細胞間管理規(guī)范

細胞間管理實施條例一層流1。進入細胞間換鞋(肺科要求換鞋兩次)，或穿戴鞋套。2。穿白大褂，戴口罩帽子，戴手套,手套噴75％酒精。3。任何試劑、耗材及物品用75%酒精消毒，擦干凈表面灰塵后方可進入細胞間。4．即使只是瞬間拿試劑等操作，只要進入細胞間，必須穿衣戴帽.5.細胞間要求每天紫外照射滅菌,30min以上。二生物安全柜的使用紫外照射20-30分鐘滅菌.酒精燈酒精不能低于最低刻度標尺，及時補充。酒精燈按程序滅活，記得重復開蓋再蓋好，防止爆炸.使用完畢清理廢液缸，擦桌面，所有移液槍調(diào)回最大值,任何培養(yǎng)皿,管子不得留置于安全柜中。使用過后除清理超凈臺,還要清理真空泵,瓶內(nèi)體積不能超過2/3.注意真空泵不帶濾膜，所以用后必須清理，清洗過程如下：結(jié)束實驗時，用真空泵吸入75％的酒精，去除并清洗管子的液體.將真空泵內(nèi)液體傾倒進廢液收集桶,用清水涮洗。用酒精內(nèi)外噴釋壁，加入少量84消毒液，放置原處。預約（1)門口登記本預約,請合理估計使用時間進行預約。若約了后又不用,請及時擦除。（2）上一個使用完畢的同學,清理超凈臺,紫外照射，進行正計時。(3）若提早用完，如果方便請口頭通知下一位同學。8:00HHH9:00

表示從8：01分開始，到9：59分結(jié)束，包括自己照臺的時間.如果約臺后超過45分鐘未使用,后面約臺的同學或未約臺的同學可直接使用.三配液及公共試劑分裝配液及公共試劑分裝必須遵循節(jié)約的原則，嚴禁浪費。細胞間公共液體將分配到個人進行分裝。FBS：劉銀Glutamine:劉海玲TE：李子依、吳秋P/S：蔣征負責試劑分裝的同學,應及時檢查分裝試劑的庫存，及時訂購該試劑。當分裝試劑不足時，其他同學有必要提醒該試劑負責人進行分裝.細胞所需培養(yǎng)試劑及血清盡量避免反復凍融。培養(yǎng)液分裝后用抗酒精筆標記。配液操作及分裝操作必須嚴格執(zhí)行30分鐘紫外消毒，配液及分裝公共試劑前禁止一切其他操作.每人獨立使用自己的培養(yǎng)基，PBS，必須標明姓名、開啟及配制日期。所有自己配制的培養(yǎng)基要標明：試劑名稱,姓名，日期.所有試劑培養(yǎng)基都要用封口膜封好.四值日原則上每周一人值日，同學之間也可以自行組合，兩兩一組,值日時間相應增長。不能夠保證值日生每天等到最后一名同學做完實驗離開，所以，每天最后一名離開實驗室的同學，有義務處理不能過夜的垃圾等。每周一交班擦桌子，及柜子表面。清空所有垃圾桶。處理廢舊橡皮筋。加滿75％酒精桶和95%酒精桶。檢查84消毒液的用量。處理病毒垃圾（每周1-2次)。補充槍頭盒，EP管盒及其它耗材，并及時訂購缺少的耗材。通知下一組值日同學，下一組值日同學可檢查上一組完成情況，若沒達到相關(guān)要求可拒絕接班,并可投訴至陳嘉瑜處。每天及時清潔垃圾筐，固體垃圾及液體垃圾在細胞間不過夜。最后一名做實驗的同學在值日生不在的情況下，有義務進行垃圾清理。清理空槍頭盒收納箱，一般內(nèi)容物最好不要超過2/3.及時添加新的槍頭盒,EP管盒及其它耗材。及時添加酒精噴壺內(nèi)的75%酒精,若75%酒精桶或95%酒精桶內(nèi)的酒精用完也需及時配置并添加。值日同學負責檢查耗材,通知相關(guān)負責人進行耗材的訂取。請值日同學認真完成相關(guān)工作,為大家創(chuàng)造良好實驗環(huán)境。由于值日工作量較大，也請其他同學能自覺維護細胞間的整潔，不要亂扔槍頭，及時撿起地上雜物.如發(fā)現(xiàn)相關(guān)耗材的缺少,可提醒值日同學進行添加。五大掃除大掃除時,跟隨張帆老師實驗室同時進行，時間為每周4下午6點30分。原則上，在肺科做實驗的都應加入。1清理桌面及儀器外部（包括桌面，冰箱,培養(yǎng)箱，超凈臺，離心機）2超凈臺內(nèi)部清潔3清理冰箱舊冰4水浴鍋，刷燒杯5鞋架，刷鞋底6刷洗真空泵玻璃瓶7離心平衡管對整齊,包括內(nèi)容水的刻度校準8地面雜物，包括超凈臺的腳支架的清潔,及冰箱、培養(yǎng)箱后面的死角9換新的白大褂10掃地，吸塵，拖地(包括超凈臺底下，培養(yǎng)箱后，冰箱后面）11照紫外30min.通風1小時12更換病毒處理桶的耗材,并查看84消毒液情況六病毒處理:病毒污染的耗材統(tǒng)一放入84消毒液浸泡處理（蓋底分離），病毒液倒入收集罐加入84消毒液。培養(yǎng)皿蓋如未被污染無需進行消毒。對于醫(yī)用注射器,請拔出助推器后進行浸泡處理。不要簡單的吸入消毒液，造成以后處理還需將液體推出.每周大掃除時將其撈出，依普通實驗垃圾處理。浸泡桶每月至少更換1次新鮮84消毒液.病毒實驗較多時,相應增加更換84消毒液的次數(shù).七細胞間其它注意事項顯微鏡使用:觀察細胞時，短暫離開,可將光源調(diào)制最暗，使用過后將電源關(guān)閉。晚上最后離開的同學請注意檢查顯微鏡開關(guān)，并將電源關(guān)閉。培養(yǎng)基相關(guān)：培養(yǎng)液及其它試劑用完后及時放入冰箱，不要過夜放置在外。放入水浴鍋加熱的培養(yǎng)液等均需寫上名字。瓶裝培養(yǎng)液母液如DMEM、1640等需寫明瓶蓋打開人,打開時間，是否公用等信息。個人配置和使用的瓶裝液體，也需寫明擁有人，配置時間。配置完后請盡快使用，減少浪費.不用的液體請及時處理，不要占用公用空間。培養(yǎng)箱相關(guān)：開培養(yǎng)箱時，禁止對培養(yǎng)箱說話培養(yǎng)操作過程中有液體灑出隨手就擦干細胞間內(nèi)外門不能同時開，及時關(guān)閉出口處的門。干凈的dish集中于儲物箱中，一條未用完,請勿開行新的.及時清理計數(shù)板，不能過夜