口服緩釋制劑釋放度研究的基本原則與要求

口服緩釋制劑釋放度研究的基本原則與要求（一）釋放度研究的總體考慮釋放度系指緩釋制劑等在規(guī)定溶劑中釋放的速度和程度。體外釋放度是口服緩釋制劑處方工藝篩選的重要指標(biāo)，同時(shí)釋放度檢查也是有效控制產(chǎn)品質(zhì)量，驗(yàn)證批內(nèi)與批間產(chǎn)品質(zhì)量是否一致，確定產(chǎn)品是否可以放行以及產(chǎn)品在效期內(nèi)質(zhì)量是否符合要求的重要指標(biāo)。對(duì)于所建立的體外釋放度檢查方法，如能結(jié)合體內(nèi)研究結(jié)果，建立體內(nèi)外相關(guān)性，則體外釋放度測(cè)定不僅可以作為控制產(chǎn)品質(zhì)量的指標(biāo)，并且可以在一定程度上預(yù)測(cè)產(chǎn)品的體內(nèi)行為。緩釋制劑的釋放行為受很多因素的影響，例如藥物自身的特點(diǎn)（溶解度、晶型、粒徑、劑量等），輔料（種類、用量等），制劑生產(chǎn)工藝過(guò)程等，故釋放度檢查方法應(yīng)具有一定的區(qū)分能力，能夠區(qū)分由于生產(chǎn)中關(guān)鍵參數(shù)改變（如控制釋放行為的關(guān)鍵輔料的用量改變等）而可能顯著影響體內(nèi)釋放及生物利用度的不同產(chǎn)品。可以通過(guò)考察不同處方釋藥行為的差異來(lái)驗(yàn)證所建立方法的區(qū)分能力。但檢查方法又不能過(guò)于敏感，以致于微小的變化均被視為不同?？梢酝ㄟ^(guò)考察釋放介質(zhì)的pH、轉(zhuǎn)速、體積等的變化對(duì)釋放行為的影響來(lái)驗(yàn)證所建立的方法的敏感性。對(duì)于釋放度方法可靠性和限度合理性的評(píng)判，還需要結(jié)合體內(nèi)研究數(shù)據(jù)進(jìn)行綜合分析。對(duì)于同一制劑的不同規(guī)格，推薦采用相同或至少類似的體外釋放度測(cè)定條件。對(duì)于不同廠家研制的同一品種的緩釋制劑，如產(chǎn)品的釋藥機(jī)制不同，所建立的體外釋放度測(cè)定方法可以不同，只要所建立的方法能控制和反映產(chǎn)品質(zhì)量即可。藥物的研究開(kāi)發(fā)本身具有明顯的階段性，是一個(gè)不斷完善的過(guò)程。通常釋放度研究會(huì)隨著產(chǎn)品從申報(bào)臨床向申報(bào)生產(chǎn)的推進(jìn)、認(rèn)識(shí)的不斷深入、體內(nèi)試驗(yàn)信息的獲取，不斷得到完善。（二）具體的技術(shù)要求1、釋放度研究方法的建立釋放度研究方法的建立包括測(cè)定條件的選擇及釋放量測(cè)定方法的建立。藥物的體外釋放行為受制劑本身因素和外界因素的影響，制劑因素系指主藥的性質(zhì)、處方、工藝，外界因素系指釋放度測(cè)定的儀器裝置、釋放介質(zhì)、轉(zhuǎn)速等條件。釋放度測(cè)定條件的選擇關(guān)系到最終確定的釋放度檢查方法能否切實(shí)反映制劑的釋放特點(diǎn)。若釋放條件過(guò)于劇烈，則可能無(wú)法區(qū)分因處方或工藝不同產(chǎn)生的釋放行為的變化，故一般建議選擇較為溫和的條件，以加強(qiáng)方法的區(qū)分能力。研究過(guò)程中，需要綜合考慮各種外界條件對(duì)釋放行為的影響，通常需對(duì)儀器、釋放介質(zhì)、轉(zhuǎn)速等進(jìn)行詳細(xì)的考察。1．1儀器裝置：對(duì)于儀器裝置的選擇，應(yīng)考慮具體的劑型及可能的釋藥機(jī)制。通常情況下，建議選擇藥典收載的儀器裝置進(jìn)行釋放度檢查。片劑一般傾向于選擇槳法，轉(zhuǎn)籃法多用于膠囊及可能會(huì)漂浮的制劑。如采用其他特殊儀器裝置，需提供充分的依據(jù)。1．2釋放介質(zhì)：釋放介質(zhì)的選擇依賴于藥物的理化性質(zhì)（溶解性、穩(wěn)定性、油水分配系數(shù)等）、生物藥劑學(xué)性質(zhì)（吸收部位等）及口服后可能遇到的生理環(huán)境。在研究過(guò)程中，一般推薦選用水性介質(zhì)，介質(zhì)的體積需使藥物符合漏槽條件。由于不同pH下藥物的溶解度、控制藥物釋放行為的關(guān)鍵輔料的水化、溶脹、溶蝕速度可能不同，建議對(duì)不同pH值（模擬胃腸道的生理環(huán)境）條件下的釋放行為進(jìn)行考察。為了便于比較，建議繪制釋放量、時(shí)間以及介質(zhì)的pH值構(gòu)成的三維釋放曲線圖。通常選擇類似胃腸液的介質(zhì)（如pH1.2的鹽酸溶液、pH4.5、6.8的緩沖液。有些情況下亦可考慮pH7.8及以上的釋放介質(zhì)，或者不同pH介質(zhì)的更換）或脫氣后的新鮮蒸餾水。如藥物的溶解性很差，也可在其中加入少量的表面活性劑。必要時(shí)，還需考慮離子強(qiáng)度和表面張力的影響。根據(jù)以上研究結(jié)果，一則可以了解制劑對(duì)口服后可能遇到的生理環(huán)境的敏感性，二則可以通過(guò)考察不同處方在不同釋放介質(zhì)中釋放行為的差別，選擇具有較強(qiáng)區(qū)分能力的條件。1．3轉(zhuǎn)速：某些緩釋制劑在不同轉(zhuǎn)速下的釋放行為基本一致，說(shuō)明其釋放特性受釋放介質(zhì)的流動(dòng)形態(tài)影響較小。但對(duì)于大部分制劑而言，不同轉(zhuǎn)速下的釋放行為會(huì)有不同，例如溶蝕型制劑，轉(zhuǎn)速越大，釋放越快，故應(yīng)考察制劑在不同轉(zhuǎn)速下的釋放行為。轉(zhuǎn)速過(guò)快,可能削弱對(duì)不同制劑釋放行為的區(qū)分能力，所以不推薦首選過(guò)高轉(zhuǎn)速。如確有需要，應(yīng)進(jìn)行充分的驗(yàn)證，證明在所用轉(zhuǎn)速下能夠區(qū)分不同產(chǎn)品質(zhì)量。1．4取樣時(shí)間點(diǎn)的設(shè)置：為了解產(chǎn)品的釋放特性，通常應(yīng)選取足夠多的取樣測(cè)試點(diǎn)，以繪制完整的釋放曲線（包括上升曲線及達(dá)到平臺(tái)的階段）。前期取樣點(diǎn)的間隔應(yīng)比較短，后期取樣點(diǎn)間隔可相對(duì)延長(zhǎng)，直至90％以上的藥物釋放或達(dá)到平臺(tái)期。釋放度整體考察時(shí)間要根據(jù)制劑釋放時(shí)間長(zhǎng)短不同而異，一般不宜短于給藥間隔。1．5釋放量測(cè)定方法：釋放量的測(cè)定，即已釋放入介質(zhì)中藥物的定量測(cè)定，其技術(shù)要求應(yīng)符合測(cè)定藥物含量的一般原則。常用的方法有UV法和HPLC法。方法學(xué)驗(yàn)證過(guò)程中除常規(guī)考慮外，尚應(yīng)關(guān)注：主藥在釋放介質(zhì)中的穩(wěn)定性；最佳取樣量，以保證測(cè)定簡(jiǎn)便，盡量減小誤差；濾器的性質(zhì)，考證有效成分在濾器上是否有吸附。1．6復(fù)方制劑：復(fù)方緩釋制劑中每個(gè)成份的釋放行為均需進(jìn)行研究和控制。如在同一種方法下不能有效測(cè)定每個(gè)成份的釋放行為，則需針對(duì)不同成份，選擇建立不同的測(cè)定方法。在以上研究基礎(chǔ)上建立的體外釋放度檢查方法，如未進(jìn)行體內(nèi)外相關(guān)性的驗(yàn)證，則只能作為處方篩選的指標(biāo)之一及控制產(chǎn)品質(zhì)量的一種手段，不能預(yù)測(cè)產(chǎn)品體內(nèi)的釋藥行為。建議在臨床研究階段加強(qiáng)體內(nèi)外相關(guān)性的研究，為進(jìn)一步改進(jìn)處方工藝、優(yōu)化體外釋放度測(cè)定條件、預(yù)測(cè)體內(nèi)吸收行為提供依據(jù)。2、制劑體外釋藥行為的研究緩釋制劑體外釋放行為的研究一般應(yīng)考察不同條件下的釋放特性，并進(jìn)行釋藥模型分析，同時(shí)還要考察產(chǎn)品批間重現(xiàn)性及批內(nèi)均一性。2．1不同條件下釋藥特性的考察：雖然緩釋制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中通常采用一種條件測(cè)定釋放度，但在制劑的處方篩選及質(zhì)量研究過(guò)程中，應(yīng)當(dāng)考察其在不同條件下的釋放度，以充分了解所研發(fā)制劑的釋藥特性，同時(shí)為確定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中采用的釋放度測(cè)定條件提供依據(jù)。2．2釋藥模型研究：通過(guò)釋藥模型的研究，可以在一定程度上量化釋放特性?？煽紤]采用適宜的模型進(jìn)行擬合（如零級(jí)釋放、一級(jí)釋放、Higuchi模型等）。在釋藥模型研究的基礎(chǔ)上，建議結(jié)合制劑處方工藝研究中采用的控制釋放方法、所用輔料的特性等信息，對(duì)釋藥機(jī)制進(jìn)行探討。2．3釋藥重現(xiàn)性和均一性的考察：為考證生產(chǎn)工藝的重現(xiàn)性及穩(wěn)定性，需對(duì)同一批次內(nèi)制劑的釋放行為及連續(xù)三批的釋放行為進(jìn)行考察，其中每批制劑至少要選擇6個(gè)測(cè)試樣品。研究中應(yīng)選取足夠多的取樣點(diǎn)，記錄和計(jì)算每個(gè)時(shí)間點(diǎn)測(cè)得的單一數(shù)值、平均數(shù)值及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差。對(duì)于早期釋放點(diǎn)，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差一般不應(yīng)超過(guò)20％，后續(xù)釋放點(diǎn)一般不應(yīng)超過(guò)10％。（三）質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中釋放度檢查方法的建立1、取樣點(diǎn)的設(shè)置通常質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中釋放度檢查需至少設(shè)置3個(gè)時(shí)間點(diǎn)。一般而言，第一點(diǎn)的取樣時(shí)間為0.5－2小時(shí)，用于考察藥物是否有突釋；第二點(diǎn)的累計(jì)釋放量約為50％左右，用于考察釋藥特性及藥物是否平穩(wěn)釋放；最后取樣點(diǎn)的累計(jì)釋放量至少達(dá)80％，用于考察藥物釋放是否基本完全。根據(jù)具體制劑不同的釋藥時(shí)間和釋藥特性，可考慮適當(dāng)增加釋藥測(cè)定點(diǎn)，以保證對(duì)產(chǎn)品的釋藥特性有比較全面的控制和反映。2、釋放度限度確定釋放度限度主要應(yīng)根據(jù)臨床試驗(yàn)研究用樣品的檢測(cè)結(jié)果確定。因?yàn)榕R床試驗(yàn)用樣品一般為中試規(guī)模樣品，其體外釋放行為一則可以在很大程度上代表產(chǎn)品放大生產(chǎn)后的行為，二則其體外釋放行為得到了臨床試驗(yàn)的驗(yàn)證，通過(guò)體內(nèi)血藥濃度測(cè)定結(jié)果及安全有效的臨床試驗(yàn)結(jié)果可以支持體外釋放限度的合理性。一般規(guī)定每個(gè)時(shí)間點(diǎn)上下浮動(dòng)范圍不得超過(guò)20％（即±10％）。某些情況下，偏差浮動(dòng)可適當(dāng)放寬至25％以內(nèi)；如超過(guò)25％的限度，則可能影響到產(chǎn)品的體內(nèi)行為，建議進(jìn)行生物等效性試驗(yàn)，驗(yàn)證上下限之間生物等效。對(duì)于某些制劑，如在一特定時(shí)間段內(nèi)的體外釋放行為符合零級(jí)釋放（例如從4－12小時(shí)內(nèi)每小時(shí)釋放5％），質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中除以上三個(gè)檢測(cè)點(diǎn)外，也可增訂釋藥速率指標(biāo)，即每小時(shí)的釋放百分率。3、釋放度檢查方法的不斷完善口服緩釋制劑研發(fā)初期應(yīng)制定初步的釋放度檢查方法，用于處方工藝篩選研究。隨著研究工作的深入，釋放度檢查方法可能需要結(jié)合處方工藝研究結(jié)果修訂完善。臨床用質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中的釋放度檢查方法，主要是基于研究初期階段的體外釋放考察結(jié)果、幾批實(shí)驗(yàn)室規(guī)模樣品以及較少批次的中試規(guī)模樣品體外考察結(jié)果制定。由于體外數(shù)據(jù)積累的局限性以及尚未經(jīng)體內(nèi)試驗(yàn)驗(yàn)證，制定的釋放度檢查方法可能不夠完善。在報(bào)生產(chǎn)階段，由于產(chǎn)品已完成了臨床研究，對(duì)于產(chǎn)品體內(nèi)行為及安全有效性有了進(jìn)一步的認(rèn)知，可