高三生物一輪復(fù)習(xí)：微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用-實(shí)驗(yàn)題考點(diǎn)攻破

（14-2）微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用—高考生物一輪復(fù)習(xí)實(shí)驗(yàn)題考點(diǎn)攻破1.下列有關(guān)細(xì)菌純化培養(yǎng)的說(shuō)法，不正確的是()A.實(shí)驗(yàn)操作者接種前要用70％的酒精棉球擦手消毒B.每次劃線后接種環(huán)要在酒精燈火焰上灼燒滅菌C.培養(yǎng)基上的單個(gè)菌落都是一個(gè)細(xì)菌細(xì)胞的克隆D.分離并純化硝化細(xì)菌時(shí)，培養(yǎng)基中需要添加氮源無(wú)需添加碳源2.幽門(mén)螺旋桿菌會(huì)分泌脲酶，能引起胃病的發(fā)生。在胃病患者體內(nèi)采集樣本并制成菌液后，進(jìn)行分離培養(yǎng)，實(shí)驗(yàn)基本步驟如下：配制培養(yǎng)基→滅菌→倒平板→X→培養(yǎng)→觀察。下列敘述錯(cuò)誤的是()A.常見(jiàn)的滅菌方法有濕熱滅菌、灼燒滅菌和干熱滅菌B.題中X表示接種，脲酶分解尿素后會(huì)使培養(yǎng)基pH降低C.培養(yǎng)基滅菌冷卻到50℃左右倒平板，平板冷凝后應(yīng)將其倒置D.以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基可初步篩選出幽門(mén)螺旋桿菌3.分散的微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面繁殖形成的肉眼可見(jiàn)的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的細(xì)胞群體，稱為純培養(yǎng)物。獲取純培養(yǎng)物的常用方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。下列有關(guān)這兩種方法的說(shuō)法，錯(cuò)誤的是()A.這兩種方法的關(guān)鍵都是要防止雜菌污染以保證獲得培養(yǎng)物的純度B.這兩種方法均需同時(shí)將接種的平板和未接種的平板倒置進(jìn)行培養(yǎng)C.接種環(huán)和涂布器均需要在火焰上灼燒，且涂布器灼燒前需用酒精引燃D.用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目時(shí)，所獲得的數(shù)據(jù)往往比實(shí)際值大4.分離、純化細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)中，平板劃線法接種（甲）及培養(yǎng)結(jié)果（乙）如圖所示，a、b、c、d是劃線的四個(gè)區(qū)域。下列敘述正確的是()A.實(shí)驗(yàn)所用培養(yǎng)基一般用干熱滅菌法進(jìn)行滅菌B.圖中d區(qū)域的劃線操作是從c區(qū)域劃線的末端開(kāi)始的C.為了防止雜菌污染，接種環(huán)灼燒后立即蘸取菌液進(jìn)行劃線D.圖示劃線接種過(guò)程中至少需要對(duì)接種環(huán)灼燒5次5.金黃色葡萄球菌是一種常見(jiàn)的食源性致病微生物，其具有耐高鹽的特性，在環(huán)境中分布廣泛。下列敘述錯(cuò)誤的是()A.如果從糞便中檢測(cè)到金黃色葡萄球菌，說(shuō)明被金黃色葡萄球菌感染B.培養(yǎng)過(guò)金黃色葡萄球菌的培養(yǎng)基要滅菌后才能丟棄C.分離樣品中的金黃色葡萄球菌時(shí)，用高鹽液體培養(yǎng)基培養(yǎng)不能增加該菌的濃度D.在固體選擇培養(yǎng)基上采用平板劃線法接種，可獲得金黃色葡萄球菌的純培養(yǎng)物6.生活飲用水中大腸桿菌超標(biāo)會(huì)引起腸道外感染和急性腹瀉，嚴(yán)重時(shí)會(huì)危及生命。某研究小組利用表中的培養(yǎng)基對(duì)生活飲用水中的大腸桿菌進(jìn)行培養(yǎng)和計(jì)數(shù)，下列敘述正確的是()成分蛋白胨蔗糖乳糖K2HPO4顯色劑（伊紅—亞甲藍(lán)）瓊脂含量10.0g5.0g2.0g2.0g0.2g12.0g將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1000mLA.按照用途劃分，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基B.配置培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)先進(jìn)行滅菌后再調(diào)節(jié)pH值C.計(jì)數(shù)時(shí)，應(yīng)采用稀釋涂布平板法進(jìn)行接種D.為防止雜菌污染，應(yīng)向培養(yǎng)基中添加適量抗生素7.下圖表示培養(yǎng)和純化X細(xì)菌的部分操作步驟，下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.實(shí)驗(yàn)室里可用化學(xué)藥物或紫外線對(duì)物體表面或空氣進(jìn)行消毒B.步驟①倒平板時(shí)需將培養(yǎng)皿的蓋拿開(kāi)，以便將錐形瓶中的培養(yǎng)基倒入C.步驟②接種環(huán)、接種針等用具應(yīng)在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒滅菌D.步驟③操作過(guò)程中，需灼燒接種環(huán)6次，在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)時(shí)需要將平板倒置8.日前微博傳言手機(jī)屏幕比馬桶按鈕單位面積上的細(xì)菌多，為辨別真?zhèn)?，兩電視臺(tái)利用微生物培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，過(guò)程及結(jié)果如圖。下列敘述錯(cuò)誤的是()A.本實(shí)驗(yàn)采用稀釋涂布平板法接種B.本實(shí)驗(yàn)不需要設(shè)置對(duì)照組實(shí)驗(yàn)C.本實(shí)驗(yàn)使用的培養(yǎng)基應(yīng)含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽D.兩個(gè)報(bào)道結(jié)果不同，可能是因?yàn)槿迎h(huán)境不同9.某些香蕉植株組織中存在的內(nèi)生菌可防治香蕉枯萎病，其篩選流程及抗性檢測(cè)如圖。下列操作正確的是()A.在大量感染香蕉枯萎病的香蕉種植園內(nèi)，從感病植株上采集樣品B.將采集的樣品充分消毒后，用蒸餾水沖洗，收集沖洗液進(jìn)行無(wú)菌檢測(cè)C.將無(wú)菌檢測(cè)合格的樣品研磨，經(jīng)稀釋涂布平板法分離得到內(nèi)生菌的單菌落D.比較對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組的菌斑大小，實(shí)驗(yàn)組病原菌菌斑越大表明內(nèi)生菌抗性效果越好10.煙草的多糖含量偏高是造成煙葉原料品質(zhì)不高的重要因素，微生物在煙葉醇化階段可有效降低煙草的多糖含量。為提高煙葉質(zhì)量，科研人員篩選出S1～S5微生物菌株，并測(cè)定其相關(guān)酶活力，結(jié)果如圖所示。下列說(shuō)法正確的是()A.篩選獲得S1～S5微生物菌株時(shí)，應(yīng)以淀粉為唯一碳源B.用平板劃線法分離單菌落前需對(duì)培養(yǎng)液進(jìn)行稀釋C.用S1單菌落培養(yǎng)獲得的純培養(yǎng)物對(duì)煙葉進(jìn)行醇化效果最好D.煙葉醇化發(fā)酵應(yīng)在低溫下進(jìn)行，以抑制雜菌繁殖11.兒茶素（C）具弱抗菌性，研究人員用藥物M與兒茶素形成配合物M-C，以增強(qiáng)其抗菌效果。為確定配合物M-C的最佳組分配比，用不同組分配比的配合物M-C處理濾紙片，置于布滿菌落的培養(yǎng)基中，結(jié)果如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是()編號(hào)M-C的組分配比11:121:231:341:451:5A.該實(shí)驗(yàn)可利用稀釋涂布平板法將菌種接種到培養(yǎng)基上B.該實(shí)驗(yàn)自變量是M-C的組分配比，因變量為抑菌圈的大小C.該實(shí)驗(yàn)中應(yīng)將配制好的培養(yǎng)基倒入平板后高壓蒸汽滅菌D.該實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明不同M-C組分配比的配合物抑菌效果不同12.某研究小組設(shè)計(jì)了一個(gè)利用作物秸稈生產(chǎn)燃料乙醇的小型實(shí)驗(yàn)。其主要步驟是：先將粉碎的作物秸稈堆放在底部有小孔的托盤(pán)中，噴水浸潤(rùn)、接種菌T，培養(yǎng)一段時(shí)間后，再用清水淋洗秸稈堆（清水淋洗時(shí)菌T不會(huì)流失），在裝有淋洗液的瓶中接種酵母菌，進(jìn)行乙醇發(fā)酵（酒精發(fā)酵）。實(shí)驗(yàn)流程如圖所示，回答下列問(wèn)題。（1）在粉碎的秸稈中接種菌T，培養(yǎng)一段時(shí)間后發(fā)現(xiàn)菌T能夠?qū)⒔斩捴械睦w維素大量分解，其原因是____。不同的菌種，在相同的培養(yǎng)條件下，菌落的形狀、大小和____一般不同，若將菌T接種在含有____（一種染料）的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以這些菌為中心的大小不等的透明圈。（2）采用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)酵母菌，通?？刹捎胈___法對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌。在使用該方法時(shí)，為了達(dá)到良好的滅菌效果，在壓力為100kPa、溫度為121℃的條件下維持____來(lái)滅菌。（3）將酵母菌接種到滅菌后的培養(yǎng)基中，擰緊瓶蓋，置于適宜溫度下培養(yǎng)、發(fā)酵。擰緊瓶蓋的主要目的是____。但是在酵母菌發(fā)酵過(guò)程中，還需適時(shí)擰松瓶蓋，原因是____。發(fā)酵液中的乙醇可用____溶液檢測(cè)。（4）本實(shí)驗(yàn)收集的淋洗液中的____可以作為酵母菌生產(chǎn)乙醇的原料。與以糧食為原料發(fā)酵生產(chǎn)乙醇相比，本實(shí)驗(yàn)中乙醇生產(chǎn)方式有節(jié)約糧食、____等優(yōu)點(diǎn)（寫(xiě)出1點(diǎn)即可）。

答案以及解析1.答案：C解析：A、對(duì)操作者的衣著和手要進(jìn)行消毒，一般實(shí)驗(yàn)操作者接種前要用70%的酒精棉球擦手消毒，A正確；B、最后一個(gè)劃線區(qū)之前接種時(shí)，每次劃線后接種環(huán)要在酒精燈火焰上灼燒滅菌，殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種，使下次劃線的菌種直接來(lái)源于上次劃線的末端，使每次劃線菌種數(shù)目減少。最后一個(gè)區(qū)劃線結(jié)束后接種環(huán)要在酒精燈火焰上灼燒滅菌，防止菌種污染環(huán)境，B正確；C、培養(yǎng)基上的單個(gè)菌落也可能由兩個(gè)連在一起的細(xì)菌細(xì)胞分裂而來(lái)，C錯(cuò)誤；D、硝化細(xì)菌為化能自養(yǎng)型微生物，分離并純化硝化細(xì)菌時(shí)，培養(yǎng)基中需要添加氮源無(wú)需添加碳源，D正確。故選：C。2.答案：B解析：A、常見(jiàn)的滅菌方法有濕熱滅菌、灼燒滅菌和干熱滅菌，A正確；B、題中X表示接種，幽門(mén)螺旋桿菌能分泌脲酶，脲酶分解尿素產(chǎn)生氨，會(huì)使培養(yǎng)基pH升高，B錯(cuò)誤；C、待培養(yǎng)基滅菌冷卻到50℃左右時(shí)，在酒精燈火焰附近倒平板，為了防止培養(yǎng)皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染，所以平板冷凝后應(yīng)將其倒置，C正確；D、在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上，只有能分泌脲酶的微生物可以生長(zhǎng)，可初步篩選出幽門(mén)螺旋桿菌，D正確。故選B。3.答案：D解析：A、獲得純培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來(lái)雜菌的入侵，故兩種純化方法都要防止雜菌污染，A正確；B、為驗(yàn)證培養(yǎng)基是否被污染，兩種方法均需同時(shí)將接種的平板和未接種的平板倒置，在培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)，B正確；C、接種環(huán)和涂布器均需要在火焰上灼燒，接種環(huán)可直接灼燒滅菌，涂布器要沾少量酒精在火焰上引燃進(jìn)行灼燒滅菌，C正確；D、當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，故用稀釋涂布平板法進(jìn)行微生物的計(jì)數(shù)時(shí)，所獲得的數(shù)據(jù)往往比實(shí)際值小，D錯(cuò)誤。故選D。4.答案：D解析：A、實(shí)驗(yàn)所用培養(yǎng)基一般用濕熱滅菌法（高壓蒸汽滅菌）進(jìn)行滅菌，A錯(cuò)誤；B、圖中a對(duì)應(yīng)的區(qū)域出現(xiàn)了單菌落，d區(qū)域菌落最多，因此a區(qū)域應(yīng)該為劃線的最終區(qū)域，d區(qū)域?yàn)閯澗€的起始區(qū)域，即圖中c區(qū)域的劃線操作是從d區(qū)域劃線的末端開(kāi)始的，B錯(cuò)誤；C、接種環(huán)灼燒后需適當(dāng)冷卻再蘸取菌液進(jìn)行劃線，避免將菌種燙死，C錯(cuò)誤；D、蘸取菌液前需要灼燒一次接種環(huán)，之后在c、b、a區(qū)域劃線前都要灼燒接種環(huán)，以保證菌種來(lái)自上一次劃線的末端，劃線結(jié)束后也要灼燒接種環(huán)，防止接種環(huán)上的菌種污染環(huán)境、感染接種者，因此接種過(guò)程中至少需要對(duì)接種環(huán)灼燒5次，D正確。故選D。5.答案：C解析：A、金黃色葡萄球菌是一種常見(jiàn)的食源性致病微生物，因此可從食物和人的糞便中分離得到金黃色葡萄球菌，A正確;B、使用過(guò)的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過(guò)滅菌處理后才能丟棄，B正確;C、金黃色葡萄球菌可在鹽濃度接近8%的環(huán)境中生長(zhǎng)，具有耐高鹽的特性，因此分離樣品中的金黃色葡萄球菌時(shí)，用高鹽液體培養(yǎng)基培養(yǎng)可以增加該菌的濃度，C錯(cuò)誤;D、對(duì)微生物進(jìn)行分離、純化可用平板劃線法或稀釋涂布法，因此，在固體選擇培養(yǎng)基上采用平板劃線法接種，可獲得金黃色葡萄球菌的純培養(yǎng)物，D正確。6.答案：C解析：A、該培養(yǎng)基中含伊紅—亞甲藍(lán)顯色劑，根據(jù)用途劃分該培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基，A錯(cuò)誤；B、在配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)先調(diào)節(jié)pH值，再滅菌后倒平板，B錯(cuò)誤；C、稀釋涂布平板法進(jìn)行接種可以用來(lái)計(jì)數(shù)，C正確；D、不可以在培養(yǎng)基中添加抗生素，以免影響大腸桿菌的生長(zhǎng)，D錯(cuò)誤。故選C。7.答案：B解析：A、常用的消毒方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學(xué)藥劑消毒法和紫外線消毒等，實(shí)驗(yàn)室里可用化學(xué)藥物或紫外線對(duì)物體表面或空氣進(jìn)行消毒，A正確；B、步驟①倒平板時(shí)，用拇指和食指將培養(yǎng)皿打開(kāi)一條縫隙，以便將錐形瓶中的培養(yǎng)基倒入，B錯(cuò)誤；C、步驟②接種環(huán)、接種針等用具應(yīng)在酒精燈火焰的外焰部位即充分燃燒層灼燒滅菌，C正確；D、步驟③操作過(guò)程中，劃線5次，需灼燒接種環(huán)6次，在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)時(shí)需要將平板倒置，D正確。故選B。8.答案：B解析：A、由圖可知，本實(shí)驗(yàn)采用稀釋涂布平板法接種，A正確；B、為了防止雜菌污染，本實(shí)驗(yàn)需要設(shè)置對(duì)照組實(shí)驗(yàn)，B錯(cuò)誤；C、本實(shí)驗(yàn)使用的培養(yǎng)基應(yīng)含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽，C正確；D、通過(guò)觀察菌落的形態(tài)、大小，可知手機(jī)屏幕和馬桶按鈕都存在多種微生物，兩電臺(tái)實(shí)驗(yàn)操作均正確且完全一致，但報(bào)道結(jié)果截然不同，可能是手機(jī)的取樣和馬桶的取樣都不相同，D正確。故選B。9.答案：C解析：稀釋涂布平板法可用于分離微生物。將無(wú)菌檢測(cè)合格的樣品研磨,經(jīng)稀釋涂布平板法分離能獲得內(nèi)生菌的單菌落,C正確。10.答案：C解析：A、根據(jù)題圖信息可知，科研人員篩選出的S1～S5微生物菌株均能降低煙草中的多糖含量，但不能確定該微生物是否利用淀粉為碳源，A錯(cuò)誤；B、用平板劃線法分離單菌落直接使用未經(jīng)稀釋的微生物樣本進(jìn)行劃線操作即可達(dá)到分離目的，B錯(cuò)誤；C、據(jù)圖分析可知，科研人員篩選出的S1～S5微生物菌株均能降低煙草中的多糖含量，S1微生物對(duì)降低煙草的多糖酶活力比其他四種都強(qiáng)，故用S1單菌落培養(yǎng)獲得的純培養(yǎng)物對(duì)煙葉進(jìn)行醇化效果最好，C正確。D、酶催化化學(xué)反應(yīng)需要適宜的溫度，煙葉醇化發(fā)酵應(yīng)在適宜的溫度下進(jìn)行，D錯(cuò)誤。故選C。11.答案：C解析：A、利用涂布平板法將菌種接種到培養(yǎng)基上，菌落均勻分布，便于觀察菌落的生長(zhǎng)狀況，A正確；B、據(jù)表可知，本實(shí)驗(yàn)的自變量是M-C的組分配比，因變量為抑菌圈的大小，B正確；C、應(yīng)將配制好的培養(yǎng)基高壓蒸汽滅菌后再倒平板，C錯(cuò)誤；D、不同M-C組分配比的抑菌圈大小不一樣，表明配合物中不同M-C組分配比抑菌效果不同，D正確。故選C。12.答案：（1）菌T能夠分泌纖維素酶；顏色；剛果紅（2）高壓蒸汽滅菌；15～30min（3）制造無(wú)氧環(huán)境；排出二氧化碳；酸性的重鉻酸鉀（4）葡萄糖；廢物利用、清潔環(huán)保、不污染環(huán)境、生產(chǎn)成本低、原料來(lái)源廣等解析：（1）菌T能夠分泌纖維素酶，纖維素酶能將纖維素最終分解為葡萄糖，因此在粉碎的秸稈中接種菌T，培養(yǎng)一段時(shí)間后發(fā)現(xiàn)菌T能夠?qū)⒔斩捴械睦w維素大量分解。不同種類(lèi)的細(xì)菌形成的菌落不同，菌落特征包括菌落的大小、形狀、顏色及菌落的隆起程度，不同的菌種，在相同的培養(yǎng)條件下，菌落的形狀、大小和顏色一般不同。剛果紅是一種染料，它可以與纖維素形成紅色復(fù)合物，但并不與水解后的纖維二糖、葡萄糖等發(fā)生這種反應(yīng)。當(dāng)我們?cè)诤欣w維素的培養(yǎng)基中加剛果紅時(shí)，剛果紅與纖維素形成紅色復(fù)合物；而當(dāng)纖維素被菌T分解后，復(fù)合物就無(wú)法形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以這些菌為中心的透明圈。（2）常用高壓蒸汽滅菌法對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，在使用高壓蒸汽滅菌時(shí)，為了達(dá)到良好的滅菌