丙泊酚通過(guò)調(diào)節(jié)TLR4ROSNF-κB信號(hào)通路抑制肥大細(xì)胞依賴型哮喘小鼠氣道炎癥的研究

丙泊酚通過(guò)調(diào)節(jié)TLR4/ROS/NF-κB信號(hào)通路抑制肥大細(xì)胞依賴型哮喘小鼠氣道炎癥的研究研究目的哮喘是一種呼吸道慢性炎癥疾病,其主要病理特點(diǎn)是氣道高反應(yīng)性伴可逆性氣流阻塞,氣道粘液分泌增加以及嗜酸性粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞、T細(xì)胞等炎性細(xì)胞參與的氣道慢性炎癥反應(yīng)。麻醉過(guò)程中嚴(yán)重的哮喘發(fā)作會(huì)引起支氣管痙攣,導(dǎo)致通氣困難甚至低氧血癥,嚴(yán)重威脅到患者的生命安全。丙泊酚是一種廣泛應(yīng)用于臨床的靜脈麻醉藥物其抗炎作用受到廣泛關(guān)注。在感染或缺血再灌注引起器官炎癥損傷的研究中發(fā)現(xiàn)丙泊酚的抗炎作用與調(diào)節(jié)Toll樣受體4(toll-likereceptor4,TLR4)和核轉(zhuǎn)錄因子(nuclearfactor-kappaB,NF-κB)相關(guān)信號(hào)通路,減少細(xì)胞內(nèi)活性氧(reactiveoxygenspecies,ROS)減輕氧化應(yīng)激有關(guān)。而丙泊酚對(duì)肥大細(xì)胞依賴型哮喘有何影響目前尚不清楚。研究表明激活肥大細(xì)胞表面的TLR4及其適配子髓樣分化因子88(myeloiddifferentiationfactor88,MyD88)后能引起胞內(nèi)ROS增加,激活NF-κB,最終促進(jìn)肥大細(xì)胞分泌Th2型細(xì)胞因子,加重過(guò)敏性哮喘。綜上所述,本研究擬通過(guò)建立肥大細(xì)胞依賴型哮喘模型并在哮喘激發(fā)階段使用丙泊酚干預(yù),觀察丙泊酚對(duì)肥大細(xì)胞依賴型哮喘氣道炎癥的影響;并對(duì)TLR4/MyD88/ROS/NF-κB信號(hào)通路中相關(guān)分子進(jìn)行檢測(cè),進(jìn)一步探討丙泊酚減輕肥大細(xì)胞依賴型哮喘炎癥的機(jī)制。研究方法雌性BALB/c小鼠,6～8周齡,體重20～25g采用隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為①正常對(duì)照組(PBS):致敏及激發(fā)均使用磷酸緩沖鹽溶液(phosphatebuffersaline,PBS);②哮喘組(OVA):小鼠致敏及激發(fā)均使用卵清蛋白(ovalbumin,OVA);③丙泊酚處理組(OVA+PPF):小鼠在OVA激發(fā)前30min腹腔注射丙泊酚(propofol,PPF)100mg/kg;④脂肪乳處理組(OVA+LIP):小鼠在OVA激發(fā)前30min腹腔注射脂肪乳(intralipid,LIP)100mg/kg。分別于第1、3、5、7天給予小鼠腹腔注射50ugOVA致敏,并于第22、25、28天進(jìn)行OVA滴鼻激發(fā)哮喘反應(yīng)。于第29天處死小鼠取肺泡灌洗液(bronchoalveolarlavagefluid,BALF)用于細(xì)胞分類計(jì)數(shù)及細(xì)胞因子檢測(cè)。取右肺組織用于蛋白質(zhì)檢測(cè),左肺用于組織病理染色。實(shí)驗(yàn)結(jié)果與正常對(duì)照組相比,哮喘組小鼠BALF中嗜酸性粒細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞都顯著增多,細(xì)胞因子IL-4、IL-5、IL-6、IL-13和TNF-α分泌水平顯著升高,支氣管周圍、血管周圍間隙炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)顯著增加,炎癥評(píng)分顯著增高,支氣管內(nèi)杯狀細(xì)胞增生、PAS評(píng)分顯著增高。丙泊酚處理組與哮喘組相比,BALF中炎癥細(xì)胞數(shù)量、細(xì)胞因子水平明顯降低,氣道炎癥評(píng)分及PAS評(píng)分也明顯下降。與正常對(duì)照組相比,哮喘組小鼠肺組織中TILR4和MyD88表達(dá)顯著增加,H2O2和MDA顯著增高,SOD水平明顯降低;I-κBα表達(dá)明顯減少,p-I-κBα及p-NF-κBp65表達(dá)明顯增多。丙泊酚處理組與哮喘組相比,TLR4和MyD88表達(dá)明顯下降H2O2和MDA明顯減少,SOD水平升高;I-κBα表達(dá)明顯增多,p-I-κBα及p-NF-κBp65表達(dá)明顯減少。結(jié)論1.丙泊酚可以減輕肥大細(xì)胞依賴型哮喘小鼠的氣道炎癥反應(yīng)。2.TLR4/MyD88/ROS/NF-κB信號(hào)通路參與肥大細(xì)胞依賴型哮喘小鼠的氣道炎癥反應(yīng)。3.丙泊酚抑制TLR4/MyD88/ROS/NF-κB信號(hào)通路可能是其減輕肥大細(xì)胞依賴型哮喘小鼠氣道炎癥的機(jī)制。研究目的盡管呼氣末二氧化碳監(jiān)測(cè)能實(shí)時(shí)反映患者通氣狀態(tài),及時(shí)發(fā)現(xiàn)呼吸暫停、呼吸抑制等異常。但對(duì)于將呼末二氧化碳監(jiān)測(cè)普遍應(yīng)用于胃腸鏡檢查的鎮(zhèn)靜中仍存在較大爭(zhēng)議。本研究擬通過(guò)meta分析的方法,評(píng)價(jià)呼末二氧化碳監(jiān)測(cè)對(duì)減少胃腸鏡檢查的鎮(zhèn)靜中低氧血癥、嚴(yán)重低氧血癥及其它麻醉相關(guān)不良事件的有效性,來(lái)探討胃腸鏡檢查的鎮(zhèn)靜中加用呼氣末二氧化碳檢測(cè)是否對(duì)患者預(yù)后有益。研究方法檢索OvidMedline、EMBASE、CochraneLibrary數(shù)據(jù)庫(kù)。納入比較胃腸鏡檢查的鎮(zhèn)靜中標(biāo)準(zhǔn)監(jiān)測(cè)與加用呼末二氧化碳監(jiān)測(cè)對(duì)麻醉相關(guān)并發(fā)癥影響的隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)。依據(jù)Cochrane系統(tǒng)評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)納入文章進(jìn)行偏倚評(píng)價(jià)。以低氧血癥和嚴(yán)重低氧血癥為主要結(jié)局指標(biāo)。根據(jù)異質(zhì)性大小使用固定效應(yīng)模型或隨機(jī)效應(yīng)模型,以相對(duì)危險(xiǎn)度(relativerisks,RR)±95%CI報(bào)告結(jié)果。研究結(jié)果一共納入五篇文獻(xiàn)共計(jì)2227名患者。結(jié)果發(fā)現(xiàn)與標(biāo)準(zhǔn)監(jiān)測(cè)相比,加用呼末二氧化碳監(jiān)測(cè)可以顯著降低低氧血癥發(fā)生率(RR0.76;95%CI0.63-0.91;P=0.003,戶=64%)和嚴(yán)重低氧血癥發(fā)生率(RR0.63;95%CI0.44^0.90;P=0.01,J2=55%)。在亞組分析中發(fā)現(xiàn),在胃腸鏡操作時(shí)間≥30min的研究中,加用呼末二氧化碳監(jiān)測(cè)對(duì)減少低氧血癥(RR0.65;95%CI0.56~0.75;P<0.001；I~2=3%)效果更明顯。呼末二氧化碳監(jiān)測(cè)可以發(fā)現(xiàn)更多的呼吸暫停(RR17.02;95%Cl6.90~41.9