《生物樣本庫多能干細(xì)胞管理技術(shù)規(guī)范gbt+42466-2023》詳細(xì)解讀

《生物樣本庫多能干細(xì)胞管理技術(shù)規(guī)范gb/t42466-2023》詳細(xì)解讀contents目錄1范圍2規(guī)范性引用文件3術(shù)語和定義4縮略語5總體要求6采集與接收7建系8復(fù)蘇和培養(yǎng)contents目錄9冷凍與儲存10質(zhì)量控制11分發(fā)12運輸附錄A(資料性)人和小鼠多能干細(xì)胞生物樣本庫的質(zhì)量控制檢測項目參考文獻(xiàn)011范圍01021.1適用對象涉及多能干細(xì)胞的科研機構(gòu)、醫(yī)療機構(gòu)、生物樣本庫及相關(guān)企業(yè)等均可參考本標(biāo)準(zhǔn)。本標(biāo)準(zhǔn)適用于生物樣本庫中多能干細(xì)胞（包括胚胎干細(xì)胞和誘導(dǎo)多能干細(xì)胞等）的采集、處理、儲存、運輸和使用等管理活動。1.2管理環(huán)節(jié)涵蓋了從多能干細(xì)胞的獲取、鑒定、質(zhì)量控制，到儲存、運輸和分發(fā)等全過程的管理要求。明確了各環(huán)節(jié)的操作規(guī)范和技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)，確保多能干細(xì)胞的安全性、有效性和可追溯性。對多能干細(xì)胞、生物樣本庫、采集、處理、儲存、運輸、使用等術(shù)語進(jìn)行了明確定義，避免了術(shù)語混淆和誤解。有助于統(tǒng)一行業(yè)術(shù)語，促進(jìn)國內(nèi)外交流和合作。1.3術(shù)語和定義022規(guī)范性引用文件主要引用文件《生物樣本庫質(zhì)量和能力通用要求》(GB/T37864)該標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了生物樣本庫在質(zhì)量管理和能力建設(shè)方面的通用要求，包括組織管理、設(shè)施設(shè)備、人員培訓(xùn)、樣本采集、處理、儲存、運輸和廢棄等方面的內(nèi)容?！陡杉?xì)胞通用要求》(GB/T39718)該標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了干細(xì)胞的通用要求，包括干細(xì)胞的定義、分類、命名、標(biāo)識、制備、儲存、運輸、檢測、質(zhì)量控制和廢棄等方面的內(nèi)容。這些要求對干細(xì)胞的研究和應(yīng)用具有重要的指導(dǎo)意義。主要引用文件《人間充質(zhì)干細(xì)胞》(GB/T40788)該標(biāo)準(zhǔn)針對人間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行了詳細(xì)規(guī)定，包括其定義、特性、制備方法、質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)以及臨床應(yīng)用等方面的內(nèi)容。這些規(guī)定為人間充質(zhì)干細(xì)胞的規(guī)范化和標(biāo)準(zhǔn)化提供了重要依據(jù)。主要引用文件《細(xì)胞庫質(zhì)量管理規(guī)范》(GMP)該規(guī)范是細(xì)胞庫質(zhì)量管理的基本準(zhǔn)則，涵蓋了細(xì)胞庫的設(shè)施、設(shè)備、人員、物料、環(huán)境等方面的管理要求，確保細(xì)胞庫的質(zhì)量和安全。《干細(xì)胞制劑質(zhì)量控制及臨床前研究指導(dǎo)原則(試行)》該指導(dǎo)原則為干細(xì)胞制劑的質(zhì)量控制和臨床前研究提供了具體的指導(dǎo)和建議，包括干細(xì)胞制劑的制備、檢測、質(zhì)量控制以及臨床前研究的設(shè)計和實施等方面的內(nèi)容。以上規(guī)范性引用文件共同構(gòu)成了《生物樣本庫多能干細(xì)胞管理技術(shù)規(guī)范GB/T42466-2023》的標(biāo)準(zhǔn)化體系，為該規(guī)范的實施提供了有力的支撐和保障。0102030405其他相關(guān)引用文件033術(shù)語和定義生物樣本庫是指用于存儲生物樣本（如組織、細(xì)胞、血液、DNA/RNA等）的設(shè)施，這些樣本可用于生物醫(yī)學(xué)研究、疾病診斷和治療等。生物樣本庫具備樣本接收、處理、存儲、運輸和廢棄等功能，確保樣本的質(zhì)量和安全。定義功能3.1生物樣本庫定義多能干細(xì)胞是一類具有自我更新能力和多向分化潛能的細(xì)胞，可以分化為多種類型的細(xì)胞，如神經(jīng)細(xì)胞、心肌細(xì)胞、肝細(xì)胞等。來源多能干細(xì)胞主要來源于胚胎干細(xì)胞和誘導(dǎo)多能干細(xì)胞等。3.2多能干細(xì)胞管理技術(shù)規(guī)范是指針對生物樣本庫多能干細(xì)胞的管理和操作所制定的標(biāo)準(zhǔn)、規(guī)程和指南，旨在確保干細(xì)胞研究的質(zhì)量、安全性和可重復(fù)性。管理技術(shù)規(guī)范包括干細(xì)胞的采集、分離、培養(yǎng)、鑒定、存儲、運輸和應(yīng)用等方面的規(guī)定和要求。3.3管理技術(shù)規(guī)范內(nèi)容定義044縮略語01020304BSC生物樣本庫（Biobank）PSCs多能干細(xì)胞（PluripotentStemCells）FBS胎牛血清（FetalBovineSerum）GMP良好生產(chǎn)規(guī)范（GoodManufacturingPractice）4.1常見縮略語03SOPs標(biāo)準(zhǔn)操作程序（StandardOperatingProcedures）01CQAs關(guān)鍵質(zhì)量屬性（CriticalQualityAttributes）02KPIs關(guān)鍵性能指標(biāo)（KeyPerformanceIndicators）4.2規(guī)范專用縮略語QA/QC質(zhì)量保證/質(zhì)量控制（QualityAssurance/QualityControl）注以上縮略語在《生物樣本庫多能干細(xì)胞管理技術(shù)規(guī)范gb/t42466-2023》中頻繁出現(xiàn)，理解和掌握這些縮略語對于準(zhǔn)確理解和實施該規(guī)范具有重要意義。同時，這些縮略語也在生物樣本庫和多能干細(xì)胞管理領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用價值。4.2規(guī)范專用縮略語055總體要求生物樣本庫的建設(shè)和管理應(yīng)符合國家相關(guān)法律法規(guī)的要求，確保合法合規(guī)。遵守國家法律法規(guī)在多能干細(xì)胞的管理過程中，應(yīng)始終遵循倫理原則，保護(hù)捐贈者和受者的權(quán)益。遵循倫理原則5.1法規(guī)與倫理要求5.2質(zhì)量管理體系要求建立質(zhì)量管理體系生物樣本庫應(yīng)建立完善的質(zhì)量管理體系，確保樣本的質(zhì)量可控、可追溯。持續(xù)改進(jìn)質(zhì)量管理體系應(yīng)持續(xù)改進(jìn)，以適應(yīng)多能干細(xì)胞研究和技術(shù)的發(fā)展。生物樣本庫應(yīng)配備具有相關(guān)專業(yè)知識和經(jīng)驗的管理和技術(shù)人員，確保工作的專業(yè)性。生物樣本庫應(yīng)具備符合要求的設(shè)施和環(huán)境條件，確保樣本的安全和穩(wěn)定。專業(yè)人員設(shè)施與環(huán)境5.3人員與設(shè)施要求信息化管理系統(tǒng)生物樣本庫應(yīng)建立信息化管理系統(tǒng)，實現(xiàn)樣本信息的實時更新和共享。數(shù)據(jù)安全信息化管理系統(tǒng)應(yīng)具備完善的數(shù)據(jù)安全保護(hù)措施，防止數(shù)據(jù)泄露和被非法獲取。5.4信息化管理系統(tǒng)要求066采集與接收明確采集目的和計劃根據(jù)研究或治療需要，制定詳細(xì)的采集計劃，包括采集時間、地點、人員分工等。倫理審查確保采集活動符合倫理規(guī)范，保護(hù)供者權(quán)益，避免不必要的傷害。知情同意向供者充分說明采集目的、方法、可能的風(fēng)險和后果，并獲得其書面知情同意。6.1采集前準(zhǔn)備123采集過程中應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作原則，防止污染。無菌操作根據(jù)供者情況和采集目的，選擇合適的采集方法和技巧，確保采集到足夠數(shù)量和質(zhì)量的多能干細(xì)胞。采集方法與技巧對采集到的多能干細(xì)胞進(jìn)行及時處理，如分離、純化、凍存等，以保證其活性和功能。采集物處理6.2采集操作接收標(biāo)準(zhǔn)與流程制定明確的接收標(biāo)準(zhǔn)和流程，對采集到的多能干細(xì)胞進(jìn)行質(zhì)量評估和驗收。登記與信息錄入對接收的多能干細(xì)胞進(jìn)行詳細(xì)登記，包括供者信息、采集時間、數(shù)量、質(zhì)量等，并建立相應(yīng)的信息數(shù)據(jù)庫。保密與隱私保護(hù)確保供者信息的安全性和隱私性，未經(jīng)授權(quán)不得隨意泄露或用于其他用途。6.3接收與登記077建系明確建系目標(biāo)確定所需干細(xì)胞類型、來源及預(yù)期應(yīng)用。倫理審查確保干細(xì)胞來源合法、合規(guī)，符合倫理要求。質(zhì)量控制建立嚴(yán)格的質(zhì)量控制體系，確保干細(xì)胞質(zhì)量。7.1建系前準(zhǔn)備采用適當(dāng)方法從生物樣本中分離出干細(xì)胞。干細(xì)胞分離在適宜條件下進(jìn)行干細(xì)胞培養(yǎng)，保持其增殖能力和多向分化潛能。干細(xì)胞培養(yǎng)通過形態(tài)學(xué)觀察、分子生物學(xué)方法等鑒定干細(xì)胞的特性和純度。干細(xì)胞鑒定7.2建系過程干細(xì)胞存儲建立干細(xì)胞庫，對干細(xì)胞進(jìn)行長期存儲和管理。質(zhì)量控制與監(jiān)測定期對干細(xì)胞進(jìn)行質(zhì)量檢測和監(jiān)測，確保其質(zhì)量和安全性。記錄與報告詳細(xì)記錄建系過程、質(zhì)量檢測結(jié)果等信息，并向上級主管部門報告。7.3建系后管理臨床應(yīng)用將建立的干細(xì)胞系應(yīng)用于臨床治療和研究，探索其療效和安全性。科研應(yīng)用利用建立的干細(xì)胞系開展基礎(chǔ)研究和應(yīng)用研究，推動干細(xì)胞領(lǐng)域的發(fā)展。技術(shù)改進(jìn)與優(yōu)化不斷改進(jìn)和優(yōu)化建系技術(shù)，提高干細(xì)胞的質(zhì)量和建系效率。7.4建系技術(shù)應(yīng)用與拓展088復(fù)蘇和培養(yǎng)確保實驗室環(huán)境符合干細(xì)胞復(fù)蘇要求，包括溫度、濕度和無菌條件等。準(zhǔn)備復(fù)蘇所需的器材和試劑，如吸管、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、血清等，并進(jìn)行無菌處理。根據(jù)干細(xì)胞類型和凍存時間，制定復(fù)蘇方案，包括復(fù)蘇液的配制、溫度控制等。8.1復(fù)蘇前準(zhǔn)備03將干細(xì)胞懸液接種至培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中，放入適宜的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。01將凍存的干細(xì)胞從液氮罐中取出，迅速放入預(yù)熱至適宜溫度的復(fù)蘇液中，并不斷輕輕搖動，使干細(xì)胞快速融化。02將融化的干細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至無菌操作臺，用吸管吸出并加入適量的培養(yǎng)基中。8.2復(fù)蘇操作根據(jù)干細(xì)胞類型和生長狀態(tài)，提供適宜的培養(yǎng)條件，包括溫度、濕度、CO2濃度等。定期更換培養(yǎng)基，保持干細(xì)胞的良好生長狀態(tài)。對培養(yǎng)中的干細(xì)胞進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察、生長曲線測定等，以評估其生長情況和質(zhì)量。8.3培養(yǎng)條件在干細(xì)胞達(dá)到適宜密度后，進(jìn)行傳代或凍存處理。對培養(yǎng)后的干細(xì)胞進(jìn)行質(zhì)量檢測，包括細(xì)胞活力、純度、無菌檢測等。將檢測合格的干細(xì)胞用于后續(xù)實驗或治療等應(yīng)用。8.4培養(yǎng)后處理099冷凍與儲存細(xì)胞狀態(tài)檢查確保細(xì)胞處于對數(shù)生長期，形態(tài)正常，無污染。冷凍液配制選擇適合多能干細(xì)胞的冷凍保護(hù)劑，如二甲基亞砜（DMSO）等，配制合適濃度的冷凍液。冷凍器具準(zhǔn)備準(zhǔn)備無菌的冷凍管、程序降溫盒等器具，確保無菌操作。9.1冷凍前準(zhǔn)備將細(xì)胞與冷凍液混合均勻，制成細(xì)胞懸液。細(xì)胞懸液制備將細(xì)胞懸液分裝至冷凍管中，并做好標(biāo)記，包括細(xì)胞名稱、代數(shù)、冷凍日期等。分裝與標(biāo)記將冷凍管放入程序降溫盒中，按照設(shè)定的降溫速率進(jìn)行降溫。程序降溫將降溫后的冷凍管轉(zhuǎn)移至液氮罐中長期保存。液氮保存9.2冷凍過程定期檢查液氮罐的液氮量，確保細(xì)胞處于穩(wěn)定的低溫環(huán)境。液氮罐管理建立詳細(xì)的細(xì)胞庫存檔記錄，包括細(xì)胞名稱、代數(shù)、冷凍日期、儲存位置等信息。細(xì)胞庫管理定期對儲存的細(xì)胞進(jìn)行復(fù)蘇和檢測，確保細(xì)胞的活性和功能正常。質(zhì)量控制確保儲存設(shè)施的安全防護(hù)措施到位，防止意外事故發(fā)生。安全防護(hù)9.3儲存管理復(fù)蘇準(zhǔn)備細(xì)胞復(fù)蘇細(xì)胞檢測記錄與報告9.4復(fù)蘇與檢測準(zhǔn)備無菌操作臺、培養(yǎng)基、離心管等器具，預(yù)熱培養(yǎng)基至適宜溫度。對復(fù)蘇后的細(xì)胞進(jìn)行形態(tài)觀察、生長曲線測定、遺傳穩(wěn)定性檢測等，確保細(xì)胞質(zhì)量符合要求。從液氮罐中取出冷凍管，迅速放入37℃水浴中解凍，然后將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)基中。詳細(xì)記錄復(fù)蘇過程和檢測結(jié)果，并向上級報告。1010質(zhì)量控制建立完善的質(zhì)量控制體系，包括質(zhì)量手冊、程序文件、作業(yè)指導(dǎo)書和記錄等。明確質(zhì)量控制的目標(biāo)、原則、方法和措施，確保干細(xì)胞庫運行符合規(guī)范要求。10.1質(zhì)量控制體系對干細(xì)胞庫設(shè)施、設(shè)備、試劑、耗材等進(jìn)行定期檢查和驗證，確保其符合質(zhì)量要求。對干細(xì)胞樣本的采集、處理、儲存、運輸?shù)雀鳝h(huán)節(jié)進(jìn)行嚴(yán)格控制，確保干細(xì)胞質(zhì)量。10.2質(zhì)量控制內(nèi)容VS采用先進(jìn)的質(zhì)量控制技術(shù)和方法，如細(xì)胞活性檢測、遺傳穩(wěn)定性檢測、微生物污染檢測等。定期對干細(xì)胞庫進(jìn)行內(nèi)部審核和外部評審，及時發(fā)現(xiàn)并糾正存在的問題。10.3質(zhì)量控制方法建立完善的質(zhì)量控制記錄制度，對干細(xì)胞庫的各項操作進(jìn)行詳細(xì)記錄。定期向上級管理部門提交質(zhì)量控制報告，匯報干細(xì)胞庫的運行情況和質(zhì)量狀況。10.4質(zhì)量控制記錄與報告1111分發(fā)確保干細(xì)胞的儲存環(huán)境符合規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)，包括溫度、濕度和光照等條件。對干細(xì)胞進(jìn)行質(zhì)量檢查，確保其活性、純度和安全性達(dá)到要求。準(zhǔn)備分發(fā)所需的器材和試劑，如細(xì)胞培養(yǎng)皿、移液器、凍存管等，并進(jìn)行無菌處理。11.1分發(fā)前的準(zhǔn)備01020411.2分發(fā)過程的操作規(guī)范遵循無菌操作原則，避免干細(xì)胞受到污染。按照規(guī)定的程序進(jìn)行干細(xì)胞的復(fù)蘇、洗滌、離心和重懸等操作。對干細(xì)胞進(jìn)行計數(shù)和活力檢測，確保其數(shù)量和質(zhì)量符合要求。將干細(xì)胞分裝到適當(dāng)?shù)娜萜髦?，?biāo)明細(xì)胞名稱、數(shù)量、日期和操作者等信息。03對分發(fā)的干細(xì)胞進(jìn)行詳細(xì)的記錄，包括細(xì)胞來源、數(shù)量、去向和用途等信息。對于出現(xiàn)問題的干細(xì)胞，及時進(jìn)行召回和處理，并記錄相關(guān)信息。定期跟蹤干細(xì)胞的使用情況，確保其安全性和有效性。對分發(fā)過程進(jìn)行總結(jié)和評估，不斷改進(jìn)和優(yōu)化操作流程。11.3分發(fā)后的跟蹤與記錄1212運輸確保干細(xì)胞處于適宜的保存狀態(tài)，如使用適當(dāng)?shù)谋４嬉汉蜏囟瓤刂?。選擇合適的運輸容器，確保其具有良好的密封性和保溫性能。制定詳細(xì)的運輸計劃，包括路線、交通工具、人員配備等。12.1運輸前準(zhǔn)備123對運輸過程中的溫度、濕度等環(huán)境參數(shù)進(jìn)行實時監(jiān)控。確保運輸過程中干細(xì)胞的穩(wěn)定性和安全性，避免劇烈震動和碰撞。定期對運輸容器進(jìn)行檢查，確保其完好無損。12.2運輸過程中的監(jiān)控010203在干細(xì)胞到達(dá)目的地后，及時對其進(jìn)行質(zhì)量檢查，確保其符合相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。對運輸過程中出現(xiàn)的問題進(jìn)行記錄和總結(jié)，以便改進(jìn)未來的運輸方案。將干細(xì)胞妥善存放于目標(biāo)地點的生物樣本庫中，確保其長期保存的質(zhì)量。12.3運輸后的處理13附錄A(資料性)人和小鼠多能干細(xì)胞生物樣本庫的質(zhì)量控制檢測項目細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢測觀察細(xì)胞形態(tài)，確認(rèn)細(xì)胞是否保持未分化狀態(tài)，無分化跡象。細(xì)胞表面標(biāo)志物檢測通過流式細(xì)胞術(shù)等方法，檢測細(xì)胞表面標(biāo)志物表達(dá)情況，驗證細(xì)胞多能性。遺傳穩(wěn)定性檢測采用核型分析、基因突變檢測等方法，評估細(xì)胞的遺傳穩(wěn)定性。微生物與內(nèi)毒素檢測對細(xì)胞培養(yǎng)上清液進(jìn)行微生物培養(yǎng)、內(nèi)毒素檢測等，確保細(xì)胞無微生物污染。人多能干細(xì)胞生物樣本庫的質(zhì)量控制檢測項目細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢測觀察小鼠多能干細(xì)胞形態(tài)，確認(rèn)細(xì)胞未分化狀態(tài)。遺傳穩(wěn)定性檢測采用核型分析等方法，評估小鼠多能干細(xì)胞的遺傳穩(wěn)定性。微生物與內(nèi)毒素檢測對小鼠多能干細(xì)胞培養(yǎng)上清液進(jìn)行微生物培養(yǎng)、內(nèi)毒素檢測等，確保細(xì)胞無微生物污染。同時，還需關(guān)注小鼠多能干細(xì)胞特有的檢測項目，如種系嵌合能力等。細(xì)胞表面標(biāo)志物檢測通過流式細(xì)胞術(shù)等方法，檢測