方法〔如電脈沖、鈣離子載體、乙醇、蛋白酶合成抑制劑等〕激活受體細胞，使其完成減數分裂和發(fā)育進程生出與供體奶牛遺傳根底相同的犢牛將胚胎移入受體（代孕）母牛體內從供體高產奶牛身體的某一部位〔如耳〕上取體細胞〔供體〕去核的卵母細胞9整理課件核移植“多莉羊〞的誕生早期胚胎培養(yǎng)胚胎移植蘇格蘭黑面母羊芬蘭白面母羊去核卵細胞卵核乳腺細胞早期胚胎電脈沖融合核10整理課件4、體細胞核移植技術的應用前景〔1〕改進動物品種〔2〕保護瀕危動物〔3〕克隆動物作為生物反響器，生產醫(yī)用蛋白〔4〕治療人類疾病，作為異種移植的供體5、體細胞核移植技術存在的問題：a.成功率非常低b.絕大多數克隆動物存在健康問題c.對克隆動物食品的平安性問題也存在爭議11整理課件例：現有A和B兩個肉牛品種，A品種牛的細胞組成可表示為A細胞核、A細胞質，B品種牛那么為B細胞核、B細胞質?！?〕如果要獲得一頭克隆牛，使其細胞由A細胞核和B細胞質組成，根本步驟是，從A品種牛體內取出體細胞，進行體外培養(yǎng)。然后再從培養(yǎng)細胞中取出_______注入B品種牛的_____卵母細胞，經過刺激和培養(yǎng)后，可形成胚胎，該胚胎被稱為_______，將該胚胎移入代孕母牛的______中，通過培育可到達目的。細胞核去核重組胚胎子宮12整理課件〔2〕一般來說，要想大量獲得這種克隆牛比較難，原因之一是卵母細胞的數量______，為解決這一問題，可以用______激素處理B品種母牛?！?〕克隆牛的產生說明具有全能性?？寺∨５男誀钪饕憩F品種牛的特征。由A、B兩品種雜交得到的牛與克隆牛相比，雜交牛細胞核的遺傳物質來自______個親本，細胞質來自______性親本，克隆牛和雜交牛的遺傳物質組成______〔相同，不同〕。缺乏促性腺A兩雌不同動物體細胞核13整理課件考點三：動物細胞融合1、概念：指兩個或多個動物細胞結合形成一個細胞的過程。2、結果：形成雜交細胞3、原理：細胞膜的流動性4、誘導融合方法物理法：離心、振動、電激化學法：聚乙二醇〔PEG)生物法：滅活的病毒14整理課件5、過程不同DNA的滅活的病毒融合有絲分裂兩個完整的有絲分裂15整理課件6、意義：〔1〕突破了有性雜交方法的局限，使遠緣雜交〔種間、屬間、科間、動植物之間〕成為可能?！?〕成為研究細胞遺傳、細胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段〔3〕特別是利用雜交瘤技術制造單克隆抗體。16整理課件7、植物體細胞雜交和動物細胞融合的比較比較工程原理植物體細胞雜交動物細胞融合融合前的處理用途誘導融合方法細胞的全能性細胞膜的流動性細胞膜的流動性(酶解法)使細胞形成單個細胞去掉細胞壁分離出原生質體（同左）滅活的病毒物理（離心、振動、電刺激）化學（聚乙二醇）主要用于制備單克隆抗體獲得雜種植株17整理課件例1:右圖為細胞融合的簡略過程，請據圖答復：〔1〕假設A、B是動物細胞，一般自，然后用，使其分散開來，A、B到C的過程中，常用的不用于植物細胞的手段是，所形成的D稱為。動物胚胎或幼齡動物的組織、器官雜種細胞胰蛋白酶滅活的病毒誘導〔2〕假設該過程是制備單克隆抗體，A為小鼠B淋巴細胞，那么，在獲得此細胞之前，小鼠已被注射了。注射后小鼠身體產生了相應的生成了。圖中的B是。骨髓瘤細胞抗原免疫反響漿細胞、抗體、記憶細胞18整理課件〔3〕假設該過程仍是制備單克隆抗體，在A、B到C的過程中，所形成的C有種，用來培養(yǎng)的D的細胞應該是。從中選擇出它的方法是培養(yǎng)，獲得D后，常用的培養(yǎng)方法是體外培養(yǎng)液中培養(yǎng)和。小鼠腹腔增殖3雜交瘤細胞用特定的選擇培養(yǎng)基19整理課件考點四：單克隆抗體1、傳統(tǒng)的抗體制備方法及問題：反復注射X先把抗原做成乳劑小鼠體內有多種B淋巴細胞可分泌不同抗體-a-b-c-d-a-b-c-d缺乏：產量低、純度低、特異性差20整理課件2、單克隆抗體的概念單個B細胞通過無性繁殖形成的細胞群分泌的化學性質單一、特異性強的抗體。3.單克隆抗體的應用：單克隆抗體的優(yōu)點：〔1〕作為診斷試劑：優(yōu)點：準確、高效、簡易、快速。〔2〕用于運載藥物：制成“生物導彈”治療疾?。褐饕糜诎┌Y治療既不損傷正常細胞，又減少了用藥劑量特異性強、靈敏度高、產量大。21整理課件4、制備過程思考：將抗原注射到老鼠體內的目的，兩次篩選的目的？22整理課件例2:制備單克隆抗體所采用的細胞工程技術包括①細胞培養(yǎng)②細胞融合③胚胎移植④細胞核移植A．①②B．①③C．②③D．③④例3：利用細胞工程方法，以SARS病毒核衣殼蛋白為抗原制備出單克隆抗體。以下相關表達正確的選項是A.用純化的核衣殼蛋白反復注射到小鼠體內，產生的血清抗體為單克隆抗體B.體外培養(yǎng)單個效應B細胞可以獲得大量針對SARS病毒的單克隆抗體C.將等量效應B細胞和骨髓瘤細胞混合，經PEG誘導融合后的細胞均為雜交瘤細胞D.利用該單克隆抗體與SARS病毒核衣殼蛋白特異性結合的方法可診斷出病毒感染者23整理課件例4：以下圖表示用生物工程制備人抗A抗體的過程。請答復以下問題:〔1〕人的紅細胞膜外表有被稱為凝集原的特異_____，從免疫學角度看，這種凝集原是_____。糖蛋白抗原〔2〕圖中細胞中1是小鼠體內注入人A型血紅細胞后而獲得的_____細胞，這種細胞具有產生_____的特點，但難以在體外培養(yǎng)。甲培養(yǎng)皿中培養(yǎng)的細胞2，是從患骨髓瘤的小鼠體內獲取的骨髓瘤細胞，這種細胞在體外培養(yǎng)時能____，但不會產生抗體。漿特異性抗體快速大量增殖24整理課件〔3〕為了能充分發(fā)揮上述兩種細胞各自的特點，經特殊處理，在促細胞融合因子的作用下，使兩種細胞發(fā)生融合，形成圖中的細胞3，這種細胞稱為