水提物對(duì)蠶體和絲腺發(fā)育的抗炎作用

水提物對(duì)蠶體和絲腺發(fā)育的抗炎作用

赤井等人用親水性激素（jha）處理了5度蠶和幼蠶。研究發(fā)現(xiàn)，它可以提高蠶的重量、繭的重量和絲的蛋白質(zhì)的合成能力。大多數(shù)報(bào)告都提到了增加繭和絲綢的效果。但因其又能促使齡期延長(zhǎng)、飼料食下量增多,故對(duì)其究竟能否提高葉絲轉(zhuǎn)化率,至今尚無定論。蠶的繭絲生產(chǎn)和飼料營(yíng)養(yǎng)的攝取有著密切關(guān)系,故欲探明JHA與葉絲轉(zhuǎn)化率的關(guān)系,有必要詳細(xì)調(diào)查蠶對(duì)飼料的攝取、消化、吸收及其與體重、繭重和繭絲產(chǎn)量關(guān)系等等。本試驗(yàn),以對(duì)JHA敏感的多絲量一代雜種為材料,為避免葉質(zhì)差異的影響,全齡以具一定營(yíng)養(yǎng)條件的人工飼料飼育,用JHA體表涂布處理進(jìn)行了研究,現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。美國氏族蠶體的采集一、供試蠶品種中140×日140,試驗(yàn)全部用雌蠶。二、飼育條件全齡飼育在25℃、自然光照條件下。人工飼料(一齡用silkmate。1M,二至五齡用silkmate.3M,農(nóng)產(chǎn)工制)一日一回育。三、JHA處理方法用methoprene(大塚化學(xué)藥品株式會(huì)社制)的原液配成250倍液(內(nèi)含有效成分5μg/ml)和500倍液(2.5μg/ml),用毛筆蘸藥液連續(xù)涂布蠶體2次,每次0.25ml,處理時(shí)間,三、四齡蠶在餉食后48小時(shí)處理,五齡為72小時(shí)。設(shè)區(qū)分三、四、五齡連續(xù)涂布區(qū),四、五齡連續(xù)涂布區(qū),五齡涂布區(qū)及用清水涂布的對(duì)照區(qū),每區(qū)20頭蠶,設(shè)2個(gè)重復(fù)區(qū)。四、皂角苷(saponin)添食法將人工飼料調(diào)制成每克干物內(nèi)含皂角苷15mg的飼料,經(jīng)口添食。五、硫堇(thionine)對(duì)絲腺活體染色按竹下、重松(1975)的方法,將蠶用水浸漬麻醉后,以微量注射器給每頭蠶注入(經(jīng)口腔)0.1%的硫堇50μl。六、蠶體重及繭重、繭層重的測(cè)定蠶體重從起蠶開始,每隔24小時(shí)調(diào)查1次,每次10頭,逐頭稱重,連測(cè)2次,取平均值。繭重、繭層重在上蔟后第8日測(cè)定,方法與體重相同。七、消化試驗(yàn)用常規(guī)重量法測(cè)定,調(diào)查飼料干物食下量、消化量和消化率。結(jié)果與分析一、齡及四齡期各齡用jha處理對(duì)成蟲體重的影響JHA有使桑蠶幼蟲延緩發(fā)育、延長(zhǎng)經(jīng)過和體重增加的作用。從試驗(yàn)的3組9區(qū)比較結(jié)果(圖1)可見,處理區(qū)的五齡期經(jīng)過均顯著長(zhǎng)于對(duì)照區(qū),高濃度區(qū)又長(zhǎng)于低濃度區(qū)。三至五齡和四至五齡連續(xù)處理區(qū)及五齡高濃度區(qū)比對(duì)照區(qū)延長(zhǎng)34小時(shí),五齡高濃度區(qū)較低濃度區(qū)延長(zhǎng)12小時(shí)。試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),在五齡期前三、四齡JHA處理區(qū)與對(duì)照區(qū)之間的發(fā)育速度基本一致,體重也近似,其三齡和四齡期的攝食時(shí)間均分別為76小時(shí)和98小時(shí)左右,其五齡起蠶體重為0.840g/頭左右,各區(qū)同時(shí)餉食。這說明,在五齡前各齡用JHA處理,對(duì)當(dāng)齡幼蟲的經(jīng)過沒有多大影響。幼蟲的生長(zhǎng)量與發(fā)育經(jīng)過相關(guān)連,一般經(jīng)過時(shí)間長(zhǎng)者體重也重,對(duì)照區(qū)的最大體重每頭平均為3.993—4.124g,處理區(qū)達(dá)4.304—4.984g,而最大體重的出現(xiàn)時(shí)間,較對(duì)照區(qū)約遲1—2日。熟蠶體重三至五齡組和四至五齡組均是500倍區(qū)>250倍區(qū)>對(duì)照區(qū),而五齡區(qū)則是250倍區(qū)>500倍區(qū)>對(duì)照區(qū)。并發(fā)現(xiàn)JHA處理后,體重生長(zhǎng)量有暫時(shí)下降低于對(duì)照區(qū)的情況,約在48小時(shí)左右回升并開始超過對(duì)照區(qū)。絲腺的生長(zhǎng),在五齡第6日前生長(zhǎng)量低于同期對(duì)照,但到延長(zhǎng)齡期的1—2日內(nèi)增加明顯(見圖2)。二、絲量增重顯著試驗(yàn)結(jié)果表明,JHA對(duì)繭絲量有顯著影響,處理區(qū)的繭重高于對(duì)照區(qū)23—47%,繭層重高于對(duì)照區(qū)13—35%。但繭層率則相反降低了18—4%(見表1),這說明JHA的增繭作用,主要是使蛹體生長(zhǎng)量增大,繭絲量的增加還不及蛹體增重顯著。從化蛹率看,連續(xù)處理區(qū)和高濃度區(qū)化蛹率低,而半化蛹率高,并在高濃度區(qū)發(fā)現(xiàn)有畸形蛹和永久幼蟲(圖略),永久幼蟲吐少量絲后,約經(jīng)10余日自然死亡。為探明JHA對(duì)絲腺內(nèi)絲素合成和轉(zhuǎn)移速度的影響,JHA處理前,在五齡第4日用苯基噻嗪(phenothiazine)類的硫堇經(jīng)口注入,觀察絲腺活體染色的消長(zhǎng)情況,每24小時(shí)解剖觀察1次,其染色狀況見圖3。絲素從絲腺后部向中部移動(dòng),在絲腺內(nèi)色素和絲素結(jié)合,JHA的作用使絲素由后部絲腺向中部絲腺的移動(dòng)延遲。中部絲腺的染色狀況是處理區(qū)的48小時(shí)相當(dāng)于對(duì)照區(qū)的24小時(shí),直至第8日,始終比對(duì)照區(qū)遲1日。這一情況與蠶體重量的變化相一致。三、家蠶食下量減少的可能性從五齡第4日經(jīng)口添食JHA后,添食區(qū)的食下量和消化量均比對(duì)照區(qū)低,第6日后處理區(qū)的食下量和消化量明顯地提高,消化率也有提高的傾向(見圖4、5)。由于JHA添食區(qū)經(jīng)過延長(zhǎng),食下量和消化量的積算干物量均高于對(duì)照區(qū),平均消化率也有提高的傾向,特別是250倍區(qū)更明顯(見表2)。添食或在體表涂布JHA后的五齡期延長(zhǎng),是否由食下量減少而引起?為解開這一疑竇,用可阻礙家蠶攝食的皂角苷加入人工飼料內(nèi)作添食試驗(yàn),查證食下量下降與生長(zhǎng)發(fā)育和繭產(chǎn)量的關(guān)系。以五齡雄蠶在第3—5日與JHA—樣添食皂角苷結(jié)果從添食起直至熟蠶,體重一直比同時(shí)期對(duì)照區(qū)低,經(jīng)過則延長(zhǎng)了1日(見圖6),而食下量和消化量并不因經(jīng)過延長(zhǎng)而增加,累計(jì)干物食下量和消化量均低于對(duì)照(見圖7)。添食皂角苷對(duì)全繭量、繭層量、繭層率的影響與JHA也不同,對(duì)照區(qū)繭重、繭層重、繭層率分別為1.294g、0.342g、26.4%;皂角苷添食區(qū)則為1.173g、0.307g、26.2%。由此可見,皂角苷的作用與JHA的作用全然不同。皂角苷只是阻礙食物的食下和消化,從而因營(yíng)養(yǎng)不足而使經(jīng)過延長(zhǎng),故累計(jì)食下量、消化量均較對(duì)照低,最后體重也輕;JHA是生理活性物質(zhì),因?qū)πQ體生理的調(diào)節(jié)而暫時(shí)出現(xiàn)的食下量、消化量減少、體重增長(zhǎng)緩慢,而以后能很快恢復(fù),并使累計(jì)食下量、消化量和最后體重超過對(duì)照。四、jha對(duì)蠶絲飼料效率與蝶飼料效率的影響為調(diào)查所食下的飼料轉(zhuǎn)化成繭絲的效率,分別進(jìn)行了飼料效率和轉(zhuǎn)換效率的研討,以下式處理數(shù)據(jù),并將結(jié)果列于表3。表4說明,經(jīng)JHA處理的蠶繭飼料效率與繭層飼料效率均有提高(4—5齡區(qū)不明顯)。其中蠶繭飼料效率除五齡期外,其他連續(xù)處理區(qū)均是低濃度區(qū)略高。而繭層的飼料效率則相反,高濃度區(qū)略高于低濃度區(qū)。從轉(zhuǎn)換效率看,繭重的轉(zhuǎn)換效率處理區(qū)高于對(duì)照區(qū),而繭層重的轉(zhuǎn)換效率,除三至五齡的500倍處理區(qū)稍高外,均是處理區(qū)低于對(duì)照區(qū)。jha的染色作用本試驗(yàn)結(jié)果表明,以JHA處理家蠶幼蟲,能抑制其發(fā)育,使齡期經(jīng)過延長(zhǎng),高濃度又比低濃度處理顯著。但是,這種經(jīng)過延長(zhǎng)只在五齡期明顯地表現(xiàn)出來,在第三、四齡處理時(shí),當(dāng)齡經(jīng)過并不延長(zhǎng),這與筆者1980年的研究結(jié)果相一致。其原因,可能是五齡期前家蠶咽側(cè)體分泌內(nèi)源性保幼激素機(jī)能旺盛,掩蓋了外源JHA的作用,至五齡期咽側(cè)體機(jī)能隨發(fā)育經(jīng)過衰退,在五齡中期后甚至停止分泌JH,外源JHA才開始顯示其作用。本試驗(yàn)還發(fā)現(xiàn)JHA處理后1—2日內(nèi),體重比同時(shí)期的對(duì)照區(qū)輕,約處理48小時(shí),才開始接近并逐漸超過對(duì)照區(qū),最后體重也是處理區(qū)重。用硫堇對(duì)絲腺活體染色看到,被染色的絲素在中部絲腺內(nèi)移動(dòng)的相對(duì)距離,處理區(qū)比對(duì)照區(qū)約遲1日,這說明JHA對(duì)蠶體和絲腺的發(fā)育和合成代謝過程均具有延緩作用。關(guān)于JHA導(dǎo)致幼蟲發(fā)育經(jīng)過延遲,體重暫時(shí)下降的原因,本試驗(yàn)用皂角苷添食表明,角苷的作用只是阻害家蠶攝食,使飼料食下量減少,因營(yíng)養(yǎng)缺乏而使經(jīng)過延長(zhǎng),其體重、絲腺重始終低于對(duì)照,累計(jì)食下量和消化量也較對(duì)照區(qū)少。而JHA作用模式完全不同,只是在處理后一定時(shí)間內(nèi)食下量、消化量和體重下降,以后能恢復(fù)并超過對(duì)照。筆者認(rèn)為,JHA是通過影響蠶體內(nèi)源激素的平衡而起作用的。曹梅訊等(1983)用JHA處理五齡第3—5日家蠶幼蟲,發(fā)現(xiàn)能使前胸腺所分泌蛻皮激素滴度峰出現(xiàn)的時(shí)間,比對(duì)照區(qū)延遲1—2日,與本試驗(yàn)區(qū)較對(duì)照區(qū)五齡經(jīng)過延長(zhǎng)1—2日正相吻合。又據(jù)資料記載JHA處理后,發(fā)現(xiàn)腸液蛋白酶、淀粉酶的活性暫時(shí)低于對(duì)照區(qū),后部絲腺細(xì)胞中RNA的含量也暫時(shí)減少,而以后又迅速回升,乃至超過對(duì)照。這可能是JHA處理后對(duì)食下量、消化量、體重和絲腺重暫時(shí)下降,最后超過對(duì)照區(qū)的真正原因,本試驗(yàn)證明,JHA處理家蠶幼蟲確有一定增產(chǎn)繭絲效果。從飼料效率角度看,這種增產(chǎn)主要是由于延長(zhǎng)了五齡期經(jīng)過時(shí)間,增加了家蠶的飼料食下量,并且食下量對(duì)繭重和繭層重的飼料轉(zhuǎn)化效率亦有提高(表4)。相反,繭層重的轉(zhuǎn)換效率除三至五齡500倍處理區(qū)外,其他均顯著低于對(duì)照區(qū)。這是因?yàn)?JHA處理后較大程度上提高了消化率,增加了消化量(表2),所以對(duì)