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第2課時(shí)動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)與單克隆抗體課前自主預(yù)習(xí)案課堂互動(dòng)探究案課前自主預(yù)習(xí)案知識(shí)梳理·填準(zhǔn)記牢——自主·預(yù)習(xí)·先知知識(shí)點(diǎn)一動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)1.概念使____________________結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的技術(shù)。2.誘導(dǎo)原理和結(jié)果(1)誘導(dǎo)原理:________________。(2)誘導(dǎo)結(jié)果:形成________細(xì)胞。3.誘導(dǎo)方法:____________法、電融合法和____________法等。兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞細(xì)胞膜的流動(dòng)性雜交PEG融合滅活病毒誘導(dǎo)4.意義:突破了_________的局限,使_________成為可能。5.動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)的應(yīng)用(1)成為研究__________、__________、腫瘤和培育生物新品種等的重要手段。(2)用于制備____________。有性雜交遠(yuǎn)緣雜交細(xì)胞遺傳細(xì)胞免疫單克隆抗體知識(shí)點(diǎn)二單克隆抗體及其應(yīng)用1.制備原理(1)B淋巴細(xì)胞的特點(diǎn):一種B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體。(2)骨髓瘤細(xì)胞的特點(diǎn):能在體外大量________。(3)雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn):B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合得到的雜交瘤細(xì)胞,既能__________又能產(chǎn)生大量__________。增殖無限增殖特定抗體2.制備過程骨髓瘤雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生所需抗體3.單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)能準(zhǔn)確地識(shí)別______________,與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合,并且可以_________。4.單克隆抗體的應(yīng)用(1)作為________,具有準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速的優(yōu)點(diǎn)。(2)用于________和__________??乖募?xì)微差異大量制備診斷試劑治療疾病運(yùn)載藥物知識(shí)應(yīng)用·強(qiáng)化落實(shí)——效果·檢測(cè)·定向判斷對(duì)錯(cuò)(正確的打“√”,錯(cuò)誤的打“×”)1.動(dòng)物細(xì)胞融合過程中既有細(xì)胞膜融合也有核的融合。 (
)2.與植物原生質(zhì)體融合相比,動(dòng)物細(xì)胞融合特有的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇、滅活的病毒。 (
)3.用特定的抗原對(duì)小鼠進(jìn)行免疫后,從小鼠脾臟中只能得到一種B淋巴細(xì)胞。 (
)√×
提示:動(dòng)物細(xì)胞融合特有的誘導(dǎo)因素為滅活的病毒?!?/p>
提示:免疫后的小鼠從脾臟中獲取的是多種B淋巴細(xì)胞。4.單克隆抗體是單個(gè)B淋巴細(xì)胞增殖并產(chǎn)生的抗體。 (
)5.單克隆抗體制備過程中的兩次篩選目的相同。 (
)6.動(dòng)物細(xì)胞融合的結(jié)果是形成單核的雜種細(xì)胞,植物體細(xì)胞雜交的結(jié)果是得到雜種植株。(
)×
提示:?jiǎn)慰寺】贵w是雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的抗體?!?/p>
提示:第一次篩選的目的是獲得雜交瘤細(xì)胞,而第二次篩選是為了獲得能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。√7.雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)可以采取體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)兩種方式。(
)8.單克隆抗體制備過程中,需要進(jìn)行多次細(xì)胞培養(yǎng),如骨髓瘤細(xì)胞的培養(yǎng)、不同雜交細(xì)胞的培養(yǎng)、雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)等。(
)9.單克隆抗體由于特異性和導(dǎo)向性強(qiáng)而被譽(yù)為“生物導(dǎo)彈”。(
)√√×
提示:利用單克隆抗體的導(dǎo)向性強(qiáng)的特點(diǎn),將抗癌藥物連接在單克隆抗體上,形成生物導(dǎo)彈。課堂互動(dòng)探究案課程標(biāo)準(zhǔn)1.闡明動(dòng)物細(xì)胞融合是指通過物理、化學(xué)或生物學(xué)等手段,使兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程。2.概述細(xì)胞融合技術(shù)是單克隆抗體制備的重要技術(shù)。
素養(yǎng)達(dá)成1.以細(xì)胞結(jié)構(gòu)與功能為基礎(chǔ),理解動(dòng)物細(xì)胞融合的內(nèi)涵。(生命觀念)2.結(jié)合具體實(shí)例,以流程圖的形式表示單克隆抗體的制備過程。(科學(xué)思維)3.說明單克隆抗體的特點(diǎn)及應(yīng)用。(社會(huì)責(zé)任)設(shè)疑激趣新冠肺炎治療征集康復(fù)患者捐獻(xiàn)血漿用于重癥患者治療的目的是什么?如何提高血漿中新冠肺炎治療抗體的產(chǎn)量?夯基提能·分層突破——互動(dòng)·探究·智涂學(xué)習(xí)主題一動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)活動(dòng)1閱讀教材P48內(nèi)容,思考回答下列問題:1.動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合所依據(jù)的原理是什么?
2.動(dòng)物細(xì)胞完成融合的標(biāo)志是什么?
提示:細(xì)胞膜的流動(dòng)性。提示:動(dòng)物細(xì)胞融合時(shí),先是細(xì)胞膜發(fā)生融合,然后是細(xì)胞核的融合。當(dāng)兩個(gè)細(xì)胞核融合后形成具有單核的雜交細(xì)胞,則標(biāo)志著動(dòng)物細(xì)胞融合的完成。3.比較動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交所用的促融方法有何異同。
4.什么是滅活?滅活病毒誘導(dǎo)融合的原理是什么?
提示:二者都可以采用電融合法、離心法等物理方法,或者使用聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2+—高pH融合法等化學(xué)方法進(jìn)行促融,除上述方法外,動(dòng)物細(xì)胞融合還可以采用滅活的病毒進(jìn)行促融。提示:滅活是指用物理或化學(xué)手段使病毒或細(xì)菌失去感染能力,但是并不破壞這些病原體的抗原結(jié)構(gòu)。滅活病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合的原理是病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用,使細(xì)胞互相凝聚,細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布,細(xì)胞膜打開,細(xì)胞發(fā)生融合。5.融合后的細(xì)胞能否直接使用,為什么?
6.不滅活的病毒能否作為誘導(dǎo)劑?
提示:不可以,還需要進(jìn)一步篩選。因?yàn)檎T導(dǎo)融合后形成的融合細(xì)胞有多種,需要篩選出所需要的雜交細(xì)胞。提示:不能。用病毒作為誘導(dǎo)劑時(shí),必須事先滅活,使病毒失去感染和增殖能力,但不破壞病毒的抗原結(jié)構(gòu),而不滅活的病毒會(huì)感染細(xì)胞?;顒?dòng)2結(jié)合下面動(dòng)物細(xì)胞融合的過程,探究下列問題:1.融合過程:細(xì)胞膜融合→細(xì)胞質(zhì)融合→________融合。2.細(xì)胞膜融合的過程體現(xiàn)出細(xì)胞膜具有____________。3.融合后重組細(xì)胞的特點(diǎn):融合形成的雜種細(xì)胞具有兩種細(xì)胞的遺傳信息,通過動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),雜種細(xì)胞表現(xiàn)出兩個(gè)__________的特點(diǎn)。細(xì)胞核一定的流動(dòng)性親本細(xì)胞[易錯(cuò)警示]病毒在生物技術(shù)中的應(yīng)用(1)滅活的病毒能作為誘導(dǎo)劑,不滅活的病毒不能作為誘導(dǎo)劑。(2)病毒在不同過程或操作中的“身份”不同。在免疫調(diào)節(jié)中病毒屬于抗原;在基因工程中可作為載體;在細(xì)胞工程中可作為誘導(dǎo)劑。1.融合的原理與過程(1)原理:細(xì)胞膜的流動(dòng)性。(2)過程:動(dòng)物細(xì)胞融合的過程包括細(xì)胞膜融合、細(xì)胞質(zhì)融合和細(xì)胞核融合,其中細(xì)胞膜融合是細(xì)胞融合的先導(dǎo),在細(xì)胞膜融合中體現(xiàn)出細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性,細(xì)胞融合的實(shí)質(zhì)是核融合。動(dòng)物細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞核融合為一個(gè)細(xì)胞核。2.融合的結(jié)果形成單核雜交細(xì)胞,具有原來兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞的遺傳信息,可表現(xiàn)出兩個(gè)或多個(gè)親本細(xì)胞的特點(diǎn)。3.動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的比較比較項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合原理細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞的全能性細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞的增殖融合前處理先除去細(xì)胞壁先使細(xì)胞分散開使用的酶纖維素酶和果膠酶胰蛋白酶或膠原蛋白酶誘導(dǎo)手段物理法:電融合法、離心法化學(xué)法:PEG融合法、高Ca2+—高pH融合法除物理法和化學(xué)法外,也可用滅活的病毒誘導(dǎo)過程
結(jié)果雜種植株雜交細(xì)胞應(yīng)用培育植物新品種主要用于制備單克隆抗體意義克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙,打破了生殖隔離,擴(kuò)展了用于雜交的親本組合4.生物工程技術(shù)產(chǎn)生后代個(gè)體的遺傳物質(zhì)或基因來源(1)轉(zhuǎn)基因生物:目的基因來自外源生物,絕大多數(shù)基因來自兩個(gè)親本。(2)雜種植株:遺傳物質(zhì)來自融合的兩個(gè)親本細(xì)胞。(3)經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)獲得的動(dòng)物細(xì)胞:遺傳物質(zhì)只來自一個(gè)親本。(4)動(dòng)物細(xì)胞融合形成的雜交細(xì)胞:遺傳物質(zhì)來自融合的兩個(gè)親本細(xì)胞。(5)克隆動(dòng)物:細(xì)胞核中的遺傳物質(zhì)來自供體動(dòng)物,細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)來自提供卵母細(xì)胞的動(dòng)物個(gè)體。1.(學(xué)業(yè)水平一、二)誘導(dǎo)動(dòng)物體細(xì)胞融合的方法中,一般不用于植物的是(
)A.電刺激
B.離心C.聚乙二醇
D.病毒答案:D解析:誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合的方法包括物理法(電融合法、離心法等)和化學(xué)法(聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2+—高pH融合法等),而誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法包括物理法(電融合法、離心法等)、化學(xué)法(聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2+—高pH融合法等)和生物法(滅活的病毒)。因此,誘導(dǎo)動(dòng)物體細(xì)胞融合的方法中,一般不用于植物的是滅活的病毒。2.(學(xué)業(yè)水平一、二)植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合比較,正確的是(
)A.誘導(dǎo)融合的方法完全相同B.所用的技術(shù)手段基本相同C.所采用的原理完全相同D.都能形成雜種細(xì)胞答案:D解析:植物體細(xì)胞雜交誘導(dǎo)融合的方法有物理法和化學(xué)法,動(dòng)物細(xì)胞融合的誘導(dǎo)方法有物理法、化學(xué)法和生物法,A錯(cuò)誤;兩者所用的技術(shù)手段不相同,植物體細(xì)胞雜交還需要采用植物組織培養(yǎng)技術(shù),而動(dòng)物細(xì)胞融合不需要,B錯(cuò)誤;兩者所采用的原理不完全相同,植物體細(xì)胞雜交的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性和細(xì)胞的全能性,而動(dòng)物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性,C錯(cuò)誤;兩者都能形成雜種細(xì)胞,D正確。3.(學(xué)業(yè)水平三)下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞融合敘述錯(cuò)誤的是(
)A.指兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞融合成一個(gè)細(xì)胞的現(xiàn)象B.可以在基因型相同或不同的細(xì)胞間進(jìn)行C.動(dòng)物的體細(xì)胞融合通常伴隨一次減數(shù)分裂D.其原理是細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性答案:C解析:動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)是指使兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的技術(shù),融合后形成具有原來兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的雜交細(xì)胞,A正確;動(dòng)物細(xì)胞融合可以在基因型相同或不同的細(xì)胞間進(jìn)行,B正確;動(dòng)物的體細(xì)胞融合不涉及減數(shù)分裂,C錯(cuò)誤;由于細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性,所以通過一定的手段進(jìn)行誘導(dǎo),可使動(dòng)物細(xì)胞融合,D正確。4.(學(xué)業(yè)水平三、四,不定項(xiàng)選擇)如圖為細(xì)胞融合的示意圖,下列敘述正確的是(
)A.若a細(xì)胞和b細(xì)胞是植物細(xì)胞,需先去分化再誘導(dǎo)融合B.a細(xì)胞和b細(xì)胞之間的融合需要促融處理后才能實(shí)現(xiàn)C.c細(xì)胞的形成與a、b細(xì)胞膜的流動(dòng)性有關(guān)D.c細(xì)胞將同時(shí)表達(dá)a細(xì)胞和b細(xì)胞中的所有基因答案:BC解析:若a、b細(xì)胞為植物細(xì)胞,則需要去除細(xì)胞壁,但不需要去分化,A項(xiàng)錯(cuò)誤;兩細(xì)胞融合需要用物理法或化學(xué)法等使其融合,其融合過程體現(xiàn)了細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性,B、C項(xiàng)正確;融合后的雜交細(xì)胞中的基因仍是選擇性表達(dá),不會(huì)表達(dá)全部的基因,D項(xiàng)錯(cuò)誤。學(xué)習(xí)主題二單克隆抗體及其應(yīng)用活動(dòng)1下圖為單克隆抗體制備的流程(順序已被打亂),請(qǐng)據(jù)圖分析:1.請(qǐng)用箭頭把代表各圖解的字母按單克隆抗體制備過程的順序連接起來。
2.在單克隆抗體制備的過程中,選用B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后的雜交瘤細(xì)胞具有的特點(diǎn)是______________________。
提示:提示:既能迅速大量增殖,又能產(chǎn)生抗體3.由圖中可以看出,在單克隆抗體制備過程中運(yùn)用了____________和____________等動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)手段。4.請(qǐng)寫出圖中兩次篩選的目的:_____________________________________________________。動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)第一次篩選出雜交瘤細(xì)胞,第二次篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞5.圖中B注射的物質(zhì)是什么?其目的是什么?
6.在獲取D細(xì)胞的過程中,篩選淘汰了哪些細(xì)胞?
提示:注射特定抗原;目的是刺激機(jī)體發(fā)生免疫應(yīng)答,從而產(chǎn)生相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞。提示:未融合的細(xì)胞和同種細(xì)胞融合后形成的細(xì)胞(“BB”細(xì)胞、“瘤瘤”細(xì)胞)都會(huì)被淘汰,只有融合的雜交瘤細(xì)胞(“B瘤”細(xì)胞)才能生長(zhǎng)?;顒?dòng)2閱讀教材P49內(nèi)容,思考回答下列問題:1.為什么要對(duì)小鼠注射抗原?
2.B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞經(jīng)聚乙二醇處理后,培養(yǎng)液中存在哪幾種細(xì)胞(雜交細(xì)胞僅考慮兩兩融合)?
提示:為了獲得能產(chǎn)生相應(yīng)抗體的B淋巴細(xì)胞。提示:未融合的B淋巴細(xì)胞、未融合的骨髓瘤細(xì)胞、B—B融合細(xì)胞、瘤—瘤融合細(xì)胞、B—瘤融合細(xì)胞(雜交瘤細(xì)胞)。3.用單克隆抗體及相關(guān)物質(zhì)制成的“生物導(dǎo)彈”中真正起治療作用的物質(zhì)是什么?是單克隆抗體嗎?
4.若不采用動(dòng)物細(xì)胞融合的方法,能否生產(chǎn)出單克隆抗體?試簡(jiǎn)要說明。
提示:“生物導(dǎo)彈”中真正發(fā)揮治療作用的物質(zhì)是相關(guān)“藥物”,單克隆抗體所起的作用在于將藥物定向帶到靶細(xì)胞所在位置,借助其導(dǎo)向作用,在原位殺死癌細(xì)胞,這樣既不損傷正常細(xì)胞,又減少了用藥劑量,因此,“生物導(dǎo)彈”可作為一種療效高、毒副作用小的新型藥物。提示:能。可從經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞中獲取決定所需抗體的基因(目的基因),導(dǎo)入骨髓瘤細(xì)胞,然后培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞并從培養(yǎng)液中提取分泌物,便可得到單克隆抗體。[易錯(cuò)警示](1)除了受到注射的抗原的刺激外,小鼠在生活過程中還可能受到其他抗原的刺激,因此從小鼠體內(nèi)取出的多個(gè)B淋巴細(xì)胞可能產(chǎn)生多種不同的抗體,所以進(jìn)行第二次篩選是非常必要的。(2)可利用抗體與抗原的特異性結(jié)合原理檢測(cè)雜交瘤細(xì)胞是否產(chǎn)生了所需抗體。雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的特異性抗體是一種分泌蛋白,能夠和特定的抗原結(jié)合,產(chǎn)生特定的反應(yīng),因此可用來檢測(cè)抗體的產(chǎn)生。[知識(shí)拓展]“生物導(dǎo)彈”中真正發(fā)揮治療作用的物質(zhì)是相關(guān)藥物,單克隆抗體所起的作用在于將藥物定向帶到靶細(xì)胞所在的位置,借助其導(dǎo)向作用,在原位殺死癌細(xì)胞,這樣既不損傷正常細(xì)胞,又減少了用藥劑量,因此,“生物導(dǎo)彈”可作為一種療效高、毒副作用小的新型藥物。1.制備流程2.單克隆抗體制備過程的關(guān)鍵分析(1)對(duì)動(dòng)物免疫的原因:B淋巴細(xì)胞要經(jīng)過免疫過程,即接觸抗原,增殖分化為有特異性免疫功能的B淋巴細(xì)胞,才能產(chǎn)生相應(yīng)的抗體。(2)雜交瘤細(xì)胞具備雙親的遺傳物質(zhì),不僅具有產(chǎn)生特異性抗體的能力,還具有骨髓瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)條件下大量增殖的能力,從而可以克服單純B淋巴細(xì)胞不能無限增殖的缺點(diǎn),而大量生產(chǎn)單克隆抗體。3.已免疫的B淋巴細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞的比較細(xì)胞類型來源特點(diǎn)已免疫的B淋巴細(xì)胞由B淋巴細(xì)胞受抗原刺激后增殖、分化而來能產(chǎn)生單一抗體,但不能無限增殖骨髓瘤細(xì)胞從骨髓腫瘤中提取能無限增殖,但不能產(chǎn)生抗體雜交瘤細(xì)胞已免疫的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合而成既能產(chǎn)生抗體,又能無限增殖4.制備單克隆抗體過程中兩次篩選的方法及目的項(xiàng)目第一次篩選第二次篩選篩選原因誘導(dǎo)融合后得到多種雜交細(xì)胞,另外還有未融合的細(xì)胞由于小鼠在生活中還受到其他抗原的刺激,所以需經(jīng)過選擇性培養(yǎng)篩選方法用特定的選擇培養(yǎng)基篩選:未融合的細(xì)胞和同種細(xì)胞融合后形成的細(xì)胞(“BB”細(xì)胞、“瘤瘤”細(xì)胞)都會(huì)死亡,只有融合的雜交瘤細(xì)胞(“B瘤”細(xì)胞)才能生長(zhǎng)用多孔培養(yǎng)板培養(yǎng),在每個(gè)孔只有一個(gè)雜交瘤細(xì)胞的情況下開始克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè),經(jīng)多次篩選得到能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群篩選目的得到雜交瘤細(xì)胞得到能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞5.血清抗體與單克隆抗體的比較項(xiàng)目產(chǎn)生特點(diǎn)血清抗體由漿細(xì)胞分泌一般從血清中分離,產(chǎn)量低、純度低、特異性差單克隆抗體由雜交瘤細(xì)胞分泌特異性強(qiáng)、靈敏度高,能大量制備1.(學(xué)業(yè)水平一、二)下列關(guān)于單克隆抗體制備過程的敘述,錯(cuò)誤的是(
)A.獲得B細(xì)胞之前需給動(dòng)物注射特定的抗原B.分離出的B細(xì)胞應(yīng)與骨髓瘤細(xì)胞融合C.需要從融合的細(xì)胞中篩選出雜交瘤細(xì)胞D.得到的所有雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的抗體均相同答案:D解析:?jiǎn)慰寺】贵w制備之前,需給動(dòng)物注射特定抗原,以便獲得所需的B細(xì)胞,A正確;分離出來的B細(xì)胞應(yīng)與骨髓瘤細(xì)胞融合,B正確;B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,只考慮細(xì)胞兩兩融合,形成的融合細(xì)胞就有B細(xì)胞自身融合細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞、雜交瘤細(xì)胞,需要從中篩選出雜交瘤細(xì)胞,C正確;動(dòng)物體內(nèi)存在多種B細(xì)胞,從小鼠體內(nèi)獲得的B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合形成的雜交瘤細(xì)胞有多種,產(chǎn)生的抗體有多種,需要用相應(yīng)抗原進(jìn)行專一檢測(cè)才能得到相應(yīng)的雜交瘤細(xì)胞,D錯(cuò)誤。2.(學(xué)業(yè)水平一、二)下圖為某生物技術(shù)的操作過程,有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(
)A.甲細(xì)胞可來自經(jīng)免疫處理小鼠的脾臟中B.①中可加入乙二醇以促進(jìn)細(xì)胞融合過程C.④可置于CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)D.該技術(shù)可用于研發(fā)相應(yīng)的診斷試劑盒答案:B解析:甲細(xì)胞為經(jīng)免疫處理小鼠的脾細(xì)胞,A正確;①中可加入聚乙二醇以促進(jìn)細(xì)胞融合過程,B錯(cuò)誤;④應(yīng)置于CO2培養(yǎng)箱中以提高細(xì)胞克隆率,C正確;該技術(shù)可用于研發(fā)相應(yīng)的診斷試劑盒,D正確。3.(學(xué)業(yè)水平三、四)由單克隆抗體研制而成的“生物導(dǎo)彈”由兩部分組成,一是“瞄準(zhǔn)裝置”,二是殺傷性“彈頭”。下列對(duì)此描述,不正確的是(
)A.“瞄準(zhǔn)裝置”是由識(shí)別腫瘤的單克隆抗體構(gòu)成的B.“彈頭”是由放射性同位素、化學(xué)藥物和毒素等物質(zhì)構(gòu)成的C.“彈頭”中的藥物具有選擇性殺傷腫瘤細(xì)胞的功能D.“生物導(dǎo)彈”是利用細(xì)胞工程制備出來的答案:C解析:“生物導(dǎo)彈”對(duì)癌細(xì)胞殺傷作用的特異性由單克隆抗體即“瞄準(zhǔn)裝置”決定,“彈頭”中的藥物不具有選擇性殺傷腫瘤細(xì)胞的功能,C錯(cuò)誤。4.(學(xué)業(yè)水平三、四,不定項(xiàng)選擇)下圖為雜交瘤細(xì)胞制備的示意圖。骨髓瘤細(xì)胞由于缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(HGPRT-),在HAT篩選培養(yǎng)液中不能正常合成DNA,因而無法生長(zhǎng)。下列敘述正確的是(
)A.可用滅活的病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合B.兩兩融合的細(xì)胞都能在HAT培養(yǎng)液中生長(zhǎng)C.雜交瘤細(xì)胞需進(jìn)一步篩選才能用于生產(chǎn)D.細(xì)胞膜的流動(dòng)性是細(xì)胞融合的基礎(chǔ)答案:ACD解析:誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法有電融合法、聚乙二醇融合法、滅活的病毒(如滅活的仙臺(tái)病毒)誘導(dǎo)法等,A正確;兩兩融合的細(xì)胞包括免疫B細(xì)胞與免疫B細(xì)胞融合的具有同種核的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的具有同種核的細(xì)胞、免疫B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的雜交瘤細(xì)胞,骨髓瘤細(xì)胞雖然能無限增殖,但缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶,免疫B細(xì)胞雖然有次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶,但不具有無限增殖的本領(lǐng),所以在HAT篩選培養(yǎng)液中,兩兩融合的具有同種核的細(xì)胞都無法生長(zhǎng),只有雜交瘤細(xì)胞才能生長(zhǎng),B錯(cuò)誤;因?yàn)閺膭?dòng)物體內(nèi)獲得的免疫B細(xì)胞有多種,因此在HAT篩選培養(yǎng)液中篩選出來的眾多的雜交瘤細(xì)胞所分泌的抗體,不一定都是人類所需要的,還需要進(jìn)一步把能分泌人類所需要抗體的雜交瘤細(xì)胞篩選出來,C正確;動(dòng)物細(xì)胞融合是以細(xì)胞膜的流動(dòng)性為基礎(chǔ)的,D正確。強(qiáng)化落實(shí)·學(xué)業(yè)達(dá)標(biāo)——?dú)w納·提升·素養(yǎng)網(wǎng)絡(luò)建構(gòu)主干落實(shí)1.動(dòng)物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交,是兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程。2.動(dòng)物細(xì)胞融合常用的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇(PEG)、滅活的病毒、電融合等。3.動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)的主要用途是制備單克隆抗體。4.動(dòng)物細(xì)胞融合突破了有性雜交的局限,使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。5.雜交瘤細(xì)胞是由經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合而成的,具有既能無限增殖又能產(chǎn)生特定抗體的能力。6.傳統(tǒng)抗體的特點(diǎn)是產(chǎn)量低、純度低、特異性差。7.單克隆抗體最主要的優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng)、靈敏度高,并能大量制備。8.單克隆抗體與化學(xué)藥物結(jié)合制成“生物導(dǎo)彈”,主要用于治療癌癥,也有少量用于其他疾病的治療。9.單克隆抗體的主要用途有:作為診斷試劑、用于治療疾病和運(yùn)載藥物。高效課堂·實(shí)踐運(yùn)用——隨堂·鞏固·達(dá)標(biāo)1.動(dòng)物細(xì)胞融合的原理是(
)A.細(xì)胞膜的流動(dòng)性B.細(xì)胞膜的選擇透過性C.細(xì)胞質(zhì)的流動(dòng)性D.細(xì)胞質(zhì)酶的活性答案:A解析:細(xì)胞能融合的原理是細(xì)胞膜具有流動(dòng)性。2.將小鼠的骨髓瘤細(xì)胞與一種免疫B淋巴細(xì)胞融合,融合后的細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生單克隆抗體,其依據(jù)是(
)A.骨髓瘤細(xì)胞可以產(chǎn)生抗體,但不能無限增殖B.淋巴細(xì)胞只有與骨髓瘤細(xì)胞融合才能產(chǎn)生抗體C.骨髓瘤細(xì)胞可以無限增殖,且能產(chǎn)生抗體D.淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生抗體,但不能無限增殖,骨髓瘤細(xì)胞可以無限增殖答案:D解析:已免疫的B淋巴細(xì)胞能分泌抗體,但是在體外培養(yǎng)條件下,B淋巴細(xì)胞不能無限增殖,如果把一種已免疫的B淋巴細(xì)胞與能在體外大量增殖的骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合,所得到的融合細(xì)胞就能大量增殖,并產(chǎn)生足夠數(shù)量的特定抗體,故選D。3.在單克隆抗體制備過程中,對(duì)骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合后,要用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞。在這種培養(yǎng)基上不能存活、增殖的細(xì)胞是(
)①B淋巴細(xì)胞②骨髓瘤細(xì)胞③B淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞④骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞⑤雜交瘤細(xì)胞A.①②③④
B.①③⑤C.②④
D.①③答案:A解析:在題中所述特定的選擇培養(yǎng)基上,能夠存活、增殖的細(xì)胞只有雜交瘤細(xì)胞。4.運(yùn)用細(xì)胞工程技術(shù)獲得單克隆抗體時(shí),下列操作不必要的是(
)A.對(duì)小動(dòng)物注射抗原B.融合并篩選雜交瘤細(xì)胞C.培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞D.將胰蛋白酶注入小鼠腹腔答案:D解析:胰蛋白酶在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)用到,是加到培養(yǎng)基中用于分離細(xì)胞的。5.下圖表示用生物工程制備人抗A抗體的過程。請(qǐng)回答下列問題:(1)人的紅細(xì)胞膜表面具有識(shí)別作用的凝集原,其化學(xué)本質(zhì)是________;從免疫學(xué)角度看,這種凝集原是________。(2)圖中細(xì)胞1是小鼠體內(nèi)注入人A型血紅細(xì)胞后獲得的________細(xì)胞,這種細(xì)胞具有________________的特點(diǎn),但難以在體外培養(yǎng)。甲培養(yǎng)皿中培養(yǎng)的細(xì)胞2是從患骨髓瘤的小鼠體內(nèi)獲取的骨髓瘤細(xì)胞,這種細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)能________,但不會(huì)產(chǎn)生抗體。為了能充分發(fā)揮上述兩種細(xì)胞各自的特點(diǎn),經(jīng)特殊處理,在促細(xì)胞融合因子的作用下,使兩種細(xì)胞發(fā)生融合,形成圖中的細(xì)胞3,這種細(xì)胞稱為____________。(3)過程①的主要目的是________________________________。通過過程②或③的培養(yǎng)方法能產(chǎn)生大量__
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